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Dosaje de hemoglobina
Hemograma
Velocidad de sedimentacin globular (VSG)
Frmula leucocitaria (recuento diferencial de leucocitos)
ndices hematimetricos
SISTEMA CIRCULATORIO
El sistema circulatorio es el encargado del transporte de la sangre a todas las partes del cuerpo.
Este movimiento de la sangre dentro del cuerpo se denomina circulacin. La sangre es un lquido
rojo que recorre todo el cuerpo impulsada por el corazn, cuyas funciones son:
Transporte de gases: recoge el oxgeno de los pulmones y los nutrientes del intestino para
distribuirlos entre todas las clulas de nuestro cuerpo. Despus de que se produce la
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HEMATOLOGA I
utilizacin del oxgeno en las clulas, retira los deshechos y el dixido de carbono para su
eliminacin.
Interviene en la regulacin de la temperatura corporal
Transporte de metabolitos: conduce una asombrosa cantidad de hormonas o mensajes
qumicos, y anticuerpos o defensas contra las enfermedades.
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HEMATOLOGA I
Cada mitad del corazn presenta una cavidad superior, la aurcula, y otra inferior o ventrculo, de
paredes musculares muy desarrolladas. Existen, pues, dos aurculas: derecha e izquierda, y dos
ventrculos: derecho e izquierdo. Entre la aurcula y el ventrculo de la misma mitad cardiaca existen
unas vlvulas que se abren y cierran continuamente, permitiendo o impidiendo el flujo sanguneo
desde el ventrculo a su correspondiente aurcula. Cuando las gruesas paredes musculares de un
ventrculo se contraen (sstole ventricular), la vlvula correspondiente se cierra, impidiendo el paso
de sangre hacia la aurcula, con lo que la sangre fluye con fuerza hacia las arterias. Cuando un
ventrculo se relaja, al mismo tiempo la aurcula se contrae, fluyendo la sangre por esta sstole
auricular y por la abertura de la vlvula.
El corazn tiene dos movimientos: Uno de contraccin llamado
sstole y otro de dilatacin llamado distole. Pero la sstole y la
distole no se realizan a la vez en todo el corazn, se distinguen
tres tiempos:
Sstole auricular: se contraen las aurculas y la sangre
pasa a los ventrculos que estaban vacos.
Sstole ventricular: los ventrculos se contraen y la
sangre que no puede volver a las aurculas por haberse
cerrado las vlvulas de comunicacin con ellas, sale por
las arterias pulmonar y aorta. Estas tambin tienen, al
principio, sus vlvulas llamadas vlvulas sigmoideas,
que evitan el reflujo de la sangre.
Distole general: Las aurculas y los ventrculos se
dilatan, al relajarse la musculatura y la sangre entra de
nuevo a las aurculas.
Los golpes que se producen en la contraccin de los ventrculos
originan los latidos, que en el hombre oscilan entre 70 y 80
latidos por minuto.
La sangre realiza un doble circuito por el corazn. A travs de las venas cavas, la sangre llega hasta
el corazn y entra en l por la aurcula derecha, desde donde pasa al ventrculo derecho y sale del
corazn por la arteria pulmonar, que la llevar hasta los pulmones.
Vasos sanguneos
La sangre recorre todo nuestro organismo a travs de vasos sanguneos formando un circuito
cerrado, lo que significa que la sangre continuamente est dando vueltas por el mismo recorrido.
Los vasos sanguneos son de tres tipos: arterias, venas y capilares.
Arterias: Son vasos de paredes gruesas. Nacen de los ventrculos y llevan sangre desde el
corazn al resto del cuerpo. Del ventrculo izquierdo nace la arteria aorta, que se ramifica en
dos coronarias, y del derecho nace la pulmonar. Por las arterias sale la sangre del corazn.
Venas: Son vasos de paredes delgadas. Nacen en las aurculas y llevan sangre del cuerpo
hacia el corazn.
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HEMATOLOGA I
Capilares: Son vasos muy finos y de paredes muy delgadas, que unen venas con arterias.
Su nica funcin es la de favorecer el intercambio gaseoso y de nutrientes.
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HEMATOLOGA I
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es la circulacin cerrada y abierta?
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Cules son las diferencias entre venas y arterias?
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Qu diferencia se puede citar entre sangre arterial y venosa?
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Qu analitos se determina en sangre arterial?
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Cules son las venas del brazo, que generalmente se obtiene sangre?
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Qu tipo de enfermedades se producen en los vasos sanguneos?
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Qu es el automatismo cardiaco?
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Qu es la arterioesclerosis?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
Los elementos formes: tambin llamados elementos figurados: son elementos semislidos
(es decir, mitad lquidos y mitad slidos) y particulados (corpsculos) representados por
clulas y componentes derivados de clulas.
Glbulos rojos (eritrocitos): transportan oxgeno desde los pulmones hacia el resto
del cuerpo.
