Universidad Nacional Mayor de San Marcos

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

EAP DE TECNOLOGIA MDICA

GUIA DE PRACTICAS N 12
I.- OBJETIVOS:
-Realizar el procesamiento de muestras de lquido cfalo raqudeo segn protocolo.

II.-INTRODUCCION
El LCR corresponde a un ultra filtrado que se produce en su mayor parte en los plexos coroideos de
los ventrculos laterales, circula a travs del espacio subaracnoideo. El volumen total de LCR es aprox.
150 ml y su velocidad de produccin es 550 ml/da; aspecto transparente e incoloro como cristal de
roca.
Sus funciones incluyen: Aportar nutrientes y lubricacin al SNC que recubre, eliminar deshechos
metablicos y, proteger al cerebro y mdula espinal contra traumatismos a modo de barrera
mecnica.
RECEPCION Y RECOLECCION DE MUESTRAS:
La muestra es obtenida por Puncin Lumbar (PL) entre tercera, cuarta o quinta vrtebras de la
zona lumbar en la columna.
Rotular los tubos donde se colectarn las muestras de LCR con: Nombre del paciente, nmero de
historia clnica, cama, hora de obtencin.
La manipulacin en la toma de muestra y durante el procesamiento debe ser guantes y
mascarilla, ya que generalmente son muestras altamente contagiosas.
Para cada paciente se recogen 04 tubos estriles y se rotulan segn el orden de extraccin 1, 2, 3
y 4. Se distribuyen de la siguiente manera.
Tubo 1: Prueba s bioqumicas y/o serolgicas.
Tubo 2: Pruebas Microbiolgicas.
Tubo 3 y 4: Pruebas hematolgicas.
En lo posible, el volumen requerido por cada tubo se halla entre 1.5 ml a 4 ml.
Las muestras de LCR se pueden conservar debidamente sellados hasta 3 das en refrigeracin (2 a
10 C), para su eliminacin requiere una previa esterilizacin por autoclavado. nicamente las
muestras para bioqumica y/o serologa pueden ser congeladas.

III EQUIPOS Y MATERIALES

-

Centrifuga de mediana velocidad.

Microscopio Binocular
Cmara de Neubauer
Tubos de 12x 75
Laminas portaobjetos y laminillas cubreobjetos
Pipetas automticas de 10,50 y 100 ul
Gradillas
Papel toalla
Guantes
Reactivo de pandy

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IV DESARROLLO DE LA PRCTICA
1.-ANALISIS MACROSCOPICO:
Fundamento.
Se describen las caractersticas de aspecto, color y presencia de cogulo. Los trminos a emplear
en la descripcin, se presentan a continuacin:
Aspecto
Color
Cristalino o transparente
Incoloro (cristal de roca)
Turbio
Xantocrmico
Opalescente/brumoso/Purulento Blanquecino/lechoso
Sanguinolento/Hemorrgico

Cogulo
Ausente o Presente
Presencia de pelcula

Rojizo/hemtico

2.-ANALISIS QUIMICO
Fundamento:
Determinar la concentracin de algunos analitos segn protocolo estandarizado generalmente se
dosa Glucosa y Protenas. Se usa el tambin el reactivo de Pandy para descartar la presencia de
globulinas.
Procedimiento Tcnico:
1.- Colocar 2.5 ml de muestra en un tubo de vidrio
2.-Centrifugar a. 500 rpm por 5 minutos
3.-Separar el sobrenadante
4.-Procesar segn protocolo las pruebas bioqumica
5.-Para Dosaje de glucosa con reactivo de glucosa oxidasa
6.-Para protena dosar con reactivo de rojo de pirogalol
* Se realizara en la practica la deteccin cualitativa de protenas usando el acido sulfosalicilico al 3%
segn el mtodo realizado con las proteinurias.
*Se realizara el test de Pandy en los casos positivos para demostrar la presencia de globulinas.
En el caso de que se solicite Lactato la muestra debe venir en jeringa heparinizada y sin burbujas
procesar de inmediato a travs del equipo de gasometra.
3.-EXAMEN MICROSCOPICO
Fundamento:
Realizar el recuento celular y la formula diferencial de PMN y MN. As mismo informar la presencia
de clulas atpicas.
Procedimiento Tcnico:
a.-Si el LCR es transparente o ligeramente turbio
Se homogeniza bien la muestra y se carga directamente en la cmara de Neubauer y se leen en los
nueve cuadrantes.
b.-Si el LCR es turbio diluir la muestra al medio , al quinto o al decimo, con sol. De turck.
Cargar la cmara y dejar reposar por unos minutos
Recuento:
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N de Clulas= N de clulas contadas x 1,1 x factor dilucin

Recuento diferencial:
Colocar la muestra de LCR en la centrfuga por 5 minutos a 500 RPM.
Al finalizar, eliminar cuidadosamente el sobrenadante.
Homogenizar o resuspender el sedimento.
Colocar en cada lmina portaobjeto entre 20 a 50 ul del resuspendido.
Dejar secar a temperatura ambiente.
Colorear con Wright por 1 a 2 minutos y luego aadir el agua tamponada.
Lavar y dejar secar.
Realizar el recuento celular diferencial.
Nota: Cuidar durante la centrifugacin las revoluciones pues a mayor velocidad las clulas se lisan
ms rpidamente. Al emplear una citocentrfuga se alcanza hasta 1000 rpm por 5 min.

REPORTE E INTERPRETACION DE RESULTADOS:

Recuento Celular Total
Neonatos: 20 30 leuco /ul
Nios:
0 10 leuco/ul
Adultos:
0 5 leuco/ul
El aumento de leucocitos en LCR se denomina Pleocitosis.
En pacientes con leucemias, el significado de un recuento entre 5 y 10 clulas/ul es dudoso, pero por
encima de 10, suele ser patolgico.
Recuento Celular Diferencial: Cuadro de Valores de referencia en adultos y neonatos

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V TRABAJO PRCTICO
1-Elaborar una tabla los elementos celulares predominantes segn la patologa a diagnosticar
2-Elaborar una tabla graficando las reacciones qumicas o principio del test de cada uno de los
parmetros bioqumicos.
3.-Por que no se usan los mtodos turbidimetricos para el dosaje de proteina en las muestras de
LCR?
4.-Buscar y analizar un trabajo de investigacin donde se halla usado LCR como muestra para
otros test de laboratorio.

VI BIBLIOGRAFA
1.

GONZALES de B., Jos. (2010). Tcnicas y mtodos de laboratorio clnico. Barcelona. Editorial Elsevier
Masn.

2.

LYNCH, Rafael. (2003). Mtodos y tcnicas de laboratorio. Buenos Aires. Editorial Interamericana.

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