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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA


TRABAJO DE TITULACIN
PREVIO A LA OBTENCION DEL TTULO DE:
INGENIERO QUMICO
TEMA:
Aplicacin de las operaciones unitarias de lixiviacin y
destilacin en la obtencin del sustrato, con la finalidad de
cuantificar el poder antioxidante de la albahaca (Ocinum
basilicum L.)

AUTORES:
PAZMIO BARCIA GUSTAVO PATRICIO
SANCHEZ BARCIA RAMIRO ROMAN
DIRECTOR DE PROYECTO DE TITULACIN:
ING. QCO. CARLOS MUOZ CAJIAO Msc.
GUAYAQUIL - ECUADOR
2016

AGRADECIMIENTOS
AGRADECIMIENTO:
Damos gracias a todas las personas que nos han apoyado en el desarrollo del
presente proyecto de titulacin tanto de forma directa como indirecta durante el
tiempo en el que se efectuaron los diversos estudios, experimentos, anlisis y
trmites legales para la aprobacin, desarrollo y finalizacin de nuestra
investigacin.
Queremos agradecer principalmente a nuestros padres y familiares cercanos
quienes nos ayudaron y motivaron a finalizar nuestros estudios de grado
superior y superar las metas y obstculos que se han presentado durante
nuestra formacin profesional, a todos los docentes, tutores y profesionales
que nos han aconsejado mediante su conocimiento y experiencia nos han
capacitado y preparado para enfrentar el entorno profesional que abarca la
ingeniera qumica y en el asesoramiento y gua constante en el desarrollo de la
investigacin.
Al tutor, el Ing. Carlos Muoz Cajiao, por haberme aceptado como uno de sus
tesistas, y aconsejarnos para poder desarrollar este trabajo de titulacin.
Al Ing. Wilfrido Tern y al Q.F. Luis Zalamea por habernos orientado y guiado
con sus conocimientos durante el tiempo que se realiz el trabajo.

GRACIAS A TODOS.

GUSTAVO PATRICIO PAZMIO BARCIA

AGRADECIMIENTO:
Deseo expresar mis agradecimientos a las siguientes personas:
A mi familia, a mi madre y hermana, por haberme ayudado moral, tica y
econmicamente en el trascurso de mi carrera universitaria.
Al Ing. Jos Valdez, porque a pesar de su estado actual de salud, siempre
estuvo all como un gua y tuvo la paciencia de escucharme en los momentos
que necesitaba una crtica constructiva para la elaboracin de mi tesis de
grado. Le agradezco inmensamente, por motivarme a iniciar desde cero con
este trabajo de titulacin; ahora s lo que es esforzarse.
Al Ing. Wilfrido Tern y al Q.F. Luis Zalamea, por habernos orientado y guiado
con sus conocimientos durante el tiempo que se realiz el trabajo.
Al tutor, el Ing. Carlos Muoz Cajiao, que lo considero como un amigo al igual
que las personas antes mencionadas, le agradezco por los consejos impartidos
durante la carrera y el transcurso de esta tesis. Aunque ahora este de
vicedecano, siempre tuvo la paciencia para hacer la revisin de la tesis y
sugerir cambios relevantes en la misma.

GRACIAS A TODOS.

RAMIRO ROMN SNCHEZ BARCIA

DEDICATORIA
Dedico mi tesis por completo al esfuerzo desinteresado de mis padres que
confiaron en m y en general a toda mi familia, ya que sin ellos esto no sera
posible.
A mis compaeros y amigos que compartieron esta lucha da a da en toda
nuestra etapa de estudiantes, llevando conmigo para siempre hermosos y
gratos recuerdos.

GUSTAVO PATRICIO PAZMIO BARCIA

DEDICATORIA
Dedico mi tesis a mi familia, en especial a mi mama Bertalina Barcia Garca,
que aunque no estuvo conmigo durante el transcurso de la carrera, confo en
m ciegamente hasta el trmino de esta tesis.
A mis profesores, amigos, compaeros y contemporneos que me ayudaron a
cumplir esta meta con xito.
Por ultimo a mis compaeros y futuros colegas, espero lean esta dedicatoria y
les pueda servir de mensaje de vida: A veces la primera opcin no siempre es
la correcta y que en ocasiones la vida nos pondr a prueba; entre elegir seguir
adelante o empezar de cero, yo eleg la segunda opcin; espero ustedes elijan
bien su camino.

RAMIRO ROMAN SANCHEZ BARCIA

DERECHOS DE AUTORA
GUSTAVO PATRICIO PAZMIO BARCIA Y RAMIRO ROMAN SANCEHZ
BARCIA, declaran bajo juramento que el trabajo aqu descrito es de su autora,
que no ha sido previamente presentado para ningn grado o calificacin
profesional, y que hemos consultado las referencias bibliogrficas que se
incluyen en este documento.

A travs de la presente declaracin cedemos los derechos de propiedad


intelectual a la UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL, FACULTAD DE INGENIERA
QUMICA, segn lo establecido por la Ley de Propiedad Intelectual y su
reglamento.

Atentamente:

__________________________
GUSTAVO PATRICIO PAZMIO BARCIA
CI: 0705875920

___________________________
RAMIRO ROMAN SANCHEZ BARCIA
CI: 0803155969

CERTIFICACIN DE TUTOR
El Ing. Qco. Carlos Muoz Cajiao Msc. certifica haber tutelado la tesis,
Aplicacin de las operaciones unitarias de lixiviacin y destilacin en la
obtencin del sustrato, con la finalidad de cuantificar el poder antioxidante de la
Albahaca (Ocinum basilicum L), que ha sido desarrollada por RAMIRO
ROMAN SANCHEZ BARCIA Y GUSTAVO PATRICIO PAZMIO BARCIA,
previa la obtencin del ttulo de Ingeniero en QUIMICA, de acuerdo al
REGLAMENTO PARA LA ELABORACIN DE TESIS DE GRADO DE
TERCER NIVEL de la UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL, FACULTAD DE
INGENIERA QUMICA.

__________________________________

ING. QCO. CARLOS MUOZ CAJIAO MSC

RESUMEN
En el presente trabajo de titulacin, se muestra la capacidad antioxidante de
sustratos provenientes de la: lixiviacin y destilacin de la Albahaca (Ocinum
basilicum L.) y la variacin de antioxidantes aplicando dichas operaciones.
Para la realizacin de este trabajo, se obtuvo la materia prima de los mercados
de la localidad (10 de Agosto y Montebello), siendo un punto primordial en el
rendimiento en peso para la seleccin de la materia prima. El material
seleccionado, se utiliz para las operaciones posteriores (lixiviacin y
destilacin); siendo deshidratas las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L.)
para la extraccin de sus metanolitos con solvente (Metanol y agua acidula).
Dentro de los resultados obtenidos, se demostr que al usar pequeas
cantidades (15 l y 25 l) de los sustratos de Albahaca (Ocinum basilicum
L.), se obtuvo un alto rendimiento de 64% y 87% para un aceite proveniente de
la lixiviacin con metanol; 28,6% y 57,56 % para aceite esencial. Se realiz
tambin la medicin de antioxidantes en una muestra al natural, pero macerada
con metanol, de la cual se obtuvo un 8,30% y 23%; demostrando la gran
diferencia al aplicar la lixiviacin y destilacin.

Palabras claves: Antioxidante, Albahaca (Ocinum basilicum L.), DPPH,


extraccin fenlica.

ABSTRACTS
In titling this work, shown the antioxidant capacity of substrates from of the:
"leaching and distillation" of Basil (Ocinum basilicum l.) and the variation of
antioxidants by applying such operations.

For carrying out this work, was obtained the raw material markets in the town
(10 August and "Montebello"), being a primary point performance in weight for
the selection of the raw material. The selected material, was used for
subsequent operations (leaching and distillation); being dehydrated leaves of
Basil (Ocinum basilicum l.) for the extraction of its metanolitos with solvent
(methanol and water acidula).

Within the results, showed that using small amounts (15 and 25 l) of the
substrates of Basil (Ocinum basilicum l.), was a high-performance 64% and
87% for leaching with methanol; 28.6% from oil and 57.56% essential oil. There
was also the measurement of antioxidants in a sample natural, but macerated
with methanol, which was obtained by 8.30% to 23%; showing the difference in
applying the lixiviation and distillation.

Keywords: Antioxidant, Basil (Ocinum basilicum l.), DPPH, extracting phenolic

INTRODUCCIN
En Ecuador, una de la plantas ms usada es la Albahaca (Ocinum basilicum
L), debido a su aromaticidad y versatilidad en el campo gastronmico. A pesar
de su gran consumo, en el pas se desconoce el potencial antioxidante, que
contiene las hojas de esta planta en su estado natural y en forma deshidratada.
Para entender que es un antioxidante, hay que saber primero: Que es un
radical libre y de donde proviene este? El ser humano en su trabajo diario,
genera una gran cantidad de radicales libres, producto del metabolismo normal
-

del mismo; normalmente ese radical libre es el (O 2 ), denominado radical


superxido. Cualquier molcula, que se encuentre cercana al radical
superxido, se ver afectada y se transformar, a su vez, en un radical libre, lo
que desata una reaccin en cadena.
Sabiendo esto, se puede explicar que un antioxidante es una sustancia, cuyo
objetivo es prevenir o retardar la oxidacin (prdida de uno o ms electrones)
de otras molculas, generalmente de sustratos biolgicos como lpidos,
protenas cidos nucleicos.
El cuerpo humano, tiene un lmite de depuracin de radicales libres, con los
antioxidantes naturales presentes en el mismo; no obstante cuando se
presenta un exceso de radicales libres, existe el inicio de los problemas
degenerativos del ser humano (muerte celular, envejecimiento y hasta algunos
tipos de cncer).
Debido a que los antioxidantes, no son tangibles pero si medibles, se opt por
usar el mtodo de DPPH (2,2-Difeni-1-picrilhidrazilo); el cual da una
apreciacin cualitativa (decoloracin) y cuantitativa (porcentaje de inhibicin) de
las reaccin existente entre el radical in vitro y la muestra que posee potencial
antioxidante.
Para la medicin de la capacidad antioxidante se utilizaron los sustratos
provenientes de la lixiviacin y destilacin por arrastre de vapor de las hojas
Albahaca (Ocinum basilicum L); cuyo resultados finales demostraron un alto
poder antioxidante en esta planta (hojas).
9

INDICE
AGRADECIMIENTOS.............................................................................. I
DEDICATORIA...................................................................................... III
DERECHOS DE AUTORA.....................................................................V
CERTIFICACIN DE TUTOR................................................................VI
RESUMEN........................................................................................... VII
ABSTRACTS....................................................................................... VIII
INTRODUCCIN.................................................................................. IX
CAPITULO 1 LA INVESTIGACIN....................................................8
1.

Tema............................................................................................. 8

2.

Planteamiento del problema.........................................................8

3.

Formulacin del problema............................................................9

4.

Limitacin del estudio...................................................................9

5.

Alcance del trabajo.......................................................................9

6.

Objetivos..................................................................................... 10
6.1 Objetivo General......................................................................10
6.2 Objetivos Especficos...............................................................10

7.

Resumen de la propuesta de intervencin.................................10

8.

Aportaciones............................................................................... 11

9.

Justificacin del problema...........................................................12

10.

Variables:................................................................................. 13

11.

Operacionalizacin de las variables.........................................14

CAPTULO 2: REVISIN BIBLIOGRFICA........................................16


2. Marco terico................................................................................ 16
2.1. Descripcin de la planta.............................................................16
2.1.1 Taxonoma de la planta.........................................................16
2.1.2. Valor nutricional..................................................................17
2.1.3 Usos de la planta..................................................................19
2.2 Operaciones unitarias aplicadas para la extraccin de los
fenolitos de la albahaca....................................................................19
2.2.1. Secado................................................................................. 19
2.2.2. Liofilizacin..........................................................................20

2.2.3. Molienda.............................................................................. 21
2.2.4. Destilacin...........................................................................21
2.2.5. Extraccin slido lquido (Lixiviacin)................................21
2.3. Compuestos antioxidantes y mtodos de medicin de la
capacidad antioxidante.....................................................................22
2.3.1. Actividad antioxidante.........................................................22
2.3.2. Compuestos fenlicos..........................................................25
2.3.3. Mtodo DPPH (2,2-Difeni-1-picrilhidrazilo) para la medicin
de la capacidad antioxidante.........................................................26
2.4. Mtodos utilizados en estudios realizados en lixiviacin,
maceracin y extraccin de antioxidantes en plantas.....................27
2.4.1 Obtencin de Extracto de Ruda con alto contenido de
polifenoles..................................................................................... 27
2.4.2. Cuantificacin de los componentes fenlicos y actividad
antioxidante de Pterodon emarginatus Vogel semillas..................29
2.4.5. Actividad antioxidante y enzimtica de albahaca nufar
(Ocimum basilicum L.) almacenada en refrigeracin.....................29
CAPITULO 3 METODOLOGA Y DESARROLLO EXPERIMENTAL 32
3.1. Metodologa de la investigacin.................................................32
3.1.1. Metodologa utilizada en el proyecto...................................32
3.1.2. Mtodos y Tcnicas..............................................................32
3.1.2. Normas................................................................................ 33
3.2 Calidad de los productos.............................................................33
3.2.1 Anlisis Fsico - Qumico........................................................33
3.2.2 Anlisis Microbiolgico..........................................................33
3.3. Parmetros de acuerdo a las variables......................................34
3.4 Experimentacin (Diseo)...........................................................34
3.4.1. Equipos y Materiales............................................................34
3.5. Ingeniera de Procesos...............................................................38
3.5.1. Operaciones Preliminares....................................................38
3.5.2. Operaciones durante el proceso..........................................39
3.5.3. Operaciones finales.............................................................41
3.5.4. Diagrama de flujo de procesos............................................42
3.5.5. Diagrama por equipo de procesos......................................46
4. Anlisis y discusin de los resultados...........................................46
4.1 Balance de materia..................................................................46
4.2 Balance de energa..................................................................53

4.3 Resultados experimentales......................................................57


4.4 Anlisis e interpretacin de resultados....................................63
CONCLUSIONES................................................................................. 69
RECOMENDACIONES.........................................................................70
BIBLIOGRAFA.................................................................................... 71
ANEXOS.............................................................................................. 75
Anexo A- Nomenclatura de los balances de materia.........................76
Anexo B Nomenclatura de los balances de energa........................76
Anexo C-Tamizaje fitoqumico............................................................77
Compuestos Reductores................................................................77
Triterpenos y esteroides.................................................................77
Saponinas:..................................................................................... 78
Alcaloides....................................................................................... 79
Compuestos fenlicos....................................................................79
Flavonoides.................................................................................... 79
Anexo D Balances de energa.........................................................80
Clculo de las capacidades calorficas...........................................80
Curvas de secado de las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L).
...................................................................................................... 81
Anexo E- Rendimiento y mermas de proceso....................................85
Operaciones preliminares..............................................................85
Operaciones durante el proceso....................................................90
Operaciones finales.......................................................................93
Anexo F- Layout.............................................................................. 107
Anexos G - Anlisis realizados.........................................................108
Anexos H Fotografas de la investigacin.....................................112
1.

Operaciones preliminares......................................................112

2.

Operaciones durante el proceso............................................114

3.

Operaciones finales...............................................................116

CAPITULO 1 LA INVESTIGACIN
1. Tema.
Aplicacin de las operaciones unitarias de lixiviacin y destilacin en la
obtencin del sustrato, con la finalidad de cuantificar el poder antioxidante
de la albahaca (Ocinum basilicum L.)
7

2. Planteamiento del problema.


El ser humano en su trabajo diario, genera una cantidad de radicales
libres producto del metabolismo, esta generacin

no es medible de

manera directa, por lo que se usan distintos mtodos.


La acumulacin de estos radicales libres en el organismo humano causa
dao al ADN de nuestro cuerpo, lo que se deriva en enfermedades
cardiovasculares, cncer y tumores.

