ICIDCA.

Sobre los Derivados de la Caa de

Azcar
ISSN: 0138-6204
revista@icidca.edu.cu
Instituto Cubano de Investigaciones de los
Derivados de la Caa de Azcar
Cuba
Bello, Daniel; Garca, Roxana; Otero, Miguel A.; Saura, Gustavo
Fermentacin alcohlica con jugo de caa mezclado en Heriberto Duquesne
ICIDCA. Sobre los Derivados de la Caa de Azcar, vol. XXXIX, nm. 2, mayo-agosto, 2005, pp. 2934
Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caa de Azcar
Ciudad de La Habana, Cuba

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Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina, el Caribe, Espaa y Portugal
Proyecto acadmico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto

Daniel Bello; Roxana Garca; Miguel A. Otero, Gustavo Saura

Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caa de Azcar (ICIDCA)
e.mail: miguel.otero@icidca.edu.cu

RESUMEN
Se evaluaron dos cepas industriales de Saccharomyces cerevisiae en la produccin de
etanol a partir de jugos en la Empresa Mielera Heriberto Duquesne de la provincia de
Villa Clara. La cepa Turbo, de procedencia sueca y desarrollada con propsitos especficos de produccin de etanol, alcanz una concentracin de etanol en el medio fermentado 36 % superior a la Collico de propsitos panaderos, en presencia de 0.1 g/L de fosfato y sulfato diamnico. En ausencia de las sales, estas concentraciones se redujeron en
71 y 52 %, respectivamente.
Palabras clave: Saccahromyces cerevisiae, etanol, fermentacin alcohlica, levadura
panadera
ABSTRACT
Two industrial strains of Saccharomyces cerevisiae were evaluated in ethanol production
from sugar cane juices in the Molasses enterprise Heriberto Duquesne in Villa Clara province. Turbo yeast strain from Sweden and specially developed for ethanol production,
reached an ethano concentration in fermented broth a 36 % higher than that obtained by
Collico strain for bakery in presence of 0.1 g/L of diamonic phosphate and sulphate. In
salt absence the yield were reduced in 71 and 52 % respectively.
Key words: Saccahromyces cerevisiae, ethanol, etanol fermentation, baker`s yeast

ICIDCA No. 2, 2005

29

INTRODUCCIN
La industria cubana de alcohol ha sido
totalmente dependiente de las fbricas de
azcar para obtener su materia prima fundamental: las mieles finales de caa. ste es
un aspecto de importancia con relacin a la
produccin de alcohol. Hasta el presente no
ha habido un impulso empresarial al
empleo de sustratos diferentes de las mieles. Sin embargo, con el presente escenario
de la produccin azucarera y de etanol en
Cuba, la necesidad de acudir a otros sustratos ha devenido imprescindible para cumplimentar la demanda creciente del combustible y anticipar la ya real escasez de
mieles finales como materia prima (2).
Dejando a un lado la produccin de etanol a
partir del etileno, existen en la actualidad
tres grupos de materias primas:
Remolacha, caa de azcar, sorgo dulce y
frutas (7, 11)
Materiales amilceos tales como maz,
millo, trigo, arroz, patatas, yuca, boniato,
etc. (3, 4, 5, 6), y
Materiales celulsicos como: madera,
papel reciclado, residuos de cosecha, etc
(1, 4, 9, 10).
No obstante, la produccin de etanol de
lignocelulsicos an no existe a escala
comercial.
En vista de lo anterior, el empleo de cantidades equivalentes de jugo de caa, especialmente jugos secundarios, directamente
para la fermentacin y produccin de etanol, parece ser la ms econmica y revalorizadora de las alternativas para las fbricas
de azcar (8). El jugo secundario posee
menos azcar y arrastra impurezas. Esto
requiere cantidades sustanciales de vapor
para la evaporacin e induce mayores cargas durante la refinacin. Si se deriva este
jugo secundario a la produccin de etanol,
esto ayudara la operacin del ingenio en:
Reducir la carga de evaporacin de este
jugo diluido, reduciendo al mismo tiempo
el consumo de vapor
Produccin de azcar de mayor calidad al
utilizar los jugos secundarios para la produccin de etanol y,
Generacin de valores adicionales en trminos de produccin y venta de etanol
Por medio de esto, cada ingenio azucarero ser capaz de cumplimentar sus demandas de produccin de azcar a partir de los
30

jugos primarios y producir alcohol simultneamente a partir de los jugos secundarios

durante la campaa de molida.
El objetivo del presente trabajo es investigar a escala industrial, la posibilidad de
fermentar jugos secundarios en la Empresa
Mielera Heriberto Duquesne, con la finalidad de su posterior introduccin comercial.
MATERIALES Y MTODOS
Microorganismo
Fueron evaluadas dos cepas de levadura Saccharomyces cerevisiae seca activas
comerciales, a saber: Turbo yeast, productora de etanol y Collico, de panificacin,
de procedencia chilena. La primera suministrada por Quimizuk SA, en tanto la
segunda fue adquirida en el mercado
nacional.
Propagacin
Ambas cepas fueron propagadas en un
fermentador de 2 L Biotec a temperatura
entre 30 y 32 C. El pH fue controlado entre
3.5 y 3.8 por medio de la combinacin de
sales nutrientes (1.68 g/L de fosfato diamnico, 0.76 g/L de urea y 1.59 g/L de sulfato diamnico). El flujo aire fue mantenido a 1 vvm
y la agitacin en 450 rpm. Se efectu, igualmente, una propagacin a escala de 30 L utilizada para la siembra del primer pre-fermentador de la destilera. En las propagaciones a escala de 2 L se determin cada
hora la materia seca gravimtrica y el conteo celular cada 2 horas para estudiar la
cintica de crecimiento. En todos los casos,
la propagacin se efectu con concentracin de azcares reductores totales (ART)
de 30 g/L.
Fermentacin alcohlica
La levadura propagada aerbicamente
fue utilizada para inocular frascos de 1 L
con 300 mL de medio de fermentacin compuesto por diferentes variantes de sustrato:
Jugo de los filtros (JF), jugos diluidos (JD) y
miel final en relacin de 75 % de los azcares aportados por los jugos (60 % JD y 40 %
JF) y 25 % por la miel final. Adicin de
sales nutrientes (fosfato y sulfato de amonio
en concentraciones de 0.1 g/L).
Condiciones idnticas a las anteriores
pero sin adicin de sales
ICIDCA No.2, 2005

Las muestras fueron dejadas estticas a

temperatura ambiente (30 C) por 20 horas.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Los ajustes de los medios de fermentacin empleados en todos los experimentos
se llevaron a cabo a partir de los datos de
composicin de los jugos y la miel final del
da. Las tablas 1 y 2 muestran el resumen de
los anlisis disponibles de ambos sustratos.
La fermentacin de jugos de caa es un
proceso establecido en las destileras de
Brasil desde hace aos como parte de su
programa nacional de alcohol. Sin embargo,
en nuestro pas solamente se han realizado
pruebas a escala de laboratorio y en condiciones lejanas a las de una destilera tpica.
La figura 1 muestra el esquema previsto
para la realizacin de la prueba industrial
de fermentacin de jugos en la destilera de
la
Empresa
Azucarera
Heriberto
Duquesne, sita en el municipio de
Remedios en la provincia de Villa Clara. El
jugo de la desmenuzadora (primer molino)
se destina ntegramente a la produccin de
azcar, en tanto los jugos de los molinos 2,
3 y 4, mezclados con los jugos de los filtros
de cachaza se emplearn en la fermentacin

Figura 1. Esquemas de produccin de jugos para

la fermentacin alcohlica en la destilera de la
EA Heriberto Duquesne

alcohlica. Es de destacar, que en todos los

casos, la levadura en los pre-fermentadores
fue propagada con miel final exclusivamente.
Antes de enfrentar la fermentacin alcohlica es preciso estudiar las potencialidades de propagacin de las cepas candidatas
a su introduccin en la fbrica. La etapa de
propagacin reviste vital importancia pues
de ella depende el estado fisiolgico del
microorganismo y las posibilidades de una

Tabla 1. Composicin de las mieles finales tributadas a la destilera de la EA

Heriberto Duquesne entre los das 23 y 28 de febrero del 2005
Densidad
Brix
pH
Lodos
RLibres
RTotales
Sacarosa
AzTot
AzFerm
RInferm

23-02
1.410
80.00
6.1
4.80
15.10
61.69
44.26
59.36
58.79
2.9

24-02
1.415
80.60
5.9
6.74
13.16
61.76
46.18
59.33
58.68
3.1

25-02
1.412
80.14
5.7
10.34
17.21
61.77
42.32
59,54
58.68
3.1

26-02
1.413
80.28
5.8
7.90
17.17
61.21
41.84
59.01
58.13
3.1

27-02
1.456
86.66
5.7
7.44
17.12
61.36
42.03
59.14
58.28
3.1

28-02
1.450
86.0
5.7
7.00
15.02
56.15
39.08
54.09
53.61
2.5

MEDIA
1.426 0.017
82.33 2.58
5.82 0.13
7.37 1.44
15.80 1.32
60.66 1.78
42.62 1.92
58.41 1.70
57.70 1.62
2.96 0.17

Tabla 2. Composicin de jugos de la EA Heriberto Duquesne durante la zafra 2003-2004

