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Hongos= grupo morfolgicamente heterogneo

Caractersticas
1. Eucariotas
2. Unicelulares: microscpicos de forma redondeada, levaduras.
3. Pluricelulares: macroscpicos, las clulas que los forman son alargadas y al disponerse
linealmente conforman lo denominado como una hifa. sta crece por el extremo distal.
Cuando las hifas comienzan a entrecruzarse se forman matas visibles de diferente aspecto
(algodonoso, aterciopelado, etc.). La masa de hifas se llama micelio. Segn las hifas los hongos
se dividen en:
Inferiores: hifas anchas (5-10 m) con escasas tabicaciones (cenoctica). Forman mohos.
Superiores: hifas finas (0,5-5 m) con septos, los cuales poseen poros (citoplasma
comunicado). Formar mohos y setas.
El micelio posee dos porciones: la que penetra en los sustratos nutritivos (micelio vegetativo), y
la que se dispone en la superficie y contiene las estructuras reproductoras (micelio areo o
reproductor).
4. Poseen pared rgida caracterstica. sta pared est formada por capas o extractos
(formados por polisacridos fibrilares -como la quitina, celulosa y mananos- y protenas y
lpidos asociados). La pared es un exoesqueleto rgido que protege a las clula y no permite la
endocitosis (condiciona la nutricin absortiva).
5. Hetertrofos: difieren la materia orgnica muerta mediante exoenzimas y luego la
absorben. Funcionan a travs de la glucolisis, Krebs, respiracin. Aerobios estrictos. Hay
alguna excepcin (anaerobio facultativo). Pueden vivir en:
Materia orgnica muera: saprobios
Parsitos de otros seres vivos.
Metabolizar queratina o protenas asociadas: dermatofitos.
6. Reproduccin sexual y asexual.
Asexual: se da en los unicelulares (levaduras) donde ocurre por divisin celular o
gemacin y luego se dispersan las hijas. La formacin de esporas tambin es u tipo de
reproduccin asexual, pero se da en los hongos filamentosos (pluricelulares). El desarrollo de las
esporas puede ser interno denominndose esporangiosporas, las cuales se desarrollan en una
bolsita llamado esporangio; a su vez esta bolsita esta situada en una hifa especializada, el
esporangioforo. Cuando el esporangio se abre, se liberan las esporas al medio y s dispersan.
Si las esporas se forman externamente se llaman conidios, y surgen del extremo de una
hifa llamada conidiforo.
Sexual: ocurre en dos fases, la fusin citoplasmtica y la fusin de ncleos
(plasmogamia y cariogamia). Luego lo secunda la recombinacin y posterior meiosis.
7. Inmviles
8. Papel en la naturaleza: degradan materia orgnica muerta. Algunos microscpicos
pueden causar enfermedades (micosis), pero no estn generalmente adaptados a la infeccin del
ser humano.
9. Microscpicos: se los observa al microscopio mejor con tinciones.
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10. Macroscpicos: se los distingue en base a sus caractersticas morfolgicas. A las


levaduras por su actividad metablica.
11. Medios de cultivo para hongos: requerimientos nutritivos simples; temperatura
optima (25, 30C); pH optimo (4,5-5,5 CIDO); luz necesaria para esporular; condicin de
aerobiosis (sembrar en superficie); presin osmtica elevada (mayor concentracin de hidratos
de carbono); menor requerimientos de nitrgeno y humedad; tardan en crecer (mas que
bacterias). Algunas de estas condiciones inhiben el crecimiento bacteriano, lo que
minimiza la competencia con respecto a los hongos, como:
-Mayor acidez: las bacterias crecen ptimamente a pH neutro (7,4). Los hongos a un
pH acido.
-Mayor presin osmtica: los hongos crecen ptimamente con una concentracin
mayor de hidratos de carbono que las bacterias, lo que desencadena una presin osmtica mas
elevadas.
-Antibiticos: algunos hongos los resisten, mientras que las bacterias no.
Si el medio que se desea preparar es en un pico de flauta, hay que proporcionarle abundante
culot, ya que como el hongo tarda ms en crecer, ste no debe secarse. Se logra inclinando el
tubo de ensayo ligeramente. El mtodo de siembra es por enrizamiento, se lo mete dentro como
plantndolo, no en zigzag.
12. Forman micorrizas: relacin de simbiosis mutualista entre un hongo y una planta,
cuando ste se asocia a las races. En esta relacin el hongo recibe hidratos de carbono y la
planta incrementa la capacidad de absorcin de nutrientes: el hongo es como una pseudoraiz
que aumenta el rea de absorcin.
Hay dos tipos de micorrizas: las arbusculares (70,80%) que se da en suelos y races. El arbsculo
es el sitio de intercambio de metabolitos entre los simbiontes. Por otro lado las ectomicorrizas
(3%), se da en especies forestales: cuando muere el hongo, la planta aprovecha todo lo
producido por l (nitrgeno).
Las micorrizas aumentan la resistencia de las plantas y su capacidad de recuperacin frente a
situaciones de stress abitico (sequia, salinidad) y bitico (patgenos). Este beneficio se
invidencia en el aumento del crecimiento vegetal. Tambin logran una estructura mejor del suelo
al descomponer sustancias.
Ejemplos vistos en clase:
Fusarium spp. (la bananita) con hifa tabicada, macroconidios (banana) y microconidios (cacho de
la banana separado).
Aspergillus spp. con hifa tabicada, conidiforo y conidios.
Rhizopus spp con rizoides, esporangio y esporangiosporas.
Mucor spp con hifa no tabicada y esporangio.
Alternaria spp con hifa tabicada, conidiforo y conidio segmentado.
Peniccillium spp. con hifa tabicada, conidiforo, fialides y conidios.