Recientes estudios cientficos han

demostrado que el poder antioxidante de ciertas frutas y tubrculos, as


como de plantas ha prevenido y amortiguado el inicio de las
enfermedades antes mencionadas.
En Ecuador, una de la plantas ms usada es la Albahaca (Ocinum
basilicum L), debido a su aromaticidad y versatilidad en el campo
gastronmico.
En el presente proyecto se pretende medir la capacidad antioxidante de
esta planta, por medio de un sustrato obtenido aplicando principios de
operaciones unitarias (lixiviacin y destilacin); con la finalidad de
conseguir un producto con alto contenido en antioxidantes.

3. Formulacin del problema


La Albahaca (Ocinum basilicum L), en Ecuador es usada como un aditivo
para la preparacin de alimentos; siendo comercializado en su estado natural o
en forma deshidratada, desconocindose la capacidad antioxidante que
contiene esta especie vegetativa.
El presente trabajo busca determinar el mtodo de extraccin, que permita
tener un mayor porcentaje de inhibicin a los radicales libres, y usarlo para
diversos productos alimenticios; siendo este medio una alternativa rpida para
asimilar los fenolitos de esta planta.

4. Limitacin del estudio


El presente trabajo emplear las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L),
obtenidas en los mercados locales, de la ciudad de Guayaquil, como materia
prima para las distintas extracciones a realizarse.
Debido a que no se cuenta con un equipo moderno, como lo es el
espectrofotmetro msica gaseosa (Gs/Ms), se decidi optar por utilizar
equipos ms sencillos que se tienen en el medio para el anlisis de los
componentes del extracto de la Albahaca (Ocinum basilicum L). El equipo a
utilizarse es el espectrofotmetro Genesys 10.

5. Alcance del trabajo.


Determinacin del contenido de fenolitos del aceite esencial de Albahaca
(Ocinum basilicum L) y

de extractos provenientes de la lixiviacin con

solventes (metanol 99,8% y agua acidulada 5 %) de las hojas previamente


secadas (secado en caliente y en fro), con la finalidad de encontrar el sustrato
con

mayor

capacidad

antioxidante,

sin

perder

las

caractersticas

organolpticas propias de esta planta.

6. Objetivos.
6.1 Objetivo General
Obtener los sustratos de Albahaca (Ocinum basilicum L), a partir de las
destilacin por arrastre de vapor (aceite esencial) y la lixiviacin con solvente
(metanol 99,8% y agua acidulada 5 %), para la medicin de la capacidad
antioxidante.
6.2 Objetivos Especficos
Determinar y cuantificar la capacidad antioxidante de los extractos, mediante el
mtodo de DPPH.
Establecer en base a la experimentacin, la operacin unitaria ms adecuada
para la extraccin de metabolitos, que permita un alto rendimiento al final del
proceso.
Obtener una especia alimentaria,

a partir de las hojas deshidratadas de

Albahaca (Ocinum basilicum L) en presentacin de envase de vidrio.

7. Resumen de la propuesta de intervencin.


El proyecto se basa en encontrar mediante de la capacidad antioxidante de
extractos de la Albahaca (Ocinum basilicum L), por diferentes vas de
extraccin: Lixiviacin y Destilacin.
La Albahaca (Ocinum basilicum L), es caracterizada por ser una planta muy
aromtica, debido a los componentes voltiles presentes en ella. Dichos
componentes, ricos en polifenoles son una parte de los metabolitos de la
Albahaca (Ocinum basilicum L); tal es el caso del eugenol, linalol y trans-
cariofilina; encontrados en mayor cantidad por cromatografa gaseosa del
aceite esencial de la Ocinum basilicum L (IMERI, y otros, 2014)
Para verificar la presencia de polifenoles en los extractos obtenidos, se aplic
el mtodo del DPPH (2,2-Difeni-1-picrilhidrazilo); subsecuentemente estos

10

resultados demostrarn, cual es la operacin unitaria ms eficiente y eficaz


para concentrar los metabolitos de dicha planta.

8. Aportaciones
Cientfico: Desarrollar tcnicas metodolgicas para aprovechar la extraccin
de polifenoles, alcaloides y otros antioxidantes, as como los componentes
voltiles; que son de gran utilidad en el campo alimentario y medicinal.
Medicinal: Utilizar adecuadamente los metabolitos primarios y secundarios de
la Albahaca (Ocinum basilicum L), con la finalidad de obtener una mejora en
la calidad de vida, a travs de un producto alimenticio libre de componentes
txicos para el ser humano.
Tecnolgico: Aplicar las operaciones unitarias necesarias, para la extraccin
de los metabolitos (en especial polifenoles) de esta planta. Sugerir tcnicas
donde se apliquen operaciones preliminares, que mejoren los rendimientos de
extraccin; as como cambios en los sistemas de transferencia de calor para
optimizar el tiempo y etapas de la lixiviacin en sus distintas escalas
(laboratorio, semi-piloto, industrial).
Social: Concientizar a la poblacin en general de ingerir en su dieta diaria
alimentos ricos antioxidantes; con la finalidad de reducir el dao degenerativo
provocado por los radicales libres. Entre estos alimentos se encuentra

la

Albahaca (Ocinum basilicum L); la cual es un vegetal con un alto contenido


de antioxidantes.
Econmico: Aprovechar los recursos

naturales del Ecuador para la

produccin en masa de Albahaca (Ocinum basilicum L) deshidratada, y su


distribucin como aditivo alimentario. El producto obtenido tendra un valor
agregado por el reconocimiento de su potencial antioxidante.

11

9. Justificacin del problema


La aplicacin de las operaciones unitarias a escala de laboratorio permitira
obtener un sustrato, que demuestre y cuantifique el poder antioxidante de cada
una de las muestras.
El beneficio que se obtendr ser mejorar los estndares de salud de los
consumidores por su alto contenido de antioxidantes.

12

10. Variables:
Tabla 1: Variables dependientes e independientes de operacin .
Operacin o proceso

Rgimen de

Variable

operacin

Secado.

Lixiviacin.

Independiente
Temperatura.
Tiempo.

Aplicacin de calor.

Albahaca
Carga a Secar.
Humedad de la

Remocin de calor.

Albahaca
Carga a Secar.
Gas refrigerante.
Tamao de partcula. Concentracin del
Humedad del Slido.
solvente.
Tipo de material a
Tiempo de operacin.
Temperatura de trabajo.
lixiviarse.
Carga de materia para Temperatura
Tiempo
la operacin.
Presin de trabajo.
Temperatura del

Aplicacin de calor.

Destilacin.

Dependiente
Humedad de la

Variable

Aplicacin de calor.

Temperatura.
Tiempo.

lquido refrigerante.

obtencin de un

Sustrato con
Medicin de

Aplicacin del

antioxidantes.

mtodo de DPPH

polifenoles a partir
de la Albahaca

Proceso para la

sustrato.
Potencial antioxidante.
Humedad de la planta.
Cantidad de
metabolitos primarios
y secundarios.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

13

11. Operacionalizacin de las variables.


Tabla 2: Variables de operaciones unitarias empleadas.
Variable

Definicin

Nivel de

Instrumentos

Influencia

medicin

de medicin

Intervalo

Termmetro

Variacin del

digital (C)

contenido de

Norma o
mtodo

La temperatura
Temperatura

es una medida

de secado en

de la energa

caliente

interna que tiene

N/A

antioxidantes.

un elemento.
La temperatura
Temperatura

es una medida

de secado en

de la energa

fro

interna que tiene

Intervalo

Termmetro

Variacin del

NTE

digital (C)

contenido de

INEN

antioxidantes.

222:

un elemento.
El tiempo es una

2014

medicin
cualitativa de
Tiempo

los

Intervalo

Reloj digital

acontecimientos

(Horas,

que sucede

minutos)

N/A

N/A

Rendimiento

NTE

de extraccin.

INEN

durante un
intervalo
establecido.
Concentraci

Es la medida

n del

cuantitativa del

solvente

grado de pureza

Razn

Alcoholmetro
(GL)

2162:99

que tiene un
solvente.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

14

Tabla 3: Variable de proceso.

VARIABLE

DEFINICIN

NIVEL DE

INSTRUMENTOS DE

MEDICIN

MEDICIN

Razn

Espectrofotmetro

Carga de

Mtodo de
DPPH

INFLUENCIA

NORMA
O MTODO

Un antioxidante
es una sustancia
Determinacin

que previene,

del contenido de

retarda o

Genesys 10 UV

antioxidantes en

Antioxidantes

contrarresta los

(517 nm)

los extractos

radicales libres
generados por el
metabolismo
celular.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016

15

CAPTULO 2: REVISIN BIBLIOGRFICA


2. Marco terico
2.1. Descripcin de la planta.
La Ocinum basilicum L. es una planta aromtica pequea de
crecimiento anual de unos 50 cm de altura, provista de tallos firmes,
ramosos y cuadrados. Caracterizada por tener flores pequeas de 8 a 10
mm, labiada, de color blanco o moradas, agrupadas en largos ramilletes
(Garca, 2006)
Se considera a esta especie originaria de Asia tropical, aunque algunos
autores afirman que es originaria de Centroamrica. Crece silvestre en
climas clidos y terrenos frtiles, muy raras veces en lugares frescos.
(GUPTA, 1995) Constituye una maleza en solares y patios de las casas
de zonas secas.
2.1.1 Taxonoma de la planta.
La Albahaca (Ocinum basilicum L.) pertenece a la familia de las
Lamiaceae, que comprende 142 especies encontradas en Ecuador, de las
cuales 47 de estas son tiles de acuerdo a las categoras mencionadas
en: La Enciclopedia de plantas tiles del Ecuador (HenrikBalslev, 2008).

16

Tabla 4: Clasificacin taxonmica de la planta.


Reino
Subreino
Divisin
Superdivisin
Clase
Subclase
Orden
Familia
Subfamilia
Genero
Especie

Plantae
Traqueobionta
Magnoliophyta
Spermatophyta
Maganoliopsida
Asteriadae
Lamiales
Lamiaceae
Nepetoideae
Ocinum
Ocinum basilicum L.

Fuente: (Alipi & Pichardo, 2009)

2.1.2. Valor nutricional.


El conocimiento de la composicin alimenticia de un producto y los
diferentes grupos en que estos se clasifican, es fundamental para un
balance nutricional apropiado (ngeles Carvajal, 2013)
En la Tabla 2. 1.2. Se muestran los valores nutricionales de la Albahaca
por parte del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos.

Tabla 5: Valor Nutricional de la Albahaca

17

Fuente: (National Nutrient Database for Standard Reference, 2000)

18

2.1.3 Usos de la planta.


En base a estudios realizados por

(Briseo Ruiz , Aguilar Garca , &

Villegas Espinoza , 2013) , presenta que la albahaca (Ocinum


basilicum L.) tiene un rendimiento de:
Tabla 6: Rendimiento en peso por hectrea de cultivo.

FRESCO

SECO

ACEITE ESENCIAL

Ton/ha

Ton/ha

Kg/ha

18-20

10

80

Fuente: (Briseo Ruiz , Aguilar Garca , & Villegas Espinoza ,


2013)
Los usos ms comunes que se le atribuyen a la Albahaca (Ocinum
basilicum L.) son:

Aditivo alimentario (hojas frescas o secas) (Veerle Van den &

Cueva, 2008)
Preparacin de Locin Repelente (aceite esencial) (OLMEDO

ROMERO , ORELLANA LPEZ, & TENAS PREZ , 2003)


En la industria farmacutica; como estimulante y antiespasmdico.
En la perfumera: aromatizante de cosmticos y elaboracin de

perfume.
Elaboracin de Jabones.
(Vega Marrero, Escandn, , Soto, & Mendoza, 2012)

2.2 Operaciones unitarias aplicadas para la extraccin de


los fenolitos de la albahaca
2.2.1. Secado.
El secado es una operacin unitaria que consiste, en la separacin fsica
del lquido contenido en un slido, sea este inorgnico u orgnico. De
acuerdo al producto que se vaya a secar, depender la humedad final y
el mtodo que se aplicar.
19

Los mtodos y procesos de secado se clasifican de diferentes maneras;


se dividen en procesos de lotes (batch) continuos (sin interrupcin).
Tambin basados en las condiciones fsicas usadas en el proceso para la
transferencia de masa y energa indica que:
1. El calor se suministra por contacto ntimo con el flujo de aire
caliente a presin atmosfrica, y el vapor de agua creado es
depurado con la razn de aire circulante.
2. En el secado al vaco, la evaporacin del agua se verifica con ms
rapidez a presiones bajas, y el calor se aade indirectamente por
contacto con una pared metlica o por radiacin.
3. En la liofilizacin, el agua se sublima directamente del material
congelado. (Geankopolis, 1998)
Para la operacin de secado se utiliza la estufa, debido a la capacidad de
carga de materia prima que ofrece, a su fcil operacin y disponibilidad.
El equipo tiene una potencia de 220 Wattios y trabaja bajo la aplicacin de
calor por radiacin.
2.2.2. Liofilizacin.
La liofilizacin es una operacin unitaria basada en la transferencia de la
masa del agua contenida en un material, mediante la sublimacin
aplicando vaco.
El proceso de liofilizacin tiene sus orgenes en el Imperio Inca, en el
altiplano andino a 4000 metros sobre el nivel del mar. All los pobladores
realizaban y an continan realizando un producto denominado Chuo,
resultado de la deshidratacin de la papa. La tcnica consiste en dejar las
papas cosechadas sobre el suelo, de manera que durante la noche se
congelen (debido a las bajas temperaturas); y durante el da por accin
del sol y el viento seco, produzcan el cambio de estado del agua
(sublimacin). (Parzanese, 2015)
Se ha desarrollado con el fin de reducir las prdidas de los compuestos
responsables del sabor y el aroma en los alimentos, los cuales se pierden
20

durante los procesos convencionales de secado. (ORREGO ALZATE ,


2008)
2.2.3. Molienda.
Se entiende por molienda la reduccin de tamao de la partcula, el
objetivo de la molienda no es solo la reduccin de tamao, sino tambin la
obtencin de un producto con dimetro y tamao definido y con una
distribucin granulomtrica determinada. (PERRY R. , 2001)
2.2.4. Destilacin
La destilacin es una operacin unitaria que se basa en la diferencias de
volatilidades (S. Foust, A. Wenzel, W.Clump, Maus, & Bryce Andersen,
2006) de una mezcla lquida binaria o multicomponente para separar el
componente con el punto de ebullicin ms bajo.
Para la obtencin del aceite esencial de albahaca se utiliz la destilacin
por arrastre de vapor en un material de laboratorio denominado
Clevenger operando con calor indirecto de una manta de calentamiento.
2.2.5. Extraccin slido lquido (Lixiviacin)
La extraccin slido lquido es un proceso fsico que consiste en obtener
la sustancia soluble (soluto) de un slido en contacto con un solvente a
una concentracin determinada.
Los principales aspectos que corresponden a esta operacin unitaria son
la seleccin del proceso y las condiciones de operacin. (PERRY R. T.,
2001)
Para la obtencin de los extractos (metanolicos y en agua acidulada) se
us el equipo soxhlet, con un acoplamiento de una manta calefactora
operando al 50% de su capacidad de calentamiento durante la extraccin.

21

2.3. Compuestos antioxidantes y mtodos de medicin de


la capacidad antioxidante.
2.3.1. Actividad antioxidante.
Los organismos aerobios en su metabolismo diario, generan una gran
cantidad de radicales libres, debido a que entre un 2% y 5% de la
reduccin del Oxgeno a Agua

para producir ATP ocurre de forma

incompleta en la mitocondria generando especies altamente oxidantes y


reactivas. (Tourio Eirin, 2009)
Segn (Calderon, 2007), un antioxidante es una sustancia que inhibe,
retarda o previene la oxidacin de un sustrato en el que est inmerso
generalmente a bajas concentraciones en relacin al sustrato.
Existen dos mecanismos de estabilizacin de radicales libres que se
muestran en la siguiente figura:
Figura 1: Mecanismo HAT y SET.

Fuente: (CORFO-Chile, 2011)


En el primer mecanismo HAT (hydrogen atom transfer) el antioxidante
primario, atrapa un radical por una donacin rpida de tomos de
hidrgeno. El segundo mecanismo SET (single electron transfer), el
antioxidante puede donar un electrn al radical (Rojano, y otros, 2008),
estabilizando a la especie reactiva pero convirtindose en un radical
libre de baja o casi nula reactividad.

