La Medicina para el Viajero

E. coli
Qu es la E. coli O157:H7?

La Escherichia coli (o simplemente E. coli) es uno de los muchos grupos de bacterias

que viven en los intestinos de los humanos sanos y en la mayora de los animales de
sangre caliente. Esta bacteria ayuda a mantener el equilibrio de la flora intestinal
normal (flora bacteriana) contra las bacterias nocivas y sintetiza o produce algunas
vitaminas.
No obstante, existen cientos de tipos o cepas de bacterias E-coli. Las distintas cepas de
E. coli tienen diferentes caractersticas distintivas.
Una cepa de E-coli en particular, conocida como E. coli O157:H7, causa una grave
infeccin intestinal en los humanos. Es la cepa ms comn que causa enfermedades en
las personas. Se puede diferenciar de otras E. coli por la produccin de una potente
toxina que daa el revestimiento de la pared intestinal y causa diarrea con sangre.
Tambin se conoce como infeccin enterohemorrgica por E. coli.
Los Centers for Disease Control and Prevention (Centros para el Control y la Prevencin
de Enfermedades o CDC) informan que se producen aproximadamente 73,000 casos de
este tipo de infeccin por E. coli en los Estados Unidos cada ao.
Cmo se disemina la infeccin por E. coli?

En 1982 se identific inicialmente a la E. coli O157:H7 como causa de diarrea con

sangre por comer carne de hamburguesa contaminada con la bacteria. Desde ese
momento, las epidemias de E. coli O157:H7 han sido asociadas con otros tipos de
alimentos, tales como espinaca, lechuga, repollo, salame y agua potable. Tambin se
han rastreado epidemias hasta animales de zoolgicos de contacto y guarderas.
La E. coli O157:H7 se encuentra en los intestinos del ganado saludable, cabras, ciervos
y ovejas. De acuerdo con los CDC, la transmisin de estas bacterias a los humanos
puede ocurrir de la siguiente manera:

La carne, como la de vaca, se puede contaminar cuando los organismos se

mezclan accidentalmente con ella, especialmente cuando es picada (triturada).
La carne contaminada con E. coli O157:H7 no huele mal y se ve normal. Es
importante cocinar muy bien la carne.
La infeccin puede ocurrir despus de nadar o beber agua contaminada con E.
coli O157:H.
El contacto familiar de persona a persona y los centros de atencin a nios, u
otros centros de atencin institucional, tambin son lugares donde puede ocurrir
la transmisin de la bacteria.
Se confirm que la leche y los jugos, como la sidra de manzana, sin pasteurizar
tambin pueden causar la infeccin.

Sin embargo, los CDC tambin indican que las vas de transmisin del E. coli O157:H7
pueden cambiar con el transcurso del tiempo.
Cules son los sntomas de una infeccin por E. coli?

Una infeccin por E. coli puede enfermar mucho a una persona. Los siguientes son
algunos de los sntomas ms comunes asociados con el E. coli O157:H7. Sin embargo,
cada persona puede experimentar los sntomas de diferente forma, y pueden incluir:

calambres abdominales
diarrea con sangre, grave
diarrea sin sangre
sin fiebre o fiebre leve
sndrome urmico hemoltico (SUH)

Los sntomas pueden ir de ninguno a una forma grave de la infeccin conocida como
sndrome urmico hemoltico (SUH). En el SUH, se destruyen los glbulos rojos (las
clulas que transportan oxgeno en el flujo sanguneo) de un individuo y los riones
dejan de trabajar. Aproximadamente el 8 por ciento de las infecciones pueden dar como
resultado este sndrome. Los nios y las personas mayores pueden ser ms propensos a
desarrollar esta complicacin, que puede amenazar la vida de la persona.
Cmo se diagnostica el E. coli O157:H7?

