Prctica #2

Manejo y Uso del Microscopio ptico Compuesto

INTRODUCCIN
El microscopio es una de las herramientas bsicas en el estudio de la
biologa. Mediante un conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamao de
los objetos bajo estudio, que son demasiado pequeos para ser estudiados a
simple vista.
Dos principios estn involucrados en el uso del microscopio:
MAGNIFICACIN (la capacidad de aumentar el tamao de una imagen) y
RESOLUCION (la capacidad de producir una imagen ntida, o bien la capacidad
del instrumento para dar imgenes bien definidas de puntos situados muy cerca
uno del otro en el objeto). Existen distintos tipos de microscopios, cada uno con
un propsito particular.
PARTES DE UN MICROSCOPIO PTICO
En el microscopio distinguimos un sistema ptico destinado a la iluminacin y obtencin de
una imagen muy aumentada del objeto examinado, y un sistema mecnico (o montura), cuya
finalidad es la de sustentar convenientemente los elementos pticos y los preparados que se
examinan.
Sistema ptico
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Sistema mecnico
SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, ..
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el
enfoque correcto.

MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO

1.

Mover siempre suave y lentamente cualquier pieza del microscopio.

2. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el

microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
3. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
4. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si
la preparacin es de bacterias.
5. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el
objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con
el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un
enfoque fino.
6. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un
poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la

imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El
objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de
percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con
aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin.
7. Empleo del objetivo de inmersin:
a. Bajar totalmente la platina.
b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va
a visualizar y donde habr que echar el aceite.
c. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40.
d. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
e. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.
f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite.
En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
g. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y
la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy
grande.
h. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el
objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay
que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.
i. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor
aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca
se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin.
j. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar
tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio.
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES

Al ser el microscopio un aparato de precisin y de precio elevado, es muy conveniente

asegurarle un buen rendimiento y una larga duracin mediante toda una serie de normas y cuidados:
1. Para transportar el microscopio se recomienda utilizar siempre las dos manos,
sujetndolo por el brazo con una mano y sostenindolo del pie con la palma de la otra mano.
2. Se debe desplazar en posicin vertical para evitar la cada del ocular y/o del espejo o
fuente de luz.
3. En la mayora de los microscopios el brazo debe quedar hacia el observador. Debe
apoyarse correctamente el aparato hacia el centro de la mesa.
4. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en
posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de
la misma y dejarlo cubierto con su funda.
5. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su
funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe
guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
6. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
7. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
8. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en
el objetivo con pauelos especiales para ptica. En cualquier caso se pasar el papel por la lente en
un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3), xilol o solucin para lentes. No hay que abusar
de este tipo de limpieza (mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol) porque si se aplican estos
disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.
9. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico,
micromtrico, platina, revlver y condensador).

10. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la

preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo
agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular.
11. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol.
12. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin
prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.
OBJETIVOS:
Identificar las partes pticas y mecnicas de un microscopio ptico compuesto y el uso
correcto del mismo.
Preparar laminillas simples para observar bajo el microscopio y aprender a enfocarlas a
diferentes magnificaciones.
MATERIALES:
Papel de diario
Hilos de colores
Tijeras
Portaobjetos
Cubreobjetos
Gotero
METODOLOGA O ACTIVIDADES:
Instrucciones generales:
Limpiar los lentes del microscopio siempre, antes y despus de usarlo con papel ptico.
Colocar el objetivo de baja potencia en posicin a utilizar.
Colocar la laminilla encima de la platina, centralizando el rea del cubreobjetos en la
abertura de la misma.
Encender el microscopio.
Mirar por el ocular intentando localizar la imagen en el rea observada (campo visual).
Preparain de laminilla de letra e:
Tome un portaobjetos limpio y seco por sus bordes.
Corte una pequea letra de diario asimtrica e,f u otraColoque una gota de agua en el portaobjetos y ubquela encima de la gota de agua.
Cubra el preparado con un cubreobjetos.
Coloque el portaobjetos sobre la platina (esta preparacin se conoce como MONTAJE
HMEDO).
Enfoque con el objetivo 4X. (Utilice el tornillo macromtrico girndolo suavemente hasta
observar la imagen). Cuando obtenga una imagen ntida no mueva ms el tornillo.
Mientras observa a travs del microscopio, mueva la laminilla hacia la izquierda Hacia
dnde se mueve la imagen?
Luego de enfocar la laminilla de la letra e utilizando el lente 4X, cambie el lente al 10X
girando el revlver.
La imagen debe permanecer enfocada. Si necesita aclarar ms la imagen, utilice solamente el
tornillo micromtrico.
Dibuje la imagen que observa en el campo visual de 4 y 10 X.
Cambie ahora al objetivo 40X.
La imagen debe permanecer en foco.
Si necesita aclarar ms la imagen utilice solamente el tornillo de ajuste micromtrico.
Dibuje la imagen que observa en el campo visual de 40X.

Laminilla con hilo de colores (Profundidad de foco)

Corte tres trozos de hilos y colquelos sobe un portaobjetos, ponga un cubreobjetos encima y
observe al microscopio. Cundo tiene en foco uno de los hilos, que sucede con los otros?
En funcin a lo observado, podr responder a las siguientes preguntas:
CUESTIONARIO
1. Observando los distintos elementos del microscopio ubique los que corresponden a la parte
ptica. Reconozca los objetivos secos y de inmersin.
2. De qu partes del microscopio depende la correcta iluminacin de la preparacin?
3. Cmo vara la iluminacin al abrir o cerrar el diafragma?
4. Qu funcin tienen el filtro azul, el diafragma y el condensador en la iluminacin?
5. Escriba e interprete las inscripciones que llevan cada grupo de lentes. Preste especial
atencin al objetivo de INMERSION.
6. Qu es la profundidad de foco?
7. Cules son las caractersticas que tiene la imagen final del microscopio compuesto?
8. Al desplazar el portaobjetos, en qu sentido se mueve la imagen?
9. Qu combinaciones de aumentos (del ocular, del objetivo y total) pueden hacerse con el
microscopio del que se dispone?
10. Por qu es conveniente centrar en el campo de observacin el objeto que nos interesa ver de
la preparacin si queremos observarlo a gran aumento?
La profundidad de foco se refiere al rango sobre el cual el plano de imagen se puede mover mientras
que se mantiene una cantidad aceptable de nitidez.
Tcnicamente hablando, la profundidad de foco de un microscopio ptico es el rango de posicin del
plano de la imagen en la que la imagen puede ser vista sin que parezca estar fuera de foco para un
objeto o espcimen que no se mueve o cambia de sitio durante la observacin. Esto significa que la
profundidad de foco es la claridad con que aparece tu espcimen u objeto al ojo humano.

Identifique las partes componentes del microscopio en la figura presentada a continuacin, y a partir
de la observacin del microscopio del que dispone.

MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO