GUA DE LABORATORIO: LOS PIGMENTOS FOTOSINTTICOS

PRESENTADO POR:
YEICOL PEDROZO LAITANO
YULIBETH ARGOTE MORENO
DINA LUZ PALMERA
LUZ KARINE VEGA

PRESENTADDO A:
LIC. LVARO ZEQUEIRA

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS Y DE LA EDUCACIN
LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE
SISTEMAS Y METABOLISMOS I
VALLEDUPAR
2016

INTRODUCCIN

Fotosntesis es un proceso que convierte energa solar en energa qumica. La

fotosntesis se lleva a cabo en los cloroplastos, organelos de membrana doble que
contienen pigmentos fotosintticos que absorben la luz solar. La membrana interior
del cloroplasto rodea el estroma, donde los tilacoides se agrupan formando
granas. La fotosntesis produce glucosa y oxgeno a partir de bixido de carbono,
agua y luz solar. La reaccin fotosinttica se resume de la siguiente manera:

La glucosa es la fuente principal de energa en las clulas, y el oxgeno es

necesario para las plantas, los animales y dems organismos que llevan a cabo
respiracin aerbica en los mitocondrios. El proceso de fotosntesis se divide en
dos fases: las reacciones dependientes de la luz y las reacciones independientes
de la luz (que ocurren en presencia o ausencia de luz)
Fase dependiente de la luz:
Se absorbe la luz solar y se convierte en energa qumica.
Las reacciones dependientes de luz ocurren en la membrana de los tilacoides de
los cloroplastos.
Durante esta reaccin se descompone agua, se libera oxgeno como producto
secundario, y se sintetiza ATP y NADPH.

Fase independiente de la luz:

Las reacciones independientes de la luz (o de fijacin de carbono) ocurren en e
lestroma del cloroplasto.
La energa del ATP y del NADPH, producidos en las reacciones dependientes
dela luz, se usa para transformar el bixido de carbono en carbohidratos.

Para utilizar la energa solar se requiere que la luz sea absorbida por pigmentos
fotosintticos que se encuentran en las membranas de los tilacoides en los
cloroplastos. El pigmento principal para la fotosntesis es la clorofila a. Tambin
hay pigmentos accesorios, como la clorofila b, el caroteno y la xantofila, que
absorben la luz y la transfieren a la clorofila a.
A. Separacin de los pigmentos fotosintticos de la hoja
En el experimento siguiente se usar cromatografa de papel para separar los
pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. La cromatografa
separa los compuestos qumicos por su afinidad con un solvente especfico.
Mientras mayor afinidad tenga el pigmento por el solvente, ms rpido se mover
y mayor distancia recorrer en el papel. El color verde profundo de la hoja no
indica cules ni cuntos pigmentos hay en los cloroplastos.

OBJETIVOS
1. Describir cul es el rol de la luz y los pigmentos en la fotosntesis.
2. Describir las reacciones principales que ocurren en la fotosntesis.
3. Identificar los pigmentos fotosintticos.

MATERIALES
Papel de cromatografa
Lpiz
Tubos de ensayo medianos
Solucin de cromatografa (45 ml ter de petrleo + 5 ml de acetona)
Gradillas para tubos de ensayo
Hojas frescas de espinaca
Presillas de papel
Tapones de corcho

MARCO TEORICO

Definicin de pigmento
Un pigmento es cualquier sustancia que absorbe luz. El color de un pigmento es el
resultado de la longitud de onda reflejada (no absorbida). La clorofila, el pigmento
verde de todas las clulas fotosintticas, absorbe todas las longitudes de onda,
excepto el verde, el cual es reflejado y percibido por nuestros ojos. Un cuerpo
negro toda o casi todas las longitudes de onda.
Definicin de fotosntesis
Es el proceso bioqumico mediante el cual las plantas captan la luz del sol para
producir su propio alimento. Para esto requieren de dixido de carbono y agua,
mientras que liberan oxgeno.
Que es la cromatografa
Se llama cromatografa a una tcnica que permite separar o fraccionar, los
componentes de una mezcla de sustancias biolgicas. El trmino deriva del griego
chroma: color y graphein: escribir, ya que los primeros ensayos del mtodo
tuvieron por objeto, separar compuestos que eran naturalmente coloreados. As
hoy en da la mejor manera de separar los pigmentos, consiste en macerar plantas
en un disolvente, filtrar la muestra para separar el sobrenadante y restos de
vegetales y posteriormente determinar que pigmentos estn presentes. Esto se
logra colocando un trozo de papel en contacto con el filtrado y por simple
capilaridad, el disolvente arrastra consigo los pigmentos.
Un ejemplo de capilaridad es el agua que absorbe una toalla de papel. A
consecuencia de la variabilidad que tienen los diferentes pigmentos en su
solubilidad, as como el grado de atraccin que tienen al papel, estos se movern
a diferentes velocidades. Al poco tiempo de haberse iniciado este proceso los
pigmentos se separan unos de otros, quedando bandas de distintos colores y a
diferentes alturas.
En trminos prcticos la cromatografa permite separar los componentes de
cualquier muestra, por lo que es muy utilizada para la separacin de muestras en
diversas empresas.