22

Los antioxidantes se pueden clasificar en 2 grupos:

De acuerdo al sitio donde ejercen su accin.


Segn su origen

(Venereo Gutierrez, 2002)


En las siguientes tablas se muestra estas clasificaciones:

Tabla 2.3.1.1 Clasificacin de los antioxidantes segn el


sitio donde ejercen su accin
Intracelular

Membrana

Extracelular

Superxido

Vitamina E.

Ceruloplasmina.

Betacarotenos.
Ubiquinol-10.

Transferinas.
Lactoferinas.
Albminas.
Haptoglobinas.
Vitamina C

dismutasa.
Catalasa.
Peroxidasa.
DT-deafarasa.
GSH.
Protenas que
ligan metales.
Sistemas

cido rico

proteolticos.
Vitamina C.

Vitamina E.

FUENTE: (Venereo Gutierrez, 2002)

Tabla 2.3.1.2. Clasificacin de los antioxidantes, segn


origen.
23

ORIGEN
1.

ACCIN
Neutraliza el oxgeno singlete.
Captura radicales libres.
Captura O2.
Neutraliza perxidos.

Exgenos

Vitamina E
Neutraliza el oxgeno singlete.
Captura radicales libres
Vitamina C

de

hidroxilo.
Captura O2.
Regenera la forma oxidada de la
vitamina E.

Betacarotenos
Flavonoides,

Neutraliza el oxgeno singlete.

Licopenos.
2.
Endgenos

3. No
enzimtico
s

Enzimticos
Superxido

Cofactor.
Cobre, sodio, manganeso.

dismutasa(SDD)
Catalasa(CAT)
Glutatin

Hierro.
Selenio.

Peroxidasa(GPx)
Glutatin

Barreas fisiolgicas que enfrenta el

Coenzima Q.
cido Tioctico.

oxgeno a su paso desde el aire


hasta las clulas.
Transportadores de metales
(Transferencia y ceruloplasmina).

FUENTE: (Venereo Gutierrez, 2002)


2.3.2. Compuestos fenlicos.
Son un grupo de sustancias bio-sintetizadas por las plantas, estos
incluyen a los fenoles simples, polifenoles, flavonoides, taninos, entre
otros. (Dueas Ricaurte, 2009).

24

Los fenoles son compuestos orgnicos, no nitrogenados, de estructura


aromtica, con uno o varios grupos hidroxilo, libres o formando parte de
otra funcin: ter, ster, glucsido. (Naveda Gonzlez, 2010)
En la siguiente tabla se muestran los principales compuestos fenlicos
encontrados en plantas:
Tabla 1.6. Principales clases de compuestos fenlicos en plantas
Atmos de

Esqueleto

Carbono
6
6
7
8
8

base
C6
C6
C6-C1
C6-C2
C6-C2

9
9
9
10
13
14
14
15
15

C6-C3
C6-C3
C6-C3
C6-C4
C6-C1-C6
C6-C2-C6
C6-C2-C6
C6-C3-C6
C6-C3-C6

Fenoles simples.
Benzoquinonas.
cidos fenlicos.
Acetofenonas.
cidos fenilacticos.
cidos
hidroxicinmicos.
Fenilpropenos.
Cumarinas.
Naftoquinonas.
Xantonas.
Estibenos.
Antraquinonas.
Flavonoides.
Isoflavonoides.

18

(C6-C3)2

Lignanos.

30
N
N
N

(C6-C3-C6)2
(C6-C3)n
(C6)n
(C6-C3-C6)n

Biflavonoides.
Lignina.
Melanina.
Taninos condensados.

Clase

FUENTE: (Braca, 2008)


La actividad biolgica de los compuestos fenlicos es generalmente
antioxidante, antiinflamatoria, antibacteriana, antiviral y antitumoral, entre
otras. (Braca, 2008)

25

2.3.3. Mtodo DPPH (2,2-Difeni-1-picrilhidrazilo) para la medicin de


la capacidad antioxidante.
El mtodo de DPPH (Brand-Williams, Cuvelier, & Berset, 1995) ,
consiste en la decoloracin de azul-violeta a amarillo claro del radical in
vitro en contacto directo de un sustrato con

presencia de sustancias

antioxidantes.
Esto se debe a que existe una reaccin (en algunos casos agresiva) de
estabilizacin del electrn desapareado del DPPH. La absorbancia ser
medida espectofometricamente a 517 nanmetros (nm).
Posteriormente, se usarn los valores de absorbancia para determinar el
% de captacin de radicales libres (DPPH), mediante la siguiente formula:
Capacidad Antioxidante = [1 (A2 A3) / A1] x 100
% Captacin de Radical Libre.
Clculo de la capacidad antioxidante:
A1= Absorbancia del patrn de referencia
A2= Absorbancia de la muestra
A3= Absorbancia del blanco de muestra
(Ramos Llica, Castaeda,Castaeda, & Ibaez Vsquez, 2008)

2.4.

Mtodos

utilizados

en

estudios

realizados

en

lixiviacin, maceracin y extraccin de antioxidantes en


plantas.
2.4.1 Obtencin de Extracto de Ruda con alto contenido de
polifenoles.
En este trabajo se realiz ensayos a partir de las hojas, flores y tallos de
la Ruda (Ruta graveolens), con una relacin slido: lquido, 1:8 y 1:10
usando como solvente etanol (0%,48%,96%) y tiempo de maceracin de
26

24 a 48 horas para la obtencin de polifenoles por este medio de


extraccin.
Se realiz un diseo factorial mixto experimental con los extractos de la
ruda, que se muestran a continuacin.

TABLA 1.7 Cantidad de polifenoles extrados con cada


tratamiento experimental

FUENTE: (Naveda Gonzlez, 2010)

27

Se lleg a la conclusin que el extracto con mayor capacidad antioxidante


fue el etanlico al 50%, obtenindose una capacidad antioxidante de 5788
mol eq. Trolox / 100 g de muestra, la misma que representa el 70,60%
de la actividad antioxidante total cuantificada en la planta seca. (Naveda
Gonzlez, 2010)
2.4.2. Cuantificacin de los componentes fenlicos y actividad
antioxidante de Pterodon emarginatus Vogel semillas.
En (Dutra, Leite, & Barbosa, 2008) se llev a cabo la extraccin de las
semillas

de Pterodon emarginatus vogel, usando 30 gramos de

semillas (previamente trituradas)

con distintos solventes: Metanol,

butanol, hexano y acetato de etilo; operando en el Soxhlet como el equipo


para la extraccin. La eliminacin del Solvente de cada uno de los
extractos se llev a cabo en un rotavapor, obtenindose con ello el aceite
de la semilla de sucupira blanca (Pterodon emarginatus vogel).
Al igual, se obtuvo despus de 2 horas el aceite esencial por
hidrodestilacin a partir de 30 gramos de semilla triturada usando el
Clevenger. El aceite esencial fue almacenado a 4C hasta cuando se lo
necesite para su anlisis respectivo.
En este estudio se midi la capacidad antioxidante del aceite esencial y
de los extractos provenientes del Soxhlet, usando como alcuota 0,5 ml
de muestra a una solucin etanlica de 1,5 ml del radical in vitro DPPH
0,05 mM diaria (2,2-difenil-1-picrihidrazilo).
2.4.5. Actividad antioxidante y enzimtica de albahaca nufar
(Ocimum basilicum L.) almacenada en refrigeracin.
La presente investigacin (Lopez Blancas, y otros, 2014) fue realizada
en la ciudad de Texcoco Mxico, con la finalidad de evaluar el efecto de
la actividad antioxidante y enzimtica de la Albahaca (Ocimum basilicum
l.) en almacenamiento frigorfico a 5C y 10C; as como su actividad a
temperatura ambiente (20C) respectivamente.

28

Durante el tiempo de almacenamiento (18 das) se realiz cada 48 horas


la evaluacin de la capacidad antioxidante (CA), fenoles totales (FET) y la
actividad enzimtica de las enzimas: catalasa, superxido dismutasa,
peroxidasa y polifenol oxidasa.
Se obtuvo el extracto de 25 gramos (g) de hojas congeladas (sin pecolo)
ms 50 mililitros (ml) de acetona en congelacin (-15C) mediante la
homogenizacin en una licuadora durante 25 segundos (s) , con una
posterior filtracin al vaco. Este procedimiento se repiti 9 veces.
El filtrado (EAc) de este proceso se llev a refrigeracin (4+-2C) y el
polvo de acetona (PAc) generado, se dej secar al ambiente durante 15
minutos, se pes y se guard en un ultra congelador. Ambas muestras
fueron usadas en los anlisis de este estudio.
La FET se cuantifico por el mtodo de Folin y Ciolcalteu usando como
muestra 0,1 ml de EAc, como lo indica el mtodo hasta obtener la lectura
a 760 nanmetros (nm), reportando los resultados en mg/kg mediante la
curva patrn de cido tnico. En el caso de CA se determin de acuerdo
con el mtodo ABTS [2,2-azinobis (3-etilbenzotiazolin-6-cido sulfnico)],
usando 0,1 ml de una solucin de PAc (0,05 g de PAc en 5 ml de etanol,
homogenizados con 24 horas de reposo) y as siguiendo el mtodo, se
ley la absorbancia a 734 nm.
En la siguiente figura se muestra la variacin de la CA y FET durante el
tiempo y temperatura de almacenamiento de las hojas de Albahaca
(Ocimum basilicum L.)

29

Figura 2: (Lopez Blancas, y otros, 2014)


En los resultados de este estudio, se determin que la mayor cantidad de
FET est en el intervalo de 4 a 10 das de almacenamiento en fro
(estadsticamente difieren poco entre ellos) siendo este 4,5 mg/Kg/ PFr;
no obstante la muestra testigo almacenada a temperatura ambiente tuvo
un valor de 4,9 mg/Kg/ PFr a los 12 das.
Se observ un incremento de la CA en el lapso de 2 a 8 das en todas
las muestras. Entre los 8 y 10 das despus de almacenamiento (DDA) a
5C, se encontr la mayor

CA siendo 79,9 mg VCEAC/g/PFr

(VCEAC=equivalente de cido ascrbico), as tambin a los 12 DDA


existi un aumento en la CA (87,4 mg VCEAC/g/ PFr) pero esta vez a la
temperatura de almacenamiento de 20C.
Al trmino de la investigacin sugieren almacenar la albahaca a 10C
para disminuir la activacin de las enzimas presentes en la planta, que
afecta considerablemente a los FET y CA.

30

CAPITULO 3 METODOLOGA Y DESARROLLO


EXPERIMENTAL
3.1. Metodologa de la investigacin.
3.1.1. Metodologa utilizada en el proyecto.

Investigativo: El objetivo es la medicin de la capacidad antioxidante de


los metabolitos primarios y secundarios (entre ellos polifenoles) de los
sustratos de las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L) obtenidos por
lixiviacin y destilacin.

Experimental: Aplicacin de mtodos y tcnicas estandarizados para la


medicin de antioxidantes, as como para la obtencin de sustratos por
las operaciones unitarias mencionadas.

Obtencin de una especia alimentaria en presentacin de frasco, al igual


que datos para la experimentacin en alimentos.
3.1.2. Mtodos y Tcnicas.
La experimentacin se realiz en el Laboratorio de Microbiologa y
Bioqumica de la Facultad de Ingeniera Qumica de la Universidad Estatal
de Guayaquil.

31

El aceite de las hojas de albahaca (Ocinum basilicum L.) se obtuvo por


lixiviacin utilizando distintos solventes (metanol al 99.8% y agua
acidulada 5%) mediante un sistema armado a nivel de laboratorio de
extraccin slido-lquido usando el tubo extractor Soxhlet.

32

Antes de la lixiviacin se aplic operaciones preliminares como: secado y


molienda, necesarias para un mejor rendimiento de la extraccin. Tambin
se obtuvo el aceite esencial de las hojas de albahaca (Ocinum basilicum
L.) por hidrodestilacin, usando el tubo destilador Clevenger en el
sistema de destilacin por arrastre de vapor armado a escala de
laboratorio, con una carga mxima de 250 g de materia prima.
Posterior a la extraccin de los aceites (esencial y no esencial), se midi
las capacidades inhibitorias de radicales libres y ensayos fotoqumicos
correspondientes.
3.1.2. Normas.
Norma NTE INEN 2532:2010 - Especias y Condimentos. Requisitos.
3.2 Calidad de los productos
Obtenido el polvo de albahaca se procedi a realizar los respectivos
anlisis fsico qumicos y microbiolgicos

con el fin de evaluar la

inocuidad del producto final.


3.2.1 Anlisis Fsico - Qumico
Realizados en el Instituto de Investigaciones Tecnolgicas de la
Universidad

de

Guayaquil

donde

se

consider

los

siguientes

parmetros:

Humedad (Evaporacin)
Cenizas (Calcinacin)

3.2.2 Anlisis Microbiolgico


Elaborados en el Instituto de Investigaciones Tecnolgicas de la
Universidad de Guayaquil y Laboratorios AVVE donde se tomaron en
consideracin los siguientes microrganismos:
33

Escherichia Coli (Mtodo Petrifilm 3M)


Levaduras y Mohos (Mtodo Petrifilm 3M)
Aerobios Mesfilos (Mtodo Petrifilm 3M)
Coliformes (Mtodo Petrifilm 3M)
Salmonella (Deteccin molecular AOAC 031208)

Los resultados de los anlisis se encuentran en el Anexo G.


3.3. Parmetros de acuerdo a las variables
En base a la experimentacin realizada, se determin los parmetros
utilizados para controlar los rendimientos de extraccin de la Albahaca
(Ocinum basilicum L.), as como para la obtencin de la especia
alimentaria son:

Humedad del polvo de Albahaca.


Control de la temperatura de operacin(Secado, Lixiviacin y Destilacin)
Control del tiempo de operacin.
Granulometra de la especia alimentaria.
3.4 Experimentacin (Diseo)
La albahaca seleccionada del gnero Ocinum, se us para la obtencin
de sustratos (extractos aceitosos provenientes de las operaciones
unitarias de lixiviacin y destilacin), ensayos fotoqumicos, medicin de
antioxidantes y elaboracin de una especia alimentaria acorde a la NTE
INEN 2532:2010.
3.4.1. Equipos y Materiales.
Los materiales, equipos, sistemas y sustancias

utilizados durante las

distintas etapas de experimentacin de obtencin de los sustratos y la


especia alimentaria se mostrarn a continuacin:

34

Tabla 3.1. Equipos y sistemas usados para la obtencin de los


sustratos de Albahaca (Ocinum basilicum L.) (1)
Operacin o

Equipos,

mtodo

sistemas

aplicado.

utilizados.

Secado por

Estufa.

calor.
Secado por

Refrigeradora (2)

enfriamiento.
Molienda.

Molino de Disco

Lixiviacin.

Equipo de
Extraccin slidoLquido(3)

Destilacin.

Rotavapor.
Sistema de
Hidrodestilacin(4)

Medicin de

Espectrofotmetro

DPPH(5)

Genesys 10.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


(1)

Se utiliz las hojas de albahaca en buen estado(mnima o nada presencia de enfermedad, plaga o deterioro fsico-qumico)

(2)

Se us este equipo, debido a que no exista la facilidad de un liofilizador, no obstante cumpli con las expectativas de secado.

(3)

Es un sistema armado en laboratorio que consta de los siguientes materiales: Tubo refrigerante, baln de calentamiento, Tubo extractor Soxhlet.

(4)

Es un sistema armado en laboratorio que consta de los siguientes materiales: Tubo refrigerante, baln de calentamiento, Tubo destilador Clevenger.

(5)

Se utiliz los sustratos de albahaca obtenidos por lixiviacin y destilacin.

35

Tabla 3.2. Materiales utilizados durante la experimentacin.


Materiales
Cubeta de

Espectrofotmetro
Matraz Aforado.
Frasco de color mbar.
Gradilla.
Tubos de ensayo.
Vaso de precipitacin
Pipetas: automticas, graduadas y

aforadas.
Embudo de vidrio.
Soporte universal.
Aro metlico.
Balanza digital.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Tabla

3.3.

