UNIVERSIDAD AUTNOMA DE GUERRERO

UNIDAD ACADMICA DE CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS

PLAN EDUCATIVO: QUMICO BILOGO PARASITLOGO
Inmunologa aplicada (Electiva)
Prctica No. 7
Diagnstico de artritis reumatoide

Responsable:
Dra. Gloria Fernndez Tilapa
Elaborado por:
Guillermo Fabin Luis Enrique
Rivera Romero Jos Jovany
Vzquez Cruz Natalio

Grupo: 801

Chilpancingo, Guerrero a 29 de Febrero de 2016.

Prctica 7. Diagnstico de artritis reumatoide

Introduccin
Las enfermedades reumticas (ER) son un grupo de padecimientos caracterizado por la
aparicin de lesiones, cambios y alteraciones en el sistema musculo esqueltico y
conectivo, causando inflamacin crnica, dolor, degeneracin progresiva e incapacidad
funcional. Existe una gran variedad de ER de origen autoinmune, debidas a la formacin
de auto-anticuerpos dirigidos contra componentes propios del organismo. La presencia de
anticuerpos en contra de antgenos propios, genera inflamacin persistente que ocasiona
dao estructural y funcional. Tal es el caso de la artritis reumatoide (AR), enfermedad
difusa del tejido conectivo, debida a inflamacin articular persistente que causa
deformacin, desgaste del cartlago y del hueso, dolor y prdida de las funciones
normales de manera simtrica (Arana et al, 2015). La AR es una enfermedad autoinmune,
sistmica, poliarticular e inflamatoria crnica de origen multifactorial, eventualmente
presenta manifestaciones extra articulares como la aparicin de ndulos reumatoides,
vasculitis y serositis; esta enfermedad afecta de 1 a 2% de la poblacin mundial, con una
relacin de 1 hombre por cada 5 mujeres. Est clasificada en dos grupos, temprana con
una evolucin sintomtica menor a 12 meses y la crnica o establecida, con una
evolucin mayor ese periodo. Una proporcin significativa de los pacientes desarrolla
dao articular irreversible poco despus de la aparicin de la enfermedad, de ello deriva la
importancia del diagnstico oportuno y la decisin acerca del tratamiento (Aletaha et al,
2010; Gonzlez et al, 2012).
En septiembre de 2010 se publicaron simultneamente en Annals of Rheumatic Diseases
y Arthritis and Rheumatism los nuevos criterios de clasificacin para la artritis reumatoide
(AR), como conclusin del esfuerzo conjunto realizado por la European League Against
Rheumatism EULAR y el American College of Rheumatology (ACR) con el fin de mejorar
los criterios de clasificacin utilizados previamente. Estos nuevos criterios tienen el
objetivo de mejorar la clasificacin de la AR de corta evolucin, de manera que se pueda
establecer un tratamiento con frmacos modificadores de la enfermedad (FAME) lo antes
posible. Como segundo objetivo, establecen la definicin de caso para poder llevar a cabo
ensayos teraputicos en pacientes con AR de corta evolucin (Gmez, 2011).Los nuevos
criterios de AR incluyen variables relacionadas con la afectacin articular, resultados de
laboratorio y duracin de los sntomas, tabla 1. La puntuacin que aporta el laboratorio en
la suma de 6 puntos, proviene de los resultados de la determinacin del factor reumatoide
(FR) y/o de los anticuerpos anti-protenas citrulinadas (ACPA), de la protena C reactiva y
de la velocidad de sedimentacin globular (Gmez, 2011).
El FR fue el primer autoanticuerpo identificado en el suero sanguneo de los pacientes con
AR, est presente en otra serie de alteraciones no reumatolgicas y puede ser detectado
con una sensibilidad de 70-80% y una especificidad de 80-93%, en casos con al menos 8
aos de evolucin. En casos de corta evolucin, la sensibilidad es de 77% a 88% y la
especificidad de 33% a 77% (Gonzlez Arboleda et al.,2013; Gmez, 2011). Aos ms

tarde, se identificaron otros autoanticuerpos dirigidos contra protenas citrulinadas

