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Historia
1700s estudios en la digestin de carne
1800s conversin del almidn en azcar por la saliva y
extractos de plantas
1850s Louis Pasteur la fermentacin, del azcar hasta
alcohol es catalizado por fermentos
1897 Eduard Buchner fermentacin es promovida por
molculas. Frederick W. Kuhne llam a estas molculas
ENZIMAS.
1962 Cristalizacin de la ureasa James Sumner
Qu es una enzima?
Es un tipo de protena que acta como catalizador de
reacciones qumicas.
Incrementa la velocidad de reaccin sin cambiar el
punto de equilibrio.
Como catalizador:
Es especfico para cada reaccin. No necesariamente
para un solo sustrato, aunque muchas enzimas lo son.
Tiene gran poder cataltico, transformando hasta 103 a
104 molculas por segundo.
Est sujeto a diversos mecanismos de regulacin de
modo tal que no genere ms producto que el necesario.
Qu hace un catalizador?
Reduce la barrera de energa para una reaccin
por lo que ms molculas alcanzan la energa de
transicin. No tiene efecto sobre la posicin de
equilibrio
Como lo hace?
Forzando la molcula a
un estado intermediario
que se parece al de
transicin
pero
de
menor energa.
Puede
reunir
dos
molculas reactivas en
la orientacin adecuada,
aumentando
su
reactividad
Orienta partes de la
molcula de forma
adecuada para alcanzar
la transicin.
Importante
Todas las enzimas son protenas con excepcin de un pequeo
grupo de molculas catalticas de RNA
Se conocen mas de 3000 enzimas.
Las enzimas son catalizadores biolgicos que aceleran la reaccin.
Las enzimas son altamente especificas y reaccionan solo con un
sustrato para formar un producto y puede acelerar la reaccin en
ms de 1017.
Importante
Las enzimas tienen un rango de magnitud de incrementar la reaccin
de 5 a 17 ordenes de magnitud
Cofactores / coenzima
Algunas
enzimas
requieren
un
componente
quimico
adicional
denominado cofactores.
Las coenzimas actan como portadores
transitorios de grupos funcionales
especficos
Cofactor / coenzima
Un cofactor o coenzima que es muy relacionado o se
enlaza covalentemente a una protena enzimtica es
llamada grupo prosttico.
La enzima activa o completa es llamada holoenzima
Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Catalizan reacciones de transferencia de hidrgeno (H) o
electrones (e-) de un sustrato a otro
AH2 + B
Ared + Box
A + BH2
Aox + Bred
Clase 2: TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del
hidrgeno) de un sustrato a otro
A-B +
A + C-B
Clase 3: HIDROLASAS
Catalizan las reacciones de hidrlisis
A-B
H2O
AH + B-OH
Clase 4: LIASAS
Catalizan reacciones de ruptura o unin de sustratos
A-B
A + B
Clase 5: ISOMERASAS
Catalizan la interconversin de ismeros
A
Fosfoglucosa isomerasa
EC 5.
Clase 6: LIGASAS
A + B + XTP
A-B + XDP + Pi
enzima
sustrato
productos
enzima
Localizacin enzimtica
Na/K ATPasa
membrana
Retculo endoplasma
Glucosa 6 fosfatasa
Alfa manosidasa
Complejo Golgi
Catalasa
Peroxisoma
Mitocondria
actividad
Temperatura
temperatura
70
pH
pH
pH ptimo (activo)
pH alcalino (inac)
14
Concentracin de la enzima y
constante de equilibrio
La concentracin de la enzima incrementa la velocidad de la
reaccin, pero no modifica la constante de equilibrio.
As, si la reaccin se produce en ausencia de la enzima...
K1
SP
K 1
K1
( P)
Keq
K 1 (S )
Enz S Enz P
K 1
Keq
K1
K 1
( Enz )( P )
( Enz )(S )
( P)
(S )
Cintica enzimtica.....
Vmax
Vmax/2
Km.
Primer
orden
S
Orden
cero
Vmax[ S ]
Km [ S ]
Bajo estas condiciones Vmax se observa cuando todos los sitios activos
estn llenos de sustrato. Toda la enzima est bajo la forma de [ES] y la
Km se define como concentracin de sustrato a Vmax/2
Vmax: es un ndice de la eficiencia de una enzima. Es la velocidad cuando
todos los sitios activos estn saturados, y es proporcional a la
concentracin de la enzima. Sus unidades son unidades de velocidad.
Km: es una medida inversa de la afinidad de la enzima por el sustrato.
Una baja Km indica alta afinidad entre enzima y sustrato. Las unidades de
Km son unidades de concentracin.
Vmax/2
Km. Km
Hexoquinasa
(cerebro)
Glucoquinasa
(hgado)
La aplicacin de la ecuacin de
Michaelis Menten se basa en...
