Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
INFECCION URINARIA
COLONIZACIN,
INVASIN Y
MULTIPLICACIN, EN
LA VA URINARIA, DE
MICROORGANISMOS
PATGENOS QUE
SOBREPASA LA
CAPACIDAD DE
DEFENSA DEL
INDIVIDUO AFECTADO.
EPIDEMIOLOGIA
La IU es una causa frecuente de consulta en medicina familiar .
15% al 25% de las consultas hospitalarias diarias.
EPIDEMIOLOGIA
EN AMBOS SEXOS LA PROBABILIDAD DE ITU
ES MAYOR EN PACIENTES CON:
PATOLOGIA DE LA VIA URINARIA (REFLUJO
VESICOURETERAL, LITIASIS)
CLASIFICACION
INFECCIO
NES
URINARIAS
BAJAS
URETRITIS
CISTITIS
INFECCIONES
URINARIAS
ALTAS
PIELONEFRITIS
AGUDA
PROSTATITIS
CLASIFICACION
Infecciones
primarias
SEGN HISTORIA
NATURAL DE LA
ENFERMEDAD
Bacteriuria no
resuelta
Infecciones
recurrentes
Persistencia
bacteriana
Reinfecci
n
UROCULTIVO
Es el cultivo de la
orina que permite
investigar la
presencia de
bacterias en ella
Determinar su
cantidad,
especie y
sensibilidad
antibiotica
Se indica para
detectar bacterias
significativas que
van a confirmar o
descartar una ITU
FASE PREANALITICA
RECOLECCION DE LA
MUESTRA
PREFERENTEMENTE SE DEBE
OBTENER LA PRIMERA ORINA DE LA
MAANA.
NO FORZAR LA INGESTIN DE
LQUIDOS.
VOLUMEN RECOMENDADO: 25 A 50
mL. VOLUMEN MNIMO: 5-10 mL.
LAS MUESTRAS SE DEBEN OBTENER
ANTES DE INICIAR EL
TRATAMIENTO ATB
PRIMERA PARTE
DE LA MICCIN
CONTIENE LA
FLORA DE
ARRASTRE DE LA
PORCIN
DISTAL DE LA
URETRA
LA PARTE FINAL
ESCASO
CONTENIDO
MICROBIANO
PUNCION SUPRAPUBICA
POSICIN PARA LA
REALIZACIN DE ASPIRADO
SUPRAPBICO - VISTA
LATERAL
LA VEJIGA SE PERFORA EN
LA LNEA MEDIA, POR
ENCIMA DE LA SNFISIS.
ASPIRACION DE CATETER
VESICAL
BOLSA COLECTORA
NO SE RECOMIENDA
PUES TIENE UN 85% DE
POSIBILIDAD DE
FALSOS POSITIVOS.
TIENE VALOR SI ES
NEGATIVO.
ENVO Y TRANSPORTE DE
MUESTRA
CONDICIONES ESPECIFICAS
La muestra debe ser mantenida lo ms cerca posible de su estado
original
a)
b)
VOLUMEN DE MUESTRAS
EXAMEN FISICO
Aspecto : Es considerado como normal un
aspecto transparente, pero es aceptado
hasta un aspecto ligeramente turbio ya
que este puede ser debido a
contaminaciones.
El aspecto de una orina turbia ya es
considerado como anormal, esto puede
ser debido a presencia de leucocitos,
glbulos rojos, bacterias , cristales, grasa
(Por obstruccin de linfticos).
EXAMEN FISICO
Color : En condiciones normales el color de la orina va de
amarillo hasta mbar. Se pueden encontrar colores anormales
debido a la presencia de elementos anormales en la orina
como por ejemplo sangre, medicamentos, alimentos y otros
pigmentos.
MEDIOS
Las bacterias para su desarrollo requieren de sustancias nutritivas cuyos
componentes bsicos deben satisfacer las mnimas exigencias nutricionales
y condiciones de atmsfera (aerobiosis, anaerobiosis, microaeroflia), pH y
temperatura ptima para su crecimiento in vitro.
