UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO

INFORME DE LA PRCTICA N.- 4

TCNICAS HISTOLGICAS
DOCENTE: Lcdo. IVN PEAFIEL MNDEZ

TERCER SEMESTRE

ELABORADO POR: NELSON JAVIER CHAGNAMA

FECHA DE LA PRCTICA: 15 - 06 - 2016

FECHA DE ENTREGA: 22 - 06 - 2016
DURACIN DE LA PRCTICA: 3 HORAS: De 17:00 a 20:00
PERIODO ACADMICO: ABRIL 2016 - AGOSTO 2016

TTULO DE LA UNIDAD:

Unidad 3: PROCESAMIENTO DE TEJIDOS (Procesador) E INCLUSIN DE

TEJIDOS EN PARAFINA.

TEMA DE LA PRCTICA:
INCRUSTACIN DE TEJIDOS EN PARAFINA, FORMACIN DEL BLOQUE
DE PARAFINA

OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL:
Incrustar tejidos en parafina y formar el taco que contenga los mismos, para su
posterior corte en el micrtomo; tomando en cuenta la orientacin de tejidos.

OBJETIVOS ESPECFICOS:
Realizar el reconocimiento del rea de la inclusin de tejidos en parafina.
Realizar la formacin de bloques de parafina siguiendo el protocolo indicado.
Analizar bien la orientacin con el cual se debe colocar las muestras de tejido
obtenidas en el rea de Macroscopia.
Colocar las partes de la Estacin de Inclusin de Tejidos en Parafina para as conocer
de una mejor manera y realizar una inclusin correcta.
Identificar el tipo de tejido que se va a colocar en un molde, proveniente de una
caseta.

FUNDAMENTACIN TERICA O MARCO TERICO:

PARAFINA
Son mezclas de hidrocarburos saturados de cadena que oscilan entre 22 y 28 tomos de
carbono.
El punto de fusin depmde del nmero de tomos de carbono y estn entre 46 y 60, mientras
que las mezclas en parafinas comerciales estn entre 54-56C.
La parafina para incrustacin se presenta como pequeas lentejas de 50mm de dimetro.
Aunque la parafina ms comercial est libre de impurezas algunos tcnicos prefieren
filtrarlas. Para hacer eso se coloca la parafina en un embudo grande con un papel filtro en el
horno de parafina, para que el embudo desemboque en un gran vaso. Como la parafina se
funde ser filtrado mientras pasa a travs del papel filtro hasta el recipiente.
ESTACIN DE INCLUSIN DE PARAFINA.

Tiene como finalidad elaborar un taco de parafina que incluya al tejido que ha pasado por los
procesos de la Macroscopia y del Procesamiento de Tejidos.
Se trata de una estacin modular de inclusin diseada para el encastramiento del tejido y la
confeccin de bloques de parafina. Cuenta con un mdulo calefactado de dispensacin de
parafina con una capacidad de 3 litros y una superficie de trabajo espaciosa, as como zonas
de almacenaje tanto para casetes como moldes.
La estacin de inclusin est compuesta por un bao de parafina, en el cual se introducen los
casetes con las muestras; el dispensador de parafina, con el cual rellenaremos los moldes para
hacer los bloques con el tejido; la cmara fra, en la cual se enfriarn los bloques de parafina,
y as coger la consistencia necesaria para poder ser cortada despus en secciones muy
pequeas en el microtomo.
Todas las funciones del equipo se controlan a travs de una pantalla LED de fcil lectura,
incluido el ajuste de la temperatura para las bandejas de calentamiento derecha e izquierda, el
depsito de parafina y la superficie de trabajo. Cuenta adems con un portapinzas extrable y
calentable para 6 pinzas, accesible por los dos lados.
En la pantalla se encuentra un control que nos permite prender la plancha fra que va a estar
con una temperatura de 0,5C y otro para el reservorio de parafina que se derrame al
momento de realizar el proceso, tambin se encuentra una estacin en donde est ubicada una
plancha caliente con una temperatura de 65,9C. En otro panel se encuentran los reservorios
en un lado para los moldes que pueden ser de plstico, papel o de metal y al otro lado para las
casetas que provienen del procesamiento de tejidos. Para realizar el control de calidad de
estos se debe colocar doble cdigo en las castas para no confundirse. En el molde se busca
una simetra para orientar al eje central a los tejidos; con varios fragmentos se los coloca en el
centro, eso es para los tejidos con una superficie plana. Se debe trasladar de la caseta al
molde de la misma forma o en la misma direccin para buscar a los tejidos.
La activacin del flujo de parafina es mediante clip de altura ajustable y pivotable, cuya
activacin manual se hace mediante el molde de inclusin o con el dedo.
La velocidad de flujo es regulable y los recipientes colectores de parafina extrables,
calentados (de forma indirecta a travs de la superficie de trabajo). Dicha superficie de
trabajo es grande y de fcil limpieza con zona de enfriamiento integrada tambin para casetes
extra grandes con sistema de salida de parafina.
La iluminacin de la superficie de trabajo es ptima gracias a la lmpara halgena ajustable
individualmente.