Hongos

entomopatgenos: grupo de microorganismo que pueden utilizarse para regular plagas ya que
infectan artrpodos ocasionando su muerte. Esto permite una regulacin sin contaminacin y
deterioro del medio ambiente por el uso de pesticidas (aunque el impacto ambiental podra ser
contraproducente para artrpodos como las abejas, por ejemplo).
El mecanismo de infeccin es el siguiente: se adiciona la espora del hongo a la cutcula externa
del insecto, penetra en el hemocel, se desarrolla el hongo, muerte del insecto. Como no
necesitan ser ingeridos, infectan re fcil.
Factores abiticos que afectan la viabilidad y persistencia de los hongos entomopatogenos: rayos
UV, temperatura, humedad, presenciad e fungicidas. Las esporas necesitan condiciones de
humedad y temperatura especificas (fundamental). La temperatura es ptima a los 25 C.
Microbios eucariotas
Existen 2 clados englobantes: Unikonta y Bikonta. En el primero los organismos que lo
componen poseen un solo flagelo, y en el segundo poseen dos. Adems, en los unikontos los
genes de la TS (timidilato sintasa) y de la DHFR (dihidrofilato reductasa) se traducen
separadamente, y en los bikontos se traducen en una nica protena con 2 funciones. Las
enzimas nombradas son de vital importancia para la replicacin del ADN ya que catalizan la
produccin de dTMP (trifosfato).

Supergrupo Excavata
CLADO
BIKONTA

Phylum Euglenophyta

Euglena spp.(vida
libre)
Phacus spp. (vida
libre)
Trypanosoma
(parasito)
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Phylum Metamonada
Supergrupo Rhizaria

CLADO
BIKONTA
Supergrupo
Chromoalveolata

Radiolaria
Foraminfera
Phylum Haptophyta
Phylum Cryptophyta
Phylum Ochrophyta
Phylum Oomicota
Phylum Pyrrophyta
Phylum Ciliophora
Phylum Apicomplexa

Supergrupo
Archaeplastida
(plantae)

CLADO
UNIKONTA

Supergrupo
Amebozoa
Supergrupo
Opistokonta

Phylum Chlorophyta

Phylum Amebozoa
-

Giardia duodenalis
(parasito)
Cocolitoforidos:
Emiliania spp.
Rhodomonas spp.
Diatomeas
No se observa
Dinoflagelados
Paramecium
Vorticella spp.
Plasmodium
Clase
Prasinophyceae:
Tetraselmis sp.
Clase
Chlorophyceae
Entoamoeba
histolytica
Amoeba spp.
-

Excavata: protistas, anaerobios de vida libre y


parsitos. Poseen un surco excavado, de all el
nombre, en la parte anterior que usan para
atrapar partculas de alimento con ayuda de un
flagelo que sobresale. El otro no se ve, es corto.
Constituido por organismos verdes brillantes
(poseen clorofila a y b). Poseen una cubierta
de celulosa fuerte con una sustancia de reserva llamada paramiln. Se le denomina estigma a la
mancha ocular foto receptora. Euglena y Phacus (plancton de agua dulce) son de vida libre,
Trypanosoma y Giardia parsitos.
Rhizaria: grupo diverso, ameboides con presencia de pseudpodos. Algunos poseen conchas
que son de especial importancia en paleobiologia. Tenemos a los foraminferos y radiolarios
(plancton marino). Los organismos de este grupo viven plantnicos y bentnicos.

Chromoalveolata: grupo diverso, cocolitoforidos (Emiliania), rhodomonas, diatomeas (agua


dulce y marino), dinoflagelados (plantonc marino), ciliados (agua dulce). Emiliania posee placas
de carbonato de calcio (cocolitos), clorofila a y c (pardo) y es mariano. Rhodomonas presenta
color marrn, clorofila a y c2, eyectosomas (defensa) y dos flagelos que salen de la parte
anterior. Las diatomeas son cosmopolitas (estn en TODOS lados), hay una enorme
biodiversidad, de color marrn pardo por la clorofila a y c, y las hay pennadas (simetra
bilateral) con rafe (canal o surci por donde sale mucilago) y tambin las hay centrales (simetra
radial). Los dinoflagelados son hetertrofos o sea que NO POSEEN CLOROFILA, tienen una
epiteca y una hipoteca. Su cubierta celular es de celulosa rgida, dividida en placas, las cuales
tienen importancia taxonmica. Pueden presentar cuernos que aumentan la flotabilidad. Los
ciliados poseen cilios que rodean todo el cuerpo (holotricos) o parte (peritrico), tenemos al
Paramecium y Vorticella. Son hetertrofos, no poseen clorofila y presentan citofaringe o boca
cubierta de cilios, los cuales atraen partculas de alimento.