Glbulos blancos (leucocitos): ayudan a combatir las infecciones y asisten en el
proceso inmunolgico. Los distintos tipos de glbulos blancos son:
Linfocitos
Monocitos
Eosinfilos
Basfilos
Neutrfilos
Albmina 4,2%
Globulinas 2,5%
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HEMATOLOGA I
Ciningeno
Plasmingeno
Sistema de complemento
Inmunoglobulinas
Fibringeno 0,3%
La sangre representa 1/13 del peso total del cuerpo humano (5 litros en una persona de 65
kg. de peso) y circula por las arterias y las venas.
El 55% de la sangre est formado por un lquido llamado plasma en el que estn en
suspensin diversas clulas:
Glbulos rojos eritrocitos o hemates
Glbulos blancos leucocitos
Plaquetas trombocitos
De aqu, se resume que el 45% de la sangre son partes slidas y el restante es lquido.
Adems hay una parte gaseosa (oxigeno, anhdrido carbnico, etc.)
Respiratoria: transportando el oxgeno que toma del aire de los pulmones y recogiendo
bixido de carbono de los tejidos.
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HEMATOLOGA I
La sangre cuando es extrada del organismo tiende a coagular,
hacindose gelatinosa. Al adicionar anticoagulantes,
sedimenta, reconocindose 3 capas con claridad: El plasma,
los glbulos blancos (leucocitos) y los glbulos rojos
(eritrocitos), estos dos ltimos conocidos como elementos
figurados.
El plasma obtenido por sedimentacin es el medio lquido en el
que estn inmersos los componentes de la sangre. Rico en
protenas, alberga en su interior un tercer grupo de clulas
sanguneas denominadas: trombocitos o plaquetas.
Funciones del plasma sanguneo:
Transporte
Mantiene la inmunidad
Reserva de protenas
Mantiene los elementos de coagulacin
Mantiene presin osmtica constante
Regula la presin sangunea
Mantiene en suspensin los eritrocitos
Regula el equilibrio cido bsico
Componentes del tejido sanguneo
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HEMATOLOGA I
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cul es la diferencia entre pasma y suero?
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Qu es la albumina?
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Qu y cules son las inmunoglobulinas?
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Qu es el fibringeno?
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HEMATOLOGA I
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Cules son los componentes de una muestra sangunea sin anticoagulante?
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Cules son los componentes de una muestra sangunea con anticoagulante?
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Qu tipo de tejido es el sanguneo e indique sus componentes?
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Cules son los elementos formes del tejido sanguneo?
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GLBULOS ROJOS
Los glbulos rojos, hemates o eritrocitos constituyen aproximadamente el 96 % de los elementos
figurados. Su valor normal (conteo) en la mujer es de alrededor de 4.800.000, y en el varn, de
aproximadamente 5.400.000 hemates.
Edad
Recin nacido
millones/ml
4a5
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HEMATOLOGA I
A los 3 meses
1 ao
Entre los 3 y 5 aos
De los 5 a los 15 aos
Mujer adulta
Hombre adulto
3,2 a 4,8
3,6 a 5
4 a 5,3
4,2 a 5,2
4,5 a 5
4,4 a 5,6
Morfologa:
Los glbulos rojos son las clulas sanguneas de
dimetro de 7.5 m y un grosor de 2.6 m cerca de su
borde y de 0.8 m en el centro; carecen de ncleo, tienen
forma de disco bicncavo, deprimido en el centro; esta
forma aumenta la superficie efectiva de la membrana
para el intercambio de oxgeno por dixido de carbono en
los tejidos. Adems su membrana es flexible lo que
permite a los glbulos rojos atravesar los ms estrechos
capilares. Los glbulos rojos maduros carecen de ncleo,
porque lo expulsan en la mdula sea antes de entrar en
el torrente sanguneo (esto no ocurre en aves, anfibios y
ciertos animales). Los eritrocitos en humanos adultos se
forman en la mdula sea.
Los eritrocitos con ms de 8 m y menos de 6 m de
dimetro se denominan macrocitos y microcitos
respectivamente. Cuando la sangre contiene un elevado porcentaje de de eritrocitos con
dimensiones anormales se dice que hay anisocitosis.
Los eritrocitos contienen algunas vas enzimticas y su citoplasma est ocupado casi en su totalidad
por orgnulos que contienen en su interior la hemoglobina, una protena encargada de transportar
oxgeno, como pigmento, otorga su color caracterstico, rojo, aunque esto slo ocurre cuando el
glbulo rojo est cargado de oxgeno.
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HEMATOLOGA I
Tras una vida media de 120 das, los eritrocitos son destruidos y extrados de la sangre por el bazo,
el hgado y la mdula sea, donde la hemoglobina se degrada en bilirrubina y el hierro es reciclado
para formar nueva hemoglobina.
Factores importantes para la produccin de eritrocitos:
Membrana plasmtica:
Es una bicapa lipdica tpica compuesta por:
Los antgenos ms comunes son los antgenos A y B, que originan a los cuatro grupos sanguneos
principales: A, B, AB y O.
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HEMATOLOGA I
Otro grupo importante es el Factor Rh es una protena integral de la membrana aglutingena que
est presente en los eritrocitos. El factor Rh+ y el Rh- son determinados por la presencia del
antgeno D determinado por los genes responsables de este sistema ubicados en el cromosoma 1.
