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BIOQUMICA

EXTRACCION E IDENTIFICACION CUALITATIVA DE


LIPIDOS
Joven, Jeisson Fermin. Murcia, Diana Maritza.
Bioqumica. Docente, ngela Obando Mora. Universidad de la Amazona
Avd. Circunvalar, Barrio el Porvenir, Florencia, Caquet, Colombia.

Resumen
Este laboratorio consisti en una serie de procedimientos para la
extraccin y caracterizacin de lecitina, colesterol, presentes en la yema
del huevo, durante el procedimiento pudimos darnos cuenta que todas
las pruebas realizadas en la yema de huevo fueron positivas, por ende
en el procedimiento de la reaccin de Salkowski entre ms se expona a
la luz se tornaba a un color caf por la oxidacin formando un anillo
visible ya que entre ms concentracin halla de colesterol ms va a
reaccionar con los cidos fuertes.
Palabras claves: extraccin, oxidacin, colesterol, lecitina, huevo.
Abstrac
This lab consisted of a series of procedures for the extraction and
characterization of lecithin, cholesterol present in the yolk, during the
procedure we realized that all tests in the egg yolk were positive,
therefore the procedure Salkowski reaction among most exposed to light
was turning to brown by oxidation to form a visible ring because the
more cholesterol concentration found more will react with strong acids.
Key words: extraction, oxidation, cholesterol, lecithin, egg.

Resultado y Discusin

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Peso del material utilizado en el laboratorio

Vaso precipitado de 100 ml


Yema
Papel filtro
Embudo de vidrio
Erlenmeyer

61.548 gr
6.6974 gr
1.062 gr
16.53 gr
115.368 gr

Peso huevo sin cascara

58.589 gr

Peso de yema completa

13.3948 gr

Peso de media yema

6.6974 gr

Cantidad Lecitina yema


completa

1.87 gr

Cantidad Lecitina media


yema completa

0.937 gr

Se utilizaron los siguientes disolventes:


ter, permiti diluir y homogenizar completamente la mezcla.
Acetona, se us para dar miscibilidad a la mezcla, pero se
precipito formando dos interfaces, (una liquida y una slida).
Etanol, permiti la fcil filtracin de la mezcla.
Los solventes: Son compuestos orgnicos basados en el elemento
qumico carbono. Su importacin y patrn de uso determinan su
clasificacin en solventes activo, co-solventes, solventes latentes y
diluyentes.
La Acetona: es un solvente intermedio entre los muy polares y los no
polares, sirviendo para hacer miscibles dos solventes que no lo son o
para extraer conjuntamente sustancias no polares y polares.
El ter es un solvente de muy baja polaridad y de bajo punto de
ebullicin 35C, solvente especial para los lpidos, resinas y grasas
minerales.

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Etanol o alcohol etlico: es un alcohol que se presenta como un


lquido incoloro e inflamable con un punto de ebullicin de 78C. Es el
solvente por excelencia de uso en el laboratorio.
PROCEDIMIENTO EXPERIMETNAL
Preparacin de la muestra:
Pesar media yema de huevo
cocido, Adicionar 20 mL de una
mezcla de etanol: ter 2:1.
Macere en un mortero, deje en
reposo 10 minutos con agitacin
ocasional. Filtrar la solucin. El
filtrado recogerlo en un vaso de
precipitado de 100 mL y el
residuo guardarlo para una
segunda extraccin.

Reaccin de Salkowski: Mida 1


mL del sobrenadanante del paso
1 en un tubo de ensayo, incline
el tubo y deslice por su pared
interna un volumen igual de
cido
sulfrico
concentrado,
cuidando que los lquidos no se
mezclen. Observe la formacin
de un anillo coloreado en la
interfase.
Prueba positiva.
Reaccin de Salkowski: Segn Pocovi (2004), este procedimiento dice
que si a una disolucin de colesterol en cloroformo se le aade un
volumen idntico de cido sulfrico concentrado, en la interface aparece
un anillo coloreado y agitando se observa la disolucin clorofrmica que