El E. coli O157:H7 se puede confirmar con un cultivo especial de materia fecal. Se

examinan las muestras de materia fecal para compararlas con la fuente o el alimento
contaminado que caus el brote. Los CDC denominan esto "identificacin del ADN" del
E. coli.
Tratamiento para una infeccin por E. coli:

Con este tipo de infeccin no se utilizan antibiticos. Adems, no se usan medicamentos

antidiarreicos, como la loperamida (Imodium). La recuperacin de la mayora de las
personas que padece esta enfermedad en general ocurre entro los cinco a diez das..
Si una persona desarrolla al sndrome urmico hemoltico (SUH), la complicacin que
amenaza su vida, podra requerir hospitalizacin en una unidad de cuidados intensivos.
El tratamiento puede incluir transfusiones de sangre y dilisis renal. De acuerdo a los
CDC, entre el tres y el cinco por ciento de las personas que desarrollan SUH pueden
morir por esta complicacin.
Cmo se puede prevenir la infeccin por E. coli?

Las recomendaciones de los CDC para la prevencin de la infeccin incluyen:

Cocine completamente toda la carne picada o las hamburguesas. Asegrese de

que la carne cocinada es de color gris o marrn (no rosada), que se encuentra
completamente seca y que el interior est caliente.
Use un termmetro digital de lectura inmediata para asegurarse de que la
temperatura de la carne alcanz un mnimo de 160 grados F (71C).
Si le sirven una hamburguesa medio cruda en un restaurante, devulvala.
Lave con agua todos los vegetales y frutas, especialmente si no los va a cocinar.
Slo consuma leche y productos lcteos pasteurizados. Evite la leche sin
pasteurizar.
Consuma slo jugos y sidras pasteurizados.
Asegrese de que las personas infectadas, especialmente los nios, se laven las
manos con cuidado, frecuentemente y con jabn para reducir el riesgo de
diseminar la infeccin.
Beba agua proveniente del abastecimiento municipal que haya sido tratada con
los niveles adecuados de cloro u otros desinfectantes eficaces.
Evite tragar agua de la piscina o de un lago mientras nada.
Lvese las manos minuciosamente despus de utilizar el bao.
Las personas con diarrea no deben:
o nadar en piscinas pblicas ni lagos
o baarse con otros

preparar comida para otros

Escherichia coli O157:H7

La bacteria que dispar el HACCP en la industria de la carne
Ganados
&
Ao
4,
No
17
pp40-42,
Revista de la Unin de la Industria Crnica Argentina

Sept.

Silvia
Dra
en
Bioqumica,
silvia@michanie.com.ar

de

Universidad

Carnes
2003
Michanie
Belgrano

Copete
El Centro para la Prevencin y Control de Enfermedades (CDC)
de los EE.UU., public un estudio en el que ha detectado un
importante nmero de casos de infecciones por E.coli O157:H7
producidos luego de que los nios visitan granjas y toman
contacto con la materia fecal de los animales.
Escherichia coli es una bacteria que habita normalmente en el
intestino del hombre y animales de sangre caliente, y
desempea un importante papel en la fisiologa del intestino.
La distribucin en el ambiente esta determinada por su
presencia en el intestino. Por ser un habitante regular y normal
del intestino se usa desde hace un siglo como "el mejor"
indicador de contaminacin de los alimentos con materia fecal.
En este caso indica la contaminacin con bacterias perjudiciales
o patgenas para el hombre que tienen un hbitat comn,
como por ej., Salmonella.
Recin en la dcada del 40 del siglo pasado se descubri que
algunas diarreas de los nios se producan por algunos tipos
particulares-serovariedades o serotipos-de E.coli.
Caracterizacin de los microorganismos
Los microorganismos se clasifican gracias a la expresin de su
genoma (material gentico). Desde tiempo atrs se usa la
clasificacin bioqumica o fisiolgica y tambin, la serolgica
para
diferenciar
las
distintas
especies
y
diferentes
serovariedades de una misma especie. El procedimiento
serolgico se basa en las diferencias antignicas (capacidad de
producir anticuerpos diferentes) por la superficie (cuerpo de la
bacteria que constituye el antgeno O) y los flagelos (son los
antgenos H) de bacterias de una misma especie. As, se
establecen las serovariedades.
Hoy en da se dispone de ensayos genticos que clasifican los
microorganismos al detectar porciones que no varan del
genoma o de otras estrategias que amplan las porciones del
genoma que se quieren identificar; este tipo de ensayos estn
reservados a laboratorios de media y alta complejidad.
Atrs