Recuento de hemates
A) Recuento Manual
Consiste en hacer el recuento en una dilucin de sangre entera anticoagulada. Es un mtodo poco
usado debido al elevado error que presenta.
Lquido diluyente: solucin fisiolgica o citrato de sodio 3,8%.
La dilucin empleada es de 1/200, para lo cual se mide exactamente:
Solucin fisiolgica o citratada:
Sangre (con pipeta automtica):
3,98 ml
0,02 ml
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HEMATOLOGA I
Las lneas reforzadas, o triples, sirven nicamente como lmites de cada cuadrado que contiene los
16 cuadrados pequeos. Se deben contar 5 de estos cuadrados. La superficie de este cuadrado es
de 1 mm2 y la cmara tiene una profundidad de 0,1 mm.
Con la dilucin indicada, luego de agitar adecuadamente en un agitador de rodillos, se carga la
cmara y se cuentan los glbulos rojos de los 80 cuadrados pequeos (zona sombreada). La
cmara puede ser cargada con un capilar, evitando que queden burbujas y que la misma quede
cargada uniformemente.
Considerando entonces, que el retculo tiene 400 cuadrados pequeos en total, el clculo que se
debe hacer es el siguiente:
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HEMATOLOGA I
2.
3.
4.
5.
6.
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8.
9.
10.
B) Recuento Automatizado
La automatizacin ha contribuido de manera decisiva al aumento de la rapidez y la fiabilidad del
recuento de las clulas sanguneas.
Existen distintos tipos de instrumentos: los semiautomatizados que requieren algunos pasos
previos, como por ejemplo diluciones de la muestra antes de ser procesada y, los aparatos
totalmente automatizados slo requieren que se les suministre la muestra obtenida en condiciones
apropiadas (por ejemplo: con el anticoagulante adecuado).
Los sistemas de recuento celular por estos medios se basan en la medida del tamao u otras
propiedades fsicas de las clulas suspendidas en medio lquido de acuerdo con uno de los dos
principios siguientes:
1. Impedancia o resistencia elctrica.
2. Dispersin de luz o campo oscuro.
3.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es el VCM y que nos indica?
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Qu es el HCM y que nos indica?
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Qu son y cules son las funciones de las inmunoglobulinas?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
Qu analitos se pueden evaluar en una muestra con anticoagulante?
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Qu analitos se pueden evaluar en una muestra sin anticoagulante?
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Qu relacin existe entre el hematocrito y el recuento de eritrocitos?
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Qu tipos de anemia conoce?
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HEMATOLOGA I
Figura:
01
Figura:
02
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HEMATOLOGA I
Figura:
03
Figura:
04
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HEMATOLOGA I
EL HEMATOCRITO
El hematocrito es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa la fraccin de los glbulos
rojos. Los valores normales de hematocrito en personas oscilan entre:
Hombres: de 40.7 a 50.3 %
Mujeres: de 36.1 a 44.3 %
Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiolgicos, como la edad y la condicin
fsica del sujeto, como tambin del laboratorio donde se realiza el examen.
Valores bajos de hematocrito estn asociados a mltiples posibilidades: desde anemia,
hasta leucemia o artritis reumatoidea, entre otras.
Valores altos de hematocrito se pueden asociar a deshidratacin, eritrocis o hipoxia, entre
varios.
Se define como la relacin entre el volumen de glbulos rojos con el de sangre entera.
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HEMATOLOGA I
Con los mtodos manuales tambin se cuentan, junto con el volumen de los hemates, el de los
leucocitos, el de las plaquetas y el del plasma que queda atrapado entre los hemates. Por ello, el
valor de Hto conseguido con mtodos automticos es ms exacto y suele ser 1 o 2 unidades ms
bajo que el logrado con mtodos manuales.
Materiales utilizados:
Plastilina.
Algodn o gasas.
Procedimiento:
1. La determinacin ha de hacerse por duplicado.
2. Llenar cada tubo capilar con la sangre, hasta las 3/4 partes de su longitud. El Llenado se
efecta por capilaridad y se realiza poniendo en contacto uno de los extremos del tubo
capilar con la gota de sangre, o introducindolo en el tubo de sangre e inclinando este,
posteriormente, para facilitar el proceso.
3. Limpiar el exterior de cada tubo con un trozo de algodn o con una gasa.
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
4. Sellar el extremo de cada tubo por el que ha entrado la sangre con plastilina. Para ello, se
hace penetrar el tubo en la plastilina.
5. Colocar, debidamente equilibrados, los tubos en la centrifuga. En ella los tubos se sitan
con su extremo tapado hacia afuera, ajustados al borde exterior y adecuadamente
encajados en sus surcos.
6. Centrifugar los tubos a unas 12.000 rpm durante 5 minutos.
Resultados:
Puede realizarse de 2 maneras:
Formula:
Paquete globular / Paquete total x (100) =
Valores de referencia:
Al nacer:
Nios de 1 ao :
Nios 10 aos :
Hombres :
Mujeres :
44 - 62 %
35 % +/- 5
37% +/- 5
40 - 54 %
36 - 47 %
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HEMATOLOGA I
ABACO PARA LECTURA DEL
MICROHEMATOCRITO
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un Hematocrito?
