Manual Banco de Sangre PDF

Programa Educativo:
Qumico Farmacutico Bilogo
MANUAL DE PRCTICAS
LABORATORIO DE
BANCO DE SANGRE
Compiladores:
M. en C. Baldemar Ak Canch
M. en C. Patricia Margarita Garma Quen
UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS
PROGRAMA EDUCATIVO: QUMICO FARMACUTICO BILOGO
Manual de prcticas
Laboratorio de
Banco de Sangre
COMPILADORES:
M. en C. Baldemar Ak Canch
REVISIN: 01/2014.
CAMPECHE, CAMP. MARZO 2014
DIRECTORIO
Lic. Adriana Ortz Lanz
Rectora
Lic. Gerardo Montero Prez

Secretario General
Mtra. Mara Guadalupe Maldonado Velzquez
Directora de la Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas
Q.F.B. Geovani Araceli Salinas Balderrabano

Coordinador de la Licenciatura en Qumico Farmacutico
Bilogo

Presidente de la Academia de Qumico Farmacutico Bilogo
PRESENTACIN
El Banco de Sangre ha alcanzado una relevante posicin en la medicina moderna,

especialmente por el aporte que ha significado la transfusin de sangre para el
desarrollo de la ciruga y el uso teraputico de sus componentes en el
tratamiento de las enfermedades que afectan el rea hematolgica.
Todo ello ha conducido a su rpido desarrollo, a la tecnificacin de su personal, y
ha permitido que no sea ms el simple servicio de transfusin con que fue
concebido originalmente.
Por lo anterior, se recomienda que el personal que trabaja en el rea de
inmunohematologa, deba disponer de una metodologa uniforme y actualizada
que facilite la pronta resolucin de los problemas que se presentan.
La sangre es un tejido muy particular, que posee numerosas propiedades;
constituye el medio de transporte del oxgeno y otras sustancias necesarias para
el metabolismo celular.
La sangre est constituida por:
Una fase lquida que se conoce con el nombre de plasma
Componentes celulares, que son: glbulos rojos, leucocitos y plaquetas.
Los glbulos rojos (GR) son las clulas ms numerosas y proporcionan a la sangre
su caracterstico color rojo, tiene una gran capacidad de transporte de oxgeno.
Existe una correlacin entre el nmero de hemates circulantes y su capacidad
para transportar oxgeno. El nmero de hemates o GR. por litro de sangre se
denomina recuento globular.
Hematocrito. Es el porcentaje de hemates o GR por unidad de volumen de

sangre.
La concentracin de hemoglobina presente en una unidad de volumen de sangre
se conoce como concentracin de hemoglobina.
En la elaboracin del presente manual, agradecemos la colaboracin de Yolanda
Guadalupe Nuez Pinto, alumna del 6 semestre del Programa Educativo de
Qumico Farmacutico Bilogo.
UNIDAD DE APRENDIZAJE DE BANCO DE SANGRE
Elaborar un diagnstico clnico con base a los diferentes
COMPETENCIA DE LA
UNIDAD DE
APRENDIZAJE
grupos sanguneos que se emplean en las pruebas

pretransfusionales en los diferentes procesos de banco de
sangre y aplicarlos para fines teraputicos, tomando en
cuenta los principios ticos, la ley General de Salud y la
normatividad vigente.
1. Aplicar la NOM 253 SSA 2012 y las caractersticas

biolgicas de la inmunohematologia y la respuesta
inmune as como la obtencin de la sangre para
fines teraputicos de transfusin. Aplicar mtodos
y tcnicas de grupos sanguneos, sistema Rh y otros
sistemas de acuerdo a la normatividad vigente.
2. Describir las caractersticas de la prueba de

antiglobulina
SUB-COMPETENCIAS
complemento,
humana
prueba
el
de
sistema
de
compatibilidad,
investigacin e identificacin de anticuerpos.

Recoleccin y procesamiento de la sangre, para
realizar los procesos recoleccin, preparacin,
conservacin, transporte de los componentes
sanguneos, su empleo en la terapia transfusional,
para contribuir a la obtencin de un diagnstico
clnico acertado de las pruebas de compatibilidad
causadas por ellos, de acuerdo a la normatividad
vigente.
CONTENIDO
Pg
SUBCOMPETENCIA 1 ........................................................................................................... 1
PRCTICA 1. TOMA DE MUESTRA SANGUINE A ................................................................ 1
PRACTICA 2.CONTROL DE CALIDAD DE LOS SUEROS HEMOCLASIFICADORES ........... 6
PRCTICA 3. DETERMINACIN DEL SISTEMA ABO (PRUEBA CELULAR Y SRICA ....... 11
PRCTICA 4. PREPARACIN DE CLULAS CONOCIDAS ................................................. 15
PRCTICA 5. DETERMINACIN DE LOS SUBGRUPOS A1 Y A2 MEDIANTE EL USO DE
LECTINA Y ANTI H LECTINA. .............................................................................................. 18
PRCTICA 6. DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE HEMOLISINAS EN EL SUERO .. 21
SUBCOMPETENCIA 2 ......................................................................................................... 24
PRCTICA 7. TIPIFICACIN DEL ANTGENO D DEL SISTEMA Rh .................................... 24
PRCTICA 8. DETERMINACIN DEL ANTGENO D DBIL (Du) ........................................ 27
PRCTICA 9. DETERMINACIN DEL FENOTIPO DEL GRUPO Rh .................................... 31
PRCTICA 10. PREPARACIN DE CLULAS CONTROL DE COOMBS O CLULAS
SENSIBILIZADAS ................................................................................................................. 34
PRCTICA 11. DETERMINACIN DE VDRL (VENEREAL DISEASE RESEARCH
LABORATORY) .................................................................................................................... 37
PRCTICA 12. DETERMINACIN DE Brucella CON ANTGENO ROSA DE BENGALA EN
PLACA .................................................................................................................................. 40
PRCTICA 13. PRUEBAS CRUZADAS DE COMPATIBILIDAD ............................................ 43
PRCTICA 14. PRUEBA DIRECTA DE COOMBS ................................................................. 47
PRCTICA 15 PRUEBA INDIRECTA DE COOMBS .............................................................. 50
BIBLIOGRAFIA GENERAL .................................................................................................. 53
ANEXOS............................................................................................................................... 54
ANEXO I. INSTRUMENTOS DE EVALUACIN ................................................................... 55
ANEXO II. LINEAMIENTOS GENERALES EN MATERIA DE SEGURIDAD E HIGIENE A
SEGUIR EN LOS LABORATORIOS ...................................................................................... 59
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 1. TOMA DE MUESTRA SANGUINEA
1.1 GENERALIDADES
La calidad de un procedimiento Pre analtico, analtico y post analtico en gran parte de la
calidad de la muestra en estudio se ha comprobado que la fase Pre analtica consta de un
60% la totalidad del proceso, que se genera desde la solicitud de anlisis del laboratorio
hasta la obtencin del resultado que es la parte Post analtica.
El procedimiento de la toma de muestra, manejo, conservacin y transporte de muestra
es en base a la norma (NOM 166-SSA 1997), que marca los lineamientos para el
funcionamiento correcto de los laboratorios clnicos.
Manejo y registro de anlisis de pacientes
Un sistema de registro de anlisis de pacientes asegura que especmenes de un paciente
no sean confundidos con aquellos de otro y los reportes de anlisis sean los ordenados
por el mdico y recuperables.
El manejo de anlisis de laboratorio se refiere a las acciones como:
Etiquetado
Nombre del paciente
Edad
Hora
Fecha
Solicitud de laboratorio enviada por el mdico
Diagnstico
Debe de existir una libreta de registro para los pacientes y el tipo de anlisis que se va a
realizar o un sistema de cmputo para guardar la informacin si es que se pierde cuando
la libreta se extrava.
La libreta de laboratorio y el sistema cmputo es de ayuda para tener acceso a la
informacin de los anlisis de los pacientes, para calcular mensual y anualmente los
volmenes de pruebas que se realizan.
La sangre consta de dos fases: una parte lquida que es el Plasma y un paquete globular
en donde estn presentes los glbulos blancos, rojos y las plaquetas.
La puncin de la vena deber hacerse con mucho cuidado para evitar formar un trombo, y
evitar hemlisis y hemoconcentrado de la muestra y as evitar que las venas sufran lesin.
1.2 OBJETIVO
Tomar la muestra de sangre en cantidad y condiciones necesarias para el estudio correcto
del laboratorio de Hematologa.
1.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

