Fiche TP : Chromatographie des carotts rpes.

Matriel :
Carottes rpes (sauvages et cultives) ;
un agitateur, un mortier, un pilon, du sable fin ;
2 bchers dhuile minrale (10mL), du solvant chromatographie ;
2 entonnoirs avec fiole pour rcuprer le solvant, du papier filtre, 2 pipettes pasteur pour les dpts ;
une bande de papier Whatman perce dun orifice, une rgle ;
prouvette (ou quivalent), un bouchon avec crochet de suspension, un cache noir pouvant recouvrir
lprouvette ;
Logiciel Mesurim et appareil photo numrique.
Objectif : Expliquer lorigine de la diffrence de couleur entre carotte sauvage et cultive.
Protocole :
I.

Extraction des pigments :

1. Mlanger dans un mortier lquivalent de 5 ml de carottes rpes avec 10 ml dhuile minrale et un
peu de sable fin.
2. Broyer avec le Pilon jusqu lobtention dune pte homogne.
3. Placer un filtre dans lentonnoir et filtrer le mlange. Une solution colore aura pass travers le
filtre.

II.

Migration des pigments par chromatographie :

1. Prparez lprouvette : suspendez le papier chromatographie laide dun crochet fix sur un
bouchon, placez-le dans lprouvette pour reprer le niveau du solvant mettre (le papier doit
tremper dun demi-cm dans le solvant). Veillez prendre le papier uniquement par les bords sans
poser vos doigts sur la zone de migration.
2. Retirez le papier, versez le solvant (en vitant tout contact avec la peau et les yeux) jusquau niveau
repr et fermez lprouvette sans le papier.
3. Tracez un trait au crayon 2 cm du bas de la bande de papier puis marquer lemplacement des deux
dpts.
4. La tche des dpts doit tre aussi petite et fonce que possible. Pour cela dposer une goutte de
solvant de chaque carotte lendroit marqu. Eviter tout dbordement..
5. Suspendez le papier chromatographie, placez-le dans lprouvette en vrifiant que les dpts de
pigments sont bien situs au-dessus du niveau du solvant et fermez.
6. Recouvrez lprouvette dun cache noir et laissez migrer le solvant lobscurit pendant 15
minutes.
7. Laissez scher lair libre.

III.

Analyse et interprtation des rsultats :

Identifier le principal pigment retrouv par cette chromatographie (comparaison avec une
chromatographie des pigments de feuille dangiosperme)
Numriser le rsultat de la chromatographie avec l'appareil photo.
Traiter le rsultat obtenu avec le logiciel MESURIM afin de traduire l'intensit des bandes sous
forme de courbes. Cette technique permet destimer de manire relative la concentration dun
composant chimique.
Tracer d'abord un segment perpendiculaire aux deux tches de pigments,
puis cliquer sur choix, outils de mesure, mesure en mission.
Copier/coller les images et les courbes obtenues sur un document texte.
Comparer vos rsultats et conclure.

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