RIDASCREEN Rotavirus

Art. n.: C0901

R-Biopharm AG, An der neuen Bergstrae 17, D-64297 Darmstadt, Germany

Tel.: +49 (0) 61 51 81 02-0 / Fax: +49 (0) 61 51 81 02-20

1. rea de aplicacin
Para el diagnstico in vitro. El test RIDASCREEN Rotavirus es un enzimoinmunoensayo
para la identificacin cualitativa de Rotavirus en muestras de heces.
2. Resumen y explicacin del test
Los Rotavirus son los agentes patgenos ms importantes de la gastroenteritis no
bacteriana en nios con edades entre los 6 meses y los 3 aos. Sin embargo tambin son
detectados en nios mayores y en adultos como causa de la enfermedad. En grupos de
riesgo, o sea en nios y en pacientes viejos o inmunosuprimidos, este virus puede provocar
la muerte.
Las infecciones por Rotavirus aparecen de forma masiva en los meses de invierno. Se han
descrito tambin endemias y epidemias con algunos miles de enfermos. En nios
hospitalizados con enteritis aguda se ha encontrado hasta un 50 % de muestras positivas de
Rotavirus. Los Rotavirus transmitidos por va fecal-oral se segregan en grandes cantidades
en el intestino, en tal medida que las infecciones nosocomiales por Rotavirus son
particularmente temidas en las estaciones de lactantes y clnicas infantiles, con la agravante
adems, de que su control presenta dificultades. Una identificacin temprana y confiable de
la presencia de los Rotavirus es por consiguiente muy importante para evitar ms
infecciones.
La identificacin de Rotavirus se realizaba anteriormente por medio de la microscopa
electrnica de muestras de heces y material de biopsias intestinales hoy en da este
mtodo ha quedado slo como referencia. Los exmenes in-vitro desarrollados para cultivos
celulares son difciles y laboriosos; razn por la cual no son utilizados en los anlisis de
rutina para la deteccin de Rotavirus. Las determinaciones serolgicas pueden contribuir
nicamente a afianzar el diagnstico de una enteritis por Rotavirus, ya que los anticuerpos
IgM solo son detectables a partir de los 5 das despus del inicio de la enfermedad. El
establecimiento de un diagnstico temprano no es por consiguiente posible de esa manera.
El test RIDASCREEN Rotavirus es un mtodo de enzimoinmunoensayo sencillo y de alta
sensibilidad que posibilita una deteccin temprana y fiable de los antgenos de Rotavirus.
Tambin es factible la elaboracin de cantidades grandes de muestra en corto tiempo.
3. Fundamento del test
En el test RIDASCREEN Rotavirus se emplean anticuerpos monoclonales en un
procedimiento sndwich. La superficie de la cavidad de la microplaca de titulacin est
recubierta con un anticuerpo monoclonal contra el producto del sexto gen viral (VP6). Se
trata en este caso de un antgeno especfico para un grupo de virus, el cual est presente en
todos los Rotavirus patgenos al hombre. Se pipetea a temperatura ambiente (20 25 C)
en el pocillo de la microplaca una suspensin de la muestra de heces a analizar, as como
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de los controles junto con anticuerpos monoclonales anti-Rotavirus biotinilados (conjugado

1) para iniciar la incubacin. Despus de un paso de lavado se adiciona un conjugado de
poliestreptavidina con peroxidasa (conjugado 2) y se incuba nuevamente a temperatura
ambiente (20 25 C). Si hay Rotavirus presentes en la muestra de heces se forma un
complejo sndwich entre los anticuerpos inmovilizados, los antgenos del Rotavirus y los
anticuerpos conjugados del complejo biotina-estreptavidina-peroxidasa. La fraccin no
enlazada del conjugado de estreptavidina-peroxidasa se elimina en un paso posterior de
lavado. Despus de aadir el sustrato, si la muestra es positiva, la enzima enlazada
transforma el color de la solucin en las cavidades de la microplaca de incolora hacia el azul.
Mediante la adicin de reactivo de parada se lleva a cabo un cambio de color del azul al
amarillo. La absorbancia es proporcional a la concentracin de Rotavirus en la muestra.
4. Contenido del envase
Los reactivos de un envase alcanzan para 96 determinaciones.
Plate

96 det.

Microplaca de titulacin, 12 tiras de microtitulacin (separables)

en marco de soporte; recubiertas con anticuerpos monoclonales
contra Rotavirus

Diluent1

100 ml

Buffer de dilucin de muestras, solucin de NaCl tamponada

con buffer de protena; listo para el uso; teido de azul

Wash

100 ml

Buffer de lavado, solucin de NaCl tamponada con buffer de

fosfato (conc.10 veces); contiene Timerosal al 0,1%

Control+

1,8 ml

Rotavirus inactivados, listos para el uso

Conjugate1

10 ml

Anticuerpos conjugados con biotina contra Rotavirus en solucin

estabilizada de protena; lista para el uso; teida de rojo

Conjugate2

10 ml

Conjugado de poliestreptavidina-peroxidasa en solucin

estabilizada de protena; listo para el uso, teido de anaranjado

Substrate

10 ml

Perxido de hidrgeno / TMB; listo para el uso

Stop

6 ml

Reactivo de parada; cido sulfrico 1 N; listo para el uso

5. Reactivos y su almacenamiento
Todos los reactivos se deben guardar entre 2 8 C y pueden usarse hasta la fecha de
vencimiento impresa en las etiquetas. El buffer de lavado diluido se puede usar hasta 4
semanas si se conserva entre 2 8 C. La contaminacin microbiana se debe evitar.
Despus de la fecha de vencimiento no se asumen garantas de calidad.
La bolsa de aluminio se debe cortar con una tijera de manera que el cierre no sea eliminado.
Las tiras de microtitulacin no usadas se deben guardar inmediatamente en la bolsa de
aluminio cerrada y conservar entre 2 8 C.
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Se debe evitar la incidencia directa de la luz sobre el sustrato incoloro para prevenir la
descomposicin o su coloracin de azul debido a la autooxidacin. Si ocurre una coloracin
azul no se deber utilizar el sustrato.
6. Reactivos adicionales necesarios accesorios requeridos
6.1. Reactivos
Agua destilada o desionizada
6.2. Accesorios
Tubos de ensayo
Pipetas desechables (Art. n.: Z 0001)
Agitador Vortex (opcional, vase 9.3.)
Micropipetas de 50 100 l y de 1 ml de volumen
Probeta (1000 ml)
Cronmetro
Instrumento de lavado para las microplacas de titulacin o pipetas multicanal (300 l)
Fotmetro lector de microplacas de titulacin (450 nm, eventualmente filtro de referencia
600 nm)
Papel de filtro (paos de laboratorio)
Recipiente de desechos con una solucin de hipoclorito al 0,5 %
7. Medidas de seguridad
Slo para el diagnstico in vitro.
Este test debe ser realizado solamente por personal cualificado de laboratorio. Se deben
observar las directrices de trabajo para laboratorios mdicos. Las instrucciones para el uso
del test deben cumplirse estrictamente.
El control positivo que se encuentra en el kit contiene Rotavirus inactivados de mono. No
obstante debe ser manejado, al igual que las muestras de los pacientes, como
potencialmente infeccioso de acuerdo a las reglamentaciones nacionales de seguridad.
No se deben pipetear las muestras o reactivos con la boca, as como tambin evitar el
contacto con la piel lesionada o las mucosas. Durante el trabajo con las muestras deben
usarse guantes desechables y lavar las manos despus del test. En los locales donde se
trabaje con las muestras o reactivos de ensayo no est permitido fumar, comer o beber.
El buffer de dilucin de muestras y el conjugado contienen Kathon como agente
conservante. Se debe evitar, por tanto, el contacto con la piel o mucosas.