Archaeplastidia: Tetraselmis, se mueve mucho rotando ya que posee dos flagelos. Presenta
clorofila a y b y por eso es de verde brillante. Presenta estigma. Las rhodofitas son esfricas
con cloroplasto central estrellado.

Amebozoa: organismos ameboides, hetertrofos. Algunos forman una teca de proteccin. En el


centro de todo encontramos al plasmasol: parte con grnulos y organelas; le sigue la membrana
plasmtica, el plasmagel (hialino) y luego la calota hialina que forma psudopodos.

Parsitos
Excavata
Giardia duodenalis. Parasito del intestino que causa la enfermedad del viajero y da diarrea,
ente otras cosas. Posee 2 formas, el quiste que es el que infecta (posee ventosas para
adherirse), y el trofozoito que no, solo se ocupa de muiltipliarse una vez infestado el organismo.
Quiste animal desarrolla trofozoito (multiplica) forma quistes materia fecal alimento
quiste
Se lo diagnostica en ambas formas.

Trypanosoma cruzi: desencadena la enfermedad del mal de chagas y del sueo. La vinchuca es
el vector, a travs de la materia fecal, en mucosas. Posee 3 formas, la tripomastigota se mueve
en el torrente sanguneo, para lo cual posee un flagelo y una membrana ondulante. Adems,
tiene un ncleo y ADN en la nica mitocondria (quinetoplasto o cinetosoma). Otra forma es la
amastigota, con un flagelo corto y el ncleo. Es un psudoquiste que ingresa a rganos como el
corazn, y bazo. Se divide asexualmente. La otra forma es la epimastigota (no vista en el
prctico).

Chromoalveolata
Plasmodium vivax: causa la malaria y paludismo. El mosquito es el vector al picar, inyecta a los
esporozoitos. Ocurre un ciclo fuera de los glbulos rojos (multiplicacin, trofozoito inmaduro) y
luego otro donde infecta al glbulo rojo (trofozoito maduro). Los picos de fiebre coinciden con la
ruptura de un glbulo rojo y la liberacin del parasito, produciendo anemia.

Amebozoa
Entamoeba histolytica (similar a Giardia): infecta el intestino, puede atravesar e infectar otros
rganos. Posee 2 formas, el trofozoito y el quiste. Se encuentra en agua o alimentos. Tiene un
ncleo en carreta o redondo, por la condensacin de la cromatina.

Recuento de microorganismos
Finalidad: determinar el nmero de microorganismos en una muestra. Mediar el crecimiento
bacteriano. Analizar la calidad del agua/alimento a consumir y determinar si es apto. Lo que se
cuenta es el cambio de nmero de clulas por unidad de volumen, o la masa de las mismas.
Tipos de recuento:
Total directo: se cuentan clulas viables y no viables.
Cultural o vivos: se cuentan clulas viables.
Clula viable: aquella que es capaz de multiplicarse y formar colonias.
Recuento en microscopio directo, en frotis coloreado o
en cmara de recuento: mediante el conteo directo
del microscopio, vemos el nmero total de clulas. Es
una tcnica comn, rpida y barata. Para lograr este
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Tcnica microscpica

Total
directo

Medida de masa
celular y turbidez

La masa est relacionada


al nmero de clulas, as
que si la sabemos,
podemos estimar la otra.

En placa por dilucin

Cultural o
vivo

El nmero de UFC
depende de los nutrientes
del medio donde hicimos
las diluciones, del
tiempo y temperatura de
incubacin.
-MUESTRA SOLIDA: 10 gr
+ 90 ml peptonada
(100ml de madre) 1
dilucin es a la .10-1
-MUESTRA LQUIDA: 10 ml

