GUA DE ESTUDIO IV MEDIO GENOMA

ADN Y REPLICACIN
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1. El ADN como portador de la informacin gentica

El ADN, es el cido nucleico que est presente en todas las clulas de los seres vivos.
Esta molcula, tiene como funcin portal el material gentico de todos los organismos y
transferirla a sus descendientes. Sin embargo, esta afirmacin no hubiese sido posible
sin aportes de numerosos cientficos quienes investigaron esta molcula y descubrieron
su potencial hereditario.
Ya en el siglo XIX se conoca que en el ncleo celular haba una sustancia, la nucleina,
formada por una parte cida (hoy ADN) y una parte bsica (hoy protena). Pero fue entre
1944 y 1952, cuando una serie de experimentos cruciales apuntaron claramente al DNA
como el material gentico. Antes de esta fecha los cidos nucleicos se consideraban
demasiado simples, estaban formados simplemente por 4 clases de monmeros y se
consideraron simplemente como una sustancia estructural del ncleo celular. Se
consideraba ms probable que los genes estuvieran formados por protenas, que eran
molculas mucho ms complejas.
En 1928, el misterio comenz a resolverse, cuando el microbilogo britnico Frederick
Griffith inicia sus investigaciones en bsqueda de la vacuna contra la neumona. Griffith
nunca encontr la vacuna, pero su experimento abri la puerta para investigaciones que
luego demostraron que el ADN es la molcula de la herencia.
Lo que Griffith descubri fue la transformacin bacteriana, es decir, las molculas de la
herencia podan pasar de una bacteria a otra modificando el fenotipo. Sin embargo, esto no
esclareci si las molculas correspondan a protenas o al ADN. En 1944, el bilogo
canadiense Oswald Avery y su equipo de investigadores se propusieron identificar cul era
la molcula de la herencia. Para conseguirlo, aislaron las protenas y el ADN de la cepa S y
los aadieron a cultivos de la cepa R, luego analizaron el efecto de cada una sobre el
fenotipo de las clulas de la cepa R. El resultado fue que solo el ADN produjo la

transformacin bacteriana observada por Griffith, lo que permiti identificar al ADN como
la molcula responsable de la herencia. (Figura 1)
.

Figura 1. Experimento de Griffith. Transformacin Bacteriana .

Un segundo experimento independiente proporcion la evidencia definitiva. Hersey y

Chase (1952) demostraron, mediante el experimento de la batidora, el papel del ADN
(Figura 2). Para esto usaron en fago T2 (virus) que solo tiene ADN y las protenas de la
cpsida. Marcaron radioactivamente dos muestras de fago T2. En el primer caso las
protenas del fago T2 con S35 y en segundo el ADN con P32 (las protenas no tienen P y
los nucleicos no tienen S). Estas muestras se usaron para infectar muestras separadas de
bacterias. Las suspensiones bacterianas se agitaron con una batidora y las capsidas se

separaron de las bacterias por centrifugacin. Solo las bacterias infectadas con virus
marcados con P32 tenan radiactividad, indicando que era el ADN el agente infectante. En
el otro caso la radiactividad quedaba en el sobrenadante donde estaban las cpsidas
marcadas con S35

Figura 2. Experimento de Hersey y Chase

2. Modelo de Watson y Crick.

Una vez que se determin la composicin qumica del ADN, faltaba conocer cmo se
organizaban los nucletidos para formar la estructura del ADN, fundamental para

comprender el funcionamiento de la molcula. Diferentes investigadores competan por