La eleccin de los medios de cultivo se realiza en funcin a la localizacin
de las infecciones y las bacterias a investigar. Los errores cometidos
durante este paso del ciclo de procedimientos pueden invalidar la lectura e
interpretacin de los cultivos.
Los medios usados son:
Placas con agar sangre de carnero (AS)
Placas con agar Mc Conkey (McC)
Otros medios: para hongos si es necesario Agar Sabouraud
INOCULACION
Usar el asa calibrada, flamear,
dejar
enfriar, mantener
en
INOCULACION
Estriar en la placas de cultivo de la siguiente
manera:
Estriar de arriba hacia el centro de la placa y
estriar la orina en una serie de pasos de
ngulo de 90 a travs del inculo (solo para
el mtodo de 0.001 ml).
Sedimento
Agar Cled
Medios de cultivo
Normal sin grmenes
Normal con grmenes
Patolgico con grmenes
1 o 10 L
Agar sangre
Agar
Chocolate
Cled
Cled, MC
Cled, MC
Peditrico (AS)
AS, Ach, Cled
CLED, MEDIO
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
DEL TRACTO URINARIO
Aislamiento selectivo de
Enterobacterias y Escherichia coli
SABOURAUD GENTAMICINA
CLORANFENICOL 2, AGAR
Aislamiento selectivo de
levaduras y hongos
El aumento del nivel de peptonas y
dextrosa favorece el crecimiento
de cepas de hongos.
La presencia de gentamicina
inhibe el crecimiento de la
mayora de las bacterias Gramnegativas y Gram-positivas.
La presencia del cloranfenicol
mejora la selectividad frente a
algunas especies que pueden ser
resistentes a la gentamicina
(estreptococos, Proteus, etc.). El pH
del agar es ligeramente cido, lo
que favorece el crecimiento
fngico ms que el crecimiento
SEDIMENTO URINARIO
Examen microscpico de la orina
(centrifugada)
(no centrifugada
BACTERIURIA
DETECCIN DE BACTERIURIA
La presencia de nitritos en orina
es signo de colonizacin o
infeccin bacteriana y puede
analizarse mediante el examen
microscpico y las tiras reactivas
ya que por medio de esta revela
la presencia de bacterias en la
orina a travs de la deteccin de
nitritos, los cuales aparecen
cuando los nitratos de la orina
son reducidos por la nitrato
reductasa bacteriana.
Nitritos:
La sensibilidad es muy baja, pero la
especificidad es del 92%. La presencia
de falsos negativos puede explicarse
por una baja cantidad de nitratos en la
dieta o porque la bacteria carece de la
enzima, como por ejemplo ocurre en
Pseudomonas sp., Staphylococcus sp.
Enterococcus sp. Acinetobacter y
Cndida spp.) y la prueba no es
demasiado sensible (60 %). Por lo tanto
es imprescindible analizar el sedimento
urinario.-
COLORACION GRAM
El examen microscpico con
tincin de Gram es el mtodo
ms simple, ms rpido, ms
barato y probablemente ms
fiable para identificar muestras
de
orina
con
recuentos
bacterianos iguales o superiores
a
105 UFC/m
UROCULTIVO-SEDIMENTO
Al momento de informar los
urocultivos, se recomienda revisar el
resultado del sedimento para que
ambos informes sean concordantes.
Es necesario definir qu se entiende
por sedimento sugerente de ITU para
poder evaluar las discordancias
entre el sedimento y el urocultivo:
Piocitos: > 10 /ul > de 5-6 por
campo de 40x
Leucocitos: > 10 /ul > de 5-6 por
campo de 40x
Bacterias: Regular o abundante
cantidad
La
presencia
de
clulas
descamativas y/o mucus en una
paciente mujer, sugiere que la
muestra est contaminada con
secrecin vaginal.
IDENTIFICACIN BACTERIANA
Para un adecuado sistema de vigilancia de
infecciones, es necesario realizar la identificacin
de las bacterias.
El laboratorio de microbiologa tiene la
responsabilidad de identificar el microorganismo
causante de una infeccin, ms an cuando el
espectro de los agentes responsables de
infecciones intrahospitalarias han cambiado en los
ltimos aos.
IDENTIFICACIN BACTERIANA
En los urocultivos se pueden aislar una cantidad
considerable de microorganismos causantes de
infecciones urinarias, por ello es necesario
identificarlo y hacerle su respectivo antibiograma.
Estos microorganismos pueden ser: Bacilos Gram
Negativos, Cocos Gram Positivos, Bacilos Gram
Negativos No Fermentadores (mayormente en
infecciones intrahospitalarias)
IDENTIFICACIN BACTERIANA
Cada grupo de bacterias tiene un metodologa
diferente de identificar, tiene diferente forma de
crecimiento en diferentes medios de cultivo.
Los medios usados mayormente son:
Agar Sangre: CGP, BGN, BGNNF y levaduras
Agar McConkey: BGN y BGNNF
Agar Sabouraud: levaduras
IDENTIFICACIN DE CGP
Los CGP solo crecen en Agar sangre
Se debe de considerar el tipo de muestra que se esta analizando.
Tener en cuenta que enterococcus spp y se aslan con mayor
frecuencia en muestras de orina o muestras relacionadas con vas
urinarias
Los CGP de genero streptococcus spp se aslan con mayor
frecuencia en muestras de secreciones farngeas, o secreciones de
vas respiratorias.
Los CGP de genero staphylococcus spp se aslan en cualquiera de
las 2 muestras sean vas urinarias como vas respiratorias, pero
tener en cuenta si son capaces de causar dao o son parte de la
flora normal.
IDENTIFICACIN DE CGP
Para su identificacion se usan pruebas como: coagulasa,
catalasa, fermentacin de manitol, sensibilidad a la
novobiocina, a la optoquina y a la bacitracina; NaCl 6.5 %,
Bilis Esculina, entre los mas importantes
Streptococcus
spp
Enterococcus spp
Staphylococcus
spp
IDENTIFICACIN DE CGP
CGP
Catalasa -
Catalasa +
Streptococc
us
Staphylococcus
S. Aureus
Coag (+)
NB (R)
Manitol (+)
S.
Saprophyticcus
Coag (-)
NB (R)
Manitol (-)
S.
Epidermidis
Coag (-)
NB (S)
Manitol (-)
Alfa
hemoltico
St.
Pneumonia
e
Optoquin (S)
St.
Viridans
Optoquin (R)
Enterococcus
spp
Beta
hemolticos
St.
Pyogenes
Bacitracina (S)
PYR (+)
St.
Agalactiae
Bacitracina (R)
PYR (-)
IDENTIFICACIN DE BGN Y
BGNNF
Este tipo de bacterias suele crecer en Agar sangre y adems
crecen en el medio selectivo McConkey, en el cual se pueden
diferenciar los Lactosa + de Lactosa -.
A partir de este Agar se tomaran colonias aisladas, y se pasara
a hacer la identificacin por reacciones bioqumicas.
IDENTIFICACIN DE BGN Y
BGNNF
En el medio McConkey crecen las enterobacterias, de las
cuales se pueden diferenciar 2 grandes grupos:
Bacilos fermentadores (E. coli, Klebsiella spp, Proteus spp, etc)
Bacilos no fermentadores (Pseudomonas spp, Acinetobacter spp)
IDENTIFICACIN DE BGN Y
BGNNF
Citrato: para comprobar si la bacteria es capaz de usar el citrato como unica fuente de
carbono.
TSI: Capacidad de la bacteria para fermentar los azucares (lactosa, sacarosa y glucosa),
ademas de produccion de gas y acido sulfurico.