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Qu determina un Hematocrito?
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Cules son las patologas donde el hemograma tiene valores altos?
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Cules son las patologas donde el hemograma tiene valores bajos?
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Qu es una microcentrifuga?
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Cul es la diferencia de utilizar capilares heparinisados y no heparinisados?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
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Indique la relacin de la hemoglobina con el hematocrito
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Indique la forma indirecta de obtencin de hematocrito
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HEMOGLOBINA
GENERALIDADES:
La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le
otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos
rojos y es la encargada del transporte de oxgeno por la
sangre desde los pulmones a los tejidos.
La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono,
que es el producto de desecho del proceso de produccin de
energa.
La forman cuatro cadenas polipeptdicas (globinas) a cada
una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo tomo de
hierro es capaz de unirse de forma reversible al oxgeno.
El grupo hemo se forma por:
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HEMATOLOGA I
1. Unin de la Succinil CoA (formado en ciclo de Krebs o ciclo del cido ctrico) a un
aminocido glicina formando un grupo pirrol.
2. Cuatro grupos pirrol se unen formando la Protoporfirina IX.
3. La protoporfirina IX se une a una molcula de hierro ferroso (Fe 2+) formando el grupo hemo.
Cuando la hemoglobina est unida al oxgeno, se denomina oxihemoglobina o hemoglobina
oxigenada, dando el aspecto rojo o escarlata intenso caracterstico de la sangre arterial. Cuando
pierde el oxgeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo oscuro o bord de la
sangre venosa (se manifiesta clnicamente por cianosis).
TIPOS DE HEMOGLOBINA
H A1: Tipo de hemoglobina del adulto, consta de dos cadenas y dos cadenas , en el
adulto normal corresponde a ms del 95% del total.
HA2: Consta de dos cadenas y dos cadenas , en el adulto sano se encuentra en
proporcin menor al 3%.
H S: Tpica de la anemia falciforme
H F: Conocida como hemoglobina fetal.
Valores disminuidos:
Alteraciones en la dieta
Anemias de diversa ndole
Cncer
Enfermedades sistmicas
Embarazo
Hemorragias
Valores aumentados:
Cardiopatas
Enfermedades pulmonares crnicas
Estancias en lugares de gran altitud
Poliglobulia de diferentes causas
Determinacin:
Materiales
Un espectofotmetro o fotocolormetro.
Pipetas:
- Una pipeta para sangre (pipeta de Sahli) graduada hasta 0.02 ml, con tubo de goma y
boquilla (o una micropipeta de 20 ul).
- Una pipeta de vidrio graduada de 5 ml.
Tubos de ensayo.
Reactivo de Drabkin para dilucin.
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HEMATOLOGA I
Este reactivo se puede adquirir en tabletas o polvos para disolver en 1 litro de agua destilada. Si se
dispone de una balanza analtica la preparacin se puede hacer en el laboratorio. Esta solucin se
puede conservar durante un mes en un frasco de vidrio obscuro o de color mbar.
Procedimiento
Valores de referencia
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es la hemoglobina?
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Qu me indica una baja en el valor normal de hemoglobina?
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Qu me indica una suba en el valor normal de hemoglobina?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
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Cules son las recomendaciones para realizar una prueba de hemoglobina?
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Cul es la diferencia entre oxihemoglobina y carboxihemoglobina?
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Explique la composicin de la hemoglobina a nivel bioqumico
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RECUENTO DE RETICULOCITOS
INTRODUCCION:
Al perder el ncleo, el eritroblasto ortocromtico se transforma en reticulocito, elemento anucleado,
joven que todava posee cierta capacidad de sntesis de RNA, protenas y hemoglobina, gracias a la
persistencia de algunas mitocondrias, ribosomas y restos de retculo endoplasmtico, reconocibles
mediante tinciones supravitales. Los reticulocitos miden entre 8-9 um aproximadamente. Se
presentan en 4 estadios:
I.
II.
III.
IV.
en forma de ovillo
formas reticulares incompletas
formas reticulares completas y
granular-filamentosa.
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HEMATOLOGA I
Los estadios III y IV, dan cuenta del 90% de los casos, vistos en sangre perifrica.
Eritroblastosis fetal
Anemia hemoltica
Post-hemorragia
Enfermedad renal con aumento de produccin de eritropoyetina
CAUSAS DE DEFICIT
CAUSAS DE ERROR
Recuento insuficiente de hemates y reticulocitos
La hemoglobina H se desnaturaliza por el azul brillante y aparece en forma de inclusiones
redondeadas azul verdosas.
No debe leerse despus de 3 horas de incubacin.
La prescripcin debe hacerse tras un estudio racional de los datos del hemograma
CONSIDERACIONES GENERALES
33
HEMATOLOGA I
Los reticulocitos ms maduros (grupo IV) presentan los mayores problemas tcnicos a la
hora de identificacin.