10 Guantes
Jabn
1 FrascoTorundas
Alcohol al 70 %
10 Gasas
Isodine espuma (lodopovidona)
3 Agujas
Glutaraldehido al 2%
3 Tubos de tapon lila
5 ml de sangre
2 Ligaduras
2 Gradillas
1 Camisa vacutainer
10 Tubos de ensaye de 13 mm x 100 mm

10 Tubos de ensaye de 10 mm x 75 mm
1.4 PROCEDIMIENTO
1. Aplicar un torniquete con una ligadura
2. Identificar el mejor sitio para la venopuntura y liberar el torniquete (Fig. 1).
Figura 1. Localizacin de las venas

Realizar la asepsia frotando vigorosamente el rea como mnimo 4cm de arriba hacia
abajo y en un solo sentido, del sitio destinado para la venopuncion durante 30 segundos
con una torunda de algodn humedecida con alcohol desnaturalizado al 70%.
3. Una vez realizada la asepsia del rea, sta no debe ser tocada nuevamente, es decir,
no se volver a palpar la vena en el sitio destinado para la venopuntura.
4. Volver a aplicar el torniquete
5. Realizar la venopuntura.
6. Una vez que el bisel ha penetrado la piel, se puede realizar la palpacin de la piel por
encima del tallo de la aguja con un dedo enguantado, siempre que no se toque la
aguja.
7. Una vez terminado el llenado de tubos, se retira la aguja del brazo disponente y se
deposita directamente en el contenedor para residuos peligrosos biolgico
infecciosos destinado para ese fin, para su posterior incineracin.
1.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de una correcta toma de muestra?
2. Cul es el nombre de las venas del brazo tomando en cuenta la figura de arriba?
3. Para qu sirve una toma de muestra? Explique
4. Qu factores pueden interferir en una correcta toma de muestra?
1.6 TRATAMIENTOYDISPOSICION DE RESIDUOS

Extraccin de
jeringa y aguja
sangre
D1
con
D2
Tubo lila
Sangre con tubo lila
D3
Figura 2. Diagrama ecolgico: Toma de muestra sangunea.
D1. Basura comn

D2: Se entrega al laboratorio para su disposicin final
D3: Tratamiento con hipoclorito al 10% y Ecomayab.
1.6 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de una correcta toma de muestra?
2. Cul es el nombre de las venas del brazo tomando en cuenta la figura de arriba?
3. Para qu sirve una toma de muestra? Explique
4. Qu factores pueden interferir en una correcta toma de muestra?
1.7 EVALUACION
Ver anexo I: Instrumentos de evaluacin.
1.8 BIBLIOGRAFIA
1.- Rodak Bernndett F; 2004. Hematologa Fundamentos y Aplicaciones Clnicas; 2
Edicin, Editorial; Mdica Panamericana. Argentina.
2.- Rodrguez-Mayado h, Quintanar-Garca e, Meja-Arregui MH. 2004. El Banco de
Sangre y la Medicina Transfusional.. Edicin Editorial Mdica Panamericana. Mxico
3.- Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos. 10 Edicin. Editorial Mdica
Panamericana. Buenos Aires Argentina.
SUBCOMPETENCIA 1
PRACTICA 2.CONTROL DE CALIDAD DE LOS SUEROS
HEMOCLASIFICADORES
2.1 GENERALIDADES
Con el fin de evitar interpretaciones errneas que se deban a reactivos que no cumplen
con las especificaciones adecuadas, debe realizarse el control de calidad todos los das en
el laboratorio.
2.2 OBJETIVO
A travs de esta prctica el alumno, tendr el conocimiento respectivo a la importancia
para verificar que las caractersticas fsicas de los reactivos hemoclasificadores del
sistema ABO y suero de coombs, y la albmina bovina, sean los adecuados de acuerdo a
la norma y criterios aceptados.

5 Placas de vidrio
Solucin salina
2 Cronmetro
Eritrocitos lavados de los grupos A1, A2, B y O
2 Gradilla
Antisueros comerciales: Anti A, Anti B, Anti AB
10 Aplicadores
Anti D, Anti IgG, C3d
10 Pipetas Pasteur
10 Tubos 12 x 75
1 Frasco de cada Uno Anti A, Anti B, Anti AB, Anti

D, y suero de Coombs
2 Gradillas
Eritrocitos del grupo: A1, A2, B y O
1 Cronmetro.
10 Pipetas Pasteur
2.4 PROCEDIMIENTO
Avidez
El Procedimiento de Avidez es una medida de la capacidad de unin y la velocidad con el
cual el anticuerpo (Ac) se combina con su correspondiente antgeno (Ag). Se determina
usando la tcnica de placa.
1. Tomar de 2 a 3 gotas de clulas de los grupos A1, A2, B, y O, lavar tres veces con
4ml de solucin salina.
2. Homogenizar.
3. Preparar suspensiones al 10% para determinar la avidez del sistema AB. En tanto
que para el sistema Rh y suero de Coombs se emplear suspensin al 40% (Cuadro
1).
Suspensin al 10%
Suspensin al 40%
9 gotas de solucin salina
3 gotas de solucin salina
1 gota de eritrocitos
2 gotas de eritrocitos
Cuadro 1. Preparacin de suspensiones de las clulas conocidas.

4. Colocar en la placa de vidrio, una gota del reactivo a probar y una gota de la
suspensin, sin llegar a tocarse dichas gotas.
5. Mezclar las dos gotas con aplicador de madera en un rea de aproximadamente
25mm de dimetro. Al mismo tiempo poner en marcha el cronmetro y pararlo al
iniciarse la aglutinacin.
6. Rotar la placa de lado a lado durante el perodo de observacin. Anotar resultados
de acuerdo con la Cuadro 2.
Antisuero
Clulas
Tiempo promedio de reaccin
Anti A
A1 y A2
De 4 a 10 seg
Anti B
De 4 a 10 seg
Anti AB
A1, A2 y B, A1B, A2B.
De 4 a 10 seg
Anti D
R1r
De 9 a 15 seg.
Coombs
Clulas Sensibilizadas
De 10 a 15 seg.
Cuadro 2. Tiempo promedio de Avidez para los diferentes sueros y clulas frescas.
Nota: Para la realizacin de las suspensiones, utilizar eritrocitos frescos.
Proceso de especificidad
1. Especificidad, es la reactividad selectiva de un anticuerpo (Ac) con su
correspondiente antgeno (Ag).
2. Preparacin de suspensin al 5%; (19 gotas de solucin salina ms una gota de
eritrocitos).
3. En tubos del tamao adecuado, colocar en cada uno de ellos una gota del reactivo
a probar, ms una gota de clulas.
4. Centrifugar 20 segundos a 3400 rpm.
5. Leer de acuerdo con el Cuadro 3.
Reactivo
Anti A
Cel A1
Cel A2
Anti B
Anti AB
Cel B
Cel R1r
+
+
Anti D
Reactivo
Clulas Sensibilizadas
Clulas No Sensibilizadas
Anti IgG,C3d
Cuadro3.- Especificidad para los diferentes sueros y clulas.

8
Grados de aglutinacin
4+ Botn slido, fondo claro
3+ Grumo grande y varios pequeos o. varios grumos grandes, fondo claro
2+ grumos de tamao mediano, fondo claro.
1+ Grumos pequeos y eritrocitos libres. Fondo turbio
(+) Grumos muy pequeos y eritrocitos libres, fondo turbio
Negativo: sin grumos, fondo totalmente turbio
Valoracin de los diferentes grados de aglutinacin
4+ = 12 Puntos
3+ = 10 Puntos
2+ = 8 puntos
1+ = 5 Puntos
(+) = 3 Puntos
2.5 CUESTIONARIO
1. Para que sirve realizar el control de calidad de los reactivos mencionados
anteriormente en el laboratorio?
2. Cual es la utilidad del rectivos de Commbs?
3. A que se debe los doferentes grados de aglutinacion?
4. Cual es la utilidad de la ulbumina bovina?