RM/VP: se usa para ver si la bacteria usa otros medio para fermentacion de azucares
como por ejemplo la via acido mixta y la via butanodiolica
Citra
to
TSI
LIA
S/I/M
Urea
RM /
VP
E. Coli
A/A
K/K
-++
+-
K. Pneumoniae
A/A
K/K
---
-+
K. oxytoca
A/A
K/K
-+-
-+
P. mirabilis
K/A
R/A
+-+
+-
P. vulgaris
K/A
R/A
+++
+-
Morganella spp
K/A
R/A
--+
+-
Providencia spp
K/A
R/A
--+
+-
Enterobacter spp
A/A
K/A
--+
-+
Citrobacter spp
A/A
K/A
+-+
-+
K/K
K/K
---
--
K/K
K/K
--+
--
Escherichia coli
Pseudomonas
aeurginosas
Enterobacter spp
PRUEBAS DE SUCEPTIBILIDAD
Determinacin de la susceptibilidad al antibitico, de las bacterias
que causan enfermedad clnica.
Garantizar que los antibiticos prescritos sean apropiados
respecto al organismo aislado.
Flucloxacilin
a
Staphylococcus aureus
SARM
Vancomicina
CONCENTRACION MINIMA
INHIBITORIA
Es el parmetro fundamental para la determinacin de la
sensibilidad de la bacteria frente a un antibitico.
CONCENTRACION MINIMA
BACTERICIDA
Se refiere a la concentracin del antibitico necesaria para
producir una disminucin del tamao original del inoculo
bacteriano en un porcentaje mayor o igual al 99.9%. Muchas veces
el MIC es equivalente al MBC.
E TEST
Prueba innovadora utiliza una banda de material que
incorpora una gradiente exponencial de antibiticos
METODO AUTOMATIZADO
Utiliza sistemas de micro dilucin en medio liquido, sobre
micro placas en pocillos en U.
FASES DE IDENTIFICACION
3 filas superiores de la muestra
5 filas inferiores para antibiograma
ANTIBIOGRAMA
Prueba microbiolgica que se realiza para determinar la
sensibilidad de una colonia bacteriana a un antibitico o grupo de
antibiticos.
El antibiograma, una vez realizado, da la siguiente informacin:
Grado de sensibilidad de la colonia bacteriana a un determinado
antibitico.
Diferencia de sensibilidad por parte de la colonia a diferentes
antibiticos.
Con esta informacin, se clasifica el efecto del antibitico sobre esa
determinada colonia en: Resistente (R), Intermedio (I) y Sensible (S).
En el mbito clnico, el estudio sobre la bacteria causante de la
infeccin y sobre el antibiograma es entregado al mdico
responsable del paciente.
DISCO DIFUSOR
En una placa de Petri, se siembra la
bacteria por diseminacin" para
que esta pueda crecer de manera
homognea por toda la placa. Acto
seguido, se colocan los discos
difusores, unas pequeas cpsulas
que contienen antibitico, que
liberan al medio. Las placas se
incuban y pasado el tiempo
pertinente se observa. Las
bacterias habrn crecido por toda
la placa salvo en las zonas
impregnadas con el antibitico.
