Mdulo:

Los Frmacos como Modificadores de Funciones Biolgicas

Titulo:
Protocolo de investigacin

06 febrero 2016
Mxico, D.F

Protocolo de investigacin para Evaluar la eficacia ansioltica de Diazepam vs

Valeriana Officinalis/ Passiflora Incarnata/ Melissa Officinalis

INTRODUCCION
Segn la Encuesta Nacional de Epidemiologa Psiquitrica, levanta en 2003, uno de los trastornos
psicopatolgicos ms frecuentes en Mxico es la ansiedad con un 14.3% de prevalencia en la vida de
la sociedad mexicana [1]. Adems es un padecimiento que tiene ms alta prevalencia en mujeres y
personas de entre 40 y 50 aos de edad [2], pero en los ltimos aos se demuestra incidencia en
personas jvenes de 18 aos [3].
El tratamiento de la ansiedad, se emplean habitualmente dos tipos de frmacos: los ansiolticos, y los
antidepresivos siendo estos ltimos para tratar la depresin, que es un sntoma asociado a la
ansiedad [3]. Los ansiolticos ms usados son las benzodiacepinas, su principal ventaja es que
actan rpidamente sobre la sintomatologa de la ansiedad y la remisin de los sntomas se presenta
generalmente dentro de la primera hora despus de haber tomado el medicamento. Los ms
utilizados son: Clorazepate 5-10 mg 2 veces al da y Diazepam 2-5 mg 2 veces al da [2]. Sin
embargo, su consumo crnico produce tolerancia, dependencia y la interrupcin brusca del
tratamiento induce un sndrome de abstinencia (Sollozo-Dupont, 2011).
Recientemente, en una encuesta llevada a cabo en la Ciudad de Mxico, se report el aumento en el
uso de medicina alternativa entre personas con trastornos psiquitricos como la ansiedad. Las
razones abarcan desde la dependencia del tratamiento farmacolgico hasta el alto costo que este
lleva, lo cual los pacientes de este padecimiento consideran problemas a largo plazo.

Prueba de enterramiento de canicas.

El fundamento de esta prueba se basa en el comportamiento o defensa que evoca el ratn ante un
objeto desconocido, en este caso el objeto desconocido son canicas. Estos objetos generan ansiedad
y por lo tanto, el ratn responde con la conducta de enterramiento usando el material de su hbitat,
aserrn (Quionez y Godnez).
Esta prueba es utilizada para evaluar los niveles de ansiedad del animal, de tal manera que una
reduccin o aumento en el nmero de esferas enterradas se interpreta como una disminucin o
aumento en los niveles de ansiedad (Kintana, D. y cols. 2007).

El entierro de las canicas se vera como la conducta apropiada porque quita la fuente del estmulo
que causa aversin. La inhibicin de esta conducta ha sido propuesta como prueba para identificar
compuestos ansiolticos Alternativamente, se ha propuesto que el enterramiento es una conducta
compulsiva, porque los inhibidores de la recaptura de serotonina que se utilizan para tratar la
alteracin obsesivo-compulsiva en humanos inhiben esta conducta (Bonilla, J. 2013).
Justificacin: El creciente consumo de remedios naturales para aliviar este tipo de padecimiento nos
ha interesado en realizar una prueba de eficacia ya que las personas que lo usan, aseguran una alta
eficacia y bajos efectos adversos. En algunas pginas de internet se asegura que el uso de extractos
de etanlicos y hexanlicos de plantas como la Valeriana Officinalis, Passiflora Incarnata y Melissa
Officinalis tienen efecto moderado en casos de sujetos con ansiedad [4].
Nuestro inters generalizado esta en torno a estas tres plantas, administradas en forma conjunta en
una sola presentacin, para evaluar eficacia comparndola con el Diazepam.
La eficacia de las sustancias administradas se medir con el modelo de enterramiento de canicas.
Objetivo:

Evaluar

la

eficacia

ansioltica

de

Diazepam

vs

Valeriana

Officinalis/Passiflora

Incarnata/Melissa Officinalis en ratones CD1 por el mtodo de enterramiento de canicas.

Objetivos especficos:

Observar el comportamiento de los ratones en estado de ansiedad sin administracin de

alguna sustancia ansioltica.

Observar el comportamiento de los ratones en estado de ansiedad con administracin de va

oral de Diazepam.
Observar el comportamiento de los ratones en estado de ansiedad con administracin de va
oral de Valeriana Officinalis/Passiflora Incarnata/Melissa Officinalis

Hiptesis: Si las propiedades individuales de Valeriana Officinalis, Passiflora Incarnata y Melissa

Officinalis tienen eficacia moderada para disminuir la ansiedad en modelos animales, entonces las
eficacias de las tres juntas puede sumarse y actuar sinrgicamente produciendo un efecto ms rpido
y poder igualar la eficacia del Diazepam.