Reactivos

sustancias

utilizados

durante

la

experimentacin.
Reactivos y sustancias
Metanol (99,8%)
Agua Acidulada (5%)
Agua destilada.
Agua potable.
Radical In vitro DPPH
Agua Destilada.
Reactivo de Fehling A y B.
Cloroformo.
Anhdrido Actico.
cido Sulfrico.
cido Sulfrico.
Reactivo de Dragendorff.
Tricloruro Frrico al 5%
36

Solucin Salina (0,9%).


Cinta de Magnesio
Alcohol Amlico.
Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

3.5. Ingeniera de Procesos


En la obtencin de sustratos para la medicin de antioxidantes y la
elaboracin de la especia alimentaria, se describen las siguientes etapas:

Operaciones preliminares.
Operaciones durante el proceso.
Operaciones finales.

3.5.1. Operaciones Preliminares.


Son procesos fsicos aplicados para la obtencin del polvo de Albahaca
(Ocinum basilicum L.) necesarios para la obtencin de la especia
alimentaria y la medicin de antioxidantes de los sustratos de esta planta.
3.5.1.1. Seleccin de la materia prima.
La materia prima escogida, fue comprada en los mercados locales de la
urbe

(Mercado

10

de Agosto

Mercado

de

Monte

Bello)

consecuentemente se procedi a la seleccin de las fracciones que se


usaran de la planta. Solo se us las hojas en buen estado (mnima o
nada presencia de enfermedad, plaga o deterioro fsico-qumico) para
evitar problemas de contaminacin.
3.5.1.2. Lavado.
Se utiliz abundante agua para asegurar un lavado profundo y as evitar
la presencia de microorganismos no deseados Las hojas escogidas se en
la materia prima seleccionada.
3.5.1.3. Secado.
Este proceso fsico de prdida de humedad es fundamental para la
obtencin de la especia alimentaria y los extractos por lixiviacin.

37

El secado es un proceso en el cual el producto pierde humedad y esto se


lo logra manteniendo a una temperatura constante de 50 C la estufa
durante 28 horas continuas. Paralelamente otra muestra se la llev al
secado mediante fro a una temperatura constante de 5,5C para extraerle
la humedad respectiva.
3.5.1.3. Molienda.
Esta operacin unitaria se aplic para mejorar los rendimientos por
lixiviacin y la apariencia de la especia alimentaria.
3.5.2. Operaciones durante el proceso.
3.5.2.1. Destilacin.
La aplicacin de esta operacin unitaria tuvo como resultado la
separacin de los componentes voltiles (aceite esencial) de la mezcla
heterognea agua-albahaca (Ocinum basilicum L.), sustrato que se us
en la determinacin de la capacidad antioxidante de esta planta. A
diferencia de la lixiviacin, en esta operacin unitaria no se requiere que
la materia prima a destilar est libre de humedad, por tanto dentro de las
operaciones preliminares para este proceso solo se tomar en cuenta los
apartados 3.5.1.1 y 3.5.1.2.
La

hidrodestilacin

consista

en

usar

una

materia

prima

con

caractersticas aromticas (plantas, frutas y semillas) en contacto con un


solvente (generalmente agua) a su temperatura de ebullicin. En el caso
de la albahaca (Ocinum basilicum L.) el tiempo de operacin sera
extenso (4-5 horas) y se terminar cuando la mayor parte del solvente se
haya evaporado (1).
3.5.2.2. Lixiviacin.
Para la obtencin de los extractos (metanlicos y acuosos), es necesario
aplicar el proceso fsico de lixiviacin.
El procedimiento de extraccin consiste en calentar el solvente (metanol
99,8% y agua acidulada 5%) hasta su punto de ebullicin mediante una
manta de calentamiento (2). Los vapores del solvente se condensan debido
38

al sistema de enfriamiento

incorporado,

a medida que avanza la

operacin existir un contacto ntimo entre el solvente condensado y el


polvo de albahaca cargado en el extractor (3).
Conforme pasa el tiempo de operacin (2-3 horas), empezar a
segregarse un extracto que se dirigir al baln de calentamiento como
reflujo del proceso (4). La operacin se da por terminada cuando el reflujo
tiene la coloracin del solvente

Para el clculo del rendimiento de extraccin se us el contenido de


sustrato obtenido (aceite no esencial) con relacin a la carga de la materia
prima en el extractor.
3.5.2.3. Filtracin.
Esta operacin unitaria se aplic para la remocin de los slidos
suspendidos que puedan estar inmersos en el extracto lixiviado, as como
cidos grasos y ceras; los cuales intervienen en las caractersticas fsicas
del sustrato.
3.5.2.4. Recuperacin del solvente.
El solvente inmerso en el extracto lixiviado se recuper utilizando un
rotavapor que opera bajo las siguientes condiciones

(1) Se us una manta de calentamiento al 60% de su capacidad debido a que el solvente usado era agua, luego se lo bajo a 50% para evitar arrastre de
materia prima.
(2) Para evitar problemas de reflujo espontneos (innecesarios), solo para la etapa inicial se moder la emisin de calor por parte de la manta a un 60%
para agua acidulada y un 50% para metanol, posterior a ello se baj a 50% y 40% respectivamente.
(3) En esta parte del proceso es donde existe la extraccin de los metabolitos primarios y secundarios de la albahaca (Ocinum
Basilicum L.), notndose cualitativamente en la coloracin del reflujo la presencia de dichos componentes.
(4) De acuerdo a la cantidad de materia prima y solvente depender las etapas de extraccin. Cada reflujo formado significar una etapa de extraccin.

Temperatura de operacin : 68C y 120C


Vaco de bomba: 0,4 bar y 0,5 bar
Revoluciones: 40 RPM.

El solvente recuperado sirve para medir las prdidas durante el proceso,


mientras el sustrato obtenido en el baln de carga de alimentacin del
rotavapor, se us para el anlisis fotoqumico, medicin de la capacidad
antioxidante y rendimiento de extraccin slido-lquido.

39

3.5.2.4. Maceracin.
Es una operacin de extraccin slido-lquida, que opera bajo el rgimen
batch discontinuo. A diferencia de la lixiviacin, en este proceso no se
aplica calor para la obtencin de los extractos, solamente se necesita que
el solvente interacte con la materia prima en un tiempo establecido (24,
48,72 horas).
Para obtener el extracto, se prepar la muestra por maceracin con
hojas frescas seleccionadas y metanol puro (99.8%) en proporcin 1:10.
La finalidad es determinar cuantitativamente la variacin de antioxidantes
existentes entre unas muestras secas y frescas.
3.5.3. Operaciones finales.
3.5.3.1 Medicin de la capacidad antioxidante.
El mtodo de DPPH (2,2-Difeni-1-picrilhidrazilo) determina el porcentaje
de inhibicin existente del radical in vitro con relacin a una muestra
preparada de un sustrato seleccionado.
Dependiendo de la cantidad de antioxidantes que tenga la muestra y de
su agresividad (5) ante el radical in vitro, ser establecida la cantidad de
microlitros (l) usados para la experimentacin y el porcentaje de
inhibicin a un tiempo determinado. Para la obtencin de los datos de
porcentaje inhibicin se us el espectrofotmetro Genesys 10.

(5) Se denomina agresividad a la capacidad que tiene una cantidad de microlitros (l) de la muestra preparada de estabilizar rpidamente el radical in
vitro, notndose cualitativamente pero generando error en el porcentaje de inhibicin (%).

Antes del uso de este equipo se debe calibrar y hacer un test para la
curva estndar, la cual se muestra en la Tabla E.10.
Despus de la calibracin a 517 nanmetros (nm), se procedi a cargar 2
ml

de

DPPH

en

una

cubeta

espectrofotomtrica

al

equipo

posteriormente se adicion las alcuotas de las muestras preparadas

(6)

(15 y 25 l respectivamente), rpidamente se cerr la cubierta del equipo


(7)

para su medicin (8).

40

3.5.3.2 Tamizaje fotoqumico.


Es una serie de ensayos que permite determinar de manera cualitativa
los componentes de un sustrato determinado.
En el presente estudio basados en (Miranda Martnez, 2012) se realiz el
tamizaje fotoqumico a los sustratos con mayor capacidad antioxidante.
Dentro de los ensayos se encuentran los siguientes:
Ensayo de Fehling: Compuestos Reductores.
Ensayo de Liebermann-Burchard: Triterpenos y esteroides.
Ensayo de espuma: Saponinas.
Ensayo de Resinas.
Ensayo de Dragendorff: Alcaloides.
Ensayo de Cloruro Frrico: Compuestos Fenlicos.
Ensayo de Shinoda: Flavonoides.
Estos ensayos fueron realizados debido a la disponibilidad de reactivos, el
procedimiento del tamizaje fitoqumico se encontrar en el Anexo C.
3.5.3.3. Envasado de especia alimentaria:
Es un proceso sencillo de llenado, de envase de vidrio con Albahaca
(Ocinum basilicum L.) deshidratada y molida. Posterior a ello se realiza
el etiquetado correspondiente.
(6) Las muestras preparadas, son la mezcla de 4 mililitros (ml) de sustrato (aceite no esencial) con 4 mililitros (ml) de metanol puro. No obstante el aceite
esencial se us directo.
(7) Para esta medicin se requiere de completa oscuridad para que el haz de luz emanado por el equipo penetre la cubeta espectofomtrica y pueda
leerse la actividad antioxidante.
(8) El equipo transferir los resultados a su software en la computadora, estos datos se usaron para obtener mediante Excel, las curvas y el porcentaje
de inhibicin de cada muestra durante la operacin.

3.5.4. Diagrama de flujo de procesos.


GRFICO 3.1 DIAGRAMA DE PROCESO PARA LA OBTENCIN DEL
SUSTRATO

DE

ALBAHACA

(Ocinum

basilicum

L.)

POR

DESTILACIN.

41

GRFICO 3.2 DIAGRAMA DE PROCESO PARA LA OBTENCIN DEL


SUSTRATO DE ALBAHACA (Ocinum basilicum L.) POR LIXIVIACIN.

42

GRFICO 3.1 DIAGRAMA DE PROCESO PARA LA OBTENCIN DE


UNA ESPECIA ALIMENTARIA A PARTIR DE LAS HOJAS DE
ALBAHACA (Ocinum basilicum L.).

43

44

3.5.5. Diagrama por equipo de procesos.


El layout para los distintos procesos mencionados en los diagramas de
flujo, se encontrar en el Anexo F.

4. Anlisis y discusin de los resultados.


4.1 Balance de materia.
La nomenclatura usada en este apartado se encuentra en el Anexo A.
4.1.1. Balance de masa de seleccin de materia prima.
La materia prima adquirida se clasific, teniendo como prioridad, hojas
frescas y en buen estado para su posterior uso correspondiente (sustratos
y especia alimentaria).
En las primeras experimentaciones se utiliz una pequea cantidad de
materia prima proveniente del Mercado 10 de Agosto para la
obtencin de los extractos. Para la elaboracin de la especia alimentaria y
de sus respectivos anlisis, la materia prima se obtuvo en el Mercado de
Monte Bello. El balance es el siguiente:
E= S
Balance de Materia de 1109 g de Albahaca fresca.
E= S+A
1109 g MP = 373,6 g H + 344,4 T + 391 g R
1109 g E = 1109 g S
Balance de Materia de 291,8 g de Albahaca fresca
E= S+A
291,8 g MP = 112,8 g H + 102,13 T + 76,87 g R
291,8 g E = 291,8 g S
Los dems clculos sern tabulados directamente a continuacin:

45

Tabla 4.1 Balance de masa de seleccin de materia prima

SELECCIN DE
MATERIA PRIMA

Secado por calor

Secado por
enfriamiento

Destilacin

ENTRADA

SALIDA

MP

TE

Ts

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

1109

1109

374

291,8

292

113 102,1

288

288

116

100

72

288

113

113

45

28

40

113

600

600

245

139

216

600

372

372

142

100

130

372

563

563

225

135

203

563

344

391

1109

76,87 291,8

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.2. Balance de masa de lavado de materia prima.
En este proceso, solo se realiz una inmersin de la materia prima
seleccionada en agua con un recipiente trasparente de capacidad de
cuatro litros. Para las primeras experimentaciones las prdidas eran
mnimas; por ende este clculo solo reflejar las prdidas del lavado para
la especia alimentaria, mas no para los extractos.
Balance de Materia de 2000 g de Albahaca fresca.

46

E= S+A
2003 g MP + 4000 g W= 3500 g ML + 2503 g L
6003 g E = 6003 g
4.1.3. Balance de materia de secado.
El proceso de secado se llev a cabo con algunas muestras y a distintas
temperaturas. El balance es el siguiente:
E= S
A continuacin se mostrar dos clculos de secado (por calor y por
enfriamiento), los dems sern tabulados directamente.
Balance de secado (por calor) de 112,8 g de materia prima.
E= S
112,8 g MW = 13,8 g MS+ 99 P
112,8 g E = 112,8 g S
Balance de secado (por enfriamiento) de 116 g de materia prima. (9)
E= S
116 g MW = 13 g MS+ 103 P
116 g E = 116 g S
Tabla 4.2 Balance de materia de secado.
ENTRADA
SECADO

Secado por calor

Secado por

SALIDA

MP

TE

MS

Ts

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

112,8

112,8

13,8

99

112,8

232,2

232,2

34,5

198

232,2

2000

2000

240 1760

2000

116

116

13

103

116

47

enfriamiento

245

245

30

215

245

45

45

7,5

37,5

45

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.4. Balance de materia de molienda.
En esta etapa se aumenta el rea de contacto de las muestras secas y se
verifica las prdidas del proceso de esta operacin. El balance es el
siguiente:
E= S
El balance a continuacin mostrar las prdidas (acumulacin) que existe
por esta operacin unitaria.
(9) Para el secado por enfriamiento se us dos neveras (marcas: DAEWOO) las cuales utilizan el refrigerante R-134 A. Las dos primeras muestras
fueron secadas por la nevera marca DAEWOO, no obstante la primera muestra tuvo una congelacin previa (9 das) a una temperatura de -16,5 C.

Balance de molienda de 13,8 g de hojas secadas por calor.


E= S
13,8 g MS = 13,5g PS+ 0,3g A
13,8 g E = 13,8 g S
Los dems valores se vern en la siguiente tabla:
Tabla 4.3 Balance de materia de molienda.
ENTRADA
MOLIENDA

Secado por calor

Secado por
enfriamiento

SALIDA

MS

TE

MP

Ts

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

13,8 13,8

13,5

0,3

13,8

34,5 34,5

34

0,5

34,5

240

240

238

240

13

13

12,5

0,5

13

30

30

29,7

0,3

30

7,5

7,5

7,2

0,3

7,5

48

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.5. Balance de materia de la extraccin slido lquido.
Para la obtencin del sustrato de albahaca se us diferentes cantidades
de muestras secas (entre 8 a 13 gramos) con 200 ml de solvente (metanol
99,8% y agua acidulada 5%) en cada batch. El balance es el siguiente:
E= S+A+P
El primer paso para este balance es llevar a gramos los 200 ml del
solvente mediante un factor de conversin. Para el caso del agua ser
200 g y para el metanol 158,4 g (D= 0,792 g/ml).
Debido a que se realizaron algunas extracciones, solo se explicar el
balance de dos de ellos y los dems sern tabulados directamente.
Balance de Materia de 13,5 g de Albahaca en polvo + 200 ml de metanol.

E= S+A+P
13,5 g PS + 158,4 g D= 9,9 g B + 0,4 A + 26 g D + 1,8 g P + 133,8 X
171,9 g E = 171,9 g S
Balance de Materia de 8,9 g de Albahaca en polvo + 200 ml de agua
acidulada.
E= S+A+P
8,9 g MP + 200 g D= 5,6 g B + 1 g A + 48 g D + 4 g P + 150,3 X
208,9 g E = 208,9 g S

49

Tabla 4.4. Balance de Materia de Lixiviacin con diferentes


muestras secas (10).