Clasificacin de los pigmentos fotosintticos

Los pigmentos de los cloroplastos se pueden clasificar en dos grupos principales:
las clorofilas y los carotenoides. Las clorofilas, los pigmentos verdes del
cloroplasto y son las ms importantes de las plantas. En la actualidad se pueden
distinguir por lo menos ocho tipos de clorofilas: las clorofilas a, b, c, d, y e, la
bacterioclorofila a, bacterioclorofila b, y clorofila de clorobio (bacterioviridina). Las
clorofilas a y b son las mejor conocidas y las ms abundantes. La clorofila a se
encuentra en todos los organismos fotosintticos (plantas, ciertos protistas y
cianobacterias). La clorofila b, est presente en todas las plantas verdes (algas
verdes, euglenophytas y plantas superiores).
Los carotenoides son compuestos lipdicos que se encuentran ampliamente
distribuidos tanto en animales como en plantas y presentan colores que varan
desde el, amarillo hasta el prpura. Los carotenoiodes hidrogenados (es decir,
exclusivamente formados por carbono e hidrgeno) se llaman carotenos y
aquellos que contienen oxgeno reciben el nombre de xantfilas.
Aunque no estn presentes en los cloroplastos de todas las plantas, existen otros
pigmentos importantes para las plantas, como por ejemplo las antocianinas
(presente en los ptalos de las flores) y las ficobilinas, las cuales estn presentes
en las algas rojas y verdeazules. Las ficobilinas rojas se denominan ficoeritrina y
las azules, ficocianinas.

PROCEDIMIENTO
1. Tomamos una hoja de espinaca y la maceramos en un mortero con etanol y un
poco de arena como muestra la imagen hasta que quedara bien triturada.

2. luego de macerar la hoja de espinaca, tomamos un pedazo de papel filtro y

filtramos en un Beaker el lixiviado de la preparacin.
3. Despus tomamos un poco de la preparacin de espinaca del Beaker y lo
esparcimos en una caja de Petri sobre esta introducimos un trozo de papel de
cromatografa y observamos lo ocurrido.

4. finalmente retiramos el papel de cromatografa de la caja de Petri y

observamos la corrida de la solucin y los pigmentos que se reflejaron.

RESULTADOS

TABLA 1: CROMATOGRAFIA DEL PAPEL DE ESPINACA

Nota: la distancia recorrida del solvente fue de 4.1 cm ms o menos 0.1 cm
PIGMENTO

PIGMENTO 1

DISTANCIA
RECORRIDA DEL
PIGMENTO
1.2

TIPO DE
PIGMENTO

Clorofila b

PIGMENTO 2

1.7

Clorofila a

PIGMENTO 3
PIGMENTO 4

2.6
4.0

Xantofila
caroteno

COLOR

Verde
oliva
Verde
azulado
Amarillo
naranja

RF

0.29
0.41
0.63
0.97

ANALISIS DE RESULTADO
Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o

zonas, que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las

hojas.
El primer pigmento obtenido fue de color verde azulado el cual corresponde a la
clorofila b.
El segundo pigmento obtenido fue de color verde oliva el cual corresponde a la
clorofila a.
El tercer pigmento obtenido fue de color amarillo el cual corresponde a la xantofila.
El cuarto pigmento obtenido fue de color naranja el cual corresponde al caroteno.

