Universidad Autnoma de Nayarit

Unidad acadmica de ciencias qumico

biolgicas y farmacuticas.

Laboratorio de Introduccin al anlisis clnico

Prctica No. 2

Glucosa postprandial
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Crespo Muro Mara Teresa

Ruiz Arias Miguel Alfonso
8 A
Equipo No. 1
QFB. Dora Liliana Luna Vzquez

INTRODUCCIN.

El colesterol es una sustancia suave y cerosa que est presente en todo el cuerpo.
el cuerpo necesita un poco de colesterol para funcionar correctamente, pero un
exceso de colesterol puede tapar arterias y provocar enfermedades cardacas.
Los exmenes de sangre para medir el colesterol se realizan para ayudar a
entender mejor el riesgo de enfermedades cardacas y otros problemas
provocados por arterias bloqueadas.
Algunos tipos de colesterol se consideran buenos mientras que otros se
consideran malos. El dato del colesterol total y triglicridos, da una informacin
global de los lpidos que circulan en el organismo, pero si se quiere tener un
concepto claro de cmo estn incidiendo los lpidos en el aparato circulatorio, se
debe tener un estudio fraccionado de las lipoprotenas, que es lo que se conoce
en la actualidad como perfil lipdicoel cual incluye: Colesterol total, Lipoprotena de
baja densidad (colesterol LDL), Lipoprotena de alta densidad (colesterol HDL),
Triglicridos y Lipoprotena de muy baja densidad (colesterol VLDL).

OBJETIVO.
Determinar colesterol total, triglicridos y colesterol HDL mediante muestra
sangunea en ayunas, utilizando reactivos especiales estas pruebas.

METODOLOGA
Determinacin de colesterol total:

Primero
se de
realiza
Disponer
tubos de ensayo rotulados
unacomo
precipitacin
blanco, estndar y muestra
del suero para eso
se sigue:

Pipetear en tubos
de ensayo:

Atemperar el
Reactivo (kit de
Colesterol) a
temperatura
ambiente.

Agitar Determinacin
bien e
Agitar bien e
de HDL.
incubar los
incubar los
durante 30
durante 30
minutos a
minutos a
temperatura
temperatura
ambiente (16ambiente (1625C) o durante
25C) o durante
10 minutos a
10 minutos a
37C.
37C.

Agitar bien y dejar

Pipetear los componentes indicados

durante 10en
la Tabla

minutos a
temperatura
ambiente

Recoger con
cuidado el
sobrenadante.
Colorimetra

Centrifugar
durante 10
minutos a un
mnimo de 4.000
r.p.m.

Agitar bien e
incubar los tubos
durante 30 min a
temperatura
ambiente (1625C) o durante
10 minutos a
37C.

a 37C.

Determinacin de Triglicridos.

tubos de ensayo
rotulados como
blanco,
estndar y
muestra

La muestra se
refiere al suero
a valorar

Determinacin de LDL
Se determinar mediante la siguiente ecuacin.

Pipetear los
componentes
indicados en la
Tabla

triglicridos
LDL=Colesterol total ( HDL+

( mg
dL )
)

FUNDAMENTO:
Determinacin de Colesterol Total:
El colesterol se determina por accin de las enzimas Colesterol ester hidrolasa y
Colesterol oxidasa. La primera libera el colesterol de los steres de colesterol, y la
segunda oxida el colesterol libre producindose perxido de hidrgeno, el cual en
presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromognico dando
origen a un compuesto coloreado que absorbe a 505 nm.

CEH: Colesterol ester hidrolasa, CHOD: Colesterol Oxidasa, PAP: Peroxidasa.

Determinacin de HDL:
Las lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) y de baja densidad (LDL)
presentes en la muestra, precipitan en presencia de fosfotungstato y iones
magnesio. El sobrenadante contiene las lipoprotenas de elevada densidad (HDL),
cuyo colesterol se cuantifica espectrofotomtricamente mediante las reacciones
acopladas descritas a continuacin

Determinacin de Triglicridos:
Los triglicridos son hidrolizados por una lipasa especfica liberando cidos grasos
y glicerol. El glicerol es fosforilado por la enzima gliceroquinasa y posteriormente,
el glicerol-1-fosfato es oxidado a dihidroxiacetona fosfato por la enzima glicerolfosfato oxidasa, generndose perxido de hidrgeno. Posteriormente, en una
reaccin del tipo Trinder, el perxido de hidrgeno reacciona con 4-

Aminoantipirina y el cido 3,5-Dicloro-2-Hidroxi-bencensulfnico para producir por

medio de la enzima peroxidasa un compuesto coloreado en cantidad proporcional
a la concentracin de triglicridos presente en la muestra, midindose la
absorbancia a 520 nm.