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.6. Balance de materia de filtracin.
La operacin de filtracin se realiz previo a la recuperacin del solvente
y obtencin del sustrato de albahaca (Ocinum basilicum L.). El balance
utilizar la misma nomenclatura que en la anterior operacin:
E= S+A+P
A continuacin se mostrarn los balances de filtracin de dos muestras,
los dems sern tabulados directamente.
Balance de Materia de 133,8 g de extracto Metanlico.
(10) La abreviatura Me., y Ac, corresponden a los solventes: metanol y agua acidulada respectivamente.

E= S+A+P
133,8 g X = 1 g A + 3,6 g P + 129,2 F
132,8 g = 132,8 g
Balance de Materia de 150,3 g de extracto acuoso (agua acidulada 5%).
E= S+A+P

50

150,3 g X = 0,1 g A + 1,6 g P + 148,6 F


150,3 g = 150,3 g
Tabla 4.5. Balance de Materia de filtracin con diferentes extractos.
ENTRADA
EXTRACTOS A
FILTRAR

SALIDA

TE

Ts

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

133,8

133,8

3,6

129,2

133,8

133,2

133,2

0,5

9,6

123,1

133,2

150,3

150,3

0,1

148,2

150,3

Muestras secadas por

135,3

135,3

0,3

1,5

133,5

135,3

enfriamiento

165,7

165,7

0,2

2,1

163,4

165,7

Muestras secadas por


calor

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.7. Balance de materia de recuperacin de solvente.
En esta operacin se obtendr el sustrato de albahaca (Ocinum
basilicum L.) y se recuperar parte del solvente usado durante el
proceso de extraccin. El balance es el siguiente:
E= S+A+P
A continuacin se mostrar los balances de recuperacin de solvente de
dos muestras, los dems sern tabulados directamente.
Balance de Materia de 129,2 g de extracto metanlico filtrado.
E= S+A+P+X
129,2 g X = 1,2 g A + 1 g P + 126 g R + 1 g X
129,2 g = 129,2 g
Balance de Materia de 148,2 g de extracto acuoso (agua acidulada 5%)
filtrado.
E= S+A+P+ X
148,2 g X = 1,2 g A + 17 g P + 129 g S + 1 g X
51

148,2 g = 148,2 g
Tabla 4.6. Balance de Materia de recuperacin de solvente.
ENTRADA
RECUPERACIN
DE SOLVENTE

Muestras secadas
por Calor
Muestras secadas
por enfriamiento

SALIDA

TE

TS

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

129,2 129,2

1,2

126

129,2

123,1 123,1

0,4

21

100

1,7

123,1

148,2 148,2

1,2

17

129

148,2

133,5 133,5

0,5

125

133,5

163,4 163,4

0,5

16,9

145

163,4

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.1.8. Balance de materia de destilacin por arrastre de vapor.
Para la obtencin del aceite esencial de albahaca se us varios pesos de
muestras frescas (entre 140 a 250 gramos) con 600 ml de agua en cada
batch. El balance es el siguiente:
E= S+A+P
Se usar la misma nomenclatura aplicada en la operacin unitaria de
extraccin - lquido.
Balance de Muestra #1
MP + D = B + D + X + A (11)
142 g MP + 600 g D = 141,27g B + 400 g D + 0,73 g X + 200 g A
742 g E= 742 g S

(11) En este caso particular, la acumulacin se tratar de la cantidad de agua en mililitros que se queda retenida en el baln por cuestiones de seguridad
(evitar rupturas del baln).

Balance de Muestra #2
MP + D = B + D + X (12) + A

52

225 g MP + 600 g D = 223,87 g B + 400 g D + 1,13 g X + 200 g A


825 g E= 825 g S
4.1.9. Balance de materia del envasado de la especia alimentaria.
La especia alimentaria fue envasada en frasco de 35 g cada una. Para la
obtencin de 5 frascos se presenta el siguiente balance:
15 g Albahaca seca
5 frascos=75 g de Albahaca seca
1 frasco de especia
Esta es la cantidad terica necesaria de Albahaca (Ocinum basilicum L.)
para el llenado de los seis frascos de la especia; no obstante en la
prctica existe mermas en el proceso de envasado, por tanto se aument
un 5% de materia seca por dichas prdidas.
4.2 Balance de energa.
En el Anexo B se encontrar la nomenclatura utilizada en este apartado.
4.2.1. Balance de energa de secado.
El calor removido de las hojas de albahaca (Ocinum basilicum L.), es el
calor latente. La frmula es la siguiente:
Q=m.

vapor

Debido a que existen algunas muestras, solo se mostrarn un balance de


energa:
Balance de energa del secado de 112,8 g de materia prima (99 g de agua
evaporada al final del proceso).
KJ
1 mol
mol
Q=99 g H 2O40,656
=223,608 KJ
18 g H 2 O
En este caso el tiempo de secado fue de 25 horas y 30 minutos lo que
equivale a 91. 800 segundos, con lo cual se puede obtener la energa en
funcin del tiempo (potencia calorfica).

53

(12) Para la medicin del peso del aceite esencial (sustrato de albahaca) se tendr que pesar previamente el frasco contenedor y por diferencia de peso
se obtendr la cantidad destilada del aceite esencial de albahaca (Ocinum basilicum L.)

P=

Calor (KJ )
223,608 KJ
Q=
=2,44103 Kw
Tiempo( s)
91800 s

Tabla 4.7. Balance de Energa de Secado (13).

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.2.2. Balance de energa del proceso de extraccin slido - lquido.
Debido a que existen algunas muestras, solo se mostrar un balance de
energa:
Ecuacin para el balance de energa del solvente en el baln de
calentamiento.
Q manta=Q solvente ( sensible +latente ) +Q baln+Qp conduccin y conveccin+Q p radiacin
En el Anexo D se encontrarn las respectivas capacidades calorficas de
este apartado al igual que clculos para las curvas de secado.
Este balance de energa mostrar a continuacin la cantidad de energa
utilizada y disipada, al momento de utilizar metanol como solvente con un
40% de la capacidad de calefaccin de la manta

; en un tiempo de

(14)

operacin de una hora y media.


Q manta=Mbcp T + Mscp T + Mvv +0,75 Q manta

(13) La primera muestra secada por enfriamiento tuvo un proceso de congelacin durante 9 das a la temperatura de -16,5C, el resto de das se trabaj a
5C para la sublimacin del agua congelada en la superficie. Las dems muestras por enfriamiento eliminaron su contenido de agua por evaporacin
(14) Al usar una manta calefactora, se entiende que el sistema utilizado es un sistema abierto; en el cual existen prdidas de calor por conveccin
conduccin y radiacin, disipndose en el ambiente durante la operacin.

54

300 watts

( Js )0,405400 s=108 g0,8507 gJ C (64,729) C +158,4 g2,5216 gJ C ( 64,7

J
5
648000 J =3279,95892 J + 14259,34541J + Mv1104 + 4,86 e J
g
6,48 e5 J=503538,3454 J + Mv1104

J
g

6,48 e5 J503538,3454 J =Mv1104

144461,6546 J =Mv1104

J
g

J
g

144461,6546 J
=Mv
J
1104
g
130,8529 g=Mv

En la siguiente tabla se resume los balances energticos de lixiviacin


Tabla

4.7. Balance de Energa en el baln de Extraccin slido-

lquido.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


A continuacin, se muestra el balance de energa del condensador del
sistema de extraccin slido lquido; cuando se usa el metanol como
solvente, con el mismo tiempo de operacin del anterior clculo.
55

Ecuacin para el balance de energa del sistema de enfriamiento:


Q g por el sistema de enfriamiento =Qp por el vapor del solvente

MrCp T Qr=Mcv
247,42 kg4,187

KJ
KJ
( 3029,5 ) C=0,13085291104
+Qr
kg C
Kg

517,97377 KJ144,4616 KJ=Qr

373,51217 KJ=Qr
En la siguiente tabla se muestra el resumen de los balances de energa
del condensador del Lixiviador.
Tabla 4.8. Balance de Energa en el Condensador de Lixiviador.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.2.3. Balance de energa del proceso de destilacin por arrastre de
vapor

Ecuacin para el balance de energa del solvente en el baln de


calentamiento.
Q manta=Q solvente ( sensible +latente ) +Q baln+Qp conduccin y conveccin+Q p radiacin

56

En este clculo, se muestra el balance de energa del baln de


calentamiento a un tiempo de operacin de 3 horas con un 50% de la
capacidad de calefaccin de la manta.
300 watts

( Js )0,5010800 s=350 g0,8507 gJ C (10029) C

+600 g4,187

J
J
( 10029 ) C+ Mv2258,667 +0,75 Q manta
g C
g

J
1620000 J =21139,895 J +178366,2 J + Mv2258,667 +1,215 e 6 J
g
205493,905 J =Mv2258,667

J
g

Mv=90,9802 g

4.3 Resultados experimentales.


4.3.1. Caracterizacin Taxonmica.
El personal del Herbario Guay, de la Facultad de Ciencias Naturales , de
la Universidad de Guayaquil, confirm que la muestra recolectada y con la
que se realiz la investigacin era Ocinum basilicum L., del gnero
Ocinum y de la familia Lamiaceae.
4.3.2. Rendimientos de las operaciones preliminares y durante el
proceso.
A continuacin se mostrarn el resumen los rendimientos obtenidos de la
experimentacin En la Tabla 4.3.1. , no se describen los rendimientos de
filtracin, ni de la recuperacin del solvente; todos estos clculos se
encuentran con ms detalle en el Anexo E.

57

Tabla 4.3.2.1. Rendimientos de las operaciones unitarias aplicadas


para la obtencin de los sustratos (1).

OPERACIN
APLICADA
Seleccin de
la materia
prima

RENDIMIENTO
PROMEDIO
PROCEDENCIA/TIPO
(%)
Mercado 10 de Agosto

38,77

Mercado de Monte
Bello

24,98

Por calor

13,03

Por enfriamiento

13,37

Por calor (especia)

11,376

Por calor

98,52

Por enfriamiento

97,05

Por calor (especia)

94,42

Secado

(1) En esta
un

cuadro

Molienda

Por calor
Lixiviacin
Por enfriamiento
Destilacin

Mercado 10 de Agosto

tabla existe
que indica la

1,075
0,67
0,82
0,61
0,505

procedencia/tipo; para el caso de procedencia es la referencia de donde se adquiri la materia prima para dicha operacin. En el caso particular de
tipo, es el tratamiento trmico previo que tuvo la muestra para ser utilizada para esa operacin o por la cual pasar; esto depender exclusivamente
de la operacin aplicada.

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.3.3. Curvas de Secado.
Las temperaturas bajo las cuales se sec las distintas muestras de
Albahaca (Ocinum basilicum L.) fueron: 50 C, 5,5C y -16,5C. Para el
caso especfico del secado por liofilizacin, los primeros nueve das se
congel la muestra a -16,5C y para los das posteriores se procedi a
cambiar la muestra al compartimiento del refrigerador; donde la
temperatura promedio usada fue de 5,5C.

58

Grfica D2: Curva de secado por calor.

TIEMPO VS PRDIDA DE HUMEDAD


9.0
7.0
PRDIDA DE HUMEDAD
(g agua/g M.S)

5.0
3.0
1.0
-1.00

10

15

20

25

30

TIEMPO(Horas)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Grfica D3: Curva de secado por enfriamiento.

4.
0.

2.

PRDIDA DE HUMEDAD
(g agua/g M.S)

6.

8.

TIEMPO VS PRDIDA DE HUMEDAD

10 11

TIEMPO(Das)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

59

Grfica D4: Curva de secado por liofilizacin.

TIEMPO VS PRDIDA DE HUMEDAD


10.0

PRDIDA DE HUMEDAD
(g agua/g M.S

5.0
0.0

10

12

14

16

18

TIEMPO(Das)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Las grficas fueron obtenidas del Anexo D.
4.3.4. Resultados de operaciones finales.
4.3.4.1. Capacidad antioxidante.
Las muestras fueron preparadas para el anlisis de antioxidantes

(15)

junto con el equipo espectrofotomtrico Genesys 10 se pudo realizar la


medicin de la absorbancia de cada muestra analizada. (16)
Cada anlisis de muestra tiene un tiempo de residencia en el equipo de
870 segundos estndar (en este tiempo se generan los datos de
absorbancia).Las muestras analizadas son:
Muestra A: Aceite proveniente de la lixiviacin de Albahaca (Ocinum
basilicum L.) secada por calor con metanol puro (99,8%).
Muestra B: Aceite proveniente de la lixiviacin de Albahaca (Ocinum
basilicum L.) secada por calor con agua acidulada (5%)
Muestra C: Aceite proveniente de la lixiviacin de Albahaca (Ocinum
basilicum L.) secada por enfriamiento con metanol puro (99,8%).
60

Muestra D: Aceite proveniente de la lixiviacin de Albahaca (Ocinum


basilicum L.) secada por enfriamiento con agua acidulada (5%)
Muestra E: Aceite esencial.
Muestra F: Macerado de hojas frescas en metanol.
Las curvas y datos de absorbancia; junto con sus porcentajes de
inhibicin se mostrarn en el Anexo E.
En la Tabla 4.3.4.1.1 se encuentra un resumen de los resultados de la
medicin de la capacidad antioxidante de las muestras analizadas en el
transcurso de este trabajo de investigacin.
(15) Las muestras A, B, C, D, fueron preparadas en la siguiente proporcin: dilucin de 1 ml de aceite + 4 ml de metanol; posterior a ello se utiliz la
cantidad de microlitros indicada en la tabla. Las muestras E y F, no tuvieron preparacin previa.
(16) El equipo espectrofotomtrico tiene un software integrado, el cual transmite los datos a un programa del cual se puede exportar dichos datos a
Excel, para la realizacin de las curvas respectivas de absorbancia.

TABLA 4.3.4.1.1.

Medicin de la capacidad antioxidante de los

sustratos obtenidos.

TIPO DE
MUESTRA

PORCENTAJE DE INHIBICIN DE
RADICALES LIBRES
(%)
MUESTRAS

15 l

25 l

64

87

36,7

67

49,04

84,9

67,07

79

ACEITE
ESENCIAL

28,6

57,56

FRESCA

8,30

23

ACEITE

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Grfica 4.3. Capacidad antioxidante de muestras de Albahaca.

61

CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE LA ALBAHACA


100%
80%
60%
l
% DE INHIBICIN DE15RADICALES
LIBRES

25 l
40%
20%
0%

MUESTRAS DE ALBAHACA

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.3.4.2. Tamizaje fitoqumico.
La marcha fitoqumica solamente se realiz a los aceites con los
resultados ms altos a la inhibicin de radicales libres.
La nomenclatura usada en la tabla siguiente es la misma encontrada en el
Anexo C; en el cual se describe la marcha fitoqumica usada con una
abreviatura sencilla de cada ensayo.
Tabla 4.3.4.2.1. Tamizaje fitoqumico de los sustratos con mayor
capacidad antioxidante.

EFE ELB ESP ERS

ENSAYOS

MUESTRA
S

EDR

ECF ESD

++

+++

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.3.4.3. Anlisis de calidad de la especia alimentaria.
Solo el anlisis microbiolgico de salmonella, se realiz en el Laboratorio
AVVE, los dems se realizaron en el Instituto de Investigaciones
Tecnolgicas de la Facultad de Ingeniera Qumica.
62

Tabla 4.3.4.3.1. Anlisis Fsico-Qumicos del polvo de Albahaca


(Ocinum basilicum L).

ANALISIS

RESULTADO

MTODO

Humedad

11,50%

Evaporacin.

13%

Calcinacin.

Cenizas
Totales

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

Tabla 4.3.4.3.2. Anlisis microbiolgicos del polvo de Albahaca


(Ocinum basilicum L).

ANALISIS
Escherichia
Coli
Levaduras y
Mohos
Coliformes
Totales
Salmonella

RESULTAD

MTODO

O
0 UFC/g

Petrifilm 3M

0 UFC/g

Petrifilm 3M

0 UFC/g

Petrifilm 3M

No

Deteccin molecular

detectado

AOAC 031208

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


4.4 Anlisis e interpretacin de resultados.
En base a los datos obtenidos en esta experimentacin y establecidos en
la Tabla 4.3.2.1, surge el siguiente anlisis:
63

Anlisis de rendimiento de materia prima:


La notable diferencia entre los rendimientos del Mercado 10 de Agosto y
Monte Bello, se debe principalmente a:
1. Materia prima fresca.
2. Materia prima con pocos rasgos de enfermedades, daos fsicoqumicos, ataque de insectos o vejez.
3. Deshojado tardo de la planta adquirida.
4. Lugar y condiciones de almacenamiento de la materia prima. (17)
De acuerdo con la investigacin realizada el tiempo mximo de
almacenamiento de la materia prima sin seleccionar es de 30 minutos y
de hojas seleccionadas es de 6 horas desde su adquisicin; posterior a
ello la planta empieza a degradarse por condiciones naturales.
(17) Si la materia prima se encuentra en un lugar con relativa exposicin de calor y dentro de un empaque de plstico inadecuado, el rendimiento de esta
planta caer notoriamente. Para el caso de materia prima deshojada solo se perder una cantidad mnima de agua.

En el caso de la materia prima no deshojada, la degradacin de la planta


se acelera por mecanismos de transferencia de masa (sabia bruta y
elaborada); ocasionando un bajo rendimiento en peso (8,35%) como se
indica en la Tabla E2
Dentro de la investigacin realizada se encontr, que en el mejor de los
casos existi una merma del 16,2 % en hojas rechazadas. El rechazo es
basado en el punto 2; el cual no es recuperable dentro del proceso.
Anlisis de rendimiento de secado:
La pequea variacin existente entre el rendimiento promedio del secado
por calor y por enfriamiento en la tabla antes mencionada se debe a:

rea de contacto de la planta.


Tiempo de operacin.
Temperatura de operacin.
Estado funcional del equipo de secado utilizado.

Si el rea superficial del material a secar no es adecuada (pequea) y por


el contrario es grande; existirn problemas relacionados con la
transferencia de calor (conduccin, conveccin y radiacin) y por ende el
centro de la muestra no estar seco. Los tiempos de operacin cambiarn
64

debido al problema surgido por una inadecuada distribucin de la materia


a secarse.
El secado por calor (50 C) mantiene las caractersticas organolpticas
tpicas de una especia alimentaria, por otro lado el secado por
enfriamiento (5,5C) realza estas caractersticas (siendo apreciado por
muchos consumidores); no obstante el costo energtico y de produccin
de este tipo de especia, se encarece al tener un producto con esta
descripcin.
Anlisis de rendimiento de molienda:
El rendimiento promedio obtenido en esta operacin es alto. La diferencia
no radica en el tipo de secado previo de las muestras, sino del tipo de
molienda usada y de la acumulacin por cada carga en el molino. En el
caso particular de esta investigacin, al usar un molino de disco la
disminucin del tamao de la materia seca fue tan eficiente, que las
prdidas existentes del proceso eran ocasionadas por el polvo de
Albahaca (Ocinum basilicum L.) encontrado en el piso al trmino de la
operacin.
Anlisis de rendimiento de lixiviacin:
El rendimiento obtenido por esta operacin unitaria es muy bajo; a pesar
de ello se puede notar una diferencia del 23,72 % entre los aceites
obtenidos por

lixiviacin con metanol y las muestra secas: por calor

(1,075%) y por enfriamiento (0,82%).


Dentro de los resultados obtenidos tambin existen aceites provenientes
de la lixiviacin con agua acidulada y muestras secas: por calor (0,67%) y
por enfriamiento (0,61%); las cuales tienen una diferencia del 8,9% entre
los rendimientos.
Las caractersticas organolpticas de los aceites obtenidos por muestras
secadas por enfriamiento son notablemente ms intensas y agradables
que los otros aceites mencionados.

65

Anlisis de rendimiento de destilacin:


Segn (DAZA, BENAVIDES, LPEZ, HOYOS, & IZQUIERDO, 2011),
indica que los rendimientos en aceite esencial a partir de las hojas tiernas
y viejas de Albahaca (Ocinum basilicum L.) fueron de 0,111 % y 0,139%
respectivamente; al igual que (Briseo Ruiz , Aguilar Garca , & Villegas
Espinoza , 2013), el cual

indica un rendimiento en peso de aceite

esencial entre 0,3% y 0,4 % de la planta recin cultivada. El rendimiento


promedio obtenido (0,505 %) en esta experimentacin fue superior a los
mencionados anteriormente.
Anlisis de las curvas de secado:
En base a los datos obtenidos en esta experimentacin y representados
en las grficas D2, D3 y D4, surge el siguiente anlisis:
La grfica D2, denota la tendencia decreciente de prdida de humedad
por parte de las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L.), al aplicarle
calor a una temperatura estndar de 50C.El punto crtico de secado es al
tiempo de 22 horas y humedad en base seca de 0,5077 g agua/g materia
seca; luego del cual pasado 5 horas, la muestra queda seca e idnea
para cualquier post-proceso.
La grfica D3, demuestra el comportamiento de secado por enfriamiento a
una temperatura de 5,5C, por parte de la materia prima utilizada en un
lapso de 10 das. El punto crtico de secado es al tiempo de 5 das y
humedad en base seca de 1,0233 g agua/g materia seca; luego del cual
pasado 5 das, la curva de secado se muestra constante y por tanto el
proceso de secado culminado.
La grfica D4, refleja dos comportamientos presentes en esta operacin
unitaria: la prdida constante de humedad (7,2308

g agua/g materia

seca) desde el tercer da hasta el quinto, y la prdida sbita de humedad


desde el trmino de la congelacin de las hojas (6,8462 g agua/g materia
seca) al noveno da; hasta el punto crtico del secado por evaporacin
(1,0769 g agua/g materia seca) al treceavo da.

66

Desde el punto de vista de economa energtica, el

proceso de

liofilizacin es rentable debido a que la cantidad de energa necesaria


para secar la muestra de Albahaca (Ocinum basilicum L.) es de 0,1488
W como lo indica la Tabla 4.7;

usando solamente el 0,1033% de la

capacidad total de energa del equipo usado.

(18)

A pesar de que este tipo

de secado se lo realiza en un tiempo extenso (en este caso 17 das), las


caractersticas

organolpticas

se

intensifican;

siendo

una

opcin

adecuada para la elaboracin de una especia alimentaria.


El secado (50C) aplicado a las hojas de Albahaca es el mejor desde el
punto de vista de tiempo de operacin y consumo energtico; debido a
usando solamente el 0,122 % de la capacidad total del equipo utilizado (19),
se obtiene una muestra seca, cercana a la humedad requerida por la NTE
INEN 2532:2010 - Especias y Condimentos.
(18) El equipo usado (refrigerador marca DAEWOO) tiene un voltaje de 120 V y un amperaje de 1,2 A, por lo cual se puede obtener la cantidad de
energa emanada (144 W) y la relacin energtica mencionada.
(19) El equipo usado (estufa) tiene una potencia de 200 W, siendo este dato utilizado conjunto con el gasto energtico de la muestra para obtener el
consumo de energa que se usa por parte del equipo.

Entre una de las caractersticas importantes de este tipo de secado, es


que mantiene un fuerte aroma, y otras caractersticas organolpticas
tpicas de una especia alimentaria.
Anlisis de los resultados de capacidad antioxidante:
La capacidad antioxidante encontrada por parte de la Muestra F (fresca),
da entender que la relacin existente entre los microlitros (l) utilizados
para este ensayo, no es directamente proporcional. Al usar 15 l de
muestra la actividad antioxidante fue del 8,30%, debiendo tener a 25 l,
un porcentaje de inhibicin de 13,83%, en el caso de ser directamente
proporcional; pero a esa cantidad se obtuvo, casi tres veces ms
inhibicin de radicales libres en comparacin a los 15 l de muestra.
Las muestras provenientes de la lixiviacin con metanol (A y C),
evidencian una capacidad antioxidante mayor a las dems muestras
extradas con agua acidulada (B y D), cuando se us 25 l para la
experimentacin.

67

Dentro de la investigacin, existe una diferencia notable entre el


porcentaje de inhibicin (36,7% y 67,07%) de las muestras (B y D) a 15
l; siendo su aceite extrado por el mismo solvente, pero con un
tratamiento trmico diferente de su materia prima.
El aceite esencial (muestra E), al igual que la Muestra F (fresca),
manifiesta una relacin inversamente proporcional; siendo su porcentaje
ms alto de inhibicin (57,26%), pero en comparacin con las muestras
por lixiviacin fue el ms bajo (20).
Anlisis de los resultados de ensayo fitoqumico:
De acuerdo a los porcentajes de inhibicin a los radicales libres,
obtenidos en esta experimentacin, se procedi a caracterizar de manera
cualitativa, los compuestos presentes en las muestras con mayor
capacidad antioxidante; siendo estas la muestra A y C respectivamente.

(20) Esto pudo ocasionarse por varios motivos: presencia de agua, antigedad del aceite esencial, incorrecta dosificacin.

Los compuestos encontrados al realizar este ensayo fueron para la


muestra A los siguientes: compuestos reductores, triterpenos y esteroides,
saponinas, resinas, alcaloides, fenoles (taninos del tipo pirocateclicos); y
para la muestra C solamente: saponinas, alcaloides, fenoles (taninos del
tipo pirocateclicos) y flavonoides (flavonas).
Anlisis de resultados fisicoqumicos y microbiolgicos, realizados a
de la especia alimentaria.
Los anlisis fisicoqumicos y microbiolgicos, nos dan una resultado
preciso de la calidad alimentaria de un producto. Conociendo los puntos
de control de calidad dentro de la norma, se prioriz el control de la
contaminacin directa y cruzada, que puede existir despus del proceso
de secado.
Segn lo establece los resultados de la tabla 4.3.4.3.1 y 4.3.4.3.2, las
muestra analizadas para los ensayos de calidad, de la especia alimentaria
68

se encuentran conforme, en base a lo dictaminado en la NTE INEN


2532:2010- Especias y Condimentos. Requisitos.

CONCLUSIONES

Se alcanz el objetivo inicial al determinar el nivel de antioxidantes de la


planta. Al aplicar las operaciones unitarias de lixiviacin y destilacin por
arrastre de vapor, se obtuvieron las cantidades promedios de 1 g aceite/
13 g de M.S. y 1,13 g aceite esencial/ 600 g.

La capacidad antioxidante de las muestras utilizadas para el ensayo,


fueron cuantificadas; determinndose un alto poder inhibitorio a los
radicales libres de: 87% y 84,9%.

La lixiviacin por su fcil operacin, se constituy en la herramienta que


permiti obtener los mejores resultados.

69

Aplicando la NTE INEN 2532:2010, se obtuvieron las hojas deshidratadas


de Albahaca (Ocinum basilicum L), con todo su potencial antioxidante.

RECOMENDACIONES

La manipulacin adecuada de las hojas durante el proceso de seleccin,


es un factor que se requiere tener mucho cuidado para lograr una mejor
presentacin del producto.

Continuar en la investigacin del tallo de la Albahaca (Ocinum basilicum


L.), si mantiene sus propiedades antioxidantes.
Utilizar el aceite obtenido para elaborar productos del tipo alimenticio
como valor agregado.

70

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74

ANEXOS

75

Anexo A- Nomenclatura de los balances de materia.


Nomenclatura para las operaciones lavado y seleccin de materia
prima:
E= Entrada.

R= Hojas rechazadas.

T= Tallos.

S= Salida.

MP=Albahaca Fresca.

W= Agua

H= Hojas

ML= Hojas lavadas.

L= Agua de lavado.

Nomenclatura para la operacin secado y molienda:


E= Entrada.

MW= Hojas Frescas lavadas.

S= Salida.

A=Acumulacin.

P= Prdida de Humedad.

PS= Polvo seco.

MS= Hojas secas


Nomenclatura de las operaciones de lixiviacin, filtracin y
recuperacin de solvente:
E= Entrada.

PS= Polvo seco

MP=Albahaca.

S= Salida.

A=Acumulacin

F= Filtrado.

P= Prdidas por

D= Solvente.

R= Solvente

solvente.

X= Extracto.

recuperado

B= Bagazo.
Nomenclatura de la operacin de destilacin por arrastre de vapor:
E= Entrada.

P= Prdidas por

X= Extracto.

S= Salida.

solvente.

D= Solvente.

A=Acumulacin.

B= Bagazo.

Anexo B Nomenclatura de los balances de energa.


Nomenclatura de las operaciones de secado, lixiviacin y destilacin
por arrastre de vapor:
W= Agua evaporada.

operacin.

L= Landa de fusin

T= Temperatura de

V= Landa de vapor.

P= Potencia Calorfica.
76

Q= Calor
Q = Calor latente
Qp = Calor perdido.
Qg= Calor ganado.

Qr= Calor que puede

Mc=Masa del

remover aun el

condensado.

sistema.
Mv= Masa de vapor.
Mb= Masa del baln.

Ms= Masa del solvente.


Mr = Masa del
refrigerante.

Anexo C-Tamizaje fitoqumico.


Compuestos Reductores.
Ensayo de Fehling (EFE).- Para ello, si la alcuota del extracto no se
encuentra en agua, debe evaporarse el solvente en bao de agua y el
residuo disolverse en 1-2 ml de agua. Se adicionan 2 ml del reactivo y se
calienta en bao de agua 5-10 minutos la mezcla. El ensayo se considera
positivo si la solucin se colorea de rojo o aparece precipitado rojo. El
reactivo se prepara de la siguiente forma:
Solucin A: Stye pesan 35 g de sulfato cprico hidratado cristalizado y se
disuelven con agua hasta un volumen total de 1000 ml.
Solucin B: Se pesan 150 g de tartrato de sodio y potasio y 40 g de
hidrxido de sodio y se disuelven en agua hasta un volumen de 1000 ml.
Las soluciones se tienen preparadas de forma independiente y se
mezclan igual cantidad de volumen de cada una de ellas justo en el
momento de realizar el ensayo. Dicha mezcla es la que se adiciona a la
alcuota a evaluar.
Triterpenos y esteroides.
Ensayo de Lierbermann-Burchard (ELB).- Para ello, si la alcuota del
extracto no se encuentra en cloroformo, debe evaporarse el solvente en
bao de agua y el residuo redisolverse en 1 ml de cloroformo. Se adiciona
1 ml de anhdrido actico y se mezcla bien. Por la pared del tubo de
ensayos se dejan resbalar 2-3 gotas de cido sulfrico concentrado sin
agitar. Un ensayo positivo se tiene por un cambio rpido de coloracin:

Rosado-azul muy rpido


Verde intenso-visible aunque rpido.

77

Verde oscuro-negro-final de la reaccin.

A veces el ensayo queda en dos fases o desarrollo de color. Muy pocas


veces puede observarse el primer cambio. El tercer cambio generalmente
ocurre cuando el material evaluado tiene cantidades importantes de estos
compuestos.
La reaccin de Lierbermann-Burchard se emplea tambin para
diferenciar las estructuras esteroides de los Triterpenoides, las primeras
producen coloraciones azul azul verdoso, mientras que para las
segundas se observa rojo, rosado o prpura. Estas coloraciones pueden
variar por interferencias producidas por carotenos, xantofilas y esteroides
saturados que pueden estar presentes.
IMPORTANTE: Para realizar este ensayo no puede haber agua en el
medio de la reaccin pues sta con el cido sulfrico reacciona de
forma violenta y puede ocurrir un accidente.
Saponinas:
Ensayo de la espuma (ESP).- Permite reconocer en un extracto la
presencia de saponinas, tanto como del tipo esteroidal como triterpnica.
De modo que si la alcuota se encuentra en alcohol, se diluye con 5 veces
su volumen en agua y se agita la mezcla fuertemente durante 5-10
minutos.
El ensayo se considera positivo si aparece espuma en la superficie del
lquido de ms de 2 mm de altura y persistente por ms de 2 minutos.
Ensayo de resinas (ERS).- Para detectar este tipo de compuesto,
adicione a 2ml de la solucin alcohlica, 10 ml de agua destilada. La
aparicin de un precipitado, indica un ensayo positivo.
Alcaloides.
Ensayo de Dragendorff (EDR).- Permite reconocer en un extracto la
presencia de alcaloides, para ello, si la alcuota del extracto est disuelta
en un solvente orgnico, este debe evaporarse en bao de agua y el

78

residuo re disolverse en 1 ml de cido clorhdrico concentrado, (calentar


suavemente y dejar enfriar hasta acidez). Con la solucin acuosa cida se
realiza el ensayo, aadiendo 3 gotas de reactivo de Dragendorff, si hay
opalescencia se considera (+), turbidez definida (++), precipitado (+++).
Compuestos fenlicos.
Ensayo del cloruro frrico (ECF).- Si el extracto de la planta se realiza
con alcohol, el ensayo determina tanto fenoles como taninos. A una
alcuota de extracto alcohlico se le adicionan 3 gotas de una solucin de
tricloruro frrico al 5% en solucin salina fisiolgica (cloruro de sodio al
9% en agua).

Desarrollo de una coloracin rojo-vino, compuestos fenlicos en general.


Desarrollo de una coloracin verde intensa, taninos del tipo

pirocateclicos.
Desarrollo de una coloracin azul, taninos del tipo piro galotnicos.
Flavonoides.
Ensayo de Shinoda (ESN).- Si la alcuota del extracto se encuentra en
alcohol, se diluye con 1 ml de cido clorhdrico concentrado y un pedacito
de cinta de magnesio metlico. Despus de la reaccin se espera 5
minutos, se aade 1 ml de alcohol amlico, se mezclan las fases y se deja
reposar hasta que se separen.
El ensayo se considera positivo, cuando el alcohol amlico se colorea de:

Color naranja a rojo: Flavonas


Color rojo carmn: Flavonoles y Flavononoles
Color de carmn a magenta: Flavononas.

Anexo D Balances de energa.


Clculo de las capacidades calorficas.
Primero se encontrar la capacidad calorfica de los solventes utilizados,
posterior a ello la capacidad calorfica del baln usado.
Clculo de las capacidades calorficas de los solventes.
Para este clculo se us la tabla #23 del captulo de termofsica de
Wattson:
79

Clculo de la capacidad calorfica (cp.) del metanol:


Para este clculo se realiz una interpolacin:
kcal
kgC )
Cp

C
T )

0,566 0
x 29

0,616 40

x=0,6023

kcal
kgC

x=2,5216

KJ
kgC

Se utiliz un factor de conversin (4,187 J= 1 cal) para llevarlos a


unidades del sistema internacional (SI).
Clculo de la capacidad calorfica (cp.) del agua:
El calor especfico del agua empleado fue de 4,187 KJ/kg*C.
Clculo de la capacidad calorfica (cp.) del HCl:
Para encontrar el calor especfico del HCl (l) se us la regla de Koop para
lquidos, debido a que en tablas de capacidades calorficas no se
encontraba el HCl en fase lquida; solo en fase gaseosa.
Regla de Koop
H= 4,3; Cl= 8 ; HCl= 12,3 cal/ mol*C
Para llevarlo a unidades del sistema internacional se multiplico el valor
encontrado para el peso molecular del cido: 36,45 g/mol y para un factor
de conversin.
Cp. HCl= (12,3 cal/ mol*C)*(36,45g/mol)*(4,187 J/cal) = 1,413 J/g*C.
Clculo de la capacidad calorfica (cp.) del baln de calentamiento:
Para encontrar el calor especfico del baln de calentamiento se us la
regla de Koop para slidos, debido a que es un baln del tipo
Regla de Koop

80

Si = 3,8; O = 4; Otros= 6,2.


Para llevarlo a unidades del sistema internacional, se multiplico el valor
encontrado para el peso molecular de cada compuesto y para un factor de
conversin (4,187J= 1 cal).
PMsiO2= 60,08 g/mol; PMcaO= 56 g/mol; PMNa2O= 61,98 g/mol
Tabla D1: Componentes y capacidad calorfica del baln de
calentamiento.
Porcentajes Componentes
(%)
71-75
SiO2
10-15
CaO
12-16
Na2O

Cp.
(cal/mol*C)
11,8
10,2
16,4

Cp.
(cal/g*C)
0,1434
0,0228
0,0370

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


El calor especfico del baln es la sumatoria del calor especfico de todos
sus componentes multiplicado por sus respectivos porcentajes.
Cp. Baln= (0,2032cal/g*C)*(4,187 J/cal) = 0,8507 J/g*C.
Curvas de secado de las hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L).
En la realizacin de este trabajo de investigacin se realizaron tres tipos
de secado:

Secado por calor.


Secado por enfriamiento.
Secado por liofilizacin.

Para el clculo de la humedad(X) se utiliz la siguiente formula:


Humedad ( X )=

Peso de muestra hmedaPeso de muestra seca


Peso de muestra seca

Humedad ( X )=

112,8g13,8 g
g Agua
=7,1739
13,8 g
g Materia seca

Para todas las tablas de secado se aplic

esta frmula; y

consecuentemente se obtuvo las curvas de secado correspondientes.


81

Secado por calor:


Tabla D2: Contenido de humedad de muestra secada por calor.
Peso de
Horas Albahaca
(h)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
22
23
24
25
26
27

(g)
112,8
97,8
82,8
74,8
65,8
53,8
35,8
29,8
25,8
20,8
17,8
15,8
13,8
13,8
13,8

Humeda
d
(X)
(g agua/g
M.S)
7,1739
6,0870
5,0000
4,4203
3,7681
2,8986
1,5942
1,1594
0,8696
0,5072
0,2899
0,1449
0
0
0

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Grfica D2: Curva de secado por calor.

82

TIEMPO VS PRDIDA DE HUMEDAD


9.0
7.0
PRDIDA DE HUMEDAD
(g agua/g M.S)

5.0
3.0
1.0
-1.00

10

15

20

25

30

TIEMPO(Horas)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

Secado por enfriamiento:


Tabla D3: Contenido
enfriamiento.

de

humedad

DA
S

Peso de
albahaca

(d)

(g)

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

245
116,7
79,7
72,7
66,7
60,7
52,7
37,7
30
30
30

de

muestra

secada

por

Humeda
d (X)
(g agua/g
M.S)
7,1667
2,8900
1,6567
1,4233
1,2233
1,0233
0,7567
0,2567
0
0
0

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Grfica D3: Curva de secado por enfriamiento.

83

4.
0.

2.

PRDIDA DE HUMEDAD
(g agua/g M.S)

6.

8.

TIEMPO VS PRDIDA DE HUMEDAD

10 11

TIEMPO(Das)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

Secado por liofilizacin:


Tabla D4: Contenido de humedad de muestra con aplicacin de
secado por liofilizacin (1).

Elaborado:
G. Pazmio
(1)

Se

Da
OPERACIN
APLICADA
(d)

considera

la muestra ha pasado por un


operacin

unitaria

muestra fue secada a pesar


operacin.

Grfica D4:
secado por

CONGELACI
N

Elaborado:
G. Pazmio

SECADO POR
ENFRIAMIENT
O

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17

Peso
perdid Humeda
o
d (X)
(g
(g)
agua/g
M.S)
116
7,9231
112
7,6154
109
7,3846
107
7,2308
107
7,2308
107
7,2308
105
7,0769
104
7,0000
103
6,9231
102
6,8462
95
6,3077
87
5,6923
65
4,0000
27
1,0769
18
0,3846
13
0
13
0
13
0

R. Snchez y
2016.
liofilizacin, debido a que
proceso similar al de la
mencionada; no obstante la
del prolongado tiempo de

Curva de
liofilizacin.
R. Snchez y
2016.

84

Anexo E- Rendimiento y mermas de proceso.


Operaciones preliminares.
Rendimiento y mermas de seleccin de materia prima.
Los rendimientos de la materia prima usada para la obtencin de los
sustratos de albahaca (aceite y aceite esencial) y la especia alimentaria,
variaran en base a lo indicado en el punto 3.5.1.1.
La nomenclatura utilizada para las operaciones preliminares se detalla a
continuacin:
Nomenclatura:
C= Rendimiento en

R= Hojas

MS= Materia seca.

peso.

rechazadas.

H= Hojas en buen

MP=Albahaca fresca

estado.

adquirida.

T= Tallos

M= Merma de Proceso.

P = Prdida
PS= Polvo seco.

separados.
A continuacin se mostrarn la nomenclatura y los clculos respectivos
para esta operacin:
Rendimiento en peso de Albahaca (Ocinum basilicum L), adquirida en el
Mercado 10 de Agosto:
C=

H
100
MP

374
; C= 1109 100=33,72

M=

R
100
MP

M=

T
100
MP

M=

391
100=35,26
1109

M=

344
100=31,02
1109

Los dems clculos sern tabulados a continuacin:

85

Tabla E1: Rendimientos y mermas del

proceso de seleccin de

materia prima.
RENDIMIENTO
C-H
M-T
M-R

SELECCIN DE
MATERIA PRIMA
Secado por calor
Secado por
enfriamiento
Destilacin

(%)

(%)

(%)

33,69
38,66
40,28
39,82
40,83
38,17
39,96

31,06
35,00
34,72
24,78
23,17
26,88
23,98

35,26
26,34
25,00
35,40
36,00
34,95
36,06

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


El promedio de rendimiento de las hojas en buen estado es de 38,77%,
debido a que el tallo ni las hojas en mal estado se usaron en las
operaciones indicadas en la Tabla E1.
Rendimiento en peso de Albahaca (Ocinum basilicum L), adquirida en el
Mercado de transferencia de vveres de Monte Bello:
C=

H
100
MP

680
; C= 1961 100=34,68

M=

R
100
MP

M=

T
100
MP

M=

473
100=24,12
1961

M=

808
100=41,20
1961

Los dems clculos sern tabulados a continuacin:

86

Tabla E2: Rendimientos y mermas del

proceso de seleccin de

materia prima. (1)


MP

TE

Ts

C-H

M-T

M-R

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(g)

(%)

(%)

(%)

1866
1635
1961
4278
3643
4355
2443

1866
1635
1961
4278
3643
4355
2443

724
538
473
1237
1417
2594
411

1866
1635
1961
4278
3843
4355
2443

21,56
28,99
34,68
31,63
24,05
8,35
39,75

39,29
38,10
41,20
39,46
42,55
32,08
43,43

39,15
32,91
24,12
28,92
38,90
59,56
16,82

423
719
474
623
680
808
1353
1688
876
1550
363,7 1397,3
971
1061

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


(1) La diferencia de rendimientos es debido a la variacin entre los tiempos de deshojado, en el caso del ms bajo (8,35%) fue deshojado despus de 12
horas de haberse adquirido; no obstante el deshojado de la materia prima con mayor rendimiento (39,75%) fue prcticamente de inmediato (30 minutos
despus de adquirida a los proveedores al por mayor en Monte Bello).

Rendimiento de la operacin de secado.


En este apartado se encontrar el rendimiento del secado de la albahaca
(Ocinum basilicum L)

con relacin a la cantidad de materia prima

utilizada.
Rendimiento en peso del secado de Albahaca (Ocinum basilicum L).
C=

MS
100
MP

13,8
; C= 112,8 100=12,23

Los dems clculos sern tabulados a continuacin:


Tabla E3: Rendimiento de secado de la materia prima para lixiviacin.
RENDIMIENTO RENDIMIENTO
SECADO
Secado por
calor

MS-C

MS-C

(%)
12,23
14,86
12,00

(%)
13,03

87

Secado por
enfriamiento

11,21
12,24
16,67

13,37

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Para el caso de la materia prima usada para la especia alimentaria y sus
respectivos anlisis de calidad se obtuvieron los siguientes rendimientos a
diferentes tiempos de operacin.
Rendimiento en peso del secado de Albahaca (Ocinum basilicum L).
C=

MS
100
MP

116,3
; C= 964 100=12,06

Los dems clculos sern tabulados a continuacin:


Tabla E4: Rendimiento de secado de la materia prima para la especia
alimentaria. (1)
SECADO POR CALOR

RENDIMIENT
O
MS-C

TIEMPO DE SECADO
(das)
1,33
2
3
2
10
PROMEDIO

(%)
12,06
12,75
8,78
10,43
12,86
11,376

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


(1) Los rendimientos encontrados varan en funcin de la humedad prdida por da de secado y la temperatura aplicada.

Rendimiento de la operacin de molienda.


Esta operacin se aplic seguido de la obtencin de la materia seca (por
calor o enfriamiento); de los cuales se obtuvieron los siguientes
rendimientos.
Rendimiento en peso de la molienda de Albahaca (Ocinum basilicum L).

88

C=

PS
100
MS

2
; C= 240 100=99,17

Tabla E5: Rendimiento de molienda de la materia prima para la


operacin de lixiviacin.
RENDIMIENTO
PS-C PS-M TOTAL

MOLIENDA

(%)
Secadas por
calor
Secado por
enfriamiento

(%)

97,83
98,55
99,17
96,15
99,00
96,00

2,17
1,45
0,83
3,85
1
4

RENDIMIENTO
PROMEDIO
PS-C

(%)

(%)

100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00

98,52

97,05

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Para el caso de la especia alimentaria los rendimientos en peso estn
dentro de los rendimientos mostrados en la tabla anterior. A continuacin
se muestra los clculos respectivos:
Rendimiento en peso de la molienda de Albahaca (Ocinum basilicum L).
C=

PS
100
MS

2
; C= 240 100=99,17

Tabla E6: Rendimiento de molienda de la materia prima para la


especia alimentaria.

MOLIENDA

Secadas por

RENDIMIENTO
PSPS-M TOTAL
C
(%)

(%)

(%)

99,4

0,60

100,00

89

0
99,8
8
99,3
2
99,7
7
99,0
5
99,1
1

calor

0,12

100,00

0,68

100,00

0,23

100,00

0,95

100,00

0,89

100,00

PROMEDIO PSC

94,42

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Operaciones durante el proceso.
Rendimiento de la operacin de lixiviacin.
Los rendimientos obtenidos

en este apartado estn basados en el

balance de materia del punto 4.1.5.


La nomenclatura utilizada se detalla a continuacin:
Nomenclatura:
C= Rendimiento en

R= Retencin de

A= Acumulacin en

peso.

slidos.

M= Merma de proceso.

F = Extracto filtrado.

D= Prdidas por

M= Materia prima

I= Impurezas del

volatilizacin del

E= Extracto

extracto.

solvente.

lixiviado.

X= Sustrato

L= Recuperacin de

PS= Polvo seco.

obtenido (aceite).

solvente.

el baln.

Rendimiento en peso de la lixiviacin de Albahaca (Ocinum basilicum L):


C=

E
100
MS

3,2
; C= 13,5 100=23,70

Tabla E7: Rendimiento de extraccin slido-lquido. (1)


MUESTRA

RENDIMIENTO DE

RENDIMIENTO

90

S SECAS

E-C
(%)

Calor

Fro

SLIDO
R-M TOTAL
(%)

(%)

23,70 76,30

100,00

19,26 80,74
25,84 74,16

100,00
100,00

17,60 82,40
23,61 76,39

100,00
100,00

PROMEDIO
E-C
(%)
Me.
Ac.
21,48
25,84
17,60
23,61

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


(1) Para obtener el rendimiento real de aceite extrado por lixiviacin se tiene que dividir el sustrato obtenido en la recuperacin del solvente para el
material seco utilizado en esta operacin.

Rendimiento de la operacin de filtracin.


Los rendimientos obtenidos

en este apartado estn basados en el

balance de materia del punto 4.1.6.


Rendimiento de la filtracin del extracto de Albahaca
(Ocinum basilicum L):
F
C= 100
E

129,2
; C= 133,8 100=96,56

Tabla E8: Rendimiento de filtracin. (1)

EXTRACTOS A
FILTRAR

RENDIMIENTO DE
FILTRACIN
F-C
I-M D-M TOTAL
(%)

MUESTRAS
Secadas por
calor.
Secadas por
enfriamiento.

96,56
92,42
98,60
98,60
98,61

(%)
0,75
0,38
0,07
0,30
0,12

(%)
2,69
7,21
1,33
1,11
1,27

RENDIMIENTO
PROMEDIO
F-C

(%)
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00

(%)
Me.
94,49

Ac.

98,60
98,60
98,61

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


(1) En este caso la simbologa E, este incluye el solvente; debido a que el rendimiento obtenido se basa en un balance general.