RECUENTO DE RETICULOCITOS:
Son eritrocitos no nucleados inmaduros, que contienen RNA y que continan sintetizando
hemoglobina despus de la prdida del ncleo.
Se mezcla en un tubo tres gotas de azul de cresil brillante y tres gotas de sangre con EDTA, se
incuban durante 15 minutos a 37 C, se hacen dos extendidos en lmina y se miran con objetivo de
100 X. Se cuentan aproximadamente 1.000 hematies y se saca el promedio de reticulocitos.
%Reticulocitos =
Valor Normal:
Disminuyen frente a una mdula sea no regeneradora como en una anemia aplasica en leucemias.
En casos en que el hematocrito sea bajo se debe corregir el nmero total de reticulocitos as:
Reticulocitos = % de Reticulocitos X Hto del paciente / 45 (Hto ideal)
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un reticulocito y como se origina?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
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HEMATOLOGA I
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Qu es la eritropoyesis?
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Qu es una anemia aplasica?
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Qu sucede con los eritrocitos viejos?
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Cules son las fases de maduracin de los eritrocitos?
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ANTICOAGULANTES
GENERALIDADES:
Una vez extrada la sangre, sta puede conservarse coagulada o mantenida incoagulable mediante
la adicin de un anticoagulante. Las caractersticas bsicas de los anticoagulantes ms usados en
hematologa son:
33
HEMATOLOGA I
La sangre tratada con anticoagulante debe procesarse lo antes posible, incluso mantenida bajo
refrigeracin (4 C) si no pasan de las 2 horas. El tiempo mximo entre la extraccin de la sangre y
su procesamiento depende del coagulante de eleccin y no debe ser ms de 4 horas, a excepcin
del anticoagulante EDTA (etilendiaminotetractico) que puede ser hasta 24 horas (en refrigeracin a
4 C).
Clasificacin:
Los anticoagulantes pueden emplearse en forma slida o lquida. Los primeros estn indicados para
la determinacin de los parmetros hematolgicos, ya que no producen, como los anticoagulantes
lquidos, dilucin de la sangre.
Anticoagulantes Slidos:
a) EDTA (C10H16N2O8): Es la sal disdica o tripotsica del cido etilendiaminotetractico.
Estos compuestos realizan su accin a travs de un efecto quelante sobre el calcio (Ca++), al fijarlo
impiden su activacin y, por ende, la coagulacin sangunea.
Ventajas: podemos mencionar las siguientes:
Desventajas: Usado en exceso afecta a los eritrocitos y a los leucocitos, a los cuales les produce
encogimiento y cambios en su forma, por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de
sangre al anticoagulante.
El K2EDTA.2H2O posee un peso molecular relativo de
404,1g; 1g quela 100 mg de calcio inico y el pH para una
Importante:
solucin al 1% es de 4.8+/-1,0.
La cantidad de EDTA dihidratado agregada a la sangre
debe ser de 1.5-2.2 mg/ml. de sangre total. Esta cantidad
Blgo. RONALD H. ROSALES
es un compromiso entre la cantidad requerida para evitar
MEZA
la coagulacin y la cantidad a la cual se producen las
alteraciones celulares.
33
HEMATOLOGA I
Hemoglobina
Hematocrito
Recuento globular
Preparacin:
c) HEPARINA: El nombre de heparina proviene del griego hepar, que significa hgado, ya que fue
aislado por primera vez de las clulas de este tejido. Es un anticoagulante fisiolgico que acta
impidiendo que la protrombina se transforme en trombina. Es un mucopolisacrido cido. La
heparina de sodio o litio puede usarse en forma slida o lquida, en proporcin de 15-20 UI (0,1 - 0,2
mg) de heparina por 1 mL de sangre.
Ventajas:
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
Preparacin:
Anticoagulantes Lquidos:
CITRATO TRISDICO: C6H5O7Na3, acta impidiendo que el calcio se ionice, evitando as la
coagulacin. Es de eleccin para las pruebas de hemostasia y la velocidad de sedimentacin. Acta
a travs de la precipitacin del calcio. La concentracin depende de la prueba por realizar.
Oxalato Sdico: Recomendado tambin para las pruebas de hemostasia. Se emplea en proporcin
de un volumen de anticoagulante para 4 vol. de sangre.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Para qu procedimientos se emplea la sangre con anticoagulantes?
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
Cules son los factores determinantes de la coagulacin?
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________________________________________________________________________________
Cul es el anticoagulante ms empleado en hematologa y por qu?
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Indique el cdigo de color y el tipo de aditivo en los tubos al vacio
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________________________________________________________________________________
Indique la concentracin de los anticoagulantes en los tubos de obtencin al vacio
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EXTENSIONES SANGUNEAS
1. INTRODUCCIN
Una extensin o frotis sanguneo consiste en recubrir parcialmente un porta objetos con una gota de
sangre, de tal manera que las clulas de esta se dispongan formando una sola capa de ellas. Esto
puede hacerse manual automticamente. Lo ltimo se realiza mediante un aparato (spinner) que
centrifuga rpidamente el porta objetos con la sangre depositada en su centro. Con este aparato se
obtienen unos frotis que presentan una distribucin celular muy homognea.