objetivo utilizamos cmaras de recuento o teidos


fluorescentes. Algunos colorantes tien diferentes
clulas vivas de no vivas (azul de metileno).
Las cmaras mas usadas son las de Petroff-Hausser y
Neubauer. La primera se usa con objetivos de
inmersin.
Ventajas:
brinda
informacin
sobre
tamao,
morfologa y nmero. Rpida, barata, exigencias
mnimas.
Desventajas: la adsorcin de las clulas en el vidrio
se minimiza al realizar las diluciones. El observador
debe tener habilidad adquirida (experiencia). La
cantidad de la muestra es pobre. Provoca cansancio.
Si la muestra est mal distribuida, ocasiona errores.
Filtro de membrana: hacemos pasar un volumen de
muestra a travs de un filtro estril. Las bacterias que
quedan retenidas se tien con un material
fluorescente y se enumeran con un microscopio de
epifluorescencia.
Peso: se pesa la muestra o el pellet seco (luego de
que se evapore el lquido), y determinamos el nmero
de clulas a partir de ste dato.
Turbidez: una solucin se ve turbia porque las clulas
dispersan la luz. Lo hacen en base a la cantidad y
masa.
A mayor cantidad de clulas, mayor turbidez, y menor
luz dispersada (mayor luz absorbida). Para el anlisis
debemos poseer la curva estndar que relacione las
concentraciones y la luz dispersada.
Estima el nmero de microorganismos y sirve para
cargas altas. Es rpido.
Siembra estndar o placa vertida: debemos poner un
volumen conocido (0,1 1 ml) de una muestra en una
placa de Petri vaca estril. Luego agregamos el medio
de cultivo (agar por ejemplo) liquido (enfriado hasta
40C) y lo dejamos solidificar. Luego se incuba.
Ventajas: admite mayor cantidad de muestra que en
superficie, fiable, se aprovechan nutrientes. Se
desarrollan microaeroflicos.
Desventajas: dificultad para visualizar colonias o
repicarlas, porque estn abajo del medio. La
temperatura puede afectar el crecimiento de algunas
cepas termo sensible.
COLONIAS: (25-250) UFC

Extensin en superficie: debemos poner un volumen


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+ 90 peptonada (100 ml),


sta es 10-1 ya que no hay
madre.

Cultural o
vivo

Hay que pensar que


con una solida, hay
que hacer madre, y
con una liquida, no
hace falta, una vez que
le agregas el agua, ya
tens la dilucin
hecha. En el slido hay
que hacerlo liquido
primero.

Filtro de membrana

Diluciones (NMP)

no mayor a 0,1 ml de la dilucin que deseamos por


toda la superficie del agar, usando el palito de hockey.
Luego se deja secar, se da vuelta y se incuba.
Ventajas: facilidad para contar y repicar colonias, ya
que estn en la superficie. No se afectan a las clulas
termo sensible. Crecen aerobios y anaerobios
facultativos.
Desventajas: menor cantidad de muestra
que
vertida. Mayor error que placa vertida. Menor
aprovechamiento de nutrientes.
COLONIAS: (25-250) UFC
Ansa calibrada: rpido, econmico. Permite tener una
visualizacin preliminar de la carga bacteriana. Se
usan 0,02 ml de la muestra.
Ventajas: mayor muestra que gota. Menor
probabilidad de error.
Desventajas: la temperatura del ansa puede afectar
al inoculo. Variar la descarga en las estras da errores.
COLONIAS: (10-20) UFC
Recuento por gota: rpido, econmico. Permite tener
una visualizacin preliminar de la carga bacteriana. El
volumen es e 0,01 ml.
Ventajas: no se afectan a los microorganismos por el
calor. Hay similitud entre las gotas no podes descargar
ms o menos como en la ansa calibrada.
Desventajas: menor cantidad de muestra que ansa
calibrada. Mayor probabilidad de error por salpicado.
COLONIAS: (10-20) UFC

Se hace pasar un volumen de una muestra por un


filtro de membrana estril (poro 0,45 m). Luego se
retira el filtro y se lo coloca en la superficie de una
placa de Petri con el medio de cultivo y se incuba.
Luego se cuentan las colonias desarrolladas en el
filtro.
COLONIAS: (20-200) UFC
Se basa en la presuposicin de que las bacterias se
distribuyen normalmente en un medio lquido. Segn
el tipo de microorganismo a investigar, usaremos un
medio determinado. Luego segn los resultados,
debemos buscar en las tablas el NMP en 100 ml de
muestra.
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Ventajas: til para determinar cargas bajas. Se