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El buffer de lavado contiene Timerosal al 0,1% como agente conservante. Se debe evitar por
tanto el contacto con la piel o mucosas.
El perxido de urea puede provocar efectos custicos sobre la piel. Manjese con cuidado!
El reactivo de parada contiene una solucin 1 N de cido sulfrico Evtese el contacto con la
piel o ropas! Si se produce contacto con la piel, debe enjuagarse con agua.
Todos los materiales y reactivos que entren en contacto con muestras potencialmente
infecciosas se requiere que sean tratados con agentes desinfectantes adecuados o se
sometan a autoclave por lo menos una hora a 121 C. ATENCIN: Para evitar la formacin
de gases venenosos deben neutralizarse los residuos lquidos que contengan reactivo de
parada antes de echarlos en la solucin de hipoclorito.
8. Recoleccin y conservacin de las muestras
El material de examen se debe guardar entre 2 8 C hasta el momento de su elaboracin.
Si el material no puede ser usado en el espacio de 3 das, se recomienda almacenarlo a -20
C o temperatura inferior. Evite congelar y descongelar las muestras varias veces.
Las muestras de heces o frotis rectales no se deben recolectar en recipientes que contengan
medios de transporte, agentes conservantes, sueros animales, iones metlicos, agentes
oxidantes o detergentes debido a posibles interferencias con el test RIDASCREEN
Rotavirus.
Si se van a utilizar frotis rectales se debe prestar atencin a que haya suficiente material de
heces (aprox. 100 mg) para la realizacin del test.
En los estudios de contactos se deben incluir tambin muestras de heces de personas sin
signos clnicos aparentes para identificar tambin a los portadores asintomticos.
9. Realizacin del test
9.1. Generalidades
Antes de su uso se deben llevar todos los reactivos y la microplaca de titulacin Plate a la
temperatura ambiente (20 25 C).
Las tiras de microtitulacin no se deben sacar de la bolsa de aluminio hasta que no hayan
alcanzado la temperatura del ambiente. Los reactivos se deben mezclar bien
inmediatamente antes de su empleo.
Posterior a su uso se deben conservar las tiras de microtitulacin (cerradas en su bolsa) y
los reactivos otra vez a temperaturas entre 2 8 C. Las tiras de microtitulacin que se
hayan usado una vez no pueden volverse a utilizar. Los reactivos y las tiras de
microtitulacin no se deben usar cuando el envase est daado o los recipientes hayan
perdido su hermeticidad.

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Se debe evitar el contacto directo de las muestras con los componentes del kit para prevenir
la contaminacin cruzada.
Se debe evitar la incidencia directa de la luz solar durante la realizacin del test. Se
recomienda tapar la microplaca o cubrirla con cinta adhesiva para evitar prdidas por
evaporacin.
9.2. Preparacin del buffer de lavado
Se mezcla 1 parte del buffer de lavado concentrado Wash con 9 partes de agua destilada.
Los cristales que pudieran encontrarse en el buffer concentrado se deben solubilizar
previamente con calor (bao Mara a 37 C).
9.3. Preparacin de las muestras
En un tubo de ensayo rotulado se vierte 1 ml del buffer de dilucin de muestras
RIDASCREEN .
Las heces lquidas se aspiran (aprox. 100 l) con una pipeta desechable (Art. n. Z 0001)
hasta ligeramente por encima del segundo espesamiento y se suspenden en el buffer
preparado. En el caso de heces slidas se toma una cantidad equivalente (alrededor de 50
100 mg) con una esptula o con un asa de siembra desechable y se suspende igualmente.
La homogeneizacin de la suspensin de heces se efecta mediante aspiracin y expulsin
con la pipeta desechable o alternativamente por agitacin en un vibrador Vortex. Despus
de dejar reposar un corto tiempo, para lograr la sedimentacin de partculas grandes de
heces, se emplea directamente el sobrenadante claro obtenido de esta manera. En caso de
usar para la determinacin analtica un equipo ELISA automtico el sobrenadante tiene que
estar libre de partculas. En estos casos se recomienda para las determinaciones una
centrifugacin a 5000 rpm (aprox. 2300 - 2500 G) durante 5 minutos.
Observacin:
Las muestras de heces diluidas en el Diluent 1 se pueden analizar tambin en el ELISA
RIDASCREEN para Astrovirus, Adenovirus y Norovirus, as como en otros tests ELISA
RIDASCREEN donde se emplee el Diluent 1.
9.4. Primera incubacin
Despus de introducir una cantidad suficiente de cavidades en el marco de soporte se
pipetean en cada una 2 gotas (100 l) del control positivo Control + , del buffer de dilucin
de muestras Diluent 1 (= control negativo) o de la muestra de heces en suspensin. A
continuacin se adicionan 2 gotas (100 l) del anticuerpo conjugado con biotina
Conjugate1 , se mezcla bien (con ligeros golpes en los bordes de la placa) y se incuba
durante 60 minutos a temperatura ambiente (20 25 C).