Extraccin de sangre con
jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 2.Diagrama ecolgico: Toma de muestra sangunea.
D1. Basura comn

2.7 EVALUACION
2.8 BIBLIOGRAFIA
1.-
Rodak Bernndett F; 2004. Hematologa Fundamentos y Aplicaciones Clnicas; 2
Edicin, Editorial; Mdica Panamericana. Argentna

Sangre y la Medicina Transfusional.. Edicin Editorial Mdica Panamericana. Mxico.
3. Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos . 10 Edicin. Editorial Mdica
10
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 3. DETERMINACIN DEL SISTEMA ABO (PRUEBA
CELULAR Y SRICA
3.1 GENERALIDADES
Los procedimientos se basan en el principio de la aglutinacin. Los glbulos rojos
sanguneos humanos normales (HRBCs) que posean antgenos se aglutinarn en
presencia de los anticuerpos especficos dirigidos contra sus antgenos, mientras que los
glbulos rojos (HRBCs) que carezcan de antgenos no aglutinarn. La determinacin del
sistema ABO debe realizarse con glbulos rojos (prueba directa o celular), y con suero o
plasma (prueba inversa o srica); los reactivos Anti-A, Anti-B y Anti-AB aglutinarn los
glbulos rojos que posean antgenos de grupo sanguneo A y/o B, mientras que las clulas
del grupo O no reaccionarn. Los resultados de los grupos sanguneos debern
confirmarse con la prueba inversa, probando el suero individual con glbulos rojos de
grupos conocidos A1, A2, B y O. Para evitar los errores de trascripcin en la tipificacin
directa, es esencial la determinacin de los anticuerpos naturales de los grupos
sanguneos, como estudio comprobatorio.
3.2 OBJETIVO
A travs de esta prctica el alumno, tendr el conocimiento respectivo a la importancia
de la determinacin del sistema ABO.

10 Tubos 12 x 75 mm.
Sangre con o sin anticoagulante (5 ml)
2 Gradilla
Suspensin al 5% de: Eritrocitos A1, Eritrocitos A2,
11
10 Pipetas Pasteur y bulbos
Eritrocitos B, Eritrocitos O
1 Centrfuga serolgica de mesa
Suero hemotipificador Anti A

Suero hemotipificador Anti B
Suero hemotipificador Anti AB
Suero hemoclasificador Anti D
Solucin isotnica de cloruro de sodio (NaCl) al 0.9%
3.4 PROCEDIMIENTO
Tcnica Directa en Tubo (15 a 25C)
1. Preparar una suspensin al 5% de los glbulos rojos en solucin salina fisiolgica
0.9% o en su propio suero o plasma.
2. Marcar cada uno de los tubos como Anti-A, Anti-B y Anti-AB y a cada tubo
adicione una gota de antisuero apropiado.
3. Adicionar una gota de la suspensin de glbulos rojos a cada tubo.
4. Mezclar por agitacin suave el contenido del tubo y centrifugar: 1 minuto a 450g
(1000rpm), o bien, 20 segundos a 3400rpm. Alternativamente dejar reposar los
tubos a temperatura ambiente durante un perodo de 15 a 60 minutos.
5. Suavemente resuspender cada botn de clulas del fondo del tubo y observar
macroscpicamente la aglutinacin.
Tcnica Inversa en Tubo

1. Rotular los tubos con el nmero y la letra de los eritrocitos correspondientes.
2. Agregar 2 gotas del Suero problema a cada tubo.
3. Aadir 1 gota de suspensin al 5% de clulas conocidas (A1, A2, B y O) al tubo
correspondiente.
4. Mezclar suavemente y centrifugar 20 segundos a 3400rpm o 1000rpm por 1
minuto.
5. Observar y anotar los resultados de acuerdo con la Tabla 5a y 5b.
12
3.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia del sistema ABO?
2. Describa cmo funciona el sistema ABO
3. Para qu sirve la prueba inversa?
4. Describa el funcionamiento de la prueba inversa y directa
5. Qu azcar determina la especificidad del grupo A?
6. Qu azcar determina la especificidad del grupo B?
7. Qu azcar determina la especificidad del grupo O?
3.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICION DE RESIDUOS

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
D1. Basura comn.

D2: Se entrega al laboratorio para su disposicin final.
13
3.7 EVALUACION
Ver anexo I: Instrumentos de evaluacin
3.8 BIBLIOGRAFIA
Edicin, Editorial; Mdica Panamericana. Argentna.
14
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 4. PREPARACIN DE CLULAS CONOCIDAS
4.1 GENERALIDADES
Para la identificacin de los anticuerpos naturales del sistema ABO se realiza utilizando
antgenos conocidos como:
Eritrocitos A1
Eritrocitos A2
Eritrocitos B
Eritrocitos O
4.2 OBJETIVO
El alumno aprender a preparar y a utilizar soluciones de clulas conocidas para su
correcto funcionamiento en el laboratorio.

2 Gradilla
5 ml de sagre tipo A,B y O
10 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm
1 Suero de Coombs
2 10 Piseta
1 Solucin salinadede
10 Pipetas pasteur
15
4.4 PROCEDIMIENTO
1. Tomar 3 gotas de eritrocitos A1, A2, B y O lo ms frescas posibles.
2. Lavar 3 veces con Solucin Salina Fisiolgica 0.9%
3. Preparar una suspensin al 5% (19 gotas de solucin salina + 1 gota de Eritrocitos
previamente lavados) y utilizar.
4. Comprobacin con una gota de la suspensin al 5% y dos gotas de suero de Coombs.
4.5 CUESTIONARIO
1. Para qu sirve la preparacin de clulas conocas?
2. Qu importancia tiene las clulas conocidas?
3. Qu funcin tiene el suero de Coombs en esta prctica?
4. Qu relacin tiene esta prctica con las pruebas cruzadas?
5. En qu otras pruebas pueden usarse clulas conocidas?
6. Qu es una hemolisis intravascular?
4.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

Tubos con sangre de la
suspensin, Pipetas con
sangre, jeringa y aguja
D1
D2
Tubos y pipetas, jeringa y

aguja
Tubos y pipetas con sangre
D3
Figura 4.- Diagrama ecolgico: Clulas conocidas

16
D1. Basura comn

D2. Se entrega al laboratorio para su disposicin final
D3. Tratamiento con hipoclorito al 10% y Ecomayab
4.7 EVALUACION
3.8 BIBLIOGRAFIA
3.-Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos. 10 Edicin. Editorial Mdica
Panamericana. Buenos Aires Argentina
17
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 5. DETERMINACIN DE LOS SUBGRUPOS A1 Y
A2 MEDIANTE EL USO DE LECTINA Y ANTI H LECTINA.
5.1 GENERALIDADES
El antgeno A puede presentarse bajo varias formas que difieren entre s, cualitativa y
cuantitativamente en el antgeno A presente en el glbulo rojo. Las dos formas ms
comunes son A1 y A2. De stos, el subgrupo A1 es el ms frecuente (80%) y todos aquellos
grupos ms dbiles de A se clasifican como A2 (20%).
5.2 OBJETIVO
El alumno determinar la presencia de los distintos subgrupos de Anti A, a travs de la
lectinas y cul es la ms frecuente.

Pipetas pasteur
Tubos 12 x 75 mm.
Lectina Anti A1
Gradilla
Lectina Anti H.
5.4 PROCEDIMIENTO
1. Depositar en un tubo marcado, 1 gota de Lectina Anti-A1, Anti H.
2. Agregar una gota de suspensin de Glbulos Rojos al 5%.
3. Mezclar y centrifugar a 3400rpm por 20 segundos
4. Observar aglutinacin resuspendiendo suavemente los glbulos rojos sedimentados,
18
5. Analizar de acuerdo con el Cuadro 5.

Grupo
Lectina Anti A1
Lectina Anti H
Subgrupo
A1
AB
A1B
A2
AB
A2B
Cuadro 5. Anlisis de resultados. De la lectina
5.5 CUESTIONARIO
1. Mencione cual es la importancia de la practica
2. Explique por qu los resultados del cuadro 6
3. Cmo funciona la lectina anti A?
4. Cmo funciona la lectina anti H?
5. Qu importancia tiene los subgrupos?

Extraccin de sangre
con jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 5.-Diagrama ecolgico: Lectina.