Clasificacin de E.coli segn mecanismo para enfermar

E.coli patgenas se agrupan segn el tipo de enfermedad que
producen en el hombre y en los animales, segn se presenta
en el Cuadro 1:
Cuadro 1. Grupos de Escherichia
mecanismo para enfermar

coli

patgenos

segn

A cada uno de estos grupos pertenecen varios serotipos. E.coli

O157:H7 pertenece a las ECST; las ECET son tambin
conocidas como las causantes de la diarrea del turista.
Como sealamos en la introduccin, debemos tener presente
que tambin existe Escherichia coli genrica o biotipo 1 no
patgena y es habitante normal del intestino. Pertenecen a
este grupo todas las variedades serolgicas que no son
patgenas para el hombre ni para los animales.
Parmetros que regulan el desarrollo
Todas son miembros de la familia Enterobacteriacea, bacterias
Gram negativas y no esporuladas. Es decir, de sencilla
destruccin con el calor de la pasteurizacin. En el cuadro 2
podemos observar los principales parmetros que regulan el
desarrollo.
Cuadro 2. Parmetros que regulan el desarrollo de E.coli

Particularmente, E.coli O157:H7 tolera condiciones de acidez

mas bajas que las indicadas en el cuadro; se conoce que
sobrevive en mayonesa cosa que no se presenta con otros
miembros de la misma familia. Esto le permite atravesar la
acidez del estomago sin verse afectada.
Escherichia coli O157:H7
E.coli O157:H7 E.coli O157 -no mvil- pertenece al grupo de
E.coli enterohemorrgicas, sin constituir la nica variedad
serolgica que integra el grupo. Otras enterohemorrgicas que
han afectado en varios pases son las serovariedades O26:H11,
O111:H8, O103:H2, O113:H21 y O104:H21.
Atrs

Enfermedad
Puede ser leve o severa y se presenta a los 1 a 8 das del
ingreso de la bacteria. Los nios menores de 5 aos y los
gerontes son los grupos ms vulnerables. La dosis requerida
para enfermar parecer ser del orden de 10 a 100 clulas por g
cc. Se produce diarrea acuosa o usualmente con sangre,
dolores abdominales severos, nuseas y vmitos, y a veces
fiebre. La colitis hemorrgica puede derivar en una falla aguda
del rin o en Sndrome Urmico Hemoltico (SUH) en el 5 %
de los infectados. Del 3 a 5 % de los que padecen SUH sufren
la muerte. Los que consiguen recuperarse padecen fallas
renales, complicaciones neurolgicas y otras secuelas por
mucho tiempo.
En Argentina, se informa que hay entre 300 y 350 casos de
SUH por ao en nios menores de 5 aos.
Toxicidad y Virulencia
Como producen toxinas similares a Shigella se denominan
Shiga like toxin E.coli (STEC). E.coli enterohemorrgicas son
un subconjunto de las STEC y la que predomina en los brotes
es E.coli O157:H7. Esta ultima, posee factores de virulencia
que no tienen las STEC. Tiempo atrs, se conocan como E.coli
verotoxignicas por atacar las clulas Vero.
El origen de la toxicidad parece ser que surgi de una EPEC a
la que un bacterifago (virus de las bacterias) le agreg las
toxinas parecidas a las producidas por Shigella. Esta