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9.5. Lavado
Un lavado cuidadoso es importante para lograr resultados correctos por lo cual ste debe
llevarse a cabo estrictamente segn las instrucciones. Las muestras incubadas en las
cavidades se deben vaciar primeramente en un recipiente de desechos con hipoclorito para
la desinfeccin. Posteriormente se sacude la placa sobre un papel absorbente para eliminar
los restos de humedad. Seguidamente se lava 5 veces con 300 l de buffer de lavado en
cada caso. Despus de cada enjuague se debe prestar atencin a vaciar completamente la
placa sacudindola sobre partes secas y no usadas del papel.
Cuando se usen lavadores automticos se debe velar por el ajuste correcto del
instrumento al tipo de placa microtitulacin utilizado. Adems es preciso que si se
tiene una suspensin de heces no totalmente libre de partculas, que stas sean
eliminadas manualmente de las cavidades antes del primer lavado para evitar
obstrucciones en las agujas de lavado. Igualmente se debe velar en los diferentes
pasos de lavado por una aspiracin completa del lquido. Despus del ltimo paso de
lavado se debe sacudir la placa cuidadosamente sobre papel absorbente limpio o
paos de laboratorio para eliminar la humedad residual. Para obtener resultados
ptimos en el proceso de lavado se recomienda utilizar el modo de rebose con al
menos 600 l de buffer de lavado por cavidad y paso de enjuague. Es posible
aumentar a ms de 5 los pasos de enjuague y en casos particulares esto conduce a
mejores resultados en la limpieza.
9.6. Segunda incubacin
Se adicionan en las cavidades 2 gotas (100 l) del conjugado poliestreptavidina-peroxidasa
Conjugate2 y se incuba durante 30 minutos a temperatura ambiente (20 25 C).
9.7. Lavado
Lavar segn el punto 9.5.
9.8. Tercera incubacin
Aadir 2 gotas de sustrato (100 l) Substrate a cada uno de los pocillos. A continuacin se
incuba la placa durante 15 minutos a temperatura ambiente (20 - 25 C) en la oscuridad.
Despus se adiciona 1 gota (50 l) de reactivo de parada Stop en cada una de las
cavidades para detener la reaccin. Se mezcla cuidadosamente (mediante ligeros golpes en
los bordes de la placa) y se mide la absorbancia a 450 nm (opcional: Longitud de onda de
referencia 600 nm). La compensacin del valor cero se debe realizar contra aire, o sea, sin
la microplaca.
Observacin: Muestras de pacientes con altos valores positivos pueden dar lugar a
precipitados negruzcos de sustrato.

