UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE

MXICO
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Alimentos II (1715)
Prctica No. 1. Determinacin de la dosis letal media de cafena en
ratones
Fecha: 30 /Agosto/2016
Integrantes:
Galindo Castillo Estefania.
Isaac Rosas Adel Saul.
Ortiz Ortuo Yael.
Equipo: 10

Grupo: 04

Cuestionario previo.
1. Explicar mecanismo de accin de la cafena en
humanos.
La cafena bloquea los receptores adenosnicos lo que
produce un aumento en la liberacin de neurotransmisores
excitadores (noradrenalina, dopamina, histamina), disminuye
la afinidad de la dopamina por sus receptores lo que provoca
el aumento de la actividad motora.
La cafena inhibe la fosfodiesterasa lo que produce un
incremento en la fuerza de contraccin del miocardio y de la
frecuencia cardiaca.
La cafena provoca la liberacin de calcio intracelular lo que
produce una secuencia de potenciales de accin.
2. De qu factores depende la variabilidad intraespecie?
Gentica, Sexo, Edad, Alimentacin, Enfermedad, Hbitos.

. Qu caractersticas debe tener la sustancia utilizada

como vehculo en un estudio de toxicidad? D un
ejemplo de un vehculo que utilizara para evaluar la
toxicidad agua de un agente xenobitico liposoluble.
Inocuo, buena absorcin, biodisponibilidad y toxicidad
No debe retener el agente xenbiotico
No debe haber interacciones metablicas entre el agente
xenbiotico y el vehculo
Debe ser soluble en el vehculo
Ejemplos: Aceites vegetales (oliva, girasol, almendra), Oleato
de etilo.
4. Investigar el valor de la DL 50 terico de la cafena para
ratones macho por va oral.
127 mg cafena/ kg p.c
137 mg cafena/kg p.c en hembras
Objetivo

Determinar la dosis letal media de la cafena por va

oral en ratones, empleando el mtodo estadstico de Litchfield
y Wilcoxon, con el fin de relacionar este parmetro con el
grado de toxicidad de una sustancia.

Conocer el procedimiento para la realizacin de un

estudio de toxicidad aguda.

Datos de la muestra
Tabla 1. Registro del peso de los ratones que se usaron en la
determinacin de DL50 para cafena, ordenados de acuerdo a la tcnica
de la culebra japonesa.

Tabla 2 Registro de animales muertos despus de aplicar la dosis

indicada, realizado 48 horas despus de la misma.

Ejemplo de clculo
Clculo del volumen a administrar con respecto a su peso
corporal (dosificacin):
Dosificacin= 3D (0.03 mg/mL)
Peso del ratn:
Prueba de CHI2

calculada= 0.457308797
tabla = 7.81 ( gl. =5-2=3, p= 0.05)
calculada < tabla ; conclusin: Los datos son homogneos. Clculo
de la interpolacin en la recta trazada de la grfica 1:
mg cafena/ kg peso corporal

62
140
280

clculo de la pendiente :

Calculo de :

Calculo de N Anexo
Lmite superior:
Lmite inferior:
Resultados
Tabla3 Cuadro indicador de mortalidad de acuerdo al anlisis estadstico
de Litchfield y Wilcoxon.
Dosis
(mg/
Kg

Animales
tratados

Animales
muertos

p.c.)

% de

% de

mortalida
d

mortalidad

observad
o

esperado

75

20

22

0.002331
00

150

50

56

0.014610
39

73

0.002029
43

225

75

300

80

86

0.029900
33

375

95

88

0.046401
52

Sumatoria

0.095272
67

CHI2 exp

CHI2
critica

0.4573087
97

7.8147

Tabla 4 Anlisis de dosis especficas

Dosis

fDL50

(mg/K
g

Limite

Limite

superior

Inferior

214.62985

91.320011
7

p.c.)
DL
16

62

DL
50

140

DL
84

280

2.12903
226

1.533070
32

El valor de CHI2 experimental tiene un valor experimental calculado de:

0.4573
El valor de CHI2 crtica en g.l.= 23 y con p=0.05 es de: 7.8147
El valor de CHI2 experimental es menor que valor de CHI2 crtico, por lo
cual se considera que los datos son homogneos y la recta se considera
adecuada.
El valor de S calculado a partir de los datos correspondientes de DL 16,
DL 50 y DL 84 es: 1.5344
Los lmites de confianza para DL 50 en cafena son:
a) Lmite superior: 214.6298 mg/kg peso corporal
b) Lmite inferior: 91.3200 mg/kg peso corporal

Anlisis de resultados
De los datos obtenidos en el experimento se realiz un ajuste de datos
por la variacin de resultados obtenidos.
Tabla 5. Resultados obtenidos durante el experimento
Dosis

% de

Animales

Animales

tratados

muertos

75

20

150

50

225

300

20

375

100

(mg/
Kg
p.c.)

mortalida
d
observad
o

Los resultados que se obtuvieron del grupo no muestra una relacin lineal ni una
relacin directa con la dosis administrada ya que al ser el DL 50 para ratones
hembras es de 137mg/Kg P.C, al ser as se esperara que los resultados de los
animales tratados con 225 y 300 mg/Kg P.C fallecieran en un 100% o al menos en
un orden creciente de mortalidad sin embargo en la nica dosis que se observ el
comportamiento esperado fue en la dosis de 375mg/Kg P.C. ya que la dosis
empleada en el caso de 225, 300 y 375 mg/Kg P.C es casi el doble y triple de la
DL50 reportada en la literatura, lo cual nos hace pensar que quizs los ratones
fueron mal administrados , rasgando el tracto respiratorio y digestivo de la rata y
por lo tanto que la muerte haya sido provocada por dicho efecto.
Aunado a otra variable en el experimento pudo ser la falta de ayuno por parte de
los ratones as como tambin podramos pensar que quizs la dosis de cafena
proporcionada estaba contaminada o tena una dosis distinta a la marcada en el
tubo que contena la muestra.

El comportamiento observado en la grfica es lineal en cuanto a las

muertes de las ratas por la accin de la cafena y as calculamos la DL 50

para cafena experimental y comparando con el reportado en la

bibliografa es muy semejante aunque es ms bajo se podra decir que
al ser un dato experimental es muy parecido.
Se rectific que los datos fueran homogneos calculando la CHI2y al ser
menor esta que la de las tablas, se concluye que los datos son
homogneos.
Tambin se calcul la DL16 y la DL84, dando 62 y 280 mg de cafena/
kg de p. c. respectivamente. La poblacin que presenta efectos
adversos antes de la DL16 es denominada hipersensible, mientras que la
poblacin que presenta los efectos adversos despus de la DL 84 se
denomina hiposensibles.
Conclusiones
Podemos concluir de la prctica que el valor de DL 50 (el cual es el ms
interesante para nosotros ya que es la dosis a la cual el 50% de la
poblacin muere), es muy semejante al reportado dentro de la literatura,
obtuvimos un valor de 125 mg/Kg P.C el cual es 12mg menor que el
valor reportado por la bibliografa.
Una administracin correcta del xenobitico no afecta de manera directa
al resultado obtenido dentro del experimento.
El valor obtenido es un valor que se acepta ya que al realizar el clculo
de Chi2 nos da un valor menor que el reportado en tablas, obteniendo
datos homogneos del experimento.
Se conoci el procedimiento para la realizacin de un estudio de
toxicidad aguda. Controlando algunos factores de variabilidad
intraespecie como el sexo, la edad y el peso.
Cuestionario
1. De acuerdo al valor de obtenido Cmo clasificaras a la
cafena?

De acuerdo a la clasificacin de txicos que se muestra a continuacin

(Hernndez,A. Moreno, 2011):

a. a.
kg

Extremadamente txicas: ejemplo, DL50 oral en la rata < 1 mg/

a. b. Altamente txicas: ejemplo, DL50 oral en la rata 1-50

mg/kg.
a. c.
Moderadamente txicas: ejemplo, DL50 oral en la rata
50-500
mg/kg.
d. d. Ligeramente txicas: ejemplo, DL50 oral en la rata 0.5-5
g/kg.
d. e.
Prcticamente no txicas: ejemplo, DL50 oral en la rata > 5-15
g/kg.

d. f. Sin riesgo (relativo): ejemplo, DL50 oral en la rata > 15

g/kg.
La cafena se clasificara como moderadamente txica de acuerdo al
criterio de su DL50.
2. Si el estudio de toxicidad aguda se realizar por va
intraperitoneal Cambiara el valor de la ?
Si, ya que por esta va el agente xenobitico entra directamente al torrente
sanguneo del animal en prueba, teniendo que atravesar menos membranas
biolgicas por lo que bastar con cantidades menores del xenobitico para que se
alcancen concentraciones plasmticas txicas. Se esperara que la respuesta se
presentar en un periodo ms corto de tiempo y se obtuviera un valor de menor
con respecto al valor obtenido por va oral.

Bibliografa

Repetto M, Repetto G. (2009) Toxicologa fundamental. Vol. 1. 4 ed. Madrid:

Ediciones Daz de Santos p.61

Camen A, Repetto M. (2012) Toxicologa Alimentaria. Madrid: Ediciones Daz de

Santos; 2012. p. 100-11.


https://nutricionpersonalizada.wordpress.com/2011/09/06/efectos_fisiologicos_farmacologicos_cafeina/