Introduccin

Agar Manitol salado o siglas en ingls MSA (Mannitol salt agar)

es un medio de cultivo que se utiliza normalmente en microbiologa.
Permite el crecimiento de bacterias Gram positivas mientras inhibe el
crecimiento de Gram negativas. Este medio es importante en el
laboratorio clnico debido a que es capaz de distinguir los
microorganismo patognicos en un corto periodo de tiempo. Contiene
una alta concentracin (~7.5%-10%) de sal (NaCl), hacindolo
selectivo para Staphylococci (y 'Micrococcaceae) debido su alta
concentracin de NaCl es inhibitorio para la mayora de las bacterias
Gram negativas. Adems es contiene manitol otro inhibidor de
bacterias Gram negativas y un indicador de pH indicador de
fermentacin ; rojo de fenol.
Coagulasa-positivo Staphylococci producen colonias amarillas con
zonas amarillas, mientras que coagulasa-negativo Staphylococci
producen colonias rojas o ligeramente rosadas sin cambio alguno al
medio. Si un organismo es capaz de fermentar el manitol, un
subproducto cido es creado que hace que el rojo de fenol cambie a
amarillo. Se usa para el aislamiento selectivo de colonias de
Staphylococci sospechosas de ser patgenas.

Agar sangre:

compuesto por extracto de carne, peptona, ClNa, sangre, agra y agua

destilada. Lleva como base el agar nutritivo y se le adiciona sangre
desfibrinada en una porcin del 5-10%, principalmente sangre de
conejo, carnero y caballo ya que ofrecen buenas reacciones
hemolticas. No se usa sangre humana procedente de banco puesto
que contiene citrato que puede inhibir el crecimiento de algunos
microorganismos y glucosa que falsea las reacciones de hemolisis,
aparte de anticuerpos y agentes antimicrobianos. Aqu crecen la
mayora de bacterias patgenas y algunas levaduras. Este medio es
adecuado para el cultivo y aislamiento de microorganismos
exigentes, tambin para estudiar la actividad hemolica. 2 La hemolisis
puede ser de 3 tipos: hemolisis: clarificacin parcial de la sangre en
una colonia, que produce un cambio de color gris verdoso o pardusco
en el medio; hemolisis: zona de clarificacin completa de la sangre
alrededor de las colonias debido una lisis completa de eritrocitos que
produce una eliminacin de la sangre del medio debajo de las
colonias y a su alrededor; hemolisis: sin lisis o cambio de color en
los eritrocitos.3
Objetivo
-Describir las caractersticas morfolgicas y los procesos bioqumicos del S.
aureus en el agar Manitol Salado y Sangre
Materiales y mtodos empleados:
Materiales

-Laminas Petri
-Agar manitol salado
-Contador de colonias
-Colonia de S. aureus en agar manitol salado y agar sangre
Mtodos empleados :
-Observacin
Procedimiento:
Se procedi a observar la forma de las colonias , contar el nmero de estas
y encontrar las caractersticas particulares
Resultados
Agar
Manitol salado

Sangre

Resultados
Forma: puntiforme
Color : colonias amarillas
Borde: color amarillo
Forma : ameboidea
Color: amarillo opaco
Borde: ondulado
Elevacin: convexa
Se puede distinguir un halo transparente
alrededor de la colonia(beta hemolisis)

Discusin
La pgina web Britanialab.com, describe: Se trata de un medio
altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los estafilococos
coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o
prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de
cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la
coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la
fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato
de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta
concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompaante,
y
el
rojo
fenol
es
el
indicador
de
pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y
fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del
medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no
fermentar
el
manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan
como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias
rojas, rodeadas de una zona del mismo color o prpura.

Segn el libro Diagnostico Microbiolgico del autor Koneman, en la pg.

616 describe: el S. Aureus a diferencia del S. Epidermidis y otras
especies de coagulasas negativas pueden fermentar el manitol. Esta
propiedad se utiliza en estudios epidemiolgicos para detectar S. Aureus en
el suelo y las heces y en la seleccin de portadores nasales de
microrganismos. El medio usado es agar manitol sal. Este medio contiene
manitol al 1%, cloruro de sodio al 7,5% rojo de fenol y peptonas. La elevada
concentracin salina inhibe el desarrollo de otros microrganismos (excepto
el de enterococos) y permite crecimiento selectivo de estafilococos. S.
Aureus puede ser detectado por la presencia de una zona amarilla
alrededor de las colonias, lo que indica produccin de cido a partir de
manitol. Sin embargo, otras especies estafiloccicas aisladas con poca
frecuencia tambin pueden producir acido de manitol, de modo que los
microrganismos manitol positivos que crecen en este medio se deben
subcultivar en agar sangre y controlar para la produccin de coagulasa.
Conclusin
El agar manitol salado es un medio selectivo que sirve para identificar S.
aureus, ya que contiene manitol, el cual es convertido en acido, lo que
provoca que el color cambien de rojo a amarillo dorado, debido a que el
cambio de pH a acido hace que el rojo de fenol vire amarillo.
Bibliografa

Koneman E. Diagnostico Microbiolgico. 6 ed. Espaa. Panamericana;

2016.
Britanialab.com. Manitol salado [Sede web].Argentina:
Britanialab.com; 2016-[acceso el 23 de junio de 2016] Disponible en
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/manitolsalagar.htm