prefiere cuando el organismo es de lento crecimiento
o cuando fueron sometidos a condiciones adversas. Es
posible
mediante
este
mtodo
enumerar
microorganismos anaerobios usando tubos con medio
reducido, tapados con vaselina.
Para BAM: evidencian calidad higinica del alimento o medio por donde se extrae agua. Se
utiliza el mtodo de placa vertida (1 ml). Crecen a temperatura ptima 37 C.
Para coliformes: se usa placa vertida (1 ml). Si hay indica contaminacin fecal. Crecen a 45 C.
Hongos y levaduras: 0,1 ml extensin en superficie (necesitan oxigeno). Deterioran el
alimento,
Aguas
El 97% del agua total en el planeta es salada, y el 3% dulce. Dentro de ese 3% tenemos una
amplia distribucin entre ros, lagunas, charcos, glaciares, y agua subterrnea. El agua dulce se
encuentra expuesta a contaminantes que pueden ser:
Qumicos o microbiolgicos.
Naturales o de origen antropognico (ser humano).
Nos centraremos en los antropognicos y en los microbiolgicos.
Riesgo de contraer una enfermedad por tomar agua contaminada con patgenos: depende de
varios factores, no es 100% seguro que al ingerir un patgeno desarrollaremos una enfermedad.
Los factores son:
1. Tipo de patgeno.
2. Virulencia de la cepa.
3. Numero de organismos ingeridos
4. Edad de la victima potencial (los nios y ancianos suelen ser mas propenso).
5. Estado de salud general de la victima potencial.
6. Respuesta adquirida por el individuo: exposicin previa y generalizacin de anticuerpos.
Evaluacin del riesgo: para saber si una muestra de agua es apta para consumo o no se la debe
evaluar. Para esto no nos centramos en la bsqueda y numeracin de patgenos en la muestra
porque resulta difcil, costoso y menos confiable. Por eso debemos buscar organismos
indicadores. Estos son organismos que acompaan a los patgenos y que cumplen con un
nmero de caractersticas particulares. Los organismos indicadores lo que hacen es evaluar el
grado de contaminacin del agua, en base a heces o mala higiene. No tienen relacin
directa con la cantidad y tipo de patgenos. Las cualidades que deben cumplir en su
mayora los indicadores son:
1. Se le deben poder aplicar todo tipo de pruebas para diferente tipo de aguas.
2 Deben estar presentes cuando hay y cuando no hay patgenos.
3. Fcil de identificar y enumerar. Las pruebas deben ser fciles y rpidas.
4. Poseer caractersticas definidas.
5. No se debe multiplicar de no multiplicarse el patgeno. Si lo hace, si.
6. Debe tener mayor resistencia y esperanza de vida que el patgeno.
7. Debe ser inoculo para animales.
No hay ninguno que cumpla todas estas caractersticas.
Indicadores

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1. Contaminacin fecal: Enterobactereceae coliformes totales coliformes fecales o


termotolerantes (sobreviven a 45 C) Escherichia coli. Para que sea apta el agua para su
consumo debe haber < 3 NMP en 100 ml y ausencia en 100 ml de Escherichia.
Los coliformes totales son indicadores valiosos de las descargas fecales por habitar en el
intestino. Dentro de sus limitaciones tenemos que muchas bacterias dentro del grupo no son del
tracto intestinal; tienen poca o nula relacin con peligros potenciales provenientes de patgenos
de esa fuente. Las ventajas son que sobreviven mas tiempo que los patgenos. La utilizacin de
este indicar no se basa en su potencial para causar enfermedades al ser humano, solo indica el
grado de contaminacin fecal. Se transmiten por agua, suelos, alimentos, vegetacin, vegetales,
frutas, etc.
Caractersticas coliformes: grupo funcional sin valor taxonmico; pertenecen a la familia
Enterobacteriaceae; forma bacilar o cocobacilo; gram negativos; aerobios o anaerobios
facultativos; fermentativos; fermentan lactosa y glucosa con produccin de acido y gas a 3537CC dentro de 48 horas de incubacin; oxidasa negativas; catalasa positivos; mayora son
mviles.
Los coliformes fecales son los que tienne mayor probabilidad de haberse desarrollado en el
intestino humano, por eso se los distinguen de los totales. Dentro de fecales tenemos a E. coli y
Klebsiella.

Medios y tcnica de identificacin: NMP en 100 ml de agua


1. Presuntiva para CT, caldo Laurilsulfato 2. De los positivos, confirmatoria para CT (caldo
LVBB o Brila) de los positivos determinacin de CF (caldo E-C y E-C triptfano). La
fermentacin de lactosa en los 3 cultivos con la produccin de gas y turbidez para CT es a 35 C
durante 48 horas; para los CF a 44C durante 24 horas. Se trata de una marcha. Para indicar
los resultados usamos el NMP (numero ms probable).
Los CT se los incuban entre 35 y 37C durante menos de 48 horas; los CF entre 44 y 45 C
durante 24 horas.
La presencia de CF indica contaminacin fecal; la presencia de E. coli indica contaminacin
fecal o inadecuado tratamiento para remocin de bacterias fecales.
Otros indicadores de contaminacin fecal
Alternativamente a los CF tenemos a los Streptococos fecales (EF) que tambin habitan el
tracto digestivo e incluso podran predecir mejor el riesgo de contraer enfermedades
gastrointestinales. Nomas que las bacterias de CF estn en mayor medida que las EF en el
intestino humano (relacin CF/EF alta); en animales ocurre al revs (CF/EF baja). Si analizamos la
relacin CF/EF podemos ver si la contaminacin es animal o humana.
Caractersticas: los streptococos son gram positivos, de forma esfrica. Son catalasa negativos,
anaerobios estrictos o facultativos, producen hemolisis en agar sangre.
Clostridios reductores de sulfito. Son anaerobios esporuladas presentes en las heces en menor
cantidad que E. coli. Las esporas resisten por largos periodos. Su persistencia en el agua que fue
desinfectada indica que hubo deficiencias en sta.
2. Contaminacin ambiental, y por poca higiene: BAM (bacterias aerobias mesofilas).
Debe haber < 500 UFC / ml. Pseudomonas tambin indica poa higiene y debe haber ausencia en
100 ml de muestra.
BAM se analiza en placa vertida. Pseudomonas en cetrimida (selectivo) con un
enriquecimiento previo. Se siembra comn.
Metodologa para procesar aguas
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NMP
Se basa en la presuncin de que las bacterias
se hallan normalmente distribuidas en un
medio lquido.
Para ensayos confirmatorios se hace la prueba
de oxidasa (+ azul) e indol (+ anillo rojo).