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10. Control de calidad Indicios de reactivos caducados

Como control de calidad en cada determinacin se debe aadir un control positivo y otro
negativo para asegurar la estabilidad de los reactivos y un correcto desarrollo del test. El test
ha transcurrido correctamente si el valor de absorbancia (DO) del control negativo a 450 nm
es menor que 0,2 y el valor medido para el control positivo a 450 nm es mayor de 0,8. Si el
valor del control negativo es mayor de 0,2 esto puede ser un indicio de no haber lavado y
enjuagado suficientemente. Una desviacin de los valores requeridos, lo mismo que una
turbidez o coloracin azul del sustrato incoloro antes de ser transferido a las cavidades,
puede ser un indicio de vencimiento de los reactivos. Si los valores predefinidos no se
cumplen, se deben verificar los siguientes puntos antes de repetir el anlisis:
Durabilidad de los reactivos empleados
Funcionamiento correcto de los instrumentos utilizados (p. ej. la calibracin)
Ejecucin correcta del test
Control visual de los componentes del kit con respecto a contaminacin o prdida de
hermeticidad; una solucin de sustrato de coloracin azulada no se debe volver a usar.
Si al repetir la determinacin se obtienen nuevamente valores incorrectos Ud. debe dirigirse
al fabricante o al distribuidor local de R-Biopharm.
11. Evaluacin e interpretacin
11.1. Clculo del valor lmite
Para establecer el valor lmite se le suma 0,15 al valor de absorbancia obtenido para el
control negativo.
cut-off (Valor lmite) = Valor de absorbancia del control negativo + 0,15
11.2. Resultado del test
Se evalan como positivas las muestras cuyo valor de absorbancia se encuentra ms de
10% por encima del valor lmite calculado.
Se denominan como muestras de valores lmites y que deben repetirse, aquellas cuyo valor
de absorbancia est en el rango de 10% por encima o por debajo del valor lmite. Si una
repeticin del anlisis con una muestra de heces fresca posee de nuevo valores que
corresponden a la zona gris, entonces se debe evaluar la muestra como negativa.
Las muestras cuyos valores se encuentren en ms de 10% por debajo del valor lmite
calculado se evalan como negativas.
12. Limitaciones del mtodo
El test RIDASCREEN Rotavirus detecta antgenos de Rotavirus en muestras de heces. No
es posible a partir de este test deducir una relacin entre la magnitud de un valor de
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absorbancia obtenido y la manifestacin o gravedad de sntomas clnicos. Los resultados

obtenidos siempre deben interpretarse de conjunto con el cuadro clnico.
Un resultado positivo no excluye la presencia de otros agentes infecciosos.
Un resultado negativo no excluye una posible infeccin por Rotavirus. La causa de ello
puede ser una excrecin intermitente del virus o una cantidad demasiado baja de antgeno
en la muestra. Si existe la sospecha anamnsica fundada de una infeccin con Rotavirus se
debe repetir el anlisis con otra muestra de heces.
Un resultado con valores lmites puede ser ocasionado por una distribucin no homognea
del virus en la muestra de heces. Por este motivo se debe examinar en tales casos una
segunda suspensin de la misma muestra o solicitar otra muestra de heces para repetir el
anlisis.
13. Caractersticas de rendimiento
13.1. Calidad del test
El test RIDASCREEN Rotavirus se valid mediante la comparacin con tres mtodos
ELISA comerciales para Rotavirus. El conjunto de muestras usadas estaba compuesto de
muestras frescas de un laboratorio de rutina y de muestras que se haban conservado a -20
C para el estudio comparativo. Todos los anlisis de ELISA se realizaron a partir de una
suspensin homognea de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes. Cada muestra
se evalu como positiva o negativa, cuando coincidan los resultados de dos test de
referencia del total de tres realizados. Los resultados se resumen en la siguiente tabla.

ELISA de referencia
RIDASCREEN Rotavirus

pos.

neg.

Total

pos.

22

1*

23

neg.

