04/05/2016

ESTRUCTURA BSICA DEL ARNm

TRADUCCIN

5UTR
Leader

3UTR
Trailer

PARTE III

GENTICA MOLECULAR 2016

UNIVERSIDAD DE MORN

MENSAJEROS MONOCISTRNICOS
Y POLICISTRNICOS
Monocistrnico

ARNm codifica una sola protena

Policistrnico

ARNm codifica varias protenas

MENSAJEROS MONOCISTRNICOS
Y POLICISTRNICOS

CISTRN: unidad ms pequea de material gentico capaz de ser

responsable de la sntesis de un polipptido.
La mayora de los ARNm procariotas son policistrnicos. Es debido a la
agrupacin de genes en operones: se comporta como una nica unidad
gentica y se transcribe en un mismo mensajero.

Unidades proteicas independientes

Al ser de gran longitud permiten que decenas de ribosomas de unan a ellos.

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MENSAJEROS MONOCISTRNICOS
Y POLICISTRNICOS

MENSAJEROS MONOCISTRNICOS
Y POLICISTRNICOS
Generalmente los ribosomas que terminan la traduccin del primer cistrn
se separan en las subunidades e, independientemente, un nuevo ribosoma
se ensambla al comienzo del siguiente.
Sin embargo, si las regiones intercistrnicas son pequeas, el mismo
ribosoma que tradujo el primer cistrn puede acceder al codn de
iniciacin del siguiente.
Caso extremo: genes que se superponen

EL ARNm PROCARIOTA
La transcripcin, la traduccin y la degradacin del ARNm bacteriano
suceden en un nico compartimento celular.
Es inestable ya que tiene vida media de solo algunos minutos: el extremo 5
comienza a ser degradado antes de que el extremo 3sea sintetizado y/o
traducido detrs del ltimo ribosoma del polisoma.
Eso determina la cantidad de protena que ser sintetizada.
Velocidad de transcripcin a 37C

40 nt/seg

Velocidad de traduccin a 37C

15 aac/seg

La expresin de un gen tarda entre 2 y 3 minutos en completarse

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EL ARNm PROCARIOTA

EL ARNm EUCARIOTA
Es modificado en el ncleo durante o inmediatamente despus de su
transcripcin.
La velocidad de transcripcin en clulas animales es la misma que en
bacterias (40 nt/seg).
Solo es exportado al citoplasma una vez que todas las modificaciones se
completaron (lo cual tarda cerca de 20 minutos).
Una vez en el citoplasma es reconocido y traducido.
Vida media de 1 a 60 minutos en levaduras. Hasta 24 hs en eucariotas
superiores, dado que son ms estables.

EL ARNm EUCARIOTA

EL ARNm EUCARIOTA

MODIFICACIONES

MODIFICACIONES
1. Caperuza

Ambos extremos se modifican por adicin de nucletidos.

1. Capping o caperuza en el extremo 5:

se reemplaza el trifosfato por un nucletido G invertido (3 5)

Consiste en la adicin de un nucletido modificado de

guanina (7-metilguanosina) mediante el establecimiento
de un enlace 5-fosfato 5-fosfato en lugar del enlace 3,
5fosfodiester.
Sella el extremo 5.
Queda susceptible a metilaciones.

2. Poliadenilacin en el extremo 3:
se adicionan aproximadamente 200 nt de A.

3 tipos de caperuza:
Cap0: se metila la primera base (guanina).
Cap1: Se metila tambin la segunda base (+ frecuente)
Cap2: se metila la tercera base tambin.

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EL ARNm EUCARIOTA

EL ARNm EUCARIOTA

MODIFICACIONES

MODIFICACIONES

2. Poliadenilacin

2. Poliadenilacin

Estabiliza al ARNm.
Su falta puede inhibir la traduccin.
Es una secuencia que no est codificada en el ADN.
La reaccin es llevada a cabo por la poli(A) polimerasa. Esta enzima no acta en el
extremo 3, sino que lo hace en un sitio interno, reconociendo una secuencia seal del
ARNm.

EL ARNm EUCARIOTA

EL ARNm EUCARIOTA

MODIFICACIONES

DEFINICIN FUNCIONAL

2. Poliadenilacin: importancia prctica

La regin poli(A) puede aparearse con oligonucletidos
U y T, lo que resulta til al aislar la muestra en una
columna.