(ACPA). La parte esencial del determinante antignico reconocido por los ACPA es un
inusual aminocido llamado citrulina. La citrulina puede ser generada por modificacin
postraduccional de residuos de arginina. Esta modificacin es catalizada por la enzima
peptidil-arginina-desaminasa (PAD). Los anticuerpos para protenas citrulinadas pueden
ser detectados en el 80% de pacientes con AR con una especificidad mayor de 98%
(Gonzlez Arboleda et al., 2013).
A pesar de la evidencia acumulada sobre su especificidad, el uso de los ACPA para el
diagnstico precoz de la AR no es rutinario en los protocolos de atencin a pacientes
(Gonzlez Arboleda et al., 2013; Arana et al, 2015). Los ACPA reconocen una variedad de
antgenos citrulinados, entre ellos fibringeno, vimentina (conocida como antgeno Sa),
colgeno II, -enolasa, filagrina, entre otros. Pptidos citrulinados de estas protenas se
usan en las pruebas actuales de ELISA para detectar los ACPA en el suero o en lquido
sinovial del paciente. El incremento de los ACPA puede ser detectado antes de que
precipiten los sntomas de la enfermedad. Los ACPA incluyen IgM, IgG, IgA, IgE (Willemze
et al., 2012)
La determinacin de la VSG y CRP son marcadores inespecficos de la inflamacin,
determinados como reactantes de fase aguda. La EULAR recomienda la utilizacin de
estas dos pruebas de gabinete como marcadores de la actividad de la enfermedad de AR
(Desease Activity Score), consideradas como cruciales para la evaluacin del pronstico y
la toma de decisiones teraputicas. Se ha evaluado la posibilidad de utilizar la VSG y CRP
como marcadores de evolucin de la enfermedad y se encontr que la prueba ms
eficiente fue la CRP debido a que presenta una menor discrepancia, ya que la VSG puede
elevarse debido a factores como edad, gnero, hipergammaglobulinemia. Debido a eso se
determin que la prueba ms adecuada para evaluar el dao es la CRP (Ramrez et al.
2011). La intensidad del proceso inflamatorio tambin se refleja en parmetros
hematolgicos. La biometra hemtica es una prueba que comnmente se practica a los
pacientes con AR, en busca de datos de anemia normoctica normocrmica, de plaquetas
en nmero > 400 000/mm3 y de una cuenta de leucocitos entre 5,000 a 20,000/ L, que
hablan de la magnitud de la inflamacin (Ramrez et al. 2011).
Habilidades
Interpreta correctamente los resultados de las pruebas de laboratorio para
diagnosticar artritis reumatoide.
Maneja responsablemente las muestras del paciente y sigue las normas de
bioseguridad en el laboratorio
Sigue correctamente un protocolo para asegurar la confiabilidad del resultado
Material y mtodos
A) Equipo
Centrfuga
Agitador mecnico

 Analizador hematolgico
B) Material

Aplicadores de madera limpios

Torniquete
Jeringa de 5 ml
Gasas
Torundas
Tubos de Wintrobe o pipetas de Westergren
Tubos con anticoagolante (EDTA)
Tubos de ensaye de 13 X 100 mm
Gradilla para tubos de ensaye
Gradilla para tubos de Wintrobe o para pipetas de Westergren
Cnula
Placa de fondo negro
Micropipeta automtica de 20 a 200 l
Micropipeta automtica de 200 a 1000 l
Puntas para micropipeta

C) Soluciones y reactivos

Solucin salina fisiolgica (SSF)

Kit comercial para deteccin de protena C reactiva
Kit comercial para deteccin de factor reumatoide
Etanol

D) Muestras biolgicas
5 ml de sangre perifrica anticoagulada con EDTA
Suero
Procedimientos
Prueba rpida para deteccin de protena C reactiva. Siga las instrucciones del inserto
que acompaa al kit del reactivo PCR-Ltex para la deteccin de la protena C reactiva
que se usar en esta prueba.
Lectura de los resultados (PCR-Ltex, para la deteccin y cuantificacin de protena C
reactiva por aglutinacin con partculas de ltex).
Prueba negativa: Se indica por la suspensin uniforme, sin muestras de aglutinacin en la
mezcla de reaccin. La ausencia de aglutinacin indica que la muestra de suero contiene
una concentracin de PCR menor de 6 mg/L.
Prueba positiva: Presencia de aglutinacin en la reaccin e indica presencia de CRP
srica en una concentracin mayor de 6mg/l.

Prueba Rpida de aglutinacin en Ltex para la Determinacin Cualitativa y/ Cuantitativa

del Factor Artritis Reumatoide. Siga las instrucciones del inserto que acompaa al kit de
reactivo FR-Ltex para la deteccin del factor reumatoide que se usar en esta prueba
Lectura de resultados
Presencia de Aglutinacin: Resultado p o s i t i v o
Ausencia de Aglutinacin: Resultado n e g a t i v o
Lectura de resultados de la VSG: Los mm/h recorridos por los glbulos rojos se
compararn con los valores de referencia
Resultados:

CHILPANCINGO, GRO; A 22 DE FEBRERO

DEL 2016.