1*

112

113

Total

23

113

136

* Estas dos muestras dieron resultados negativos a Rotavirus en el anlisis por PCR
Sensibilidad: 95,6 %
Especificidad: 99,1 %

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13.2. Reactividad cruzada

Diferentes grmenes patgenos del tracto intestinal fueron analizados con el ensayo
RIDASCREEN Rotavirus ELISA y no presentaron reactividad cruzada.
Los exmenes fueron realizados en suspensiones de bacterias con una concentracin de
106 hasta 109 microorganismos por ml. Los sobrenadantes del cultivo de virus y las toxinas,
as como las muestras de heces se enumeran en el listado de ms abajo. Los resultados se
resumen en la tabla 1.
Tabla 1: Reacciones cruzadas con microorganismos patgenos
Valor
medio de
la DO [450]

Germen de prueba

Origen

Procedencia

Acinetobacter Iwoffi
Aeromonas hydrophilia
anaerogenes
Aeromonas hydrophila
hydrophila
Citrobacter sp.

cultivo

DSM 2403

0,078

cultivo

DSM 30020

0,068

cultivo

DSM 30016

0,078

cultivo

DSM 30047

0,055

Citrobacter freundii

cultivo

DSM 30039

0,090

Enterobacter cloacae

cultivo

DSM 30054

0,072

Enterococcus faecalis

cultivo

DSM 2570

0,066

Enterococcus faecium

cultivo

DSM 20477

0,095

E. coli

cultivo

Univ. LM de Munich

0,069

E. coli

cultivo

Univ. LM de Munich

0,082

E. coli

cultivo

Univ. LM de Munich

0,083

E. hermannii

cultivo

DSM 4560

0,054

Lactococcus lactis

cultivo

DSM 20481

0,073

Listeria innocua

cultivo

DSM 20649

0,078

Proteus mirabilis

cultivo

DSM 788

0,053

Proteus mirabilis

cultivo

DSM 4479

0,065

Proteus vulgaris

cultivo

DSM 30119

0,053

Providencia stuartii

cultivo

DSM 6676

0,080

Pseudomonas arruginosa

cultivo

DSM 939

0,065

Pseudomonas fluorescens

cultivo

DSM 4358

0,061

Pseudomonas fluorescens

cultivo

DSM 50124

0,082

Pseudomonas putida

cultivo

DSM 291

0,058

Salmonella Agona

cultivo

Univ. LM de Munich

0,097

Salmonella Choleraesuis

cultivo

DSM 4224

0,088

Salmonella Infantis

cultivo

Univ. LM de Munich

0,059

Salmonella Ohio

cultivo

Univ. LM de Munich

0,061

Salmonella typhimurium
Serratia proteamaculans
(liquefaciens)
Shigella flexneri

cultivo

DSM 554

0,052

cultivo

DSM 4487

0,050

cultivo

DSM 4782

0,063

Shigella sonnei

cultivo

DSM 5570

0,048

RIDASCREEN Rotavirus

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10

Staphylococcus aureus

cultivo

DSM 20372

0,063

Streptococcus agalactiae

cultivo

DSM 2134

0,078

Streptococcus dysgalactiae

cultivo

DSM 20662

0,079

Streptococcus uberis

cultivo

DSM 20569

0,072

Escherichia coli (O157:H-)

cultivo

Univ. LM de Munich

0,097

Escherichia coli (O116:H21)

cultivo

Univ. LM de Munich

0,074

Escherichia coli (O111:H-)

cultivo

Univ. LM de Munich

0,084

Escherichia coli (022:H8)

cultivo

Univ. LM de Munich

0,095

Escherichia coli (O26:H11)

cultivo

Univ. LM de Munich

0,086

Candida albicans

cultivo

ATCC 10231

0,082

Salmonella enteritidis

cultivo

DSM 9898

0,065

Campylobacter jejuni

cultivo

DSM 4688

0,054

Campylobacter coli

cultivo

DSM 4689

0,073

Campylobacter fetus

cultivo

DSM 5361

0,064

Helicobacter pylori

cultivo

DSM 4867

0,053

Morganella morganii
Sobrenadante de cultivo de
Astrovirus
Muestra de Astrovirus
Sobrenadante de cultivo de
Adenovirus
Muestra de Adenovirus

cultivo
sobrenadante de
cultivo infeccioso
heces
sobrenadante de
cultivo infeccioso
heces
lisado de H.
pylori inactivado

