INFORME DE LA TCNICA DE ELECTROFORESIS EN GEL DE CIDOS

NUCLEICOS PROTOCOLO ADN ARN

MARLIN DAYANA FERREIRA YEPES

145202804

LIC. MARIA ROCIO PARRA MOLINA

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

LIC. PRODUCCIN AGROPECUARIA
ELECTIVA 2
2015

La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una corriente

elctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas segn su tamao y
carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por en el ao 1937, pero su importancia vino a
incrementarse cuando en los aos cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius ,
impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se asign a la separacin de
materiales en un campo elctrico en presencia de algn tipo de soporte; aunque
este trmino se limit originalmente al anlisis de coloides y partculas
submicroscopicas , se ha convertido en estos ltimos aos en una metodologa
aplicada a sustancias de bajo peso molecular.
En el siguiente laboratorio emplearemos la tcnica de electroforesis de ADN
amplificado de leishmania y la electroforesis de ADNc amplificado de ARN de virus
de Nilo.

OBJETIVO GENERAL

Conocer los principios bsicos de la tcnica de electroforesis y su

aplicacin al anlisis del ADN Para el proceso de enseanza-aprendizaje de
los estudiantes de Licenciatura en produccin agropecuaria.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Realizar una electroforesis para separar los fragmentos de ADN, en el

laboratorio de gentica animal de la Universidad de los Llanos

ACTIVIDADES DE TRABAJO INDEPENDIENTE

Resuelva las siguientes preguntas:

1.Que variables intervienen en la tcnica de electroforesis de cidos nucleicos y

como la afectan.

1. Pureza del ADN. El corte de la enzima de restriccin depende de la pureza del

ADN. Contaminantes como protenas, fenol, cloroformo, etanol y altas
concentraciones de sal inhiben la endonucleasa.
2. Temperatura y pH.
3. Tipo de molcula de ADN. Si el ADN no posee una secuencia reconocida por
la enzima de restriccin, esta enzima no podr cortar el material gentico.
4. Amortiguador (buffer) adecuado. Un amortiguador o buffer provee el
ambiente necesario para que la enzima trabaje en condiciones ptimas.

2. Una kilobase a cunto equivale?

En biologa molecular, se conoce como par de base (abreviado en ingls bp) a dos
nucletidos ubicados en hebras opuestas de ADN o de ARN complementarios que
estn conectados va enlace de hidrgeno.
Un kilobase son 1.000 pares de bases de ADN o de ARN.

3. Realice un dibujo de cada uno de los procedimientos de electroforesis realizado

y descrbalo en un prrafo de no menos de 20 renglones.

Se tiene 250ul de solucin buffer, luego se incorpora en la cmara de

electroforesis, luego se saca con la micro pipeta 10ul de buffer carga y se
colocan 1ul mas 3ul de cada muestra, en total son 9 muestras, despus

4. Para usted cul es la importancia que tiene la tcnica de electroforesis de

cidos nucleicos
Primero que todo sabemos que son varias las tcnicas para estudiar la estructura
del ADN, pero la electroforesis es posiblemente segn lo que he investigado la
ms usada en el laboratorio debido a que es una tcnica efectiva, bastante fcil de
hacer y relativamente econmica. Con esta tcnica se separan macromolculas
(ej. protenas y cidos nucleicos) a travs de un flujo de corriente elctrico.

5. En la actualidad se han remplazado tcnicas por metodologas ms sencillas y

fciles, que metodologa ha remplazado la tcnica de electroforesis de cidos
nucleicos? Explique con sus propias palabras en que consiste.