adquisicin se considera reciente por eso se trata de una

bacteria emergente.
Los factores de virulencia pueden estar solos o combinados y
se conocen como stx1, stx2, eae, entre otros. Poseer los genes
stx1, stx2 no es suficiente para conferir patognicidad. Se
requieren otros genes de virulencia para adherirse y daar la
clula de la pared intestinal.
Epidemiologa
La bacteria se transmite por:
a) consumo de alimentos insuficientemente cocidos o crudos
b)
ingestin
de
agua
contaminada
c)
contacto
persona
a
persona
d) contacto con materia fecal de animales
Reservorio
La materia fecal de animales (bovinos, porcinos, etc.) y agua
contaminada con heces. El ganado no se ve afectado por las
toxinas que produce esta bacteria.
Alimentos involucrados
Han estado involucrados en brotes la carne picada
insuficientemente cocida, hamburguesas, roast beef, agua de
pozos (en los que percol la bacteria), agua de piletas de
natacin, jugo de manzana no pasteurizado (pH 3,5), brotes de
rabanitos (Japn), yogur, vegetales crudos (brotes de alfalfa),
salame, lechuga, quesos, leche cruda y otros.
La carne bovina fue el alimento involucrado con mayor
frecuencia en brotes en los EE.UU., y las hamburguesas poco
cocidas el alimento mas frecuente.
Atrs

Otras vas
Algo muy importante pero poco contemplado, en nuestro
medio, es la transmisin persona a persona y la adquisicin de
la enfermedad durante visitas de los nios a granjas y
zoolgicos. El Centro para la Prevencin y Control de
Enfermedades (CDC) de los EE.UU. public un estudio en el
que ha detectado un importante nmero de casos producidos
luego de que los nios visitan granjas y toman contacto con la
materia fecal de los animales. Hallazgos similares se
presentaron en el Reino Unido y esta va de transmisin es la
que parece ser da lugar a la presentacin de casos espordicos
Al respecto, en nuestro pas no se conoce la participacin de
las visitas a las granjas en el desarrollo de la enfermedad pero
existen casos en que esto fue atestiguado.
Por otro lado, se ha documentado que numerosos brotes de
Campylobacteriosis en nios obedecen a visitas a granjas en
donde la ingesta de leche cruda es la causa de la infeccin.
Brotes de Enfermedades Transmitidas por Alimentos
Desde 1982. esta bacteria esta asociada a alimentos causantes
de brotes en EE.UU. y ms tarde en Japn y otros pases. En

Argentina, no se ha documentado el aislamiento de este tipo

de E.coli de alimentos comprometidos en brotes; es decir, no
existen aun evidencias epidemiolgicas documentadas de los
casos espordicos o brotes por alimentos.
Atrs

Primer brote importante

Entre los primeros brotes merece mencionarse el producido por
el consumo de hamburguesas poco cocidas en la cadena de
comidas rpidas "Jack in the Box" en los EE.UU., en 1993. Este
brote produj 700 enfermos, 4 muertos y tuvo un costo de 110
millones de dlares. Asimismo, como consecuencia del brote se
produjeron algunos cambios en ese pas.
a) modificacin de la legislacin de los EE.UU. en cuanto a la
temperatura de coccin de las hamburguesas ya que era
insuficiente para destruir la bacteria.
b) el brote desencaden la aplicacin del Sistema HACCP Anlisis de Peligros y Puntos de Control Crticos - en la
industria de la carne de ese pas y en los que exportan a ese
destino.
Carne picada y carcasas
En EE.UU., sobre un total de 42.340 muestras de carne cruda
picada tomadas entre 1994 -2002, se encontr un 0.5 %
positivas a E.coli O157:H7 en muestras de plantas con
inspeccin federal y estadual, productos de importacin y de
venta al detalle. Otros autores del mismo pas sealan una
prevalencia del 2 al 4 % en carne picada.
En Argentina los hallazgos en carne picada son de 3.8 % sobre
muestras tomadas en carniceras.
Un estudio realizado en varios frigorficos de EE.UU. encontr
una prevalencia de E.coli O157:H7 E.coli O157 del 28 % en
materia fecal de bovinos antes del sacrificio; un 11 de los
cueros y 43 % de las carcasas antes de la evisceracin estaban
contaminados; slo el 18 % mostr contaminacin luego de la
evisceracin y un 2 % de los recortes fueron positivos a la
bacteria. Entre la carcasa eviscerada y los tejidos se aplic una
intervencin antimicrobiana que vari segn la planta entre
pasteurizacin con vapor, lavado con agua caliente, lavado con
algn cido orgnico una combinacin de ellos.
Atrs