La temperatura del depsito de casetes/moldes de inclusin, de la superficie de trabajo y del

recipiente de parafina regulable entre 55 C y 70 C. La indicacin de temperatura
permanente para todos los rangos de trabajo.
Se pueden programar los das y horas de trabajo para lograr un funcionamiento automtico
del equipo. Las bandejas calefactadas de los casetes y de los moldes son intercambiables para
adaptarse a los cambios en el flujo de trabajo.
PARTES:
Zona fra
Reservorio de parafina
Planchas calientes
Contenedor de casetas
Bloques desmontables
Apoyabrazos
Lupa
Freeze

ORIENTACIN DE LA PIEZA
El espcimen infiltrado se coloca en la posicin adecuada al tipo de corte que se desea
realizar, teniendo en cuenta que la cara inferior del bloque ser la superficie de corte.
Adems, debemos orientar la pieza de manera que se corte primero la parte ms blanda y la
parte ms dura o firme al final del proceso.
Los moldes que se emplean en la confeccin de los bloques de parafina suelen ser de
parafina, as que facilitan el enfriamiento homogneo en direccin ascendente y la
transmisin del fro al medio del encastramiento.
El fondo de los moldes son de tamao variable que se ajustan a los de las piezas y son las
adecuada para cada tipo de tejido. En ellos se encajan perfectamente las casetas que llevan la
muestra histolgica y su identificacin, facilitando as la confeccin de un bloque nico que
no precisa ningn tipo especial de montaje sobre el portabloques del micrtomo.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Equipo o estacin de inclusin de tejidos en parafina
Moldes metlicos
Casetas
Pinzas
Agujas de diseccin
Plancha fra (-5 C).
Parafina de punto histolgico.

MUESTRA:
Fragmentos de rganos humanos.
Cortes representativos de muestras de tejidos obtenidos de la Macroscopia.

PROCEDIMIENTO:
INCLUSIN DE TEJIDOS EN PARAFINA
Consiste en la obtencin de un bloque slido de tejidos ms el medio de inclusin mediante el
enfriamiento lento a 10-15C.
A temperaturas muy bajas produciran un efecto brusco de enfriamiento con la contraccin de
los bloques que podran llegar a romperse.
La finalidad del proceso es llegar a obtener un bloque fcil de manejar cuando se produzca un
endurecimiento homogneo con una plasticidad y elasticidad adecuada. Con ello se podr
realizar cortes de calidad sin distorsin ni fragmentacin de las estructuras que formaron el
tejido.
para la realizacin de los bloques se utilizan las estaciones de inclusin que consta de:
dispensador de parafina lquida placa caliente para la orientacin de las piezas placa fra para
la solidificacin de los bloques que estar a temperaturas inferiores a 10C.