RESULTADOS Y ANLISIS
Absorbancia

Factor

Triglicridos
Colesterol total

0.140
0.263

318.97
540.54

Colesterol HDL

0.286

TRIGLICERIDOS
Trigliceridos=318.97 0.140=44.65 mg/ dL

COLESTEROL TOTAL
COLESTEROL=540.54 0.263=142.16 mg/dL

COLESTEROL HDL
HDL=

0.286
52.5=68 .25 mg/dL
0.220

COLESTEROL LDL
44.65 mg
mg 68.25 mg
dl
mg
LDL=142.16

+
=64.98
dl
dl
5
dl

El perfil lipdico permite verificar los niveles de lpidos en la sangre, que pueden
indicar el riesgo de una persona de padecer enfermedades cardacas o

arterosclerosis esta serie de anlisis de sangre se utilizan para medir el colesterol

y triglicridos de un individuo, lo cual proporciona informacin detallada sobre la
cantidad de colesterol bueno y malo que se encuentra en nuestro sistema.
La determinacin de estos parmetros es un procedimiento bsico para el
diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas, primarias o secundarias.
Entre estos parmetros analticos que se pueden determinar estn: el colesterol
total, el colesterol transportado por las LDL, el colesterol transportado por las HDL,
los triglicridos totales.
A partir del resultado obtenido del anlisis el medico puede recomendar al
paciente realizar cambios en su estilo de vida para poder mantener los niveles
adecuados de colesterol y triglicridos a un rango aceptable y as disminuir las
posibilidades de ataques cardiacos y accidentes cerebro vasculares, elevando de
esta manera su salud y confort.
En nuestra prctica el individuo presento un nivel de Triglicridos de 44.65 mg/dL
lo cual nos permite inferir de acuerdo al inserto utilizado que est en los niveles
normales (25-160mg/dL) de triglicridos.
Por otro lado, los resultados en colesterol total fueron de 142.26 mg/dL el cual
tambin cae dentro de los valores normales manejados que son de 140-200mg/dL
Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades
cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El colesterol
de las HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fraccin de
colesterol que se transporta al hgado para su metabolizacin y excrecin por va
biliar, no se asocia con riesgo de enfermedad.
Como es suma importancia las concentraciones de estas lipoprotenas, se calcul
el ndice presentado por nuestro paciente para HDL que fue de 68 mg/dL y que de
acuerdo al kit est dentro del rango, ya que para hombres el rango de referencia
es de 30-70 mg/dL mientras que para mujeres es de 30-85 mg/dL, y nuestro
paciente era varn.
La frmula de Friedewald nos permite averiguar la fraccin de colesterol LDL, si
conocemos el colesterol total, la fraccin HDL y los triglicridos. Su clculo se
realiza mediante la ecuacin presentada en la metodologa, la cual aplicndola
nos resulta un valor de 64.98 mg/dL. No obstante, existe, una limitacin a la
utilizacin de esta frmula y es cuando los triglicridos superan los 400 mg/dl
situacin que como conocemos no es excepcional. Tambin, aunque es mucho
menos frecuente, cuando existe una disbetalipoproteinemia, ya que las betaVLDL contienen ms colesterol que las VLDL normales si el paciente es
homocigoto para la apo E. en este caso se pudo aplicar la ecuacin sin ningn