Prevencin y Control
La proteccin de la salud humana se basa en conocer y evitar
la exposicin de los nios y el hombre a las heces de los
animales.
Las estrategias de control de los microorganismos patgenos
consisten
en:
a) evitar el acceso de los microorganismos a los alimentos
b)
inhibir
el
desarrollo
c) inactivar los microorganismos
Entre las medidas que evitan el acceso de los microorganismos
a la carne en un frigorfico podemos mencionar:

 Limpieza profunda de los animales que ingresan

minimizando la materia fecal sobre los animales.

Uso de equipos limpios y buenas practicas higinicas

que prevengan la contaminacin de las carcasas.
la
contaminacin
intestinal
durante
la
evisceracin. Tomar acciones correctivas si se produce
contaminacin.
En la despostada mantener los equipos limpios y usar
prcticas que minimicen la contaminacin entre los
cortes.

Evitar

Usar otras estrategias por ej., cidos organicos, para

descontaminar las carcasas. Esta prctica no esta permitida
para todos los destinos de exportacin y adems, los
resultados del uso de lavados o intervenciones con cidos
orgnicos frente a E.coli O1577:H7 muestran datos
contradictorios.
En lo que respecta a minimizar
microorganismos es posible:

el

desarrollo

de

los

Asegurar el enfriamiento rpido de las carcasas.

Estrategias de intervencin en la industria de la carne
E.coli O157:H7 desencaden innovaciones tecnolgicas,
algunas en uso, muchas en desarrollo y por desarrollarse para
resolver el conflicto de su presencia sobre las medias reses y
luego, como consecuencia, en las carnes picadas.
La intervencin se ha definido como procedimientos, procesos
o tecnologa que reducen o eliminan el/los peligros potenciales
de un microorganismo productor de enfermedad.
Entre las estrategias de intervencin para reducir esta bacteria
se han ensayado el spray de la carcasa pre-evisceracin, la
aspiracin con vaco y vaporizador, el pasteurizador con vapor
o con agua caliente y los cidos organicos, entre otros. Muchos
de ellos son de uso corriente en las plantas de algunos pases.
El
tratamiento
pre-faena
con
neomicina,
ensayado
experimentalmente,
tambin
result
efectivo
como
intervencin.
Otra reciente estrategia por la que han optado algunas
empresas en EE.UU. es irradiar los alimentos frecuentemente
involucrados como mtodo para controlar los microorganismos
patgenos y evitar riesgos al consumidor.
No es aventurado afirmar que el proceso innovativo iniciado en
el camino de la seguridad sanitaria dar sus frutos y la presin
que ejerce el consumidor redundar en la proteccin y
beneficio de la salud.

Centro Nacional de Referencia

Bacteriologa
Anlisis de laboratorio
El Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa (CNRB) cuenta con cuatro
laboratorios, los cuales realizan los anlisis que se indican a continuacin

Laboratorio de Enteropatgenos
Responsable: Dra. Hilda Bolaos
(hbolanos@inciensa.sa.cr)
Telfono 279-9911, ext: 107, 127, 186. Fax 279-9852

I. Diagnstico de bacterias causantes de diarrea por cultivo y tinciones: se

refiere al diagnstico de enteropatgenos en muestras de heces de pacientes o la
bsqueda de portadores asintomticos, asociados a brotes de diarrea o defunciones
por esta causa. La bsqueda de los diferentes enteropatgenos depender de las
caractersticas de la muestra y de la informacin clnico epidemiolgica que
contenga la Boleta Solicitud de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro
Nacional de Referencia de INCIENSA; previa coordinacin con la persona
responsable en el Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa (CNRB). Puede
incluir:

1. Frotis. A su vez incluye:

Observacin al fresco (salina, lugol, gruesa) de la muestra para determinar

presencia de leucocitos, eritrocitos, parsitos, morfologa y motilidad bacteriana
Tincin de Gram para observacin de morfologas bacterianas predominantes
(con nfasis en aquellas semejantes a Campylobacter, Serpulina y esporulados)
Tincin de cido resistencia para identificacin de Cyclospora, Cryptosporidium
Tincin tricrmica modificada para Microsporidium

2. Coprocultivo. Incluye el aislamiento, la identificacin y la tipificacin de:

Salmonella (especie, subespecie y serovariedad)

Shigella (serogrupo y serotipo)
Vibrio cholerae (biotipo, serogrupo, serotipo, incluyendo O1, no O1, O139)
Otros vibrios (como V. parahaemolyticus, V. mimicus, V. vulnificus, etc.)
Especies de Aeromonas
Plesiomonas shigelloides
Listeria monocytogenes
Yersinia enterocolitica
Campylobacter jejuni
Recuento de Clostridium perfringens
Bacillus cereus
Staphylococus aureus
Escherichia coli patgena (ETEC, EPEC, EHEC, EIEC, ver II.1)

3. Diagnstico rpido de Vibrio cholerae O1

4. Deteccin de rotavirus (ELISA)
II. Determinacin de factores de virulencia de enteropatgenos en
muestras clnicas: se refiere al diagnstico molecular de enteropatgnos o a la
deteccin de enterotoxinas bacterianas en heces por mtodos inmunolgicos. La
bsqueda de los diferentes factores de virulencia depender de las caractersticas
de la muestra y de la informacin clnico epidemiolgica que contenga la Boleta
Solicitud de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional de

Referencia de INCIENSA; previa coordinacin con la persona responsable del

CNRB.
1. Diagnstico molecular de enteropatgenos por reaccin en cadena de la
polimerasa (PCR)
Determinacin del gen de la toxina colrica (ctxA)
Deteccin del plsmido inv de Escherichia coli enteroinvasiva EIEC
Determinacin de los genes de toxina lbil (LT) y toxina estable (ST) de
Escherichia coli enterotoxignica ETEC
Determinacin de los genes de las verotoxinas Stx1 y Stx2 de Escherichia coli
enterohemorrgica EHEC
Determinacin del gen rfb0157 de Escherichia coli O157:H7
Determinacin de los genes eae y bfp de Escherichia coli enteropatgena EPEC
2. Diagnstico de enterotoxinas bacterianas en heces por mtodos
inmunolgicos
Determinacin de toxinas diarrognicas (A, B, C, D) de Staphylococcus
aureus
Determinacin de enterotoxina de Bacillus cereus
Determinacin de toxina A de Clostridium perfringens
3. Otros
Identificacin serolgica de Escherichia coli enteropatgena EPEC (antgenos
somticos y capsulares)
Identificacin serolgica de Escherichia coli enterohemorrgica EHEC,
incluyendo E. coli O157:H7 (antgenos somticos y flagelares)

III. Identificacin de entricos: corresponde a la confirmacin y la

serotipificacin de cepas como las que se describen en el Coprocultivo (seccin
I.2), referidas por los laboratorios participantes en la Red de laboratorios de
Bacteriologa, acompaadas por la Boleta Solicitud de Confirmacin
Diagnstica por Centro de Referencia de INCIENSA.
IV. Caracterizacin molecular de enteropatgenos: se refiere a la
caracterizacin molecular de los enteropatgenos incluidos en las secciones II.1 y
II.3, en cepas referidas por los laboratorios de la Red, acompaadas por la Boleta
Solicitud de Confirmacin Diagnstica por Centro de Referencia de
INCIENSA. La bsqueda de los diferentes factores de virulencia depender de la
cepa referida y de las caractersticas clnico epidemiolgicas del paciente; previa
coordinacin con el responsable en el CNRB.
V. Otras pruebas especiales
Cuantificacin de anticuerpos vibriocidas contra Vibrio cholerae O1: este
anlisis se realiza en caso de pacientes en los que no fue posible obtener una
muestra de heces, adecuada para cultivo y/o en apoyo a las investigaciones de
brotes de clera. Se requiere de sueros pareados (agudo y convaleciente).