Esto asla todos los ARNm (citoslicos y nucleares).

Para distinguir a los ARNm citoslicos, se aslan los polisomas y se los

trata con el agente quelante EDTA (elimina los iones Mg+2 ).
Las subunidades ribosomales se separan liberando el ARNm en una
fraccin ribonucleoproteica (ARNm + protenas) que sedimenta a 18S.
El resto sedimenta a 200S.
Se lo denomina ENSAYO FUNCIONAL porque identifica a los ARNm que
realmente estn siendo traducidos por los ribosomas.

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PROTENAS

PROTENAS

SNTESIS PROTEICA

PROCESAMIENTO POSTRADUCCIONAL

Se inicia con el ensamblado de los polirribosomas al ARNm. Pueden ser:

Libres: las protenas sintetizadas se liberan al citosol.
Unidos a membrana: a medida que son sintetizadas, las protenas
ingresan al retculo endoplasmtico (transferencia co-traduccional).

El polipptido que emerge del ribosoma es inactivo.

Antes de adquirir su papel funcional debe sufrir de uno o ms de los
cuatro tipos de procesamiento postraduccional:
Plegamiento
Degradacin proteoltica
Modificacin qumica
Corte y empalme de intenas

PROTENAS

PROTENAS

PROCESAMIENTO POSTRADUCCIONAL

PROCESAMIENTO POSTRADUCCIONAL

PLEGAMIENTO:

DEGRADACIN PROTEOLTICA:

Solo algunas de las protenas ms pequeas y de estructura menos

compleja tienen la capacidad de plegarse de manera espontnea
en su estructura espacial funcional.

Para eliminar fragmentos cortos de las regiones terminales

Las dems protenas requieren de las chaperonas moleculares:

MODIFICACIONES QUMICAS:

se unen a regiones hidrfobas de las protenas desplegadas

manteniendo su conformacin abierta.

Los ms simples consisten en adicionar un grupo qumico pequeo (ej.

acetilo, metilo o fosfato) a una cadena lateral de un aminocido.

Para corte de poliprotenas. Ej: proopiomelanocortina

INTENAS:
Segmentos internos de las protenas que se eliminan para empalmar
los segmentos externos o extenas

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PROTENAS

PROTENAS

LOCALIZACION CELULAR DE LAS PROTENAS

EXPORTACIN

Muy especfica:
Protenas solubles: en el citosol.
Estructuras macromoleculares: en sitios concretos del citoplasma
(ej: centrolos en regiones polares).
Protenas nucleares: ncleo (cromatina).

Las protenas a exportar, antes de su transporte se denominan

preprotenas.
Presentan en su extremo N terminal una secuencia llamada pptido
lder o secuencia seal.

Orgnulos citoplasmticos: en mitocondrias o cloroplastos.

Protenas secretadas por la clula: recorren el sistema de transporte
de membrana.

La secuencia seal no va a formar parte de la protena madura.

Conforma la protena atraviesa la membrana, el aparato de
exportacin lo corta.

PROTENAS

PROTENAS

EXPORTACIN

EXPORTACIN

CARACTERSTICAS DE LA SECUENCIA SEAL:

APARATO DE EXPORTACIN:

Son muy variables en diferentes preprotenas pero presentan rasgos

comunes.

El aparato de exportacin consiste en una serie de protenas

llamadas protenas Sec. Las principales protenas Sec forman un
complejo en la membrana citoplasmtica:

Longitud: entre 15 y 30 aminocidos.

Uno o ms aminocidos bsicos en el extremo aminoterminal.
En la porcin central presentan 6 o 7 aminocidos hidrofbicos.
El extremo carboxilo terminal del pptido lder es hidrfilo y
contiene una zona reconocida para ser cortada.

SecA: protena perifrica ligada al lado citoplasmtico de la

membrana. Al unirse a ATP adquiere una configuracin que la
capacita para unirse a la preprotena y a SecY.
SecY: protena integral de membrana.
SecE: protena integral, muy conservada evolutivamente entre las
bacterias 8indicando que es un componente central para el aparato
de exportacin. Puede que funcione como un canal para la
exportacin.