DSM 6675

0,053

Micromun

0,055

Univ. Dresde

0,080

Micromun

0,065
0,061

C.perfringens 50 g/ml

Toxoide

Toxinas Shiga STX1

Toxoide

Univ. Dresde
Kit de control
FemtoLab H. pylori
Kit de control
C.perfringens Enterotoxin
A
Toxin Technology

Toxinas Shiga STX2

Toxoide

Toxin Technology

0,073

C.sordellii

cultivo

tgcBiomics

0,060

C.difficile

cultivo

VPI 1640

0,060

Cryptosporidium parvum

cultivo

Waterborne Inc.

0,052

Muestra de Campylobacter

heces

Lab.Enders

0,042

Muestra de Giardia lamblia

heces

TI Berlin

0,037

Ent. histolytica

heces

TI Berlin

0,049

Muestra de Salmonella
enteritidis

heces

Lab. Enders

0,066

Sapovirus

heces

Univ. Dresde

0,062

Muestra de H.pylori

0,082
0,058
0,064

13.3. Precisin
La reproducibilidad intraensayos se determin mediante un anlisis con 40 repeticiones
usando 6 muestras de referencia diferentes de Rotavirus. Los valores medios de la
absorbancia (DO), as como de la desviacin estndar y del coeficiente de variacin se
presentan en la Tabla 2.
RIDASCREEN Rotavirus

10-03-26

11

Tabla 2: Reproducibilidad intraensayos

Referencia
Nmero de mediciones
Valor medio [DO450]
Desv. estndar
Coeficiente de variacin
(%)

R1
40

R2
40

R3
40

R4
40

R5
40

R6
40

2,279
0,110

1,318
0,117

1,265
0,124

0,837
0,086

0,658
0,065

0,373
0,037

4,82 %

8,87 %

9,82 %

10,26 %

9,94 %

9,85 %

La reproducibilidad interensayos del RIDASCREEN Rotavirus ELISA se determin

utilizando 6 muestras de referencia mediante un anlisis diario por duplicado, durante 10
das y por 3 tcnicos diferentes. Los valores medios de la absorbancia medida (DO), as
como la desviacin estndar y el coeficiente de variacin se presentan en la Tabla 3.
Tabla 3: Reproducibilidad interensayos
Referencia
Das de medicin:
Nmero de mediciones:

R1
20
40

R2
20
40

R3
20
40

R4
20
40

R5
20
40

R6
20
40

Precisin por cada

medicin:
Valor medio [DO450]
Desv. estndar
Coeficiente de variacin
(%)

2,206
0,145

1,642
0,094

1,483
0,108

1,116
0,080

0,738
0,067

0,532
0,054

6,59 %

5,72 %

7,31 %

7,21 %

9,04 %

10,14 %

2,206
0,260

1,642
0,243

1,483
0,222

1,116
0,193

0,738
0,131

0,532
0,095

11,78 %

14,82 %

15,00 %

17,26 %

17,78 %

17,94 %

Precisin general:
Valor medio [DO450]
Desv. estndar
Coeficiente de variacin
(%)

14. Interferencia de otras sustancias

Las sustancias que se relacionan a continuacin no mostraron efecto sobre los resultados
del anlisis cuando se adicionaron en las concentraciones indicadas a las muestras de
heces positivas o negativas al Rotavirus: Sulfato de bario (5% p/p),
Loperamida
(antidiarreico; 5% p/p), Pepto-Bismol (antidiarreico; 5% v/p), mucina (5% p/p), ciclamato
(edulcorante sinttico 5% v/p), sangre humana (5% v/p), cido esterico / cido palmtico
(mezcla 1:1, 40% p/p), Metronidazol (0,5) (antibitico 5% v/p), Diclofenaco (0.00263% v/p).

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