Ventajas: permite una mayor recuperacin de


organismos stresados (el caldo laurilsulfato es
de pre-enriquecimiento para enterobacterias),
se obtienen mejores resultados en muestras
muy contaminadas
Desventajas:

Membrana filtrante
Se filtran 100 ml de muestra sobre una
membrana de un poro especfico. Luego se
lleva la membrana a una placa con medio LES,
se incuba
a 35C durante 24 horas. Se
examina la membrana y se cuentan las
colonias de lactosa + rojas con brillo dorado.
Para ensayos confirmatorios se hace la prueba
de oxidasa (+ azul) e indol (+ anillo rojo).
Ventajas: rpido, se necesita menos material,
especfico.

Desventajas: costoso, crece monocapa si hay


mucha carga bacteriana, hay que hacer
diluciones previas, si la muestra tienen
sedimentos, el filtro se tapa.

Potabilizacin de agua: mediante cloro, ozono, radiacin UV. Se realiza para destruir
patgenos, prevenir y proteger contra enfermedades potenciales, evitar que crezcan ms
microorganismos patgenos.
Suelos
Interacciones microbianas en el ambiente
-Ecologa microbiana: ciencia relativamente nueva que surgi a partir de 1970. Estudia a los
microorganismos y como se relacionan con el ambiente. Las interacciones son dinmicas y
varan con el tiempo.
-Poblacin: grupo de microorganismos de la misma especie en un lugar y momento
determinado.
-Comunidad: conjunto de poblaciones, es decir, de organismos de distintas especies que
conviven en un lugar y tiempo.
-Ecosistema: unidad ecolgica bsica, autosuficiente, auto regulable y estructurada, en la que
cada poblacin ocupa un nicho.
-Nicho papel que desempea una comunidad de organismos en un ecosistema.
-Hbitat: lugar ocupado por un ecosistema.
-Biosfera: porcin de la tierra ocupada por los seres vivos. En ella se integran los ecosistemas.
-Ciclo biogeoquimico: movimiento de elementos a travs de reacciones qumicas en toda la
biosfera. Intercambio entre partes biticas y abiticas. Los microorganismos cumplen un papel
importante.
-Suelo: consorcio de clulas vivas en una matriz rgano-mineral. Vara con el tiempo y lugar. Se
forma por combinaciones e procesos fsicos, qumicos y biolgicos. Componentes: mineral
arena, limo, arcilla- orgnicos, agua y aire (50% del total, muy importante), organismos vivos. En
la superficie de las arcillas ocurren las reaccione catalticas, ya que absorbe enzimas. sta posee
carga debido a que las bacterias tienen carga a pH neutro.
El tamao del poro en el suelo determina la actividad que tendr. La erosin tiene a agrandar los
poros y el agua ya no se ve retenida, por lo tanto los microorganismos tampoco. Existe una
proporcin especifica y optima entre agua-aire-suelo.

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Relaciones de la comunidad: al ocurrir algn disturbio, la comunidad puede actuar de