33
HEMATOLOGA I
El estudio de las extensiones sanguneas es esencial para el anlisis morfolgico de las clulas
hemticas y para la realizacin del recuento diferencial linfocitario (RDL). Adems, es imprescindible
para la distincin de una autentica trombopenia de una pseudotrombopenia producida por
agregados plaquetarios.
2. REALIZACIN DE UNA EXTENCIN SANGUINEA
Las extensiones sanguneas se llevan a cabo deslizando un portaobjetos sobre otro en el que se ha
depositado previamente una gota de sangre.
Con esto se obtiene una fina capa de clulas sanguneas que puede ser adecuadamente observada
con el microscopio.
3. TCNICA
1. Con los dedos ndice y pulgar de una mano sujetar un extremo del porta normal (porta
soporte), a nivel de sus bordes y situarlo sobre una mesa. Tambin puede apoyarse
simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo de la mano que lo sujeta. De esta
forma el porta soporte forma un ngulo con la mesa.
2. Con capilar cargado mediante capilaridad de sangre problema depositar una pequea gota
de esta (5 uL) en la cara superior de este porta a no menos de 2 cm. del extremo opuesto al
que agarra la mano.
3. Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco por delante de
la gota de sangre y formando un ngulo de 45 con el porta soporte. Es conveniente utilizar
siempre el mismo porta extensor para adaptarlo a esta funcion.
4. Desplazar suavemente hacia atrs el porta extensor hasta que alcance la gota de sangre.
5. Dejar que la gota se extienda por capilaridad a lo largo del extremo del porta extensor que
toca el porta soporte.
6. Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta extensor hacia
delante con un movimiento firme y uniforme y a una velocidad media. Este deslizamiento
debe acabar aproximadamente a 1 cm. del extremo final del porta soporte con un
movimiento de ascensin del porta extensor.
7. Secar rpidamente la extensin, agitndola al aire para que sus clulas no se distorsionen.
8. Escribir el cdigo de la muestra problema en el portaobjetos que soporta la extensin
(vase figura 01)
33
HEMATOLOGA I
Figura 01. Modo correcto de realizar una extensin sangunea.
4. PARTES DE LA EXTENSIN
4.1. Cabeza:
4.2. Cuerpo:
33
HEMATOLOGA I
4.3. Cola:
En su porcin terminal suelen ser ms abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes.
4.4. Bordes:
Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud y excesivo grosor. Esto se debe a un
inadecuado tamao de la gota de sangre y/o a un error en la velocidad y/o en un fallo en el
ngulo de extensin de la misma.
33
HEMATOLOGA I
Presencia de escalones o estras. Esto esta ocasionado por una falta de uniformidad en el
deslizamiento de la gota.
Existencia de abundantes zonas redondeadas que carecen de sangre. Esto se produce por
la presencia de restos de grasa o de suciedad en el portaobjetos.
Extremo final excesivamente dentado (vase figura 03).
Figura 03. Defectos de una extensin sangunea
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es una extensin sangunea?
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Qu pasos optimizaran un buen frotis sanguneo?
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Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cules son las partes de un frotis sanguneo?
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________________________________________________________________________________
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Para qu sirve un frotis sanguneo?
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Cules son los principales defectos en un frotis sanguneo?
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Cules son las caractersticas de una buena extensin de sangre?
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Qu y cules son los pasos para una tincin de un frotis sanguneo?
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33
HEMATOLOGA I
TINCIONES HEMATOLGICAS
Las tinciones hematolgicas son un conjunto de procesos que conducen a la coloracin de las
estructuras que componen las clulas sanguneas.
Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y
permite por tanto que las clulas sean visualizadas microscpicamente con mayor facilidad.
TIPOS DE TINCIONES
Las tinciones hematolgicas pueden clasificarse segn distintos criterios:
Las tinciones vitales y supravitales son aquellas que se practican sobre clulas que estn
vivas. Son colorantes vitales, por ejemplo, las sales de tetrazolio y el verde Jano.
Las tinciones no vitales se realizan sobre clulas muertas. La coloracin de clulas muertas
requiere un proceso previo de fijacin, que tiene por objeto el conservar inalterada la
estructura de las clulas y el adherir a estas firmemente a la superficie del porta.
La fijacin puede realizarse mediante calor, aunque habitualmente se realice con etanol o metanol.
Tinciones habituales y especiales
Las tinciones habituales se logran generalmente mediante el use de colorantes derivados de la
anilina. Estos se renen en 3 grupos:
Colorantes cidos: tienen una especial afinidad con las estructuras alcalinas de las
clulas, como por ejemplo la hemoglobina. El principal de ellos es la eosina.
Colorantes bsicos: tienen una especial afinidad con las estructuras acidas de las clulas,
como por ejemplo los cidos nucleicos. Uno de ellos es el azul de metileno.
Colorantes neutros: son sales de un acido y de una base coloreados. Tien el ncleo de
un color y el citoplasma de otro. Uno de ellos es el eosinato de azul de metileno.