NOMBRE:

LAURA HERNANDEZ GARCIA

EDAD:

59 aos.

REGISTRO 0122021
:
6
CUAHUTEMEOC NORTE,

DOMICILIO: C. BELIZARIO DOMINGUEZ, # 18 A, COL.

CHILPANCINGO, GRO.
TELEFONO: 747
ESTUDIOS
CITOMETRIA
HEMATICA
COMPLETA,
VELOCIDAD
DE
SOLICITADOS:
SEDIMENTACIN GLOBULAR, FACTOR REUMATOIDE, PROTEINA C
REACTIVA.
MEDICO:
A QUIEN CORRESPONDA.

H E M A T O L O G I A.
CITOMETRIA HEMATICA COMPLETA
FORMULA ROJA:
PARAMETRO

RESULTADO

VALORES DE REFERENCIA.
MUJERES

ERITROCITOS
HEMATOCRITO
HEMOGLOBINA
CONCENTRACION MEDIA DE HEMOGLOBINA
(C.M.H.C.)
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA
(H.C.M.)
VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO (V.C.M.)
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR
(V.S.G.)

4.2
41 . 7
12 . 0

4.2-5.4 x 106/L.
37-47%
12.0- 16 mg/dL.

28 . 7

31-35 %

29 . 3

27-33 pg.

91 . 5

82-98 fL.

4.0

Hasta 20.0 mm/hr.

MORFOLOGA ERITROCITARIA:

SIN ALTERACIONES.

FORMULA PLAQUETARIA:

PLAQUETAS TOTALES
MORFOLOGA PLAQUETARIA:

150,000 - 400,000/L.

259, 000
SIN ALTERACIONES.

FORMULA BLANCA:

LEUCOCITOS TOTALES
CUENTA DIFERENCIAL:
RELATIVA

4,500 11,000 /L.

4, 200
VAL. ABSOLUTO

NEUTROFILOS TOTALES

2, 646 /L.

63 %

NEUTROFILOS SEGMENTADOS

2, 310 /L.

55 %

336 /L.
0 /L.
966 /L.

8%
0%
23 %

NEUTROFILOS EN BANDA
NEUTROFILOS JUVENILES
LINFOCITOS

VAL. RELATIVO

25007500/L.
25007300/L.
0- 200/L.
0/L.
11004500/L.

REF. ABSOLUTA

50-70%
40-60%
0- 5%
0%
20-40%

REF.

EOSINOFILOS
BASOFILOS
MIELOCITOS
MONOCITOS

294 /L.
0 /L.
0 /L.
336 /L.

MORFOLOGA LEUCOCITARIA:

7%
0%
0%
8%

0- 300/L.
0- 100/L.
0/L.
0- 800/L.

1 - 3%
0 -1 %
0%
4-10 %

SIN ALTERACIONES

I N M U N O L O G I A
FACTOR REUMATOIDE, PROTEINA C REACTIVA, VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN
GLOBULAR.
PARAMETRO

RESULTADO

VALOR DEREFERENCIA

FACTOR REUMATOIDE (F.R.)

PROTEINA C REACTIVA (P.C.R.)

NEGATIVO
NEGATIVO

( NEGATIVO)
( NEGATIVO)

ATENTAMENTE.
ATENTAMENTE.
Q. B .P. LUIS ENRIQUE GUILLERMO Q. B .PS. NATALIO VAZQUEZ CRUZ
FABIAN
MATRICULA 10124594
MATRICULA 10124594