19
D1. Basura comn

5.7 EVALUACION
5.8 BIBLIOGRAFIA
3.-Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos . 10 Edicin. Editorial Mdica
20
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 6. DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE
HEMOLISINAS EN EL SUERO
6.1 GENERALIDADES
Las hemolisinas son anticuerpos que al reaccionar con su antgeno correspondiente,
activan la va clsica del complemento a 37 C y producen la ruptura de la membrana de
los glbulos rojos con la consecuente hemlisis de las mismas.
6.2 OBJETIVO
El alumno determinar la presencia de las hemolisinas en el suero de un donante del
grupo O y la importancia de la misma; adems deber verificar que los reactivos
hemoclasificadores no contengan hemolisinas.

1 Termmetro
Suero sanguneo
2 Gradillas
10 Pipetas Pasteur
1 Bao mara a 37 C
Nota: Realizar la prueba en las dos primeras horas de haber extrado la sangre.
21
6.4 PROCEDIMIENTO
1. Marcar 2 tubos, uno con letra A y otro con letra B.
2. Colocar a cada tubo 2 gotas del suero en estudio.
3. Agregar a cada tubo 1 gota de eritrocitos al 5% segn la letra que corresponda.
4. Incubar a 37C durante 2 horas.
5. Retirar del Bao Mara, mezclar, centrifugar y observar la presencia de hemlisis.
6. Anotar resultados, de acuerdo con el cuadro 6.
Hemolisis
Interpretacin
Ausente
Ausencia de hemolisinas
Presente
Presencia de hemolisinas
Cuadro 6.Interpretacin de resultados. Hemolisisnas.
6.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de esta prctica y su utilidad en el laboratorio?
2. Qu son las hemolinasas?
3. Explique la funcin de las hemolinasas
4. Qu significa la presencia de hemolisis en el suero?
5. Por qu cree usted que se utiliz a un donante tipo O?
6. Cmo se interpreta los resultados de las hemolisinas?
22

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
D1. Basura comn

6.7 EVALUACION
6.8 BIBLIOGRAFIA
Sangre y la Medicina Transfusional. Edicin Editorial Mdica Panamericana. Mxico.
23
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 7. TIPIFICACIN DEL ANTGENO D DEL SISTEMA Rh
7.1 GENERALIDADES
Determinar la presencia o ausencia del Ag D, es una prueba muy importante en la rutina
del Banco de Sangre, para asegurarse que los pacientes Rh Negativos reciban esta sangre
(Rh negativa), as como tambin evitar la inmunizacin en aquellas madres Rh Negativo.
7.2 OBJETIVO
En esta prctica el alumno identificar correctamente la presencia o ausencia del
antgeno D y la importancia para evitar la inmunizacin en aquellas madres con Rh
Negativas.

Antisuero comercial Anti D
10 Pipetas Pasteur
Suero control Rh
5 ml. de sangre con o sin anticoagulante
7.4 PROCEDIMIENTO
1. Prepare una suspensin de glbulos rojos al 5% usando el propio suero o plasma de la
muestra de sangre (o con suero o plasma de un grupo compatible), o bien en solucin
salina fisiolgica.
2. Adicionar una gota de la suspensin o una cantidad equivalente de sangre total con
uno o dos aplicadores de madera a un tubo de ensayo pequeo.
24
3. Agregue una gota de suero Anti-D albuminoso.

4. Mezcle suavemente y centrifugue a 1000rpm por un minuto o bien a 3400rpm por 20
segundos.
5. Resuspenda los glbulos con agitacin ligera del tubo. Observe si hay aglutinacin
6. Interprete los resultados acorde con la Cuadro 8.
Tubo con
Tubo con
Interpretacin
Anti Rh
Control Rh
Rh Positivo
Rh Negativo o posible Du*
Aglutinacin (investigar dicha

situacin)
Cuadro 8. Interpretacin de resultados.

* En estos casos se debe proceder a descartar la presencia del Ag D Dbil (Du).
7.5 CUESTIONARIO
1. Qu es el Rh Negativo?
2. Qu consecuencias puede traer a una mujer embarazada el Rh Negativo?
3. Cul es la importancia de esta prctica en relacin al objetivo de la misma?
4. Qu relacin hay entre el Rh y la potencia inmunogenica?
25

Jeringa, aguja tubo rojo
D1
D2
Tubo rojo
Sangre con tubo rojo
D3
Figura8. Diagrama ecolgico: Antgeno D.
D1. Basura comn

7.7 EVALUACION
7.8 BIBLIOGRAFIA
26
SUBCOMPTENCIA 2
PRCTICA 8. DETERMINACIN DEL ANTGENO D DBIL (Du)
8.1 GENERALIDADES
No todos los glbulos rojos pueden ser clasificados como Rh (+) o Rh (-), mediante las
pruebas directas de aglutinacin con antisueros comerciales y a temperatura ambiente,
ya que el Ag D puede estar dbilmente expresado, requirindose de pruebas adicionales
como la prueba de antiglobulina.
8.2 OBJETIVO
En esta prctica el alumno determinar correctamente el antgeno D dbil con antisueros
comerciales.
8.3 MATERIALES, EQUIPOS, Y REACTIVOS

Tubos de 12 x 75mm
Suero sanguneo
Gradilla
Suero o reactivo de Coombs
Piceta
Solucin salina
Bao maria a 37 C
Clulas control de Coombs
Centrifuga serolgica
8.4 PROCEDIMIENTO
1. Incubar a 37C por 30 minutos el tubo que est realizando la prueba de Rh y el tubo
Control.
27
2. Lavar ambos tubos 3 veces con solucin salina durante 3 minutos decantando
completamente la salina despus de cada lavado y homogeneizar.
3. Agregar 2 gotas del Suero de Coombs.
4. Centrifugar a 3400rpm durante 20 segundos y observar.
5. Anotar Resultados.
6. Agregar una gota de Clulas Control de Coombs (Fig 2).
7. Interpretacin de la prueba Du de acuerdo con la Tabla 9.
Figura.9. Esquema de la determinacin del Ag D y el Ag dbil Du
Tubo con
Tubo
Interpretacin
Anti Rh
Con Control Rh
Rh Negativo
Rh Positivo
Cuadro 9.- Interpretacin de resultados.
28
8.5 CUESTIONARIO
1. Por qu algunos grupos sanguneos presentan fuertemente el antgeno D y otro no?
2. Explique los resultados de la tabla anterior
3. Qu significa anti-Hr?
4. Cmo funciona la prueba antiglobulina?
D1
Aguja, jeringa tubo rojo

con sangre
D2
Tubo rojo
Tubo rojo con sangre

D3
Figura 10.-Diagrama ecolgico: Antgeno D dbil.
D1. Basura comn

8.7 EVALUACION
29
8.8 BIBLIOGRAFIA
30
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 9. DETERMINACIN DEL FENOTIPO DEL GRUPO Rh
9.1 GENERALIDADES
Contar con la informacin de otros antgenos del sistema Rh que, en ausencia del Ag D,
pueden ser inmunolgicamente importantes, ya que pueden provocar una respuesta
inmune en aquellos sujetos que carecen de ellos y le son transfundidos.
9.2 OBJETIVO
En esta prctica el alumno conocer la importancia de otros antgenos del sistema Rh

10 Tubos 12 x 75 mm
Antisueros comerciales
10 Pipetas Pasteur
Anti C
Glbulos rojos al 5 %
Anti c
Solucin de jabn
9.4 PROCEDIMIENTO
1. Hacer una suspensin al 5% de la muestra.
2. Marcar 4 tubos con la letra del reactivo correspondiente.
3. Adicionar una gota del Antisuero en el orden correspondiente (Anti C, Anti c, Anti E,
Anti e).
4. Agregar 1 gota de la Suspensin de Glbulos Rojos al 5% a cada tubo.
31
5. Mezclar y centrifugar 3400rpm durante 20 segundos y observar.

