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Instituto Tecnolgico Superior de Misantla

Ingeniera Bioqumica
Cintica qumica y biolgica
CINETICA DE CRECIMIENTO DE Saccharomyces
cerevisiae POR
CONTEO DIRECTO
Equipo 3
Elena Alarcn Landa
Christian Emmanuel Andrade Ramos
Jos Manuel Campos Martnez
Carlos Alberto Gonzlez Rodrguez
Pablo Pacheco Mendoza
Brenda Esther Roldn Castaeda
Kevin Fernndez Gmez
Alondra Aiveth Ortiz Gabriel
Yeimi Jimnez Snchez
MC. Oswaldo C. Ortiz Zamora
Grupo 605
Misantla, Ver., Mayo de 2016

PRACTICA
CINETICA DE CRECIMIENTO DE Saccharomyces cerevisiae
Objetivo
Monitorear el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae
Introduccin
En condiciones ptimas, el nmero de bacterias en un cultivo sincrnico se duplica
cada cierto periodo de tiempo de manera continua, Saccharomyces cerevisiae es
un hongo unicelular,
de levadura utilizado
fabricacin de pan, cerveza y vino. En su ciclo
de vida alternan dos formas, una haploide y
otra diploide. Ambas formas se reproducen de
forma asexual por gemacin. En condiciones
muy determinadas la forma diploide es capaz
de reproducirse sexualmente. En estos casos
se produce la meiosis en la clula formndose
un asca que contiene cuatro ascosporas
haploides. Las fuentes de carbono utilizadas
por las levaduras varan desde los
carbohidratos hasta los aminocidos. Las
bacterias y otros microrganismos en cultivo se
multiplican constantemente hasta agotar los
recursos presentes en el medio y el tamao de la poblacin cambia a lo largo del
tiempo pasando por las siguientes fases:
Fase Lag (latencia): perodo de adaptacin, aumento de tamao individual;
poco crecimiento
Fase Exponencial: mximo crecimiento. Alta actividad fisiolgica.
Fase Estacionaria: tasa de crecimiento igual a tasa de muerte (falta de
nutrientes y desechos metablicos).
Fase de muerte: acumulacin de metabolitos inhibidores y ausencia de
nutrientes.

En cada una de estas, la biomasa del cultivo aumenta o disminuye a consecuencia


de Crecimiento o disminucin del nmero de microrganismos en la poblacin. El
aumento del nmero de individuos durante el crecimiento bacteriano, provoca una
modificacin en las condiciones de su ambiente, algunas de las cuales se pueden
registrar como cambios en: concentracin de azcares, concentracin de
productos metablicos, oxgeno, pH, entre otras. Ahora bien, las modificaciones
del medio influyen a su vez en el crecimiento de la poblacin.

Material
3 Matraces de 500 ml
1 Matraz de 1L
15 Pipita Pasteur
2 Pipetas de 5 y 10 ml
1 Probeta de 500ml
1 Mechero
1 Vaso de precipitado de 500ml
1 Cmara de neubauer
1 microscopio
2 portaobjetos
Sustancias
Sacarosa

Procedimiento
1. Lavar y secar el material que se utilizara en la
prctica.
2. Colocar 900 ml de agua en la probeta.
3. Verter el agua en el matraz de 1 L.
4. Pesar la cantidad necesaria para preparar 900 ml de
agar.
5. Agregar el agar en el matraz.
6. Llevar el matraz a su punto de ebullicin.
7. Preparar tres matraces con 300 ml
8. Esterilizar el material (pipetas Pasteur, pipetas de 5 y
10 ml).
9. Activar el matraz de 300ml con Saccharomyces
cerevisiae
10.Dejar el matraz de activacin a temperatura
ambiente y en agitacin durante 24 horas.
11. Tomar una muestra de la activacin colocarla en la
cmara de neubauer
12.Realizar el recuento de Saccharomyces cerevisiae.
13.Hacer los clculos correspondientes para sembrar en
el matraz de 300ml.
14.Dejar el matraz de 300ml en agitacin y contar cada
4 horas el nmero de Saccharomyces cerevisiae con
ayuda de una cmara de neubauer.
15.Realizar esta prctica por duplicado.
Resultados
Datos obtenidos Matraz 1.
Tiempo

Curva de crecimiento para S. cerevisiae


en MMS (Cultivo 1)

7.8
7.6
7.4
7.2
7
6.8
6.6
0 20 40 60 80 Tiempo (h)

Fase exponencial para S. cerevisiae en MMS


7.9
7.8
7.7
7.6
7.5
7.4
7.3
7.2
7.1
0

Matraz 2
Tiempo

Curva de crecimiento para S.


cerevisiae en
MMS (Cultivo
2)
8
7.8
7.6
7.4
7.2
7
6.8
0 10 20 30 40 50 60 70 80 Tiempo (h)

log (UFC/ml)

Fase exponencial de crecimiento para S. cerevisiae e

El monitoreo del crecimiento de microorganismos en sus cuatro etapas, en este


caso para Saccharomyces cerevisiae, dentro del medio de cultivo preparado es
denominado comnmente cintica microbiana, que puede ser realizado a travs
de varias tcnicas, y una de ellas es la tcnica de conteo con la cmara de
Neubauer, la cual requiere un manejo delicado, para no provocar daos en la zona
de la cuadricula donde se realiza el conteo. Uno de los inconvenientes que se
deben evitar es que la muestra colocada entre la cmara y el cubreobjetos no se
seque, pues genera dificultad al ser retirada adems de que genera interferencia
para observar correctamente los microorganismos.
Por otro lado, un problema tambin a evitar y que es muy perjudicial para el
conteo es algo de bastante obviedad: contaminacin. Debido a un microorganismo
contaminante en el medio de cultivo estudiado (o varios microorganismos),
Saccharomyces cerevisiae puede verse afectado, de manera que la fase
exponencial de crecimiento podra ser demasiado lenta e incluso aparecer
brevemente, para despus entrar en fase de muerte, ya que el microorganismo
contaminante podra causar dao contra S. cerevisiae o consumir los nutrientes
antes que el propio S. cerevisiae, de modo que el crecimiento de este ltimo no
sea adecuado para el estudio que se lleve a cabo.

Conclusin
La cintica microbiana de un microorganismo, como lo es S. cerevisiae, requiere
de una gran inocuidad a la hora de hacer la activacin, al momento de hacer la
siembra sobre el medio de cintica, y en todas las tomas de muestra de este
ltimo para hacer el conteo con la cmara de Neubauer. Tambin influye mucho la
habilidad de aplicar la tcnica del conteo con dicha cmara, pues puede ocurrir
que se cuenten mal las clulas observadas bajo el microscopio.
Referencia

https://es.wikipedia.org/wiki/Saccharomyces_cerevisiae