SELECCIN DE ANTIBITICOS
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Si se tratara de un Bacilo Gram Negativo, se usaran antibiticos
especificos para este grupo de bacterias (descritos en el manual
del INS):
Cefalosporinas
Aminoglucsidos
Combinaciones con inhibidores de beta lactamasas
Ampicilina
Carbapenems
Quinolonas
Monobactams
Tetraciclinas
Otros (cotrimoxazol, cloranfenicol, fosfomicina)
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Si se tratase de un Coco Gram Positivo, se tomara en
cuenta el tipo de bacteria que sea y se usarn discos
especificos, para:
Staphylococcus spp
Streptococcus spp
Streptococcus pneumoniae
Enterococcus spp
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Para Staphylococcus spp:
Penicilinas
Glicopeptidos
Aminoglucosido
Fluoroquinolonas
Tetraciclina
Macrolidos
Lincosamidas
Otros (cloramfenicol, rifampicina, nitrofurantoina, cotrimoxazol)
A considerar (noboviocina, Polimixina B)
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Para enterococcus spp:
Penicilinas
Glicopeptidos
Aminoglucosidos
Fluoroquinolonas
Tetraciclina
Macrolidos
Otros (rifampicina, nitrofurantoina)
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Para steptococcus spp y pneumoniae:
Penicilinas
Glicopeptidos
Quinolonas
Cefalosporinas (solo para streptococcus spp)
Lincosamidas (solo para streptococcus spp)
Tetraciclina
Macrolidos
Otros (cloramfenicol, rifampicina, cotrimoxazol)
A considerar (optoquina)
SELECCIN DE ANTIBITICOS
Para Bacilos Gram Negativos No Fermentadores:
Cefalosporinas (3 y 4 generacion)
REPORTE DE ANTIBITICOS
Se reportar teniendo criterio sobre los antibiticos y sobre las
limitaciones de algunos antibacterianos.
Se tendr que tomar en cuenta el reporte de resistencias
bacterianas, para que el medico tome precauciones sobre el
tratamiento a aplicar.
Para tener la certeza de los resultados, se le harn los controles de
calidad respectivos a los discos de sensibilidad, al medio de
difusin, a la escala de Mc Farland, disposicin de discos, entre
otros.
Condicin
clnica
o mtodo de
recoleccin
Sedimento
urinario
Microorganismo
aislado
Interpretacin/
Conducta
recomendable
Independiente
del resultado
Urocultivo negativo
Cualquier
recuento
Puncin
suprapbica
Independiente
del resultado
Cualquier
microorganismo
Identificacin y
estudio de
susceptibilidad
1.000
Cateterizacin
transitoria
Independiente
del resultado
< 2 especies
uropatgenas
Idem
> 10.000
Segunda
miccin en
paciente
especial*
Independiente
del resultado
< 2 especies
uropatgenas
Idem
> 10.000
Orina por
catter
permanente
Patolgico
< 2 especies
uropatgenas
Idem
> 10.000
Segunda
miccin
Patolgico
< 2 especies
uropatgenas
Idem
Recuento de
colonias
(UFC/ml)
Condicin
clnica
o mtodo de
recoleccin
Sedimento
urinario
Microorganismo
aislado
Interpretacin/
Conducta
recomendable
> 100.000
Segunda miccin
Patolgico
2 uropatgenos +
otra bacteria con
recuento 10 veces
menos
Identificacin y
susceptibilidad
slo de los
uropatgenos
> 100.000
Segunda miccin
Sin antecedente
del sedimento
< 2 especies
uropatgenas
Identificacin y
estudio de
susceptibilidad
> 100.000
---
---
>3
microorganismos,
sin predominio de
alguno
Polimicrobismo.
Solicite nueva
muestra
CONTROL DE CALIDAD
PRE ANALITICO
Calidad de la muestra
Material esteril
CONTROL DE CALIDAD
ANALITICO
Equipos
- Debe existir un control periodico y regular y su rstado debe
registrarse adecuadamente.
Medios de cultivo
Control de Ph
espesor de medio
humedad
almacenamiento
Fecha de vencimiento
Control Esterilidad 15 lbs de presion (1210c) x 15 mn
CONTROL DE CALIDAD
ANALITICO
DISCOS DE SENSIBILIDAD
conservacion adecuada(8 C 0 - 14 C )
-lactmicos guardarse congelados
Los dispensadores deben alacanzar la T.A adecuada
Fecha de vencimiento .
( 1ul)
1000 UFC/ml
(10ul)
Semicuantitativa
Espectofometrico
manometrico
Post analitico
Validacion de resultados.
Correlacionar la presencia de leucocitos con la presencia de bacterias
observadas en el sedimento urinario.
examen qumico y microscpico
a)Nitritos positivos con bacterias presentes en el sedimento.
b)Leucocitos por L con leucocitos presentes en el sedimento.
positivo
GRACIAS