Laboratorio de Bacteriologa Especial y Antimicrobianos

Seccin: Bacteriologa Especial

Responsable: Dra. Grettel Chanto
(gchanto@inciensa.sa.cr)
Telfono 279-9911, ext 113. Fax 279-9852

I. Diagnstico, confirmacin y tipificacin de bacterias causantes de

meningitis por cultivo: consiste en el aislamiento, la identificacin y la tipificacin
de Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae y Streptococcus pneumoniae en
muestras clnicas en caso de brotes y defunciones; previa coordinacin con el
responsable en el CNRB y acompaadas por la Boleta Solicitud de Diagnstico
y/o Tipificacin por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA; y/o cepas
referidas por los laboratorios de la Red, con la Boleta Solicitud de Confirmacin
Diagnstica por Centro de Referencia de INCIENSA. Incluye:

Aislamiento e identificacin de agentes a partir de muestras clnicas

Determinacin de especie y serogrupo de Neisseria meningitidis
Determinacin del especie y serotipo de Haemophilus influenzae
Determinacin de especie y serotipo de Streptococcus pneumoniae (reaccin
de Quellung)

II. Diagnstico de tos ferina (Bordetella pertussis / parapertussis): consiste

en la deteccin de Bordetella pertussis/parapertussis a partir de muestras clnicas
referidas por los centros de salud, acompaadas por la Boleta Solicitud de
Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional de Referencia de
INCIENSA; previa coordinacin con el responsable en el CNRB.
A continuacin se indican las metodologas disponibles:

Cultivo a partir de hisopos o aspirados nasofarngeos

Diferenciacin bioqumica de especies
Diagnstico de tos ferina por inmunofluorescencia directa
Diagnstico molecular por PCR a partir de aspirados o hisopados nasofarngeos

III. Diagnstico y confirmacin de bacterias causantes de infecciones

miscelneas por cultivo
Cultivo y confirmacin bioqumica de gnero y especie

IV. Diagnstico de brucelosis humana: consiste en el diagnstico de infecciones

por Brucella en muestras clnicas referidas por los servicios de salud, acompaadas
por la Boleta Solicitud de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional
de Referencia de INCIENSA. Se dispone de:
Aislamiento de Brucella
Diferenciacin bioqumica de especies
Diagnstico serolgico de brucelosis humana: para realizar este anlisis se
requiere de sueros pareados (agudo y convaleciente)

Seccin: Antimicrobianos

Responsable: Dra. Anamariela Tijerino

(atijerino@inciensa.sa.cr)
Telfono 279-9911, ext 113. Fax 279-9852

I. Determinacin de prueba de sensibilidad a los antibiticos en grmenes

nosocomiales y comunitarios: incluye la prueba de sensibilidad a los antibiticos
por los siguientes mtodos, de acuerdo con la normativa recomendada por Clinical
and Laboratory Standards Institute (CLSI), antes National Committee for Clinical
Laboratory Standards-NCCLS:

Enteropatgenos y bacterias causantes de infecciones miscelneas por Kirby

Bauer
Neisseria meningitidis por E-test (agar Mueller Hinton 5% sangre de carnero)
Streptococcus pneumoniae por Kirby Bauer y E-test (agar Mueller Hinton 5%
sangre de carnero)
Haemophilus influenzae por Kirby-Bauer en agar HTM

II. Determinacin de patrones inusuales de resistencia en grmenes

nosocomiales y comunitarios: se realiza de acuerdo a la normativa recomendada
por Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), antes National Committee
for Clinical Laboratory Standards-NCCLS):

Confirmacin de -lactamasas (mtodo cromognico y doble disco)

-lactamasas de expectro extendido (BLEE), en enterobacterias ampicilino
resistentes y que presentan disminucin en los halos de inhibicin para cefotaxime
y ceftazidime (Escherichia coli, Klebsiella sp., Enterobacter cloacae, Proteus sp.,
Enterococcus sp).
-lactamasas de expectro ampliado (BLEA), en enterobacterias ampicilino
resistentes
Resistencia a macrlidos, lincosamidas y estreptograminaB (MSLB) en
Staphylococcus aureus
Confirmacin de resistencia a vancomicina en Staphylococcus sp. y
Enterococcus sp.
Confirmacin de Staphylococcus aureus meticilino resistente (en cepas que
presentan resistencia a oxacilina)