91

Rendimiento de la operacin de recuperacin de solvente.


Los rendimientos obtenidos

en este apartado estn basados en el

balance de materia del punto 4.1.7.


Rendimiento recuperacin de solvente y obtencin del sustrato de
Albahaca (Ocinum basilicum L).
L
LC= 100
F

X
X C= 100
F

LC=

126
100=97,52
129,2

X C=

1
100=0,77
129,2

Tabla E9: Rendimiento de recuperacin de solvente.


RECUPERACI
N DE SOLVENTE
MUESTRAS
Secadas por
calor.

Secadas por
enfriamiento.

RENDIMIENTO DE RECUPERACIN RENDIMIENTO


DE SOLVENTE
PROMEDIO
X-C
A-M D-M
L-C TOTAL
X-C
(%)

(%)

0,77

100,00

1,38
0,67

0,93 0,77 97,52


17,0
0,32
6
81,23
0,81 11,47 87,04

0,82

0,52

100,00

0,61

(%)

4,27
10,3
0,31
4

(%)

94,38

(%)

(%)
Me.

Ac.

1,075

100,00
100,00

0,67
0,82
0,61

88,74

100,00

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Rendimiento de la operacin de destilacin por arrastre de vapor.
Los rendimientos obtenidos

en este apartado estn basados en el

balance de materia del punto 4.1.8.


Rendimiento de la operacin de destilacin por arrastre de vapor de las
hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L):

92

X
100
MP

0,73
; C= 142 100=0,51

X
100
MP

1,133
; C= 225 100=0,50

C=

C=

Operaciones finales.
Medicin de la capacidad antioxidante.
El porcentaje de inhibicin a los radicales libres se obtuvo mediante la
siguiente formula:
% Inhibicin:

|.| Inicial|.| final


100
Absorbancia inicial

Esta frmula se aplicara para todas las muestras analizadas.

Tabla E.10. Muestras para calibracin del Espectrofotmetro


Muestras

DPPH

Metanol 99,8%

1
2
3
4

(ml)
1
2
4
5

(ml)
9
8
6
5

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


En primer lugar se hizo la calibracin del equipo del cual se obtuvo los
siguientes datos de absorbancia a 517 nanmetros (nm).
Tabla H1: Calibracin del equipo espectrofotomtrico.
Concentraci

ABS

(nm)

(mg/lts)
0,1
0,2

0,01
0,054
93

0,4
0,5
1

0,112
0,145
1,182

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Grfico H1: Curva de calibracin de DPPH
CURVA DE CALIBRACIN DE DPPH
0.2

ABSORBANCIA
(nm)

0.15
f(x) = 0.33x - 0.02
R = 0.99

0.1
0.05
0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

CONCENTRACIN DE DPPH( mg/lt)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.


Los resultados que se mostrarn a continuacin tienen la nomenclatura
enunciada en el punto 4.3.2. ; el cual indica que tipo de muestra es la
analizada.
Tabla H2: Capacidad antioxidante de Muestra A utilizando 15
microlitros (15 l=0,015ml)
Tiempo
(seg)
0,055
30,055
60,058
90,054
120,054
150,056
180,057
210,008
240,008
270,008
300,007
330,009

0,833
ABS
(nm)
1,386
1,121
1,077
1
1,004
1,027
0,985
0,97
0,905
0,887
0,778

94

360,008
390,009
420,008
450,008
480,007
510,009
540,008
570,007
600,008
630,007

0,801
0,754
0,78
0,775
0,735
0,725
0,714
0,698
0,674
0,653

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,008
690,009
720,008
750,01
780,008
810,009
840,008
870,009

0,64
0,613
0,603
0,586
0,556
0,545
0,521
0,494

Grfico H2: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra A

TIEMPO VS ABSORBANCIA.

ABSORBANCIA
(nm)

1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,3860,494
100=64,36
1,386

Tabla H3: Capacidad antioxidante de Muestra A utilizando 25


microlitros
l=0,025ml)
Tiempo (25
ABS
(seg)
(nm)
0,184
0,052
1,109
30,054
0,208
60,053
0,195
90,052
0,195
120,054
0,193
150,053
0,192
180,052
0,192
210,053
0,194
240,053
0,193
270,052
0,19

95

300,055
330,054
360,054
390,052
420,052
450,053
480,054
510,053
540,054
570,055
600,055
630,054

0,19
0,182
0,168
0,168
0,162
0,162
0,156
0,157
0,156
0,15
0,146

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,054
690,053
720,006
750,005
780,008
810,006
840,006
870,006

0,142
0,143
0,141
0,142
0,143
0,143
0,143
0,145

Grfico H3: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra A

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
1.2
1
0.8

ABSORBANCIA

0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,1090,145
100=86,93
1,109

Tabla H4: Capacidad antioxidante de Muestra B utilizando 15

96

microlitros (15 l=0,015ml)


Tiempo
(seg)
0,05
30,052
60,051
90,05
120,052
150,051
180,05
210,05
240,052
270,051
300,05
330,051
360,052
390,05
420,052
450,053
480,05
510,051
540,003
570,005
600,005
630,003

1,044
ABS
(nm)
1,414
1,337
1,258
1,226
1,197
1,164
1,128
1,103
1,08
1,061
1,03
1,016
1,005
0,993
0,983
0,975
0,966
0,958
0,95
0,943
0,937

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,005
690,005
720,004
750,004
780,002
810,004
840,004
870,005

0,93
0,925
0,919
0,914
0,908
0,904
0,899
0,895

Grfico H4: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra B

97

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
1.5
1

ABSORBANCIA
(nm)

0.5
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,4140,895
100=36,70
1,414

Tabla H5: Capacidad antioxidante de Muestra B utilizando 25


microlitros (25 l=0,025ml)
Tiempo
(seg)
0,057
30,055
60,056
90,055
120,056
150,057
180,058
210,057
240,055
270,058
300,057
330,057
360,056

0,847
ABS
(nm)
1,674
1,417
1,179
1,078
1,039
1,036
1,008
0,961
0,916
0,881
0,816
0,789

98

390,056
420,056
450,055
480,057
510,057
540,055
570,056
600,056
630,058

0,764
0,742
0,721
0,702
0,684
0,667
0,652
0,637
0,623

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,056
690,055
720,058
750,055
780,056
810,055
840,058
870,055

0,61
0,598
0,587
0,576
0,565
0,555
0,546
0,536

Grfico H5: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra B

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
2
1.5

ABSORBANCIA
(nm)

1
0.5
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,6740,536
100=67,98
1,674

Tiempo
ABS
(seg)
(nm)
0,056H6: Capacidad
1,572
Tabla
antioxidante de Muestra C utilizando 15
30,058
1,102
microlitros
(15
l=0,015ml)
60,058
0,93
90,056
0,921
1,045
120,059
0,835
150,056
0,842
99
180,059
0,847
210,057
0,781
240,059
0,991
270,059
1,029

300,059
330,058
360,057
390,059
420,059
450,059
480,057
510,058
540,058
570,058
600,058
630,057

1,024
1,025
0,987
0,975
0,933
0,921
0,912
0,909
0,891
0,89
0,883

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,058
690,058
720,059
750,057
780,058
810,057
840,057
870,058

0,873
0,862
0,845
0,835
0,828
0,823
0,805
0,801

Grfico H6: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra C

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
2

ABSORBANCIA
(nm)

1.5
1
0.5
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,5720,801
100=49,04
1,572

Tabla H7: Capacidad antioxidante de Muestra C utilizando 25


microlitros (25 l=0,025ml)

100

Tiempo
(seg)
0,064
30
60,001
90,003
120,002
150
180,001
210,001
240
270,001
300,001
330,002
360
390,001
420,002
450,001
480
510,002
540,002
570,003
600,001
630,001

0,132
ABS
(nm)
1,559
0,639
0,294
0,204
0,164
0,146
0,139
0,136
0,134
0,133
0,132
0,131
0,13
0,13
0,13
0,13
0,129
0,131
0,136
0,134
0,13

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,001
690
720,001
750,002
780,001
810
840,001
870,003

0,132
0,131
0,136
0,148
0,152
0,172
0,19
0,234

Grfico H7: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra C

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
2
1.5

ABSORBANCIA
(nm)

1
0.5
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

101

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,,40,536
100=67,98
1,674

Tabla H8: Capacidad antioxidante de Muestra D utilizando 15


microlitros (15 l=0,015ml)
Tiempo
(seg)
0,06
30,062
60,062
90,059
120,061
150,06
180,06
210,061
240,059
270,06
300,062
330,06
360,061
390,062
420,059
450,059
480,061
510,06
540,06
570,061
600,059
630,059

0,782
ABS
(nm)
1,4
1,256
1,168
1,082
1,03
0,998
0,933
0,897
0,851
0,818
0,752
0,723
0,698
0,675
0,654
0,633
0,614
0,597
0,581
0,565
0,552

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,06
690,061
720,061
750,06
780
810,062
840,06
870,06

0,538
0,525
0,513
0,501
0,49
0,48
0,47
0,461

Grfico H8: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra D

102

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
1.6
1.4
1.2

ABSORBANCIA
(nm)

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,40,461
100=67,07
1,4

Tabla H9: Capacidad antioxidante de Muestra D utilizando 25


microlitros (25 l=0,025ml)
Tiempo
(seg)
0,063
30,001
60,062
90,062
120,001
150,001
180,016
210,015
240,015
270,014
300,017
330,015
360,017

0,689
ABS
(nm)
1,339
1,042
0,931
0,831
0,755
0,719
0,684
0,633
0,615
0,673
0,639
0,613

103

390,015
420,015
450,015
480,015
510,015
540,016
570,017
600,015
630,016

0,587
0,558
0,501
0,481
0,455
0,42
0,414
0,404
0,39

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,016
690,015
720,017
750,016
780,017
810,015
840,015
870,015

0,379
0,353
0,353
0,329
0,317
0,314
0,296
0,281

Grfico H9: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra D

TIEMPO VS ABSORBANCIA.

ABSORBANCIA
(nm)

1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,3390,281
100=79,01
1,339

Tiempo
ABS
Tabla
H10:
Capacidad antioxidante de Muestra E utilizando 15
(seg)
(nm)
0,06
1,381
microlitros
(15
l=0,015ml)
30,06
1,135
0,821
60,06
1,051
90,061
0,996
120,061
0,956
150,059
0,923
104
180,061
0,896
210,061
0,874
240,061
0,854
270,061
0,837

300,059
330,059
360,06
390,058
420,061
450,059
480,061
510,06
540,061
570,059
600,058
630,06

0,807
0,795
0,783
0,781
0,799
0,835
0,876
0,901
0,928
0,931
0,936

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,06
690,06
720,061
750,06
780,06
810,062
840,061
870,061

0,949
0,955
0,959
0,959
0,969
0,978
0,986
0,986

Grfico H10: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra E

TIEMPO VS ABSORBANCIA.

ABSORBANCIA
(nm)

1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,3810,986
100=28,60
1,381

Tabla H11: Capacidad antioxidante de Muestra E utilizando 25

105

microlitros (25 l=0,025ml)


Tiempo
(seg)
0,063
30,001
60
90,001
120,002
150
180,001
210,001
240
270
300,002
330,001
360,064
390,002
420,065
450
480
510,001
540,002
570,062
600
630

0,517
ABS
(nm)
1,077
0,766
0,687
0,641
0,609
0,585
0,566
0,551
0,538
0,527
0,51
0,503
0,497
0,491
0,486
0,482
0,478
0,484
0,481
0,477
0,474

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,063
690,002
720,001
750,001
780,001
810,001
840
870

0,471
0,468
0,466
0,463
0,461
0,459
0,457
0,457

Grfico H11: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra E

106

TIEMPO VS ABSORBANCIA.

ABSORBANCIA
(nm)

1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,0770,457
100=57,67
1,077

Tabla H12: Capacidad antioxidante de Muestra F utilizando 15


microlitros (15 l=0,015ml)
Tiempo
(seg)
0,063
30,063
60,062
90,061
120,001
150,061
180,045
210,046
240,046
270,045
300,045
330,045

1,249
ABS
(nm)
1,362
1,268
1,23
1,25
1,249
1,255
1,253
1,251
1,25
1,249
1,247

107

360,046
390,048
420,049
450,047
480,045
510,048
540,046
570,048
600,045
630,047

1,247
1,247
1,247
1,246
1,245
1,245
1,246
1,244
1,245
1,245

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,047
690,046
720,048
750,045
780,047
810,045
840,046
870,049

1,244
1,244
1,245
1,244
1,247
1,251
1,247
1,248

Grfico H12: Curva de absorbancia de 15 l de la Muestra F

T IE M P O V S AB S O RB ANC IA.
1.5
1.4

ABSORBANCIA
(nm)

1.3
1.2
1.1
1

200

400

600

800

1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,3621,248
100=8,37
1,362

108

Tiempo
(seg)
0,052
30,052
60,052
90,053
120,053
150,055
180,053
210,055
240,053
270,054
300,052
330,055
360,053
390,053
420,053
450,052
480,053
510,054
540,052
570,053
600,054
630,054

1,033
ABS
(nm)
1,238
0,998
0,938
0,991
0,987
1,003
0,971
0,973
1,016
1,024
1,034
1,017
1,016
1,001
0,994
0,991
0,988
0,982
0,972
0,97
0,967

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

660,053
690,052
720,052
750,055
780,053
810,054
840,052
870,052

0,964
0,96
0,957
0,957
0,953
0,952
0,949
0,948

Grfico H13: Curva de absorbancia de 25 l de la Muestra F

TIEMPO VS ABSORBANCIA.
ABSORBANCIA
(nm)

500
0 1000

TIEMPO(s)

Elaborado: R. Snchez y G. Pazmio 2016.

% Inhibicin:

1,2380,948
100=23,43
1,238

109

Anexo F- Layout.

110

Anexos G - Anlisis realizados.


Anlisis Fisicoqumicos.

Anlisis Microbiolgicos.

Anlisis Taxonmico.

Anexos H Fotografas de la investigacin.

116

1. Operaciones preliminares.

Foto 1.2. Seleccin de materia prima.

Foto 1.2. Peso de Hojas

Foto 1.3. Lavado de hojas seleccionadas.

Seleccionadas.

Foto 1.3. Secado por calor (50C) de hojas seleccionadas.

117

Foto 1.4. Secado por enfriamiento (-16,5C; 5,5C) de hojas


seleccionadas.

Foto 1.5. Molienda de Albahaca (Ocinum basilicum L.) deshidratada.

Foto 1.6 Sellado al vaco de Hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L.)


deshidratadas y molidas.

118

2. Operaciones durante el proceso.

Foto 1.7 Obtencin de aceite esencial.

Foto 1.8 Lixiviacin de muestra seca con solvente (metanol; agua


acidulada).

119

Foto 1.8 Filtracin de extractos con solvente (agua acidulada;


metanol).

120

Foto 1.9 Recuperacin de solvente (metanol; agua acidulada) y


obtencin de sustrato del proceso de lixiviacin (aceite).

121

Foto 1.10 Maceracin de hojas de Albahaca (Ocinum basilicum L.)

Foto 1.11 Envasado de especia alimentaria

122

3. Operaciones finales.
Medicin de la capacidad antioxidante

DPPH para

Adicin de muestra

Resultado

calibracin.

a la cubeta

cualitativo de

espectrofotomtrica

inhibicin de
radicales libres

Tamizaje Fitoqumico.
Ensayo para detectar Compuestos Reductores:

123

Foto 2.. Adicin de la

Muestra A

Muestra C

alcuota de la muestra.

Ensayo para detectar Resinas.

Adicin de la

Muestra A

Muestra C

alcuota de la muestra.

Ensayo para detectar Triterpenos y Esteroides.

124

Adicin de la

Muestra A

Muestra C

alcuota de la muestra.

Ensayo para detectar saponinas.

Muestra A

Muestra C

Ensayo para detectar Flavonoides

125

Muestra A

Muestra C

Ensayo para detectar Alcaloides.

Muestra A

Muestra C

126

Ensayo para detectar Compuesto fenlicos.

Muestra A

Muestra C

127