ser los primeros en descubrir la estructura del ADN. Finalmente, en 1953, el
norteamericano James Watson y el britnico Francis Crick propusieron un modelo del
ADN, gracias al que obtuvieron el Premio Nobel en 1962, junto con Maurice Wilkins.
Las principales caractersticas de la molcula de ADN, establecidas por Watson y Crick
en su modelo son:
El ADN est compuesto por dos cadenas de nucletidos enrolladas que forman
una doble hlice. Los nucletidos de una misma cadena, se unen entre s con
enlaces fosfodiester entre el carbono 3 de la pentosa de un nucletido con el
grupo fosfato unido al carbono 5 del siguiente nucletido.
Las pentosas y los grupos fosfato forman el esqueleto externo de la hlice y las
bases nitrogenadas se disponen hacia el interior.
Las bases nitrogenadas de ambas cadenas se unen con puentes de hidrgeno. La
adenina se une siempre con la timina, con dos puentes de hidrgeno, mientras
que la guanina lo hace con la citosina con tres de estos enlaces. Por lo tanto, las
secuencias de nucletidos son complementarias, por ejemplo, la secuencia
complementaria de GCATT es CGTAA.
Las dos cadenas de nucletidos son antiparalelas. Los extremos de cada una de
las cadenas son denominados 5-P (fosfato) y 3-OH (hidroxilo) y las dos
cadenas se alinean en direcciones opuestas, como si una estuviera de pie y la
otra de cabeza, quedando el grupo OH del extremo 3 de una de ellas
enfrentado al grupo fosfato del extremo 5 de la cadena complementaria.

As se estableca la composicin qumica de la molcula de ADN y se entenda la estructura

y compactacin del material gentico. (Figura 3)

Figura 3. Estructura del DNA

3. Herencia y replicacin del ADN

El ADN posee la informacin necesaria para transmitir los caracteres de una especie de
generacin en generacin y conseguir la supervivencia de la especie. Por lo tanto, la
molcula de ADN constituye la base qumica de la herencia. La mayora de las molculas
de ADN se encuentran en los cromosomas del ncleo de las clulas. El nmero de
cromosomas depende de la especie, as, por ejemplo, las bacterias poseen un nico
cromosoma, mientras que las clulas humanas poseen 46 (23 de cada progenitor). La
informacin gentica en forma de ADN se organiza estructuralmente dentro del cromosoma
arrollndose alrededor de ciertas protenas (histonas) constituyendo asociaciones ADNprotena denominadas nucleosomas.
Las cadenas de ADN de cada especie difieren en longitud y en la secuencia de las bases
nitrogenadas, de tal manera que esta secuencia contiene la informacin gentica

caracterstica de cada especie. La informacin gentica debe reproducirse exactamente cada

vez que la clula se divide de tal manera que cada clula contenga la cantidad de ADN
correspondiente, por lo tanto, este proceso debe realizarse antes del proceso de mitosis
celular (Figura 4).

Figura 4. Ciclo Celular.

El proceso por el que las molculas de ADN se copian a s mismas en el ncleo de las
clulas recibe el nombre de replicacin del ADN. La replicacin pretende a partir de una
cadena de ADN obtener dos iguales.
3.1. Principales caractersticas de la replicacin
Las caractersticas principales del proceso son: su carcter semiconservador, la realizacin
simultnea en ambas hebras, de forma secuencial y con carcter bidireccional y origen
monofocal (procariotas) o multifocal (eucariotas).

Semiconservador. Es decir, cada hebra sirve como molde para la sntesis de una
nueva cadena, produciendo dos nuevas molculas de ADN, cada una con una de las
hebras viejas y una nueva hebra hija. Esta hiptesis fue propuesta por Watson and
Crick poco despus de la publicacin del modelo de la doble hlice, y fue probado
posteriormente con mltiples experimentos de marcaje.
Bidireccional. La separacin de las hebras progenitoras que comienza en cada
origen de replicacin progresa en ambas direcciones. Los puntos de transicin entre

la doble hebra y las hebras sencillas se llaman horquillas de replicacin y van

alejndose entre si.
El inicio de la replicacin en procariotas es monofocal, comienza siempre en un punto
determinado del cromosoma circular denominado origen (ORI). La replicacin progresa
formando dos horquillas de replicacin. Por el contrario, en eucariotas la replicacin es
multifocal, pues en cada cromosoma existen mltiples orgenes de replicacin (cientos o
miles) que dan lugar a un nmero doble de horquillas de replicacin. Esto permite
completar la replicacin de los cromosomas en un tiempo razonable.

