1 artculo

Sequence Tagged Side (STS) Content Mapping of

Human Chromosomes: Theoretical Considerationes and
Early Experiences
Principales objetivos del Proyecto Genoma Humano:
1- Aislamiento del genoma humano entero en clones
superpuestos.
2- Desarrollo de mapas fsicos de los DNA clonados.
La llegada del PCR ha facilitado la evolucin de un nuevo tipo
de marcador (STS) para la construccin de mapas fsicos de
cromosomas.
Panorama en conjunto:
El proceso de elaboracin de mapas fsicos de largo alcance
de genomas complejos involucra la identificacin y
localizacin de marcadores dentro de clones recombinantes
de DNA-.
Caso tpico:
a. Fragmentacin del genoma en piezas ms pequeas
(digestin enzimtica, )
b. Aislamiento y purificacin de cada fragmento (Clonacin,
)
c. Examinacin de los fragmentos individuales de DNA por
la presencia de marcadores comunes.
d. Construccin de mapas fsicos sobre las posiciones
relativas de los marcadores.
Avances tecnolgicos:
YACS (Como un sistema de clonacin) + PCR (para la
deteccin de marcadores fsicos, ha cedido enfoques potentes
para el maeo fsico de genomas enteros)
YAC Cloning

Proporciona los medios para aislar segmentos de DNA que son

largos (0.1 - 1Mb) aun experimentalmente manejable. La
implementacin de YAC cloning ha sido enormemente
facilitado en aos recientes por el desarrollo de eficientes
mtodos para construir
YAC cloning: Aislamiento de segmentos de ADN largos (0.1 a
1Mb)

Genetic Screen: tcnica experimental para identificar

individuos que poseen un fenotipo de inters en una poblacin
mutagnica.

5 WAYS TO SCREEN (identificar) FOR RECOMBINANT CLONES

Methods to verify if your gene of interest was successfully

cloned
1. Blue-White Screening: En este mtodo, el inserto es
clonado dentro de un vector conteniendo a LacZalfa
secuence encoding a-peptide, a funtional subunit of the
B-galatosidase enzyme..
2. Pos

2 rticulo

Genome-Wide Identification and Mapping of NBSEncoding Resistance Genes in Solanum tuberosum

La mayora de genes de resistencia identificados (hasta la
fecha) en plantas codifican dominios:
NBS-LLR (nucleotide-binding site Leucine-rich repeat)
CC (Coiled-coil)
TIR (TOOL/interleukin -1 receptor)
Uno de los mecanismos de defensa ms estudiados es
mediado por protenas de resistencia que funcionan en el
reconocimiento de efectores patgenos.
Los genes de resistencia a enfermedades ms predominantes
clonados hasta la fecha, NBS-LRR resistence genes, codifican
protenas que contienen sitios de unin a nucletidos (NBS) y
dominios con repeticiones ricas en leucina (LRR). Sin
embargo, tambin pueden contener dominios adicionales en
su dominio amino y carboxi terminal.