Fluorescencia de la

clorofila
Aplicacin para estudios a nivel fisiolgico en plantas

Luis Francisco Bustamante Ing. en Biotecnologa Vegetal

Medicin de la fluorescencia de la clorofila en plantas:

En los aos recientes la medicin de la fluorescencia de la clorofila se ha
transformado en una tcnica ubicua para los estudios del tipo fisiolgico y
ecofisiolgico.
Es un complemento esencial para toda investigacin que analice el
comportamiento fotosinttico de las plantas en campo.

Pero en primera instancia

Que es la fluorescencia?

La fluorescencia es un fenmeno fsico asociado a un tipo especifico de luminiscencia.

Es la capacidad de un cuerpo (solido, liquido y gaseoso) para absorber energa en forma de radiaciones
electromagnticas y luego emitir parte de esa energa en forma de radiacin electromagntica de una
longitud de onda diferente.

Y en plantas?...

Estos tres procesos

ocurren en
competicin!!!!

Y por eso es que al aumentar la

eficiencia de alguna de estas
tres vas, la de los otros dos
disminuye.

La radiacin electromagntica
reemitida como fluorescencia
de la Chl es apenas 1-2% de la
luz absorbida.

Recordemos

Va fotoqumica:

Por qu medir la fluorescencia de la clorofila en plantas?

Medir la fluorescencia de la clorofila, nos permite conocer el estado fisiolgico del aparato fotosinttico de las
plantas. De esta manera permite relacionar la incidencia de algn tipo de estrs con el deterioro fisiolgico de
dicho aparato fotosinttico (particularmente el PSII).

Pero conocer la fluorescencia de la clorofila en un momento dado, nos es til

para diagnosticar el aparato fotosinttico?
Para poder dar uso a esta propiedad fsica (fluorescencia) y su relacin con la actividad fotoqumica y el estado
fisiolgico de los PS se ha diseado algunos test, y a partir de dichos test se ha propuesto ciertos ndices, que se
relacionan de forma directa con el estado fotoqumico de las plantas:

Oscuridad

Luz

Fs

Pero

Qu parmetros medir y que significan?

Primero consideremos algunas definiciones:

Fuente de luz actnica: cualquier fuente de luz que pueda inducir fotosntesis.
Luz del rojo lejano: fuente de luz cercana a los 700nm que induce la actividad del PSI, lo que
subsecuentemente permite el drenaje (de electrones) del PSII. Esto permite una rpida re-oxidacin del PSII.
Fm: fluorescencia mxima medida durante el primer pulso de saturacin luego de la adaptacin a oscuridad.
Fm: fluorescencia medida luego del pulso saturante de luz en condiciones no adaptadas a la oscuridad. Este
valor es disminuido por el NPQ (apagamiento no fotoqumico).
Fo: fluorescencia mnima luego de la adaptacin a oscuridad.
Ft: la seal de fluorescencia instantneamente medida por el fluorometro (condiciones no adaptadas a
oscuridad.
Fs: es la fluorescencia en estado estacionario. Es el nivel de fluorescencia creado por la luz actnica luego del
pulso saturante.

 Fv/Fm = (Fm - Fo) / Fm : Mximo rendimiento cuntico. Este ndice estima la mxima porcin de la luz
absorbida que es utilizada en los centros de reaccin del PSII. Es decir, representa el mximo potencial de
eficiencia cuntica del PSII. Por lo general el optimo est entre 0,79 0,83. Valores menores pueden ser un
indicio de algn estrs.
Fv/Fo = (Fm - Fo) / Fo : Este ndice relaciona el mxima porcin de luz que entra al PSII respecto de
fluorescencia intrnseca que posee el sistema (ej. fluorescencia pre-fotosinttica de los pigmentos antena).
Es un ndice normalizado (muy importante para los anlisis estadsticos). Este ndice es ms sensible que el
Fv/Fm a cualquier estrs. Comnmente las mediciones van de 0 a 4.
Rendimiento cuntico del PSII = Y(II) = (Fm - Fs) / Fm : es una medicin del rendimiento cuntico efectivo.
Estima la porcin efectiva de luz absorbida que es utilizada en centros de reaccin del PSII. Es afectado por
el cierre de los centros de reaccin (test no adaptado a la oscuridad) y por la disipacin trmica (NPQ).
ETR: es un parmetro que mide la tasa de transporte de electrones en el PSII. Estima la porcin de energa
que es trasmitida por las vas fotoqumicas para la transformacin energtica (fotosntesis). Se ha
demostrado que este parmetro est correlacionado con la asimilacin de CO2.

Material complementario:
https://es.khanacademy.org/science/biology/photosynthesis-inplants/the-light-dependent-reactions-of-photosynthesis/a/light-andphotosynthetic-pigments
https://es.khanacademy.org/science/biology/photosynthesis-inplants/photorespiration--c3-c4-cam-plants/v/photorespiration

Pero

Todo es ms fcil en la practica que en la teora