tres maneras:
Siendo la comunidad: ABC donde cada letra es una poblacin:
-Resistencia: cuando el disturbio no afecta a la comunidad. Si tenamos ABC, seguimos
teniendo ABC.
-Resilencia: el disturbio afecta a la comunidad, por ejemplo elimina C, quedando A y B.
pero al cabo de un tiempo C vuelve a producirse, teniendo como finalizado ABC otra vez, sin
cambios ni en funcin ni en composicin.
-Redundancia: cuando el disturbio elimina C por ejemplo, y sta no vuelve a formarse. En
cambio, se forma D, que cumple exactamente las mismas funciones que C. el cambio a nivel
funcin de comunidad es redundante, todo sigue igual, pero a nivel composicin si cambi la
comunidad.
Interaccin en una poblacin microbiana: pueden ser negativas o positivas. Se
encuentran interrelacionadas y dependen ambas de la densidad de poblacin existente.
-Positivas: cooperacin, tiene a aumentar la tasa de crecimiento a medida que aumenta
la densidad de poblacin. Sin embargo, la poblacin no crece hasta el infinito, cuando ya son
muchos, se detiene, de manera de evitar agotar los recursos y la extincin. Cuando son pocos
(baja densidad e poblacin) no hay una tasa de crecimiento alta, pero si empieza a haber ms
organismos (mas densidad e poblacin), la tasa de crecimiento de estos se eleva, cada vez hay
ms (relacionar con densidad: cantidad y tasa de crecimiento: nacimientos). Dentro de los
ejemplos tenemos: efecto grupo (uno solo no prospera, pero varios s); swarming (traslocacin
celular en masa); proteccin contra agentes antimicrobianos (cuando hay muchos, los de debajo
de toda la colonia, que se encuentra por capas, quedan protegidos por los de arriba. Por eso si
ponemos algn agente antimicrobiano, los e arriba mueren, pero los de abajo no); conjugacin
(unin por puentes entre bacterias, por donde se pasa ADN y esto aumenta a la variabilidad, la
cual aumenta la adaptacin al ambiente).
-Negativas: competencia, tiene a disminuir la tasa de crecimiento cuando la densidad de
poblacin es mucha. Es decir que cuando son muchos, empiezan a morir. Se le conoce tambin
como un tipo de retro alimentacin donde se controla la velocidad con la quela poblacin crece.
Ocurre cuando hay escasos nutrientes y cuando los desechos y metabolitos producidos por la
poblacin son excesivos.
Una manera de controlar la muerte de organismos es mediante los genes suicidas y antdoto,
hok y sok, que posee E. coli. Estos genes estn en los plsmidos de la bacteria, al traducirse dan
como resultado ARNms, y la cual al dividirse la bacteria, sta puede pasar los dos, dando una
bacteria que vivir, o puede pasar el suicida y no el antdoto, dando muerte a esa bacteria en el
futuro. Sok posee un ARN m en sentido opuesto al de hok, por lo cual al producirse ambos, sok
bloquea a hok, y este no se puede traducir. Peor si el ARN m de hok se pasa y el de sok no
muerte.

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Este mecanismo es de supervivencia ya que regula la cantidad


de poblacin e evita que se terminen los recursos y posible
extincin.
Al combinar las interacciones positivas y negativas tenemos una
curva campana con predominancia de positivas cuando hay baja
densidad de poblacin, una densidad ptima, y predominancia
de negativas cuando sta ltima es alta.

Interaccin entre 2 poblaciones


diferentes: se la considera la fuerza motriz
para el arreglo de las comunidades. Pueden
ser positivas (aumentan la supervivencia y
amortiguacin
del
stress
combinando
aptitudes fsicas y metablicas, comensalismo,
sinergismo, mutualismo) o negativas (limitan
el
crecimiento
poblacional,
impiden
la
superpoblacin y destruccin del hbitat,
competencia y amensalismo). Vemos ejemplos
en la imagen.

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Interacciones entre microorganismos


Al comienzo suelen ser neutras, pero a medida que
la poblacin aumenta (competencia) ocurren
relaciones dentro de las cuales tenemos dos tipos de
estrategias: R y K.
Estrategia R: alta tasa reproductiva, baja eficiencia
en la utilizacin del recurso, alta tendencia
migratoria,
frecuente
oscilacin
del
tamao
poblacional.
Estrategia K: baja tasa reproductiva, alta eficiencia
en la utilizacin del recurso, baja tendencia
migratoria, tamao poblacional constante.
Los microorganismos siguen estrategias R debido a la variacin de nutrientes y el clima, que
desencadena un ambiente poco estable y cambiante. Por eso aprovechan cuando hay y cuando
no, no.
Biopeliculas o biofilms (Pseudomonas)
Son comunidades que viven en una matriz orgnica adherida a un sustrato. Se van pasando de
unas a otras en el tiempo (epibiosis), donde nuevas poblaciones van desplazando a las
originales. La presencia de mltiples poblaciones en la biopelicula hace posible la cooperacin
metablica sostenida, donde se producen nutrientes por unas y se absorben por otras y los
desechos se eliminan de igual manera (lo que no le sirve a una a la otra si, etc.).
Comportamiento social microbiano: incluye comunicacin entre las bacterias
1. Transferencia de plsmido
2. Resistencia a antibiticos
3. Produccin de biopeliculas.
4. Traslocacin en masa.
5. Virulencia
Todos estos comportamientos estn regulados por el QUORUM SENSING, mecanismo por el
cual se ponen de a cuerdo los organismos y coordinan una respuesta mediante la expresin de
genes. Es un fenmeno por el cual la acumulacin de molculas sealizadoras en el ambiente
permite censar situaciones y llevar a cabo una respuesta coordinada. Estas molculas
sealizadoras pueden ser desechos metablicos (se acumulan en el ambiente desencadenando
un cambio de comportamiento, como correrse a otro sitio) o autoinductores (promueven
formacin de respuesta ante el aumento de poblacin, por ejemplo esporulacin, luminiscencia,
virulencia, etc.).
La molcula seal debe ser:
-Beneficiosa tanto para el que la manda como para el que la recibe.
-Debe dar respuesta a algo, no est ah por nada.
-Debe acumularse y estimular una respuesta concreta coordinada, no solo para salir del
problema y chau.
Para rechazar la actividad coordinada entre 2 poblaciones, una de ellas genera lactonasas y
esto disuelve la comunicacin.
Ciclos biogeoquimicos
Se refiere a las variaciones que van teniendo los componentes qumicos en su paso por la
atmosfera, el C y el N son los de mayor importancia para nosotros. Los microorganismos a travs
de sus actividades metablicas, desempean un papel importante en el intercambio de
materiales entre las diversas partes de la biosfera.
-Ciclo carbono
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-Ciclo nitrgeno
El nitrgeno es uno de los componentes principales de las biomolculas, siempre en la forma de
NH2. Varias de las reacciones clave de xido-reduccin del nitrgeno que tienen lugar en la
naturaleza las llevan a cabo casi exclusivamente los microorganismos, por lo que su
participacin en el ciclo del nitrgeno es de gran importancia.El N2 es la forma ms estable y su
reservorio se encuentra en la atmsfera (78%)
Transformaciones biolgicas del nitrgeno:
Fijacin