Colorantes indiferentes: son los que no tienen afinidad con estructuras cidas o bsicas.
Son insolubles en el agua y tien a aquellas sustancias que tienen un poder de disolucin
superior al del lquido empleado para preparar la solucin colorante. Uno de ellos es el
Sudan Ill empleado para teir las grasas.
33
TINCIONES HEMATOLOGICAS
HEMATOLOGA I
Tambin hay combinaciones de colorantes que dan lugar a tinciones policromas. Una coloracin es
panptica cuando se utilizan sucesivamente sustancias colorantes neutras y es pancrmica cuando
se aplican todas las sustancias colorantes neutras juntas.
El primero que tuvo la idea de realizar una de estas combinaciones fue
Romanowsky, y los colorantes hematolgicos utilizados en la actualidad
suelen derivar del que el preparo.
Los colorantes de tipo Romanowsky constan de un colorante acido (eosina) y
de colorantes bsicos (tiacinas). Las tiacinas son el azul de metileno y sus
derivados obtenidos por desmetilacin oxidativa (colorantes tipo azur).
Las tinciones realizadas con colorantes de tipo Romanowsky, que ms
frecuentemente se emplean, son la de Wright y la de Giemsa (utilizada solo o
en combinacin con la de May-Grunwald).
Tambin hay tinciones panpticas rpidas que-producen una coloracin fcil y rpida de las
estructuras celulares.
Las tinciones especiales solo se usan en circunstancias especficas. Son de dos clases:
33
HEMATOLOGA I
Un pH bajo del colorante.
Un tiempo de coloracin insuficiente.
Un lavado excesivamente prolongado.
Si Ia tincin es demasiado azul, posiblemente, este causado por:
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es una tincin?
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Qu y cuales son tipos de tinciones para sangre?
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Cul es procedimiento para teir un hemograma?
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Qu tinciones se emplean mas en hematologa y porque
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33
HEMATOLOGA I
Qu es la tincin de Wright?
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Cmo acta un colorante bsico y que tie?
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Cmo acta un colorante cido y que tie?
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Cul es la diferencia entre una coloracin cida de una bsica?
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33
HEMATOLOGA I
LEUCOCITOS: AGRANULOCITOS
Los agranulocitos o clulas polimorfonucleares: los grnulos en el citoplasma no se tien y tienen un
ncleo redondeado como son: los linfocitos y los monocitos.
MONOCITOS: Conteo normal entre 150 y 900 clulas por mm (2% a 8% del total de glbulos
blancos). Esta cifra se eleva casi siempre por infecciones originadas por virus o parsitos. Tambin
en algunos tumores o leucemias. Son clulas con ncleo definido y con forma de rin. En los
tejidos se diferencian hacia macrfagos o histiocitos.
LINFOCITOS: valor normal entre 1.300 y 4000 por mm (24% a 32% del total de glbulos blancos).
Su nmero aumenta sobre todo en infecciones virales, aunque tambin en enfermedades
neoplsicas (cncer) y pueden disminuir en inmunodeficiencias. Los linfocitos son los efectores
especficos del sistema inmunolgico, ejerciendo la inmunidad adquirida celular y humoral. Hay dos
tipos de linfocitos, los linfocitos B y los linfocitos T.
Los linfocitos B estn encargados de la inmunidad humoral, esto es, la secrecin de anticuerpos
(sustancias que reconocen las bacterias y se unen a ellas y permiten su fagocitocis y destruccin).
Los granulocitos y los monocitos pueden reconocer mejor y destruir a las bacterias cuando los
anticuerpos estn unidos a stas (opsonizacin). Son tambin las clulas responsables de la
produccin de unos componentes del suero de la sangre, denominados inmunoglobulinas.
Los linfocitos T reconocen a las clulas infectadas por
los virus y las destruyen con ayuda de los
macrfagos. Estos linfocitos amplifican o suprimen la
respuesta inmunolgica global, regulando a los otros
componentes del sistema inmunolgico, y segregan
gran variedad de citoquinas. Constituyen el 70% de
todos los linfocitos.
Tanto los linfocitos T como los B tienen la capacidad
de "recordar" una exposicin previa a un antgeno
especfico, as cuando haya una nueva exposicin a
l, la accin del sistema inmunolgico ser ms
eficaz.
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
CARACTERSTI
CAS
LINFOCITOS
MONOCITOS
Numero/mm3
1500 2500
200 800
% de
leucocitos
20 25 %
38%
Dimetro
(m)
78
10 12
8 - 10
12 - 15
(Corte Frotis)
Ncleo
Redondo
En forma de rin
Grnulos
especficos
Contenido de
los grnulos
especficos
No
No
No
No
Marcadores
de superficie
Clulas T: receptores de la
clula T, molculas Cd,
receptores de IL; clulas B:
inmunoglobulinas de
superficie.
HLA de la clase II
receptores Fe.
Vida
Pocos das en la
sangre, varios meses
en el tejido conectivo.
Funcin
Clulas T: reaccin
inmunolgica mediada por
clulas
Se diferencian en los
macrfagos:
fagocitosis,
presentacin de
antgenos.
Clulas B: reaccin
inmunitaria mediada de
manera humoral.
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu componentes reconocemos en un hemograma?
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________________________________________________________________________________
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu caractersticas debe tener un hemograma para su lectura?
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Cul es la diferencia entre monocitos y linfocitos vistos al microscopio?
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Cul es la diferencia entre monocitos y linfocitos a nivel inmunolgico?
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Cul es la funcin de los linfocitos T?
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Cul es la funcin de los linfocitos B?
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Cules son los valores normales para el recuento en hemograma?
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33
HEMATOLOGA I
LEUCOCITOS: GRANULOCITOS
Los glbulos blancos o leucocitos forman parte de las clulas efectoras del sistema inmunolgico, y
son clulas con capacidad migratoria que utilizan la sangre como vehculo para tener acceso a
diferentes partes de la anatoma. Los leucocitos son los encargados de destruir los agentes
infecciosos y las clulas infectadas, y tambin segregan sustancias protectoras como los
anticuerpos, que combaten a las infecciones.
El conteo normal de leucocitos est dentro de un rango de 4.500 y 11.500 clulas por mm
de sangre.
Es variable segn las condiciones fisiolgicas (embarazo, estrs, deporte, edad, etc.) y
patolgicas (infeccin, cncer, inmunosupresin, aplasia, etc.).
33
HEMATOLOGA I
NEUTROFILO
EOSINOFILO
BASOFILO
3500 7000
150 400
50 100
60 70 %
24%
<1%
Dimetro (m)
89
9 11
78
(Corte Frotis)
9 - 12
10 - 14
8 - 10
CARACTERSTI
CAS
Numero/mm3
% de
leucocitos
Ncleo
3 a 4 lbulos
2 lbulos (en
forma de
salchicha)
En forma de S
Grnulos
especficos
0.1 m
sonrosados
plidos
1 1.5 m
sonrosados
oscuros
0.5 m azul o
negro
Contenido de
los grnulos
especficos
Colagenasa de
tipo IV,
fosfolipasa A,
lactoferrina,
lisozima,
fagocitina,
fosfatasa alcalina.
Arilsulfatasa,
histaminasa, b
glucoronidasa,
fosfatasa acida,
fosfolipasa,
protena bsica
mayor, protena
cationica de los
eosinofilos,
neurotoxina,
ribonucleasa,
catepsina,
peroxidasa.
Histamina,
heparina, factor
quimiotactico de
los eosinofilos,
factor
quimiotactico de
los neutrofilos,
peroxidasa.
Marcadores de
superficie
Receptor de Fe,
receptor para el
factor activador
de plaquetas,
receptor para el
leucotrienoB4,
molecula 1 de
adhesin de los
leucocitos
Receptores de
IgE. Receptor del
factor
quimiotctico de
los eosinofilos.
Receptores de IgE
Vida
< 1 semana
< 2 semana
1 2 aos (en el
ratn)
Funcin
Fagocitosis y
destruccin de las
bacterias.
Fagocitosis del
complejo de
antgeno
anticuerpo:
Semejantes a los
mastocitos para
mediar las
reacciones
33
HEMATOLOGA I
destruccin de los
parasitos.
inflamatorias.
LEUCOCITOS: GRANULOCITOS
BASFILOS
33
HEMATOLOGA I
EOSINFILOS:
NEUTRFILOS EN BANDA
NUETRFILOS SEGMENTADOS
33
HEMATOLOGA I
1- Neutrfilo en banda
2- Neutrfilos segmentados
3- Eritrocito
4- Neutrfilo en
segmentacin
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un hemograma?
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu tipos de tinciones hematolgicas conoce?
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cul son los tipos de grnulos que presentan los leucocitos?
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________________________________________________________________________________
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
________________________________________________________________________________
Cmo reconocera un basofilo de un eosinofilo?
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu nos indica un recuento elevado de segmentados y abastonados?
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Esquemas de los 5 tipos de leucocitos en la sangre humana
33
HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
HEMOGRAMA
ACTIVIDADES
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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________________________________________________________________________________
Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
________________________________________________________________________________
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
________________________________________________________________________________
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33
HEMATOLOGA I
RECUENTO DE LEUCOCITOS:
ACTIVIDADES
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
________________________________________________________________________________
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
________________________________________________________________________________
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
________________________________________________________________________________
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Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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________________________________________________________________________________
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
________________________________________________________________________________
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________________________________________________________________________________
Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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33
HEMATOLOGA I
RECUENTO DE PLAQUETAS:
ACTIVIDADES
Blgo. RONALD H. ROSALES
MEZA
33
HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
ACTIVIDADES
33
HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
HEMATOPOYESIS
ACTIVIDADES
33
HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
MICOLOGA:
ACTIVIDADES
33
HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
MICOLOGA:
33
HEMATOLOGA I
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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________________________________________________________________________________
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HEMATOLOGA I
33
HEMATOLOGA I
ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
________________________________________________________________________________
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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