ATENTAMENTE.
Q. B .P. JOS JOVANY RIVERA ROMERO
MATRICULA 1012459

Observaciones
Durante el desarrollo de la prctica se cumplieron las condiciones necesarias que debe de
cumplir el paciente. El paciente contaba con dolores articulares con un tiempo aproximado
de 3 meses, adems el paciente no estaba en tratamiento, por otra parte el suero contaba
con las caractersticas para la prueba tales como no hemolisis, no lipemico, no ictrico.
Durante la toma de muestra se sigui el protocolo en base a la norma NORMA Oficial
Mexicana NOM-253-SSA1-2012, se utiliz un tubo con EDTA para sangre total que fue
utilizado para realizar la Citometria hemtica completa, velocidad de sedimentacin
globular, y un tubo con anticoagulante para obtener suero y utilizarlo en las prueba de
protena c reactiva y determinacin cualitativa de factor reumatoide.
Anlisis de los resultados
El suero y la sangre total analizada cumplen con las condiciones que se requieren para el
estudio de la Citometria hemtica completa, velocidad de sedimentacin globular,
determinacin de protena c reactiva, y determinacin de factor reumatoide. Para la toma
de muestra y las condiciones que tiene que cumplir el paciente fue eficaz siguiendo el
protocolo para el anlisis tomando en cuenta las fases pre-analtica, analtica y posanaltica, recolectando la muestra sangunea en un tubo con EDTA para la sangre total y
un tubo sin anticoagulante, posteriormente se centrifugo siguiendo los protocolos de la
prctica. El conocimiento terico y prctico as como la experiencia como qumico clnico
al momento de observar la aglutinacin fue de gran ayuda lo que nos favoreci a
realizarlo de forma eficaz, y gracias a la practica en la observacin del frotis sanguneo
fue muy importante ya que el reconocimiento y diferenciacin de las clulas sanguneas
se basa en la experiencia como qumico clnico ya que si no es posible podran
confundirse y dar un mal diagnstico. El tiempo en la tincin de Wright es muy importante

ya que de esto depender mucho poder diferenciar a las clulas de acuerdo a la

coloracin que obtienen despus de este proceso.

Interpretacin de resultados
Tanto la determinacin de protena c reactiva y el factor reumatoide no son pruebas
especficas para el diagnstico de artritis reumatoide porque estas pruebas son indicativos
de que hay inflamacin ya sea crnica o aguda, son marcadores inespecficos de la
inflamacin, determinados como reactantes de fase aguda, todo depender de los ttulos
de aglutinacin, sin embargo ttulos altos de estos valores indican que hay respuesta
inflamatoria por lo cual el medico optar por otros estudios de gabinete que sern de
apoyo para un mejor diagnostico tal como es la citometria hemtica completa, la qumica
sangunea completa, en ello se valorarn los niveles de cido rico circulante en sangre, y
la creatinina, efectivamente si los resultados salen positivos es recomendables hacer la
determinacin de cido rico y creatinina, determinacin de los anticuerpos anti-protenas
citrulinadas y finalmente como prueba de gabinete la biometra hemtica completa para
observar si hay datos de anemia normoctica normocrmica, de plaquetas en nmero >
400 000/mm3 y de una cuenta de leucocitos entre 5,000 a 20,000/ L, que hablan de la
magnitud de la inflamacin.
Conclusiones
Al trmino de la prctica, se obtuvo un amplio conocimiento prctico que en determinado
tiempo nos enfrentaremos ante este tipo de enfermedades y la ayuda del qumico analista
desempea un papel fundamental para evaluar e interpretar los valores de la citometria
hemtica completa, determinacin de protena c reactiva, determinacin de factor
reumatoide cuyos analitos son marcadores inespecficos de la inflamacin. El
procedimiento fue llevado a cabo en base al protocolo cumpliendo los estndares de
calidad y de esta se obtuvo un resultado eficaz que nos llev a la conclusin de que el
paciente no sufre de artritis reumatoide a pesar del tiempo y estado clnico del mismo, por
lo cual es necesario informarle que ser importante llevar a cabo un seguimiento
adecuado para valorarlo.
Referencias
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(2010). 2010 Rheumatoid arthritis classification criteria: an American College of
Rheumatology/ European League Against Rheumatism collaborative initiative.
Arthritis & Rheumatism, 69(1), pp. 1580-1588.
Arana A. V., Ku E. E., Canul C. J., Chan Z. I., Torres R. J. (2015). Importancia
clnica de los anticuerpos pptidos cclicos citrulinados en el diagnstico de la
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 Arboleda, M. L. G., Gutirrez, J. R., Buritic, H. G., & Cifuentes, M. S. (2013).

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Reumatologa, 20(1), pp. 9-18.
Gmez, A. (2011). Nuevos criterios de clasificacin de artritis reumatoide.
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utility of antibody to cyclic citrullinated peptide as a diagnostic test for rheumatoid
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Ramirez S. C., Santos S. G., Gnzalez F., Martinez C., Muoz G., Barber X., et al.
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SVR: Sociedad Valenciana de Reumatologa, 4(1), pp. 23-25.
Willemze, A., Toes, R. E., Huizinga, T. W., & Trouw, L. A. (2012). New biomarkers in
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