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se tie de rojo intenso, Esta reaccin no es especifica del colesterol y


otros esteroles producen el mismo efecto.
Segn Fedna (1996) casi totalidad de los lpidos del huevo se encuentra
en la yema en forma de lipoprotenas (asociados con vitelina y
vitelenina). La yema contiene un 63% de lpidos sobre sustancia seca, de
los cuales casi un 30% son fosfolpidos
De acuerdo a la ltima muestra realizada en el laboratorio en donde
estaba la solucin clorofrmica de extracto de yema de huevo y la
solucin de cido sulfrico concentrado.
El huevo tiene colesterol entre sus componentes, porque ste es
necesario para la vida y el desarrollo del futuro embrin. El contenido del
colesterol es de (200mg/unidad), pero tiene ms grasas insaturadas que
saturadas y solo 70caloras. Debido a su contenido en fosfolpidos, que
interfieren en su absorcin, este colesterol tiene muy poco efecto sobre
el colesterol en sangre.
En conclusin entre ms concentracin halla de colesterol ms va a
reaccionar con los cidos fuertes.

Reactivo de Liberman Burchard:


Tome 2 mL del sobrenadante del
paso 1 en un tubo de ensayo y
aada 10 gotas de anhdrido
actico y 2 gotas de cido
sulfrico
concentrado,
la
aparicin de una coloracin
verde es indicadora de la
presencia de colesterol.
Prueba positiva.
Identificacin de fostatos: Tome
1 mL del filtrado y adicione 1 mL
de cido molbdico, agite, deje 3
minutos en reposo. Adicione 1
mL de solucin de cido
ascrbico observe la formacin
de un color azul.
Prueba positiva.

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Esta reaccin se basa en que el fosfato inorgnico, en medio cido, con


el molibdato da fosfomolibdato, color amarillo, que es reducido luego por
el cido ascrbico a azul de molibdeno, color azul verdoso.
El fosfato es un nutriente necesario para las funciones corporales y este
se almacena en forma de colina. Nuestro cuerpo contiene cantidades
mnimas de colina donde estn en la memoria y el musculo, por ende es
necesario consumir alimentos ricos en lecitina ya que contiene este
nutriente esencial como el fosfato.

Deteccin de colina: Tome 1 mL


de
filtrado
y
caliente
suavemente en un mechero o
en un bao de agua hirviendo.
La trimetilamina liberada se
caracteriza por un olor a
pescado.
Prueba positiva.

Identificacin de glicerol
Tome 2 mL de filtrado + 2 mL de agua
de bromo. Calentar en vitrina para
expulsar el exceso de bromo. Tomar
0,4 mL de esta solucin + 0,1 mL de
solucin de naftol al 5% en etanol,
agitar. Adicionar 40 gotas de cido
sulfrico. Calentar 2 minutos en bao
mara, enfriar. Observar la aparicin de
coloracin verde.
Prueba positiva.

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Conclusin

De esta prctica podemos llegar a la conclusin de que se puede


extraer lpidos como: lecitina a partir de una serie de
procedimientos y reacciones y tambin gracias a una propiedad
fsica de los lpidos que es la solubilidad en etanol ter. En la yema
de huevo se encuentran las lecitinas en gran abundancia, y
adems el colesterol en suficiente cantidad sirve para hacer su
aislamiento y deteccin fcil.
Se pudo separar componentes de los lpidos, tales como la
lecitina y el colesterol tomando en cuenta propiedades fsicas
como la solubilidad de los lpidos en solventes orgnicos.
Al mezclar la yema con el alcohol y el ter esta se solubilizo y se form una
solucin amarilla, la misma que formo grumos que quedaron retenidos en
el papel filtro.

Referencias

Miguel Pocov Mieras, EL COLESTEROL: UNA MOLCULA ENTRE LA


VIDA YLA MUERTE, Editorial Zaragoza 2004, REAL ACADEMIA DE
CIENCIASEXACTAS, FISICAS, QUIMICAS Y NATURALES DE
ZARAGOZA
www.huevo.org.es/default.asp
www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wpcontent/uploads/20
10/08/TP-LIPIDOS.pdf

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