6. Interpretacin de resultados de acuerdo a la Tabla 10.
Aglutinacin
Interpretacin
Presente
Ag. presente
Ausente
Ag. Ausente
Cuadro 10.- Interpretacin de resultados del fenotipo del grupo Rh.
9.5 CUESTIONARIO
1. Qu es el sistema Rh?
2. A qu se debe las diferencias entre los antgenos Rh?
3. Por qu es tan importante conocer los otros antgenos del sistema Rh?
4. A qu se debe la respuesta inmune en aquellos sujetos que carecen de ellos y le son
transfundidos?
5. Qu anticuerpos estan presentes en una imcompatiblidad por anticuerpos frios?
6. Qu anticuerpos estan presentes en una incompatibilidad por anticuerpos calientes?

Jeringa, aguja tubo lila
D2
D1
Tubo lila
Tubo lila con sangre
D3
Figura 11. Diagrama ecolgico:fenotipo y Rh.
32
D1. Basura comn.

D2: Se entrega al laboratorio para su disposicin.
9.7 EVALUACION
9.8 BIBLIOGRAFIA
33
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 10. PREPARACIN DE CLULAS CONTROL
DE COOMBS O CLULAS SENSIBILIZADAS
10.1 GENERALIDADES
Las clulas control de Coombs (CCC) se utilizan como validacin de las pruebas de
antiglobulina humana (AGH) o prueba de Coombs, as como para el control diario del
reactivo de antiglobulina, establecidos por las normas de control de calidad en el Banco
de Sangre.
10.2 OBJETIVO
El alumno conocer la importancia de la preparacin de clulas control de Coombs o
clulas conocidas y la validacin de las pruebas cruzadas y el control de los reactivos y el
lavado del material de vidrio

10 Tubos de ensaye
Suero Anti D
Parafilm
Suero de Coombs Anti IgG, C3d
10 Pipetas Pasteur
Glbulos rojos
2 Gradilla
NaCl
1 Centrfuga Serolgica de mesa
Solucin salina
1 Bao Mara a 37C
34
10.4 PROCEDIMIENTO
Titulacin del anti-d comercial IgM+ IgG
Debido a que en el comercio no existe el anti D IgG es necesario realizar una titilacin al
anti D IgM+IgG.
1. Tomar un segmento de clulas O Rh POSITIVO y lavar 3 veces con Solucin
Salina Fisiolgica al 0.9%.
2. Preparar 1 mililitro de dilucin, de la siguiente manera: 18 gotas de Solucin Salina
+ 2 gotas de Anti D.
3. Al paso 2, aadirle 10 gotas de Glbulos Rojos previamente lavados.
4. Incubar durante 1 hora a 37C.
5. Sacar y lavar 3 veces con Solucin Salina Fisiolgica al 0.9%.
6. Preparar una suspensin al 5% (1 gota de Glbulos Rojos Sensibilizados + 19 gotas
de Solucin Salina Fisiolgica al 0.9%).
Tubo 1 control (-)
Aadir 2 gotas de NaCl + una gota de suspensin de G.R. al 5%
Tubo 2
Aadir 2 gotas de Suero de Coombs + una gota de de suspensin de G.R al 5 %.
Se conservan en el refrigerador durante 7 das, siempre y cuando no presente
hemlisis.
10.5 CUESTIONARIO
1. Qu es el suero control de Coombs y cmo funciona?
2. Cmo se relaciona esta prctica y las pruebas cruzadas?
3. Qu tipo de sangre se utiliza para prepralo?
4. Con que inmunoglobulina son sensibilizadas?
5. Qu son las clulas sensibilizadas?
35

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 12 Diagrama ecolgico: Clulas sensibilizadas.
D1. Basura comn

9.7 EVALUACION
9.8 BIBLIOGRAFIA
36
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 11. DETERMINACIN DE VDRL (VENEREAL

DISEASE RESEARCH LABORATORY)
11.1 GENERALIDADES
La sfilis es una enfermedad generalizada, producida Treponema pallidum, transmitida
habitualmente por contacto sexual. El diagnstico descansa en la serologa, los mtodos
determinan dos clases
de anticuerpos: 1) Tipo cardiolipina , no treponema e
inespecficos y 2) Los antitreponemas especficos
11.2 OBJETIVO
El alumno determinar la prueba de VDRL que es una enfermedad venrea transmitida
por contacto sexual.

2 Placa cncava
3 ml de sangre
10 Pipetas de plstico
Reactivo de V.D.R.L.
1 Agitador Mecnico
1 Microscopio
1 Centrifuga
37
11.4 PROCEDIMIENTO
1. Colocar una gota (0.05ml) del Suero problema, as como de los Controles Positivo y
Negativo, en los anillos de una Placa.
2. Extender las muestras y los controles sobre la superficie del anillo.
3. Aadir una gota del Antgeno (Reactivo1).
4. Colocar la placa sobre un agitador mecnico a 180 rpm durante 4 minutos.
5. Leer inmediatamente al microscopio con el Objetivo 10x.
11.5 CUESTIONARIO
1. Qu es la sfilis?
2. Cules son los sntomas de la sfilis?
3. Por qu otros medios se puede transmitir la enfermedad?
4. Qu procedimientos se toman si la prueba da positivo?
5. Qu reactivo se utiliza para determinar sfilis?

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 13. Diagrama ecolgico:V.D.R.L.
38
D1. Basura comn

11.7 EVALUACION
11.8 BIBLIOGRAFIA
3. Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos. 10 Edicin. Editorial Mdica
39
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 12. DETERMINACIN DE Brucella CON ANTGENO
ROSA DE BENGALA EN PLACA
12.1 GENERALIDADES
Brucella. Cocobacilo gramnegativo, comprende tres especies, cada una difiere en sus
reservorios animales.
Brucella mellitensis: Cabras y Ovejas.
Brucella abortus: Ganado Vacuno
Brucella suis: Cerdos
12.2OBJETIVO
El alumno determinar la prueba de rosa de bengala y su importancia clnica aplicado en
el servicio de medicina transfusional.

Placa de vidrio o desechable
Suero del disponente
Pipeta automtica o desechable
Antgeno Rosa de Bengala
Agitador mecnico
Control positivo y negativo de

Brucella
Fuente de luz
40
12.4 PROCEDIMIENTO
1. Colocar una gota (0.05ml) del suero en estudio, as como una gota de controles
positivo y negativo en los crculos de una placa.
2. Mezclar suavemente el antgeno con la muestra hasta que se encuentre totalmente
homogneo.
3. Agitar la placa durante 4 minutos a 180 rpm.
4. La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos.
12.5 CUESTIONARIO
1. Qu es la Brucella abortus?
2. Cmo se contrae la Brucella abortus?
3. Cules son los sntomas de esta enfermedad?
4. Cmo funciona esta prueba?

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 14. Diagrama ecolgico: Rosa de bengala.
41
D1. Basura comn

12.7 EVALUACION
12.8 BIBLIOGRAFIA
Sangre y la Medicina Transfusional. Edicin Editorial Mdica Panamericana. Mxico
3. Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos. 10 Edicin. Editorial Mdica
42
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 13. PRUEBAS CRUZADAS DE COMPATIBILIDAD
13.1 GENERALIDADES
Las pruebas cruzadas es la prueba ms importante efectuada en el servicio de
transfusin. Por lo tanto, es necesario ser sumamente cuidadoso en su procedimiento
para asegurar el mximo beneficio al paciente.
Objetivos clnicos de la prueba de compatibilidad
a. Procurar que el paciente reciba el mximo beneficio de la transfusin
b. Prevenir una reaccin hemoltica transfusional.
c. Detectar anticuerpos irregulares en el suero del paciente contra los glbulos
rojos del donante (Prueba Mayor), y detectar anticuerpos en el suero del
donante contra los glbulos rojos del paciente (Prueba Menor).
d. Detectar discrepancias en la determinacin del sistema ABO.
e. Detectar errores en la identificacin de las muestras de donantes y receptores.
Las pruebas cruzadas son dos:
Prueba mayor. Es la ms importante, en ella se pone en contacto los glbulos

rojos del donante con el suero del receptor. Se detecta anticuerpos en el receptor
que puedan daar los glbulos rojos que se van a transfundir.
Prueba menor. Detecta anticuerpos en el suero del donante que puedan afectar
los glbulos rojos del receptor, debido a que los anticuerpos presentes en el
donante se van a diluir en la volemia del receptor.
Las pruebas cruzadas se realizan en tres fases

1. Primera fase salina. Detecta anticuerpos fros (IgM).
2. Segunda fase albuminoso. Detecta anticuerpos calientes (IgG).
3. Tercera faseantiglobulina indirecta. Detecta anticuerpos irregulares circulantes.
43
Las pruebas cruzadas deben de realizarse con sangre fresca del receptor, sin
anticoagulante.
13.2 OBJETIVO
El alumno realizar las pruebas de compatibilidad y conocer la importancia en el servicio
de transfusin

10 Tubos de ensayo
Suero de Coombs poli especfico
10 Pipetas pasteur
Albmina boina al 22 %
1 Centrifuga
Solucin salina
1 Bao maria
13.4 PROCEDIMIENTO
1. Lavar los eritrocitos del Donador y del Receptor, y preparar una suspensin al 5%.
2. Verificar Grupo y Rh del Donador y del Receptor.
3. Rotular 3 tubos con las letras: D, R y AT.
4. Dispensar las muestras de la siguiente manera:
5. En el tubo D colocar 2 gotas del Suero del Receptor y 1 gota del Glbulos Rojos al 5%
del Donador.
6. En el tubo R dispensar 2 gotas del Suero del Donador con 1 gota del Glbulos Rojos al
5% del Receptor.
7. En el tubo AT dispensar 2 gotas del Suero del Receptor y 1 gota del Glbulos Rojos al
5% del mismo Receptor.
44
8. Centrifugar 20 segundos a 3400rpm y observar.

9. Posterior a esta lectura, en lugar de 3 gotas de Albmina bovina al 22%, aadir 2 gotas
de LISS-Gamma LO-ION (solucin de baja fuerza inica).
10. Si se utiliza albmina la incubacin ser de una hora, si se utiliza Gamma LO-ION la
incubacin ser 15 min.
11. Sacar del bao mara.
12. Centrifugar 90 segundos para albmina, Gamma LO-ION 15 segundos.
13. Lavar 4 veces para albmina, Gamma LO-ION 3 veces.
14. Aadir 2 gotas de Antiglobulina Humana a cada tubo
15. Centrifugar 20 segundos. Dar lectura. Reportar.
16. Aadir 1 gota de Clulas Control de Coombs.
17. Centrifugar. Leer. Reportar.
18. Comprobacin de la prueba cruzada agregar a cada tubo una gota de clulas control
de Coombs y centrifugar 20 segundos.
El resultado debe ser positivo para dar validez a la prueba, de lo contrario la prueba se
debe de repetir.
13.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de las pruebas cruzadas?
2. De la prueba mayor y la prueba menor cual es la ms importante y por qu?
3. Es necesario realizar las dos pruebas? Explique cualquier respuesta
4. Que procede en caso de ser incomatible
45

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 15. Diagrama ecolgico.
D1. Basura comn

13.7 EVALUACION
13.8 BIBLIOGRAFIA
Edicin, Editorial; Mdica Panamericana. Argentina
46
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 14. PRUEBA DIRECTA DE COOMBS
14.1 GENERALIDADES
La prueba directa de Coombs se usa para demostrar la presencia de los anticuerpos que
han fijado en las clulas del paciente in vivo, por ejemplo en la enfermedad hemoltica del
recin nacido, en la anemia hemoltica adquirida, etc.
14.2 OBJETIVO
El alumno demostrar la presencia de los anticuerpos que se han fijado en las clulas del
paciente en vivo.
14.3 MATERIAL RECATIVOS Y EQUIPO

Tubos de ensayo
Solucin salina isotnico
Centrifuga serofuge
Suero de Coombs poli especifico
Bao Mara a 37C
Albmina boina al 22 %
Material biolgico: 5 ml de sangre venosa sin anticoagulante. Suero sanguneo y glbulos

rojos al 5 %
14.4 PROCEDIMIENTO
1. Preparar una suspensin al 5% en solucin salina normal de las clulas probadas.
2. Agregar dos gotas de la suspensin de las clulas preparadas a un tubo de 13 x 75mm
47
3. Lavar con solucin salina y centrifugue a 3500 rpm durante 3 minutos. Efectuar este
lavado tres veces.
4. Despus del ltimo lavado, decantar lo ms posible.
5. Agregar dos gotas de Suero de Coombs.
6. Mezclar bien y centrifugue por 20 segundos a 3400rpm.
7.- Resuspender los eritrocitos de los tubos y examinar el resuelto.
14.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de la prueba de Coombs?
2. Cmo funciona la prueba de Coombs?
3. En qu diagnostico se puede emplear?
4. Si el autotestigo nos da positivo como se reporta la prueba?
14.6 TRATAMIENTO YDISPOSICION DE RESIDUOS

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 15. Diagrama ecolgico: Coombs directo.
D1. Basura comn
48

14.7 EVALUACION
14.8 BIBLIOGRAFIA
3.- Roit, Ivan M. 2003; Inmunologa Fundamentos. 10 Edicin. Editorial Mdica
49
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 15 PRUEBA INDIRECTA DE COOMBS
15.1 GENERALIDADES
La prueba indirecta de Coombs es utilizada para demostrar la presencia de los
anticuerpos circulares que cubren, pero que no aglutinan, a las clulas suspendidas en
salina. Se efecta esta prueba combinando invitro a un anticuerpo con antgeno
especfico. Ejemplo, cuando se hace una prueba Anti-D en un suero materno, las clulas
de la prueba debern contener el antgeno D.
15.2 OBJETIVO
El alumno podr demostrar la presencia de los anticuerpos que cubren, pero no aglutinan,
a las clulas suspendidas en salina.
15.3 MATERIAL EQUIPO Y REACTIVOS

10 Tubos de ensayo
Suero de Coombs poli especfico
10 Pipetas Pasteur
Albmina bovina al 22 %
1 Gradilla
Suero sanguineo y globulos rojos al
5%
1 Centrifuga
Solucin salina
1 Bao Maria a 37 C
50
15.4 PROCEDIMIENTO
1. Presentar el suero en estudio con por lo menos tres sangres Grupo O con Coombs
Directo Negativo, para ello, rotular tres tubos y en cada tubo, colocar 2 gotas del
Suero problema + 1 gota de glbulos rojos de Grupo O al 5%.
2. Agregar 2 gotas de Albmina Srica Bovina 22%.
3. Incubar a una temperatura de 37C por 30 minutos.
4. Lavar las clulas por lo menos tres veces con solucin salina fisiolgica, teniendo
cuidado de decantar la solucin salina entre cada lavado.
5. Aadir 2 gotas de suero de antiglobulina humana y centrifugar.
6. Incubar a 37C por 5 minutos.
7. Centrifugar 20 segundos a 3400 rpm.
8. Resuspender y observar la formacin de aglutinacin.
15.5 CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia de la prueba indirecta de Coombs?
2. En qu consiste la prueba?
3. En qu diagnostico puede ser empleada?
4. Cmo funciona la prueba?
51

jeringa y aguja
D1
D2
Tubo lila
D3
Figura 16. Diagrama ecolgico: Coombs indirecto.

D1. Basura comn
D3. Tratamiento con hipoclorito al 10% y Ecomayab.
15.7 EVALUACION
15.8 BIBLIOGRAFIA
52
BIBLIOGRAFIA GENERAL

4.- ngel-Meja G, ngel-R M. 2000. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 6 Edicin.
Editorial Mdica Panamericana. Mxico
5.- Bennington JL. 1991. Diccionario enciclopdico del laboratorio. 1 Edicin .Editorial
Mdica Panamericana. Madrid Espaa
6.-Gonzlez de Buitrago. 2004. Tcnicas y Mtodos de Laboratorio Clnico. 2 Edicin .
Editorial Masson. Barcelona Espaa
7.- Ruiz Argelles G.J; 2009. Fundamentos de hematologa; 4 edicin. Editorial Mdica
Panamericana. Mxico
53
ANEXOS
54
ANEXO I. INSTRUMENTOS DE EVALUACIN
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL DESEMPEO EN EL LABORATORIO

(INDIVIDUAL).
Fuente: Martha Rosales Raya / Adecuado por comit de academia.
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR LA BITCORA DE LABORATORIO

Fuente: M.E.S. Luis Bolaos Celis / Adecuado por comit de academia.
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL REPORTE DE LABORATORIO