JUGO
BRIX
Desmenuzadora
19.66
Jugo Mezclado molinos 2,3,4
14.85
Jugo Mezclado filtros
14.72
Filtros
13.63
*determinados para el presente informe
ICIDCA No. 2, 2005

POL
16.99
12.71
12.56
11.53

PUREZA
86.36
85.73
85.34
80.95

LODOS, %*
ND
9.80
8.72
18.30
31

Figura 2. Curvas de crecimiento y multiplicacin de Saccharomyces cerevisiae Turbo en miel

final de caa. Composicin del medio: ART =
30 g/L, temperatura = 30-32 C, pH = 3.5-4.0,
aire = 1 VVM/450 rpm

Figura 3. Curvas de crecimiento y multiplicacin de Saccharomyces cerevisiae Collico en

miel final de caa. Composicin del medio: ART
= 30 g/L, temperatura = 30-32 C, pH = 3.5-4.0,
aire = 1 VVM/450 rpm

fermentacin eficiente, en un proceso no

asptico.
La tasa mxima de crecimiento (max)
de una poblacin microbiana en un medio
de composicin dada, caracteriza a esa
poblacin desde el punto de vista cintico.
Las dos cepas en estudio fueron propagadas
aerbicamente sobre un medio compuesto
exclusivamente por miel final de caa y
sales nutrientes. La figura 2 muestra el comportamiento de la cepa alcoholera turbo de
la especie Saccharomyces cerevisiae. Bajo
las condiciones establecidas, es de esperar
la formacin de etanol por desviacin del
metabolismo producto del efecto Pasteur
tpico de este gnero. Un patrn similar se
obtuvo con la levadura panadera seca activa
Collico, como puede observarse en la figura
3. Se observa de la comparacin de ambas
figuras, una pendiente mayor en el caso de
Turbo lo que sugiere una mayor tasa de crecimiento en esta cepa. La determinacin
grfica de la max en ambos casos, evidenci diferencias significativas entre ambas
cepas, obtenindose 0.28 h-1 y 0.14 h-1 para
Turbo y Collico, respectivamente. Los valores de rendimiento biomasa-sustrato (Yx/s)
no mostraron, sin embargo, diferencias
entre ambas, obtenindose valores en el
entorno de 0.21 en los dos casos. Los valores obtenidos de max no corresponden a la
realidad de las cepas en cuestin, por ser
utilizado parte del sustrato en el crecimiento anaerbico, mucho menos eficiente que
la respiracin. Es preciso estudiar la propagacin en concentraciones de azcar ms
bajas para evitar el desvo del metabolismo.

Se ensay la influencia del nutriente

QZ-350 sobre esta etapa, con el objetivo de
potenciar el estado fisiolgico del inculo.
La figura 4 muestra el comportamiento de la
levadura Turbo en presencia de ste. El
incremento de la concentracin celular es
de slo 6 %, sin embargo, la max aumenta
hasta 0.31 h-1, 11 % superior al de la cepa
sin nutriente. Cuando se increment la concentracin de nutriente hasta 0.05 g/L, la
concentracin super 6.5 g/L y el conteo
celular se elev hasta 2.47 x 108.

32

Figura 4. Curvas de crecimiento y multiplicacin de Saccharomyces cerevisiae Turbo en miel

final de caa suplementada con 0.03 Kg/m3 de
QZ-350. Composicin del medio: ART = 30 g/L,
temperatura = 30-32 C, pH = 3.5-4.0, aire = 1
VVM/450 rpm

Fermentacin de jugos
A partir de los experimentos de propagacin de las dos cepas en estudio, se preparaICIDCA No. 2, 2005

ron frascos de 1 L con 300 mL de medio conformado por 45 % de jugo mezclado, 30 %

de jugo de filtros y 25 % de miel final de
caa. Los medios fueron suplementados con
sulfato y fosfato de amonio en concentraciones de 0.01 g/L con el objetivo de estudiar la
influencia de la adicin de sales en la etapa
de fermentacin. La tabla 3 muestra los
resultados obtenidos.
Tabla 3. Fermentacin de mezclas de jugo y
miel con las cepas Turbo y Collico en
presencia de sales nutrientes.
Condiciones
Turbo yeast
Con sales
Sin sales
Collico
Con sales
Sin sales