Materiales:

Caja de acrlico
Aserrn
25 canicas de 6 mm
Cnula gstrica para ratn
Ratones CD1 macho de peso indistinto

Los animales de experimentacin, ratones CD1, sern provedos por el bioterio de la Universidad
Autnoma Metropolitana de la Unidad Xochimilco. Las condiciones en las que se encuentran los
ratones antes de comenzar el experimento son:
Hbitats son cajas de acrlico de (43 x 27 x 15 cm).
Suministro de agua potable y alimento diariamente.
Temperatura con rangos preestablecidos de 19 a 22oC
Humedad relativa del 45% al 65%
Ciclos de luz/oscuridad de 12 horas/12 horas [5].

Metodologa:
Se tendrn 4 grupos, G0, G1, G2 y G3
1. Los ratones CD1 sexo se colocaran individualmente en caja de (43 x 27 x 15 cm), con 5 cm
del material de cama (aserrn) por 30 minutos (perodo de habituacin).
2. Finalizado el perodo anterior se retira al ratn y se colocaran sobre el aserrn 20 canicas
distribuidas equidistantemente.
3. En el caso de los grupos G1, G2 y G3 se les administrara la sustancia correspondiente. El G0
omitir este paso.
4. Reintroducir de nueva cuenta al ratn en la caja donde permanecer por 30 minutos ms.
5. Finalizada la prueba, se retira el ratn y se contabiliza aquellas canicas enterradas o
cubiertas al menos en sus dos terceras partes con material de cama.
6. Contabilizar el nmero de canicas enterradas en cada caso. Se ha sugerido que a mayor
nmero de esferas enterradas, mayor nivel de ansiedad [6].

Cronograma de actividades:

El procedimiento del trabajo de investigacin se llevara a cabo en 4 diferentes sesiones,

organizadas de la siguiente manera.

Sesin
1

Actividad
Se trabajara con el G0 al cual se le aplicaran los pasos 1, 2, 4,5 y 6 de la metodologa.
Observacin del comportamiento de los ratones CD1 sin algn estimulo que disminuya la
ansiedad presentada.
Se trabajara con el G1 al cual se le administrara el Diazepam.
Seguir los seis pasos de la metodologa.
Observacin del comportamiento en los ratones CD1 para determinar nivel de ansiedad.
Se trabajara con el G2 al cual se le administrara la mezcla de Valeriana Officinalis/Passiflora
Incarnata/Melissa Officinalis.
Seguir los seis pasos de la metodologa.
Observacin del comportamiento en los ratones CD1 para determinar nivel de ansiedad.
Se trabajara con el G3 al cual se le administrara la mezcla de Valeriana Officinalis/Passiflora
Incarnata/Melissa Officinalis y Diazepam.
Seguir los seis pasos de la metodologa.
Observacin del comportamiento en los ratones CD1 para determinar nivel de ansiedad.

Bibliografa:
Bonilla, J. (2013). Determinacin de la toxicidad, actividad sedante y ansioltica del extracto acuoso
de las flores de Erythrina berteroana (PITO) en ratones NIH. (Tesis) (Lic. Qum. y Farm.). Universidad
de el Salvador. Facultad de Qumica y Farmacia. El Salvador. pp. 81-97
Quionez, Geovanna y Godinez, Beatriz. Prtocolos experimentales de farmacologa en roedores.
UAM-XOCHIMILCO. Material proporcionado por el docente.
Kintana, D. y otros. (2007). Efecto del D-004 sobre patrones conductuales en roedores. Revista
CENIC Ciencias Biolgicas. Vol. 38. Nm.1. (Cuba). pp. 1-7
Sollozo-Dupont, Mara Isabel, y cols. Medicina tradicional: estudios preclnicos de plantas con
propiedades ansiolticas. El Residente Vol. VI Nmero 2-2011: 78-84.

[1] http://www.mexicosocial.org/index.php/mexico-social-en-excelsior/item/309-salud-mental-una-agendainvisible.html
[2] *Publicado en el Boletn de Informacin Clnica Teraputica de la Academia Nacional de Medicina. 2012;
21(3):1-2
[3] http://www.nimh.nih.gov/health/publications/espanol/trastornos-de-ansiedad/trastornos-deansiedad_37135.pdf

[4] http://clinicadeansiedad.com/soluciones-y-recursos/tratamiento-de-la-ansiedad/plantas-medicinales-en-eltratamiento-de-la-ansiedad/
[5] http://www.xoc.uam.mx/servicios/bioterio/
[6] http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-47962014000400010