problema y se puede inferir que el valor presentado cae dentro del valor de rango
que maneja el cual debe ser menor de 100 mg/dL.
Esto nos permite inferir mediante los resultados de nuestro perfil de lpidos que
nuestro paciente se encuentra sano en relacin a las enfermedades relacionadas
con el metabolismo de lpidos.
PATOLOGAS RELACIONAS
Hipercolesterolemia
es la presencia de niveles elevados de colesterol en la sangre. El colesterol
elevado en la sangre se debe a las anormalidades en los niveles de lipoprotenas,
las partculas que llevan el colesterol en la circulacin sangunea. Esto se puede
relacionar con la dieta, los factores genticos y la presencia de otras
enfermedades tales como diabetes y una tiroides hipoactiva. El tipo de
hipercolesterolemia depende de qu tipo de partcula (tal como lipoprotena de la
baja densidad).
Es muy frecuente que las personas con arteriosclerosis tengan afectadas a la vez
las arterias de distintos lugares u rganos. Adems, suelen enfermar la gran
arteria aorta (que sale del corazn y va repartiendo la sangre al resto del cuerpo),
las arterias del rin y las del intestino (arterias mesentricas).
Hipocolesterolemia
La hipocolesterolemia es la disminucin del colesterol es sangre, se ha visto
asociada a numerosas patologas como la Tuberculosis pulmonar, la infeccin por
VIH-1, los estados depresivos, la retinosis pigmentaria, la diabetes mellitus tipo 2
las enfermedades diarreicas crnicas en nios, entre otras
Las consecuencias del colesterol HDL muy bajo, estn relacionadas con el riesgo
de producirse ateroesclerosis y una posible reduccin del flujo de sangre a
diferentes tejidos.

Hipertrigliceridemia
Los triglicridos son el principal tipo de grasa que se transporta a travs del
organismo. Todo lo que comemos es absorbido por el organismo por lo que la
grasa de los alimentos ingeridos se transporta por el cuerpo para darnos energa o
almacenarse como grasa. Si no tenemos cuidado y superamos ciertos niveles,

corremos el riesgo de sufrir de trigliceridos altos y as ponemos en riesgo nuestra

salud.
Al ingerir alimentos, el cuerpo usa determinadas caloras como energa, mientras
que otras se quedan en el cuerpo en forma de grasa. Cuando estas reservas en
forma de grasa son excesivas, corremos el riesgo de padecer triglicridos altos.
Existen diferentes causas para tener los triglicridos altos, algunas de las ms
comunes son las siguientes: Alimentacin poco equilibrada, vida sedentaria,
Alcohol, Gentica, Tiroides
Los sntomas de triglicridos altos son prcticamente inexistentes hasta que se
manifiesta un dao significativo, lo que siempre es peligroso, puesto que puede
avanzar esta enfermedad sin que lo notemos. La nica manera de saber si los
niveles de triglicridos son elevados es la realizacin de un anlisis de sangre.
Hipotrigliceridemia
Los niveles bajos de triglicridos suelen manifestarse con una prdida de peso y
de masa muscular notable, derivada de la falta de grasas en la dieta, recurriendo a
la degradacin de masa muscular para la obtencin de energa. Otra de las
posibles consecuencias que puede tener no prestar atencin a este problema es
una reduccin en la proteccin de algunos rganos vitales como el corazn o los
riones.
Algunas de las causas que pueden provocar esta patologa son: Hipertiroidismo,
Sndrome de mala absorcin, Desnutricin, Dieta baja en grasas
Enfermedad de niemann-pick: esta sucede por una acumulacin de grasas y
colesterol en el hgado, el bazo y el cerebro. Es transmitida de forma hereditaria.
Infarto: aparece cuando el flujo sanguneo se bloquea, por lo tanto, el corazn
sufre por la falta de oxgeno y las clulas cardacas mueren.
Ataque cerebral: Un ataque cerebrovascular ocurre cuando se bloquea el flujo de
sangre en las arterias que nutren el cerebro, o cuando ocurre un sangrado en el
cerebro mismo o en las membranas que lo rodean.
Cardiopata coronaria: Es un estrechamiento de los pequeos vasos sanguneos
que suministran sangre y oxgeno al corazn.
CONCLUSION:

Podemos concluir que con esta prctica se logr el objetivo, al haber determinado
las diferentes concentraciones lipdicas en la muestra obtenida de un paciente en
ayunas, que de acuerdo a los resultados los valores de triglicridos, colesterol
total, HDL y LDL, entraron dentro de los rangos de referencias establecidos en el
inserto del kit utilizado.
BIBLIOGRAFA

Melvin Williams. Nutricin: para la salud, la condicin fsica y el deporte. 5ta

Ed. Barcelona: Paidotribo; 2002. Pp. 173
Tnez I, Galvn A. Perfil lipdico. [Internet]. Departamento de Bioqumica y
Biologa Molecular, Cordoba. [Consultado el 21 de abril del 2016].
Disponible
en:
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/25%20PERFIL%20LIP%C3%8DDICO.pdf
ngel Gil. Tratado de nutricin: Bases Fisiolgicas y Bioqumicas de la
nutricin. 2da Ed. Madrid: Mdica Panamericana; 2010. Pp. 263-265