Semidiscontinuo. Como veremos ms adelante la sntesis de la nueva cadena tiene

siempre lugar en el sentido 5`-3`, siendo el grupo 3`OH el punto por el cual el ADN
es elongado. Esto es vlido para todas las polimerasas tanto la ADNpol como las
ARN polimerasas. Si las dos hebras son antiparalelas, como pueden las dos hebras
ser sintetizadas de manera continua mientras progresa la horquilla de replicacin. La
solucin que la clula adopta ante este problema fue descubierta por Okazaki. Que
descubri que una de las hebras era sintetizada en pequeos fragmentos llamados
fragmentos de okazaki. Por lo tanto, una de las hebras es sintetizada de forma
continua, y la otra de forma discontinua. La longitud de los fragmentos de okazaki
puede variar desde unos cientos de nucletidos hasta unos miles, segn el tipo de
clula.

3.2. Etapas de la replicacin del ADN en eucariotas. (Figura 5)

1 Etapa: Desenrrollamiento y apertura de la doble hlice en el punto de inicio.
Intervienen un grupo de enzimas y protenas, a cuyo conjunto se denomina replisoma.

Primero: intervienen
desenrrollamiento

Segundo: actan las enzimas helicasas que rompen los puentes de hidrogeno de las
cadenas de ADN.

las

enzimas

topoisomerasas

que

facilitan

en

2 etapa. Formacin de horquilla de replicacin

Actan las protenas SSBP (Proteinas de unin de cadena simple) que se unen a
las hebras molde para que no vuelva a enrollarse ni a unirse.

3a etapa. Sntesis de dos nuevas hebras de ADN

Sntesis continua

Actan las ADN polimerasas para sintetizar las nuevas hebras en sentido 5-3, ya
que la lectura se hace en el sentido 3-5.

Sntesis discontinua

En la cadena 5-3 no puede ser leda directamente, esto se soluciona leyendo

pequeos fragmentos de ella. Los siguientes puntos resumen el proceso:

La primasa sintetiza varios cebadores, que son segmentos de ARN.

Posteriormente acta la ADN polimerasa que gracias a sus funcin exonucleasa,

retira los segmentos de ARN o primer, y luego, gracias a su funcin polimerasa,
rellena los huecos con ADN.
Finalmente la ADN ligasa sella las uniones entre los fragmentos independientes y
liga las hebras.

Debemos recordar que la replicacin se lleva a cabo simultneamente en las dos hebras
moldes y que posterior al termino del proceso podemos tener 2 molculas de ADN
sintetizadas a partir de una. Adems, durante el proceso de replicacin, una de las cadenas
madre se lee bien (en sentido 3` 5`) y, por lo tanto, la nueva cadena se sintetiza de
corrido (hebra conductora), pero la otra est dispuesta en sentido contrario al que la
polimerasa puede leer (hebra retardada). La solucin a este problema es sintetizar la cadena
en pequeos fragmentos en el sentido 5` 3`.

Figur
a 5. Replicacin del DNA.

ACTIVIDADES
Realiza las siguientes actividades en tu cuaderno de manera ordenada.
1. Responde:
a)
b)
c)
d)

Explica claramente que es el ADN y cul es su funcin

Responde: Qu es la replicacin y porque es tan necesaria?
Explica claramente que significa que la replicacin sea semiconservativa
Define los siguientes conceptos: Nucletidos histona nucleosoma cadena retadada.
2. Siguiendo el modelo de Watson y Crick, dibuja la cadena de nucletidos
complementaria a la de la siguiente figura y responde:

a) Por qu se define el ADN cmo una doble hebra antiparalela?

b) Define los enlaces que unen cada nucletido con otro y cada cadena de ADN para formar
la doble hlice.

3. Observa el siguiente grfico y responde:

a)
b)
c)
d)

En qu etapa del ciclo celular se replica el ADN?

En qu etapa del ciclo celular, la clula crece y se desarrolla?
De qu sirve la mitosis en organismos multicelulares?
Describe los procesos que se llevan a cabo en la etapa G2.

4. Observa el siguiente esquema y responde.

a) Rotula la hebra retardada y la hebra continua.

b) Cules son las molculas que actan en el proceso? Explica sus funciones.
c) Qu se necesita para realizar la sntesis de una hebra de ADN a partir de la cadena

rezagada?