S

S.E.P.

S.E.S.T.N.M.

T.N.M.

INSTITUTO TECNOLGICO DE TOLUCA

Divisin de Estudios de Posgrado e Investigacin

DOCUMENTO TCNICO DE INVESTIGACIN

MAESTRA EN CIENCIAS EN INGENIERA AMBIENTAL

INDUCCIN DE BIOMARCADORES (FITOQUELATINAS) IN

VITRO POR EXPOSICIN A METALES PESADOS
(Cd, Pb y Cu) EN MUSGOS DE LA ZMVT

PRESENTA:
ELVIRA LPEZ SOLRZANO
No. CONTROL 10280256

DIRECTOR
DRA. GUADALUPE MACEDO MIRANDA