TCNICA:
Identificamos el tipo y el tamao del tejido.
Colocamos el corte de tejido en una caseta que debe estar codificada.
Guardamos todas las casetas en el contenedor de las casetas.
Escogemos un molde adecuado dependiendo del tipo de tejido.
Colocamos el molde en el dispensador de parafina.
Dispensamos una cantidad mnima de parafina lquida en el molde.
Ubicamos el tejido con una orientacin adecuada y sujetarlos con las pinzas hasta que
se solidifique la parafina y se fije simtricamente.
Saturamos con la parafina liquida el molde y con la caseta del tejido encima los
presionamos hasta que est bien fijada.
Pasamos el molde a la plancha fra.
Si falta parafina colocamos ms hasta que se llene el molde, pero no hasta los bordes.
Transportamos el molde al Freeze o Congelador hasta que se solidifique la parafina.
Con un golpe en un material rgido desprendemos la caseta del molde y obtenemos el
bloque bien formado para que nos facilite en el siguiente proceso que es el corte en el
Micrtomo.

OBSERVACIONES:
En la realizacin de la prctica pude observar que en el Laboratorio de Anatoma Patolgica
se realiz la inclusin en parafina inadecuadamente porque era la primera vez que lo
hacamos, por esa razn se debe de tener el conocimiento necesario para poder aplicarlo
correctamente en la prctica, pero en lneas generales fue buena la prctica ya que
aprendimos algo muy importante y esencial que nos ayudar en la carrera y al momento de
poder encontrar un trabajo ya que no existen muchos trabajando en esa rea.

RESULTADOS:
Tras la realizacin de la prctica se obtuvo el bloque de parafina el cual contena el fragmento
de un tejido a estudiar y realizar su anlisis para llegar a un diagnstico eficaz, para ello hay
que aplicar bien los conocimientos adquiridos y hay que seguir el protocolo indicado.
El bloque obtenido fue de un tejido de tipo tubular, con ello se lo coloc en un bloque con las
medidas adecuadas para ese tejido.

CONCLUSIONES:
En el rea de la inclusin de tejidos en parafina est presente un equipo el cual se lo
conoce como estacin de la inclusin de tejidos en parafina, con ello se realiza el
procedimiento indicado anteriormente para la obtencin de un bloque de parafina y su
posterior corte, tincin y la observacin en el microscopio.
Se realiz la formacin de bloques con las muestras obtenidas en el rea de
Macroscopia realizando la inclusin del tejido en parafina, primero se escogi el
molde para colocar el tejido, despus se reg un poco de parafina, se fij las muestras
sujetndolos con las pinzas hasta que se endurezca y quede de una forma apropiada
para realizar el corte, pero no debe de endurecer tanto, luego se puso la caseta el cual
contena la muestra encima de ella y al final se lo coloc en la plancha fra y
posteriormente al congelador.
Una buena orientacin del tejido nos ayudar a realizar el corte de una mejor manera
y en el lugar exacto de la lesin o la anormalidad que est presente en ella y nos
permitir observar en el microscopio la patologa que posee el rgano procesado y dar
un dar diagnstico verdico.

RECOMENDACIONES:
Se debe tomar en cuenta las normas de Bioseguridad, los Pictogramas y las Barreras
de Proteccin Personal presentes en el Laboratorio de Anatoma Patolgica para no
tener que sufrir alguna consecuencia al momento de realizar el proceso como un
derrame de parafina, con ello se podra quemar la piel, tambin puede sufrir un corte
al momento de un corte de la aplicacin de la tcnica, con ello podemos tener una
contaminacin, por ende, un contagio de alguna patologa que posee el rgano.
Se debe realizar con exactitud y precisin el protocolo a seguir para obtener buenos
resultados, ya que si no lo hacen correctamente podran equivocarse en el diagnstico
como
Se debe tener una visin perfecta para poder colocar en una orientacin adecuada de
las muestras en el molde que se obtuvieron en el rea de Microscopia, para se debe
conocer con exactitud la forma de colocar y la estructura o modelo de corte de cada
tipo de tejido ya sea laminar, tubular, slidas o muestras pequeas.

EVIDENCIAS FOTOGRFICAS:

BIBLIOGRAFA:
GUYTON y Hall, tratado de Fisiologa Medica 10 edicin ao 2004.
VIVAR, Nicols; Manual de procedimientos en Anatoma Patolgica editorial
activa diseo, 2010.

SITIOS WEB:
https://www10.ujaen.es/conocenos/cict/pm11-estacion-modular-de-inclusion-enparafina.
https://youtu.be/sgAwHumFRLY.