CUESTIONARIO

1. Qu colores se observan?
Se observaron el verde azulado, el verde oliva, el amarillo y el naranja
2. En qu orden aparecen los pigmentos?
Aparecen en el orden que se muestra en la siguiente tabla

PIGMENTO

TIPO DE PIGMENTO

COLOR

PIGMENTO 1
PIGMENTO 2

Clorofila b
Clorofila a

PIGMENTO 3
PIGMENTO 4

Xantofila
caroteno

Verde oliva
Verde
azulado
Amarillo
naranja

3. Qu pigmento tuvo ms afinidad hacia el solvente?

El caroteno ya que no contiene ningn oxgeno en su estructura, la cual lo hace
tener ms afinidad por el alcohol que fue el solvente en nuestro caso.
4. Cul es el rol de los pigmentos accesorios en la fotosntesis?
Los pigmentos accesorios absorben energa que la clorofila es incapaz de
absorber.
5. Calcule el valor de Rf para cada pigmento, segn la frmula:

PIGMENTO

PIGMENTO 1
PIGMENTO 2
PIGMENTO 3
PIGMENTO 4

DISTANCIA RECORRIDA
DEL PIGMENTO
1.2
1.7
2.6
4.0

RF

0.29
0.41
0.63
0.97

6. Compare los valores de Rf para cada pigmento y explique los datos.

Con respecto a los diferentes factores de retardacin, se puede decir que la
clorofila b fue la que obtuvo el Rf ms pequeo (0.29) lo cual se debe a que es
un compuesto bastante polar, contiene un nmero alto de oxgenos lo que la
hace poco soluble en el diluyente orgnico. En segundo lugar tenemos a la
clorofila a, la cual a pesar de ser un compuesto polar, cambia un grupo COH
por uno CH3, ascendiendo as un poco ms que la clorofila b. Las xantofilas
son compuestos qumicos pertenecientes al grupo de los carotenoides que
poseen uno o ms tomos de oxgeno en su estructura; al poseer tan pocos
tomos polares el Rf ser un poco ms elevado que el de las clorofilas,
resultando en la prctica con un valor de 0.63. Finalmente el caroteno no
posee ningn oxgeno en su estructura, generando una gran afinidad con el
diluyente al ser ambos compuestos altamente apolares; su solubilidad en el
alcohol ser sumamente alta, ascendiendo prcticamente la misma distancia,
con un Rf de 0.97.
7. Compare sus resultados con los de sus compaeros. Fue el valor de Rf
constante para cada pigmento?
Si en la mayora de los experimento no hubo diferencias marcadas
8. Tienen todas las plantas los mismos pigmentos? Por qu?

No un ejemplo de esto es en la zanahoria, esta solo muestra pigmentos como

las xantofila y el caroteno, y las clorofilas no, ya que las zanahorias crecen
debajo de la tierra por ende no las necesitan ya que las mismas no realizan el
proceso de fotosntesis.

CONCLUSIONES

Al romper las clulas en el mortero los pigmentos que se hallaban encerrados en

los cloroplastos dentro de ellas pasan al alcohol.

Con respecto a los diferentes factores de retardacin, se puede decir que la

clorofila b fue la que obtuvo el Rf ms pequeo (0.29) lo cual se debe a que es un
compuesto bastante polar, contiene un nmero alto de oxgenos lo que la hace
poco soluble en el diluyente orgnico.
En segundo lugar tenemos a la clorofila a, la cual a pesar de ser un compuesto
polar, cambia un grupo COH por uno CH3, ascendiendo as un poco ms que la
clorofila b.
Las xantofilas son compuestos qumicos pertenecientes al grupo de los
carotenoides que poseen uno o ms tomos de oxgeno en su estructura; al
poseer tan pocos tomos polares el Rf ser un poco ms elevado que el de las
clorofilas, resultando en la prctica con un valor de 0.63.
Finalmente el caroteno no posee ningn oxgeno en su estructura, generando una
gran afinidad con el diluyente al ser ambos compuestos altamente apolares; su
solubilidad en el alcohol ser sumamente alta, ascendiendo prcticamente la
misma distancia, con un Rf de 0.97.
La separacin cromatografa sobre papel se basa en la retardacin selectiva,
utilizando el valor de Rf para caracterizar los componentes de una mezcla.
Las hojas de espinaca contienen los pigmentos clorofila a, clorofila b, xantofila y
caroteno, siendo las clorofilas las ms abundantes en la misma.
La cromatografa de papel como mtodo de separacin de mezclas es muy til y
efectiva. Como se pudo comprobar experimentalmente.

BIBLIOGRAFIA

Lecciones hipertextuales de botnica

http://www.unex.es/botanica/presenta.htm
Fotosntesis: http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/fotosint.htm

Cromatografa y pigmentos

http://www.arrakis.es/rfluengo/pigmentosprc.html

Laboratorio de cromatografa

http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Biologia/tecnicas/separaciones_cromatogr
ficas.htm
http://www.cienciahoy.org/hoy34/index .htm