Laboratorio de Microbiologa de Alimentos

Responsable: Dra. Mara Teresa Acua Calvo
(macuna@inciensa.sa.cr)
Telfono 279-9911, ext: 107, 127, 186. Fax 279-9852

I. Anlisis microbiolgico de alimentos: el anlisis de la calidad microbiolgica

de los alimentos se realiza en apoyo a la investigacin de brotes de enfermedades
transmitidas por alimentos y/o a la funcin de regulacin del Ministerio de Salud,
segn las metodologas normalizadas por Food and Drug Administration (FDA) y
Association of Official Analytical Chemists (AOAC)(1).

En el caso de brotes de diarrea, las muestras de alimentos se procesan slo cuando

se cuenta con evidencia epidemiolgica que implique al alimento como sospechoso.
Cada una de estas muestras debe referirse acompaada con la Boleta Solicitud

para anlisis de alimentos en los Laboratorios de Referencia de

INCIENSA; previa coordinacin con el responsable en el CNRB.

Los anlisis para regulacin se realizan a solicitud de la Direccin de Registros y

Controles del Ministerio de Salud; previa coordinacin con el responsable en el
CNRB.
Se dispone de los siguientes anlisis:
1. Recuento de:

Coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli

Total de mesfilos
De microorganismos especficos: incluye la cuantificacin de cualesquiera de
los indicadores que se citan a continuacin, ya sea en muestras de agua o de
alimentos:
Clostridium perfringens
Bacillus cereus
Staphylococcus aureus
Vibrio parahemolyticus
Hongos y levaduras
2. Confirmacin y tipificacin de enteropatgenos provenientes de
alimentos por cultivo (dependiendo del alimento): consiste en la bsqueda por
cultivo (prueba de presencia o ausencia), identificacin y tipificacin (cuando
corresponda) de diferentes enteropatgenos, como los que se citan a continuacin.
Cada una de las muestras debe referirse acompaada con la Boleta Solicitud
para anlisis de alimentos en los Laboratorios de Referencia de
INCIENSA; previa coordinacin con el responsable en el CNRB.

Salmonella sp.
Serovariedades de Salmonella
Especies de Shigella
Vibrio cholerae O1 y no O1 (incluyendo O139)
Otros vibrios (como parahaemolyticus, vulnificus, mimicus, etc.)
Escherichia coli patgena, incluyendo Escherichia coli O157:H7 (antgenos
somticos y flagelares)
Especies de Aeromonas
Plesiomonas shigelloides
Listeria monocytogenes
Yersinia enterocolitica
II. Determinacin de factores de virulencia de enteropatgenos en
alimentos: se refiere al diagnstico molecular de enteropatgenos o a la deteccin
de enterotoxinas bacterianas en alimentos de cultivos por mtodos inmunolgicos;
previa coordinacin con la persona responsable en el CNRB.
1. Diagnstico molecular de enteropatgenos por reaccin en cadena de la
polimerasa (PCR)

 Determinacin del gen de la toxina colrica (ctxA)

Deteccin del plsmido inv de Escherichia coli enteroinvasiva EIEC
Determinacin de los genes de toxina lbil (LT) y toxina estable (ST) de
Escherichia coli enterotoxignica ETEC
Determinacin de los genes de las verotoxinas Stx1 y Stx2 de Escherichia coli
enterohemorrgica EHEC
Determinacin del gen rfb0157 de Escherichia coli O157:H7
Determinacin de los genes eae y bfp de Escherichia coli enteropatgena EPEC
2. Diagnstico de enterotoxinas bacterianas en alimentos por mtodos
inmunolgicos
Determinacin de toxinas diarrognicas (A, B, C, D) de Staphylococcus aureus
Determinacin de enterotoxina de Bacillus cereus
Determinacin de toxina A de Clostridium perfringens