Fuente: M en C. Rafael Manuel de Jess Mex lvarez/ Adecuado por comit de academia
55
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL DESEMPEO EN EL LABORATORIO (INDIVIDUAL)

ALUMNO
:
Grado/grupo:
Puntos:
Aspectos a evaluar
Matricula:
3
Ponderacin
Escala
Acondiciona y prepara
su rea de trabajo
A veces
Con regularidad
Siempre
Prepara en forma
adecuada equipos y
materiales
A veces
Con regularidad
Siempre
Forma de trabajo del

alumno
Individual
Con su equipo
Colaborativamente
Es organizado en su
forma de trabajo
Escasamente
Medianamente
Totalmente
Toma notas elaboradas

y aporta de su
experiencia
Inadecuada
Medianamente
adecuada
Adecuadamente
Demuestra
conocimiento al realizar
las actividades de la
prctica
Insuficiente
Suficiente
Excelente
Emplea de forma
adecuada equipo(s),
reactivos y materiales
Poco cuidadoso
Cuidadoso
Muy cuidadoso y
meticuloso
Realiza los
experimentos
atendiendo a las
medidas de seguridad
Poco cuidadoso
Cuidadoso
Muy cuidadoso y
meticuloso
Inadecuadamente
Medianamente
adecuada
Adecuadamente
Slo con compaeros
Con compaeros e
instructor
Con compaeros,
instructor y
sujeto/objeto de
estudio
En el equipo realiza de
adecuada las tareas que
se le encomiendan
Escasamente
Medianamente
Totalmente
En el desarrollo de la
prctica emplea el
tiempo eficientemente
Escasamente
Por intervalos breves
En todo el desarrollo
de la prctica
Escasamente
Medianamente
Totalmente
Atiende a las
indicaciones de trabajo
del docente y/o
instructores
Su actitud de trabajo es
respetuoso con
compaeros, instructor
y sujeto/objeto de
estudio
Al concluir la prctica
colabora con el equipo
con la limpieza y
entrega de materiales
Observacione
sy
sugerencias
Total de puntos
Fuente: Martha Rosales Raya / Adecuado por comit de academia.
56
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR LA BITCORA DE LABORATORIO
Forma 20%
EQUIPO No.
Puntos
Puntos
Ponderados
Criterio
Indicadores
Presentacin
Es una libreta costurada, enumerada, en

buen estado, aspecto presentable
x 0.2=
Usa ttulos y subttulos para organizar y

guardar un orden en el registro de las
actividades realizadas en el laboratorio.
x 0.2=
Se indica quienes participaron en el

experimento mediante un listado con
firmas.
x 0.2=
Describe en forma breve, clara y precisa el

experimento(s) a realizar
X 0.8=
Explica en forma breve y clara lo que se

pretende probar experimentalmente
X 0.8=
Describe el procedimiento del

experimento(s) con enunciados claros y
completos.
X 0.8=
Presenta una secuencia correcta de los

pasos y estn enumerados
X 0.8=
Se registra los acontecimientos y sucesos

que ocurren como resultado del
experimento(s), mediante datos, esquemas,
dibujos, tablas, fotos o videos segn se
requiera para cada caso.
X 0.8=
Se registran las observaciones en secuencia

correcta de acuerdo al orden de los eventos.
X 0.8=
Se registr los eventos o sucesos

significativos del experimento(s) observado.
X 0.8=
Emplea un lenguaje tcnico y propio de la

disciplina para expresar principios, hechos o
ideas registradas.
X 0.8=
Organizacin
Introduccin
Contenido 80%
Procedimiento*
Registro de
observaciones*
Conceptos
cientficos
*Estos aspectos son crticos no pueden faltar en la bitcora
Total de puntos
Fuente: M.E.S. Luis Bolaos Celis / Adecuado por comit de academia.
57
ESCALA ESTIMATIVA PARA EVALUAR EL REPORTE DE LABORATORIO
Forma 20%
EQUIPO No.
Puntos
Ponderados
Indicadores
Presentacin
Es un texto en un folder de aspecto presentable,

elaborado a computadora, hojas blancas tamao
carta, con una portada de datos generales.
X 0.2=
Fecha de
entrega
Entrega el informe de laboratorio completo en la fecha

establecida
X 0.2=
Organizacin
Usa ndice, ttulos y subttulos para organizar el

informe de laboratorio que presenta.
X 0.2=
Ortografa
Presenta un mximo de dos errores ortogrficos o de

puntuacin
X 0.2=
Referencias
bibliogrficas
El documento contiene la bibliografa citada en el

informe para sustentar el trabajo.
X 0.2=
Describe en forma breve, clara y precisa el

experimento(s) a realizar
X 0.8=
Redacta en forma breve y clara el objetivo de lo que

pretende lograr experimentalmente.
X 0.8=
Se formula hiptesis el experimento en forma clara

basada en el razonamiento del fundamento terico.
X 0.8=
Describe el procedimiento del experimento(s) con

enunciados claros y completos.
X 0.8=
Presenta una secuencia correcta de los pasos y estn

enumerados
X 0.8=
Se reporta en orden y en forma correcta los datos de

los acontecimientos y sucesos que ocurrieron como
resultado del experimento(s),
X 0.8=
Se construye de manera correcta: esquemas, dibujos,

tablas y grficos que muestran de manera objetiva los
resultados obtenidos
X 0.8=
Se reporta los eventos o sucesos significativos del

experimento(s) observado.
X 0.8=
Se discuten los resultados (datos experimentales

obtenidos) con citas bibliogrficas que lo soporten.
X 0.8=
Se concluye contrastando objetivo(s) con resultados y

referencias bibliogrficas.
X 0.8=
Se justifica la aceptacin o rechazo de la hiptesis,

contrastando los datos experimentales obtenidos con
las referencias bibliogrficas (en caso de manejar
hiptesis).
X 0.8=
Emplea un lenguaje tcnico y propio de la disciplina

para expresar principios, hechos o ideas registradas.
X 0.8=
Introduccin
Hiptesis
(En caso de
requerirse)
Procedimiento*
Contenido 80%
Puntos
4
3
Criterio
Registro de
observaciones*
Discusin y
Conclusin*
Conceptos
cientficos
*Estos aspectos son crticos no pueden faltar en el reporte
Total de puntos
Fuente: Rafael Manuel de Jess Mex lvarez / Adecuado por comit de academia.
58
ANEXO II. LINEAMIENTOS GENERALES EN MATERIA DE

SEGURIDAD E HIGIENE A SEGUIR EN LOS LABORATORIOS
Las actividades de carcter docente e investigador que se llevan a cabo en las prcticas de
laboratorios del Programa Educativo de Qumico Farmacutico Bilogo de la Facultad de
Ciencias Qumico Biolgicas (FCQB) de la Universidad Autnoma de Campeche (UAC)
conllevan, en determinados casos, un riesgo dependiendo del tipo de trabajo que se
desarrolle.
Este documento recoge los lineamientos necesarios para llevar a cabo un trabajo seguro y
eficiente atendiendo a las indicaciones del Reglamento Federal de Seguridad e Higiene y
Medio ambiente de Trabajo, publicado en el Diario Oficial de la Federacin, el 21 de enero
de 1997, Normatividad en materia de Seguridad e Higiene de la Secretaria del Trabajo y
Previsin Social, Sistema de Gestin Ambiental Yum Kaax
ISO 14001:2004 de la
Universidad Autnoma de Campeche y Reglamento Interno de los Laboratorios en los

que se realizan prcticas de docencia de la FCQB de la UAC.
Solo se permitir trabajar a los alumnos bajo la responsabilidad de un profesor o

de la persona asignada de manera previa por el Coordinador del Programa
Educativo o de Posgrado e Investigacin.
Realizar nicamente tareas enmarcadas en el mbito de trabajo del laboratorio

para las que ha sido autorizado.
Se deber llevar siempre la bata de manga larga y los equipos de proteccin

individual exigidos segn el tipo de trabajo que se realice (goggles, mascarilla
protectora, guantes de latex, calzado cerrado que cubra el empeine, de tacn
ancho o corrido con altura mxima de 4 cm, de piel, que no sea de tela ni de
material plstico, incluida la suela) segn lo solicite el profesor.
59
No se permite ingresar con bermudas o short y, en el caso de las mujeres, el largo