ART ART
Etanol
inic, fin,
%
g/L g/L

Yp/s, %

6.84

131

18

60.49 2.87

4.00

131

50

49.38 2.43

5.02

131

13

42.54 0.33

3.29

131

35

34.27 0.21

La comparacin entre ambas cepas mostr diferencias significativas a favor de

turbo yeast para 0.05, tanto en la versin
con sales como sin ellas. Es importante destacar que esta levadura es especfica para la
fermentacin alcohlica no as la Collico
que es una levadura de panificacin. Con
relacin a la adicin de sales como tal, se
manifestaron tambin diferencias significativas a favor de su uso, cualquiera sea la
levadura utilizada. En la actualidad la destilera de la Empresa Azucarera H.
Duquesne, adiciona sales en la etapa de
fermentacin. Otro aspecto a favor del uso,
es el mayor agotamiento del sustrato, lo que
tiene importancia no slo econmica al
inducir un mayor agotamiento del sustrato,
sino tambin ecolgica por disponer vinazas de menor grado de contaminacin.
Una vez demostrado el efecto positivo de
la adicin de sales y la superioridad de la
cepa Turbo con relacin a la Collico, se procedi a su propagacin a escala de fbrica, en
la bsqueda de su adaptacin a la escala
industrial en las condiciones de produccin
establecidas en la destilera. A estos efectos,
se prepar un tanque con 30 L de medio al
que se le provey de aireacin y se inocul
con el contenido total del fermentador de 2 L
para una relacin de inoculacin de 1:15.
ICIDCA No. 2, 2005

Para asegurar un estado fisiolgico ptimo del microorganismo, se adicion al

medio 0.05 g/L de estimulador de crecimiento QZ-350, ligeramente superior al
utilizado en los experimentos previos,
adems de las correspondientes sales de
forma que la fuente de carbono fuese el
sustrato limitante. La propagacin fue llevada a cabo por 9 horas, alcanzndose
una concentracin celular de 247 millones/mL correspondientes a una materia
seca de 6.5 g/L.
El contenido ntegro del tanque fue utilizado en la siembra del pre-fermentador 1 de
la fbrica sobre un lecho de 600 L de medio
de miel final a 7 bx y las sales nutrientes
necesarias para la propagacin. La tabla 4
muestra el comportamiento del pre-fermentador de 12 m3.
Tabla 4. Comportamiento del prefermentador
1 de la EA H. Duquesne inoculado con la
levadura Turbo sobre miel final de caa.
HORA
BRIX
TEMPERATURA, C
11:20
13.11
28
13:20
13.11
28
15:20
13.11
28
17:20
13.11
28
19:20
13.16
28
21:20
12.56
29
23:20
11.76
29
01:20
9.71
29
03:20
7.63*
31
05:20
13.03
34
07:20
11.00
32
09:20
9.96
33
*elevacin del volumen de propagacin a 12 m3

A partir del completamiento del prefermentador 1, se extrajeron 2/5 partes del

mismo para inocular el pre-fermentador 2
y se adicion medio fresco hasta completar
la propagacin. El pre-fermentador 2 por
su parte, sigui el mismo esquema con
relacin al pre-fermentador 3. Una vez terminada la propagacin en el 1, se inocul
el fermentador industrial de 100 m3 No. 6
para comenzar la fermentacin alcohlica
a escala industrial. En el marco de 24
horas, la sala de fermentacin estaba ocupada completamente por la nueva cepa
Turbo yeast.
33

Tabla 5 Composicin de etanol destilado a partir de la fermentacin mezcla de sustratos y por

la levadura Turbo yeast
ANLISIS
FERMENTACIN 1* FERMENTACIN 2** FERMENTACIN 3***
Grado
8.6
14.3
ND
Acetaldehdo, g/100 l
26.95
23.44
0.74
Acetato de etilo, g/100 l
20.61
27.77
3.98
Propanol, g/100 l
11.02
19.13
1.97***
Isobutanol, g/100 l
28.33
23.52
2.12***
Isoamlico, g/100 l
103.17
59.57
8.48***
*fermentacin a escala de laboratorio; ** fermentacin industrial; *** expresado en g/l

Composicin del alcohol destilado a escala

de laboratorio e industrial
El etanol producido a escala de laboratorio a partir de la mezcla de sustratos en presencia de sales, fue destilado y analizado en
su composicin. La tabla 5 ofrece los resultados obtenidos.
CONCLUSIONES
La utilizacin de jugos secundarios de la
fbrica de azcar en mezclas con pequeas
cantidades de miel de caa permite el incremento de la concentracin de etanol en la
baticin fermentada.
El empleo de cepas de levadura productoras especficas de etanol, influye positivamente en la concentracin alcohlica del
medio.
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