volatilizacin
Mineralizacin

inmovilizacin
Oxidacin
reduccin
Las principales reacciones del ciclo del Nitrgeno tienen relacin con los compuestos ms
importantes de ste en la naturaleza:
Fijacin del Nitrgeno
Nitrificacin y Desnitrificacin
Amonificacin

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Solo los procariotas


NITROGENASA

fijan

nitrgeno

ya

que

poseen

el

sistema

enzimtico

La fijacin de nitrgeno ocurre en un 85% por microorganismos procariotas. Puede ocurrir


en vida libre o simbitica. Dentro de vida libre tenemos como representativo al gnero
Azotobacter. Los aerobios poseen la nitrogenasa que capta el nitrgeno de la atmosfera y lo
fija, peor como el oxigeno daa al sistema enzimtico, estas bacterias viven en colonias mucosas
protegiendo al sistema. El oxigeno debe difundir por el moco, y cuando lo hace llega de manera
lenta, sin ocasionar daos.
En simbiosis tenemos a los rizobios. La relacin se da con races en lo conocido como
rizosfera, que sern unos 4 o 5 ml asociados a la raz. Dentro del grupo tenemos a: Rhizobium,
Bradyrhizobium y Azorhizobium. Fijan solo cuando estn en simbiosis con races, en vida libre no.
Son hetertrofos, el primero es de alta especificidad, el segundo no tanto. Son sensibles a pH
acido, mesofilos, y a mayor nitrgeno haya, menos fijan y viceversa. Una vez que el rizobio se
adhiri a la raz, es irreversible, no s epuede volver a atrs. Se multiplican y comienzan a infectar
la raz. La planta permite la infeccin formando tubos para que logen pasar los microorganismos
a la zona cortical, notando una coevolucion especifica. Esto lo vemos gracias a que el tubo se
encuentra protegido por celulosa. La terminacin es en ndulos.
La pared celular de los organismos es una defensa, pero no se forma si no es necesaria. Dentro
de los ndulos los rizobios estn protegidos, por los cuales la pared celular desaparece y no se
vuelve a formar, dispersando el citoplasma. As se forman los bacteroides.
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El ndulo presenta leghemoglobina, una sustancia que dispersa el oxigeno desde adentro
hacia afuera, protegiendo la nitrogenasa. El ndulo activo posee un centro colorado por eso, y el
inactivo no (se perdi la leghemoglobina).
Efecto de los MICROORGANISMOS de la RIZOSFERA sobre las plantas
Incremento de reciclado y solubilizacin de nutrientes minerales (Ca, Fe, Mn, P , N).
Competencia por nutrientes
Sntesis de auxinas, giberelinas, vitaminas, aas, que estimulan el crecimiento de las plantas.
Impiden el crecimiento de patgenos potenciales.
Accin detoxificante
Estimulan la fotosntesis
Efecto rizosfrico (microbio + planta)
Conjunto de interacciones establecidas entre la raz y los microorganismos del suelo que la
rodea.
Efecto de las micorrizas sobre las plantas (hongo + planta)
Captacin de nutrientes, en especial los menos disponibles o de baja movilidad (P, Zn, etc).
Produccin de fitohormonas que favorecen el enraizamiento y protegen a la planta contra
patgenos.
Incremento de la resistencia al estrs generado por sequa o salinidad.
Descomposicin de sustancias txicas en el ecosistema.
Mejoramiento de la estructura del suelo por exudado de sustancias (glomalina, etc) que
adhieren las partculas del suelo entre s formando agregados.
Relacin carbono/nitrgeno
Aqu vemos ejemplos de la relacin entre los compuestos. A
mayor cantidad de nitrgeno (y menor relacin C/N) mejor
crecimiento de microorganismos y mejor calidad de suelo
(porque los microorganismos necesitan de N para formar sus
protenas y vivir). Las bacterias necesitan para crecer de 5:1 a
10:1.
A medida que se va captando carbono, disminuye la relacin entre los dos y as aumenta el
porcentaje de nitrgeno, logrando que las reacciones microbianas ocurran con mayor celeridad.

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