de la falda debe ser debajo de la rodilla.
Hombres y mujeres con cabello largo debern portar el pelo recogido hacia atrs.
No llevar pulseras, colgantes, mangas anchas ni prendas sueltas que puedan

trabarse en montajes, equipos o mquinas.
No fumar, comer ni beber.
No realizar reuniones o celebraciones.
No guardar alimentos ni bebidas en los frigorficos del laboratorio.
Mantener el orden en las sesiones de laboratorio y tratar con respeto al

laboratorista, compaeros y profesores.
Verificar que el material y los equipos de laboratorio a emplear se encuentren en

ptimas condiciones de funcionamiento.
Antes de hacer uso de cualquier material y/o equipo consulte su operatividad con
el laboratorista.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin objetos personales en las superficies
(libros, cajas o accesorios innecesarios) para el trabajo que se est realizando.
Tener la autorizacin para el uso de un producto, equipo o instalacin concreta.
Lavar y enjuagar todo el material de vidrio con agua destilada y secarlo.
Leer la etiqueta o consultar las fichas de seguridad de productos qumicos antes

de utilizarlos por primera vez.
Para efectuar pipeteos utilice siempre propipeta o perilla
No tocar ni probar, sin el uso de guantes a los productos qumicos.
Calentar tubos de ensayo de lado y utilizando pinzas.
Por su seguridad utilizar gradillas y soportes.
Comprobar la temperatura de los materiales antes de sujetarlos directamente con

las manos.
En caso de ser necesario utilizar las campanas de extraccin.
Etiquetar adecuadamente los frascos y recipientes a los que se haya transvasado

algn producto o donde se hayan preparado mezclas, identificando su contenido,
60
a quin pertenece y la informacin sobre su peligrosidad (reproducir el etiquetado

original).
Reportar cualquier accidente o anomala ocurrida durante la prctica, de manera

inmediata al laboratorista.
Salvaguardar todos los implementos y dispositivos de seguridad e higiene

(extintor, sealamientos, regadera y lavaojos de emergencia, etc.) habilitados en
el interior del laboratorio.
Revisar la Normativa correspondiente de acuerdo a la NOM-062-ZOO-1999,

Cuidado y uso de animales de laboratorios y la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002,
Proteccin ambiental-Salud ambiental-Residuos peligrosos biolgico-infecciososClasificacin y especificaciones de manejo para el caso de emplear animales de
laboratorio y muestras biolgico-infecciosas respectivamente.
El material y equipo que se rompa o sufra desperfectos en el transcurso de la

prctica, se deber reportar al laboratorista de inmediato.
Asegurar la desconexin de equipos, agua y gas al terminar el trabajo.
Recoger materiales, reactivos, equipos, y depositar los residuos en los

contenedores correspondientes.
Lavarse las manos antes de dejar el laboratorio.
MARCO JURDICO
Reglamento Federal de Seguridad e Higiene y Medio ambiente de Trabajo. Publicado en

el Diario Oficial de la Federacin (D.O.F.), el 21 de enero de 1997.
NOM-002-STPS-2010, Condiciones de seguridad - Prevencin y proteccin contra
incendios en los centros de trabajo. D.O.F. 9-XII-2010.
NOM-005-STPS-1998, Relativa a las condiciones de seguridad e higiene en los centros de
trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de sustancias qumicas peligrosas.
D.O.F. 2-II-1999
61
NOM-010-STPS-1999, Condiciones de seguridad e higiene en los centros de trabajo

donde se manejen, transporten, procesen o almacenen sustancias qumicas capaces de
generar contaminacin en el medio ambiente laboral. D.O.F. 13-III-2000.
NOM-017-STPS-2008, Equipo de proteccin personal - Seleccin, uso y manejo en los
centros de trabajo. D.O.F. 9-XII-2008.
NOM-018-STPS-2000, Sistema para la identificacin y comunicacin de peligros y riesgos
por sustancias qumicas peligrosas en los centros de trabajo. D.O.F. 27-X-2000.
NOM-026-STPS-2008, Colores y seales de seguridad e higiene, e identificacin de
riesgos por fluidos conducidos en tuberas. D.O.F. 25-XI-2008.
NOM-028-STPS-2004, Organizacin del Trabajo-Seguridad en los Procesos de sustancias
qumicas. D.O.F. 14-I-2005.
NOM-062-ZOO-1999. Cuidado y uso de animales de laboratorio. D.O.F. 18-VI-2001.
NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, Proteccin ambiental-Salud ambiental-Residuos
peligrosos biolgico-infecciosos-Clasificacin y especificaciones de manejo. D.O.F. 17-II2003.
NOM-052-SEMARNAT-2005, que establece las caractersticas, el procedimiento de
identificacin, clasificacin y los listados de los residuos peligrosos. D.O.F. 23-VI-2006.
Sistema de Gestin Ambiental Yum Kaax de la Universidad Autnoma de Campeche.
Octubre 2010.
Reglamento Interno de los Laboratorios en los que se realizan prcticas de docencia de la
Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas de la Universidad Autnoma de Campeche.
Agosto de 2012.
62

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Programa Educativo:

Qumico Farmacutico Bilogo

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE

CAMPECHE, CAMP. MARZO 2014

Lic. Gerardo Montero Prez

Q.F.B. Geovani Araceli Salinas Balderrabano

M. en C. Patricia Margarita Garma Quen

El Banco de Sangre ha alcanzado una relevante posicin en la medicina moderna,

Una fase lquida que se conoce con el nombre de plasma

Componentes celulares, que son: glbulos rojos, leucocitos y plaquetas.

Hematocrito. Es el porcentaje de hemates o GR por unidad de volumen de

UNIDAD DE APRENDIZAJE DE BANCO DE SANGRE

Elaborar un diagnstico clnico con base a los diferentes

grupos sanguneos que se emplean en las pruebas

1. Aplicar la NOM 253 SSA 2012 y las caractersticas

2. Describir las caractersticas de la prueba de

investigacin e identificacin de anticuerpos.

Nombre del paciente

Solicitud de laboratorio enviada por el mdico

1.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Isodine espuma (lodopovidona)

3 Tubos de tapon lila

10 Tubos de ensaye de 13 mm x 100 mm

Figura 1. Localizacin de las venas

1.6 TRATAMIENTOYDISPOSICION DE RESIDUOS

Sangre con tubo lila

Figura 2. Diagrama ecolgico: Toma de muestra sangunea.

D1. Basura comn

2.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Eritrocitos lavados de los grupos A1, A2, B y O

Antisueros comerciales: Anti A, Anti B, Anti AB

Anti D, Anti IgG, C3d

1 Frasco de cada Uno Anti A, Anti B, Anti AB, Anti

Eritrocitos del grupo: A1, A2, B y O

9 gotas de solucin salina

3 gotas de solucin salina

Cuadro 1. Preparacin de suspensiones de las clulas conocidas.

Tiempo promedio de reaccin

A1, A2 y B, A1B, A2B.

Cuadro3.- Especificidad para los diferentes sueros y clulas.

4+ Botn slido, fondo claro

3+ Grumo grande y varios pequeos o. varios grumos grandes, fondo claro

2+ grumos de tamao mediano, fondo claro.

1+ Grumos pequeos y eritrocitos libres. Fondo turbio

(+) Grumos muy pequeos y eritrocitos libres, fondo turbio

Negativo: sin grumos, fondo totalmente turbio

Valoracin de los diferentes grados de aglutinacin

2.6 TRATAMIENTOYDISPOSICION DE RESIDUOS

Sangre con tubo lila

Figura 2.Diagrama ecolgico: Toma de muestra sangunea.

D1. Basura comn

Ver anexo I: Instrumentos de evaluacin.

Rodak Bernndett F; 2004. Hematologa Fundamentos y Aplicaciones Clnicas; 2

Edicin, Editorial; Mdica Panamericana. Argentna

3.3 MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Sangre con o sin anticoagulante (5 ml)

Suspensin al 5% de: Eritrocitos A1, Eritrocitos A2,

10 Pipetas Pasteur y bulbos

1 Centrfuga serolgica de mesa

Suero hemotipificador Anti A

Tcnica Inversa en Tubo

3.6 TRATAMIENTO Y DISPOSICION DE RESIDUOS

Sangre con tubo lila