Discusiones.

1. Comparando entre cromatografa de gases y HPLC, las caractersticas de

ambos mtodos estos son eficientes, muy selectivos, ampliamente aplicables
slo se requiere una muestra pequea, pueden utilizarse sin destruir la muestra y
se adapta fcilmente al anlisis cuantitativo. En las ventajas de la HPLC, Puede
acomodar muestras no voltiles e inestables trmicamente, es aplicable a iones
inorgnicos. Mientras que en las ventajas de la CG, Se trata de un equipo
sencillo y barato en comparacin con HPLC, es rpido, tiene resolucin en
paralelo (columnas capilares) y se conecta fcilmente con la espectroscopia de
masas, (MS). La CG, ofrece la ventaja de la velocidad y simplicidad del equipo,
pero la HPLC es aplicable a sustancias no voltiles y materiales trmicamente
inestables.

2. Entre las diferencias instrumentales en HPLC no existen detectores tan

aplicables universalmente, ni tan tampoco tan fiables como en CG. el detector en
HPLC no es necesario que sea sensible en un intervalo tan grande de
temperaturas, el detector usado en HPLC debe tener un volumen interno mnimo
a fin de reducir el ensanchamiento de banda.

3. La HPLC se puede utilizar como tcnica preparativa y como tcnica analtica,

permitiendo la purificacin, identificacin y cuantificacin del analito deseado.
La eleccin de la fase estacionaria y la fase mvil, del flujo al que se va a
impulsar la fase mvil a travs de la fase estacionaria e incluso de la temperatura
a la que se va a realizar la cromatografa, permitirn una correcta separacin del
analito de otros compuestos.

4. Cada componente de una solucin tiene unas caractersticas determinadas bajo

ciertas condiciones cromatografas, y debe conseguirse que la migracin del
componente y de los contaminantes a travs de la columna sea lo
suficientemente distinta para que dicho compuesto sea separado de los dems
del extracto, para permitir su posterior identificacin y cuantificacin. A este
proceso se le denomina purificacin. Para identificar compuestos se debe
seleccionar un sistema de deteccin que mida diferentes propiedades fsicoqumicas de la molcula. Entra en juego el tipo de separacin y la naturaleza de
la deteccin, sea absorbancia, conductividad, fluorescencia, relacin masa/carga,
etc.

5. El instrumento detecta la presencia del soluto que es convertida en una seal

elctrica y sta puede ser tratada por un procesador de datos. Se representa la
seal obtenida frente al tiempo o al volumen de elucin, y al grfico obtenido se
le conoce como cromatograma. Los solutos se representan grficamente como
una serie de picos que pueden identificarse por su anchura, altura o rea. Para la
cuantificacin de compuestos se utiliza la seal del detector haciendo que sea
proporcional a la cantidad o a la concentracin inyectada de analito.

6. En muchas ocasiones, para aumentar la vida de la columna analtica, se coloca

delante una pre columna que elimina la materia en suspensin y los
contaminantes de los disolventes. Adems, en cromatografa lquido-lquido, la
pre columna sirve para saturar la fase mvil con la fase estacionaria y as
minimizar las prdidas de sta en la columna analtica. La composicin del
relleno de la pre columna debe ser semejante al de la columna analtica; sin
embargo, el tamao de partcula es por lo comn mayor para minimizar la cada
de presin.

7. Consideracin de pH y los disolventes. En general, los

mdulos HPLC pueden operar en un rango de pH 1-12.5, pero
debemos conocer los siguientes consejos. Disolvente con pH
< 2.3, los solventes no deberan contener cidos que ataquen
al acero inoxidable. PH >9.5, reemplace el sello de rotor
estndar en todas las vlvulas de inyeccin con sellos de peek
(preparativo ph 1-14). Reemplace los filtros de entrada de
disolventes de vidrio estndar con filtros de entrada de acero
inoxidable