K1
K3
K2
K4
E S ES E P
La concentracin de sustrato es tan grande con respecto a la de
enzima, que la formacin de ES no altera significativamente la
concentracin de sustrato.
Al inicio de la reaccin la concentracin del producto es tan
insignificante que la velocidad descrita como k4 puede ser
ignorada.
La velocidad de transformacin de ES en E+P(k3) es el factor
limitante de la reaccin.
La formacin de ES es rpida y reversible y es igual a la velocidad
de desaparicin de ES.
Reacciones de multisustrato
Captacin indistinta..Cada sustrato ser captado en
su momento, generalmente uno es preferente:
Reacciones de multisustrato
Captacin ordenada de sustratos para unir
un sustrato debe unirse otro primero
Reacciones de multisustrato
Mecanismo ping-pong cuando existe una secuencia
cataltica. La enzima se modifica por persistencia de un
fragmento del primer sustrato.
Enzimas proteolticas
1/v
1
km 1
1
v Vmax [ S ] Vmax
Cuando 1/v se grafica frente a
1/s se obtiene una recta,
donde la pendiente es
Km/Vmax.
-1/Km
La interseccin en el eje de y
es igual a 1/Vmax y la del eje
de x es igual a 1/Km.
1/Vmax
1/[S]
Inhibidores competitivos
Estructuras semejantes al sustrato que compiten con l por el mismo
centro activo.
Sus efectos pueden revertirse si se incrementa la concentracin del
sustrato hasta ocupar todos los centros activos.
inhibidor
1/Vmax
[S]
-1/Km
1/[S]
Inhibidores competitivos
Inhibidores no competitivos
Estructuras diferentes al sustrato por lo que se unen a un sitio independiente de la enzima.
Ambos, sustrato e inhibidor pueden unirse a la enzima al mismo tiempo. Su efecto no puede revertirse aumentando la concentracin del
sustrato.
1/V
V
inhibidor
1/Vmax
[S]
-1/Km
1/[S]
Inhibicin
no competitiva
Inhibidores irreversibles
Reaccionan covalentemente con la cadena lateral de un aminocido
de la enzima, para formar un complejo estable permanentemente
inactivado.
Se les llama tambin substratos suicidas.
Su efecto es igual al de un inhibidor no competitivo.
Uso teraputico
Hipercolesterolemia
Cncer
Cncer
Gota
Anticoagulante
Antiinflamatorio
Hipertensin art.
Enzima afectada
HMGCoA reductasa
Timidilato sintetasa
Dihidrofolato reductasa
Xantino oxidasa
Glutamil carboxilasa
Ciclooxigenasa
Enz.convert.angiotensina
Tipo de inhibidor
Competitiva
Irreversible
Competitiva
Irreversible
Competitiva
Irreversible
Competitiva
Elevacin enzimtica en el
plasma...
La actividad enzimtica en el plasma y otros lquidos biolgicos
se produce por:
Necrosis: destruccin celular y vaciamiento de las enzimas
como en el infarto de miocardio, hepatitis viral.
Permeabilidad: aumento de permeabilidad de membrana
igual a necrosis.
Sobre produccin: mayor metabolismo en un tejido
-neoplasia-.
Menor eliminacin: no se elimina normalmente
-obstruccin biliar-.
Incremento de clulas inflamatorias: en lquidos como
Pleural los exudados se acompaan de aumento de actividad
enzimtica.
Ejemplos
Protrombina, plasmingeno,ceruloplasmina,
Lipasa Lipoproteica,colinoesterasa
Amilasas, fosfatasa prosttica, pepsingeno
Lctico deshidrogenasa, aldolasa, aspartato y
alanina transferasa.
Isoenzimas
Enzimas que realizan la misma funcin pero difieren en su estructura
qumica y propiedades cinticas.
Las formas isoenzimticas distintas pueden pertenecer a distintos
tejidos revelando sus modificaciones el tejido que le dio origen.
Generalmente son estructuras oligomricas con varios tipos de cadenas
proteicas -dmeros o tetrmeros- .
Isoenzimas LDH
Bazo
Pulmones
Eritrocitos
Msculo
Miocardio
Rin
LDH1
LDH2
LDH3
LDH4
LDH5
Hgado
100%
%
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
Dehidrogenasa lctica
Existen cinco isoenzimas
de la deshidrogenasa lctica
(LDH). Cada una es un oligmero con cuatro protmeros de los tipos H y M y
tiene un PM de 34 000.
Los protmeros se combinan de manera distinta y se
originan en distintos tejidos
con preferencia.
El suero tiene un contenido
representativo de todos los
tejidos.
normal
infarto
Creatino fosfokinasa
Isoenzima
CK1
Ck2
CK3
Subunidades
BB
MB
MM
Tejido predominante
Cerebro
Msculo cardiaco
Msculo esqueltico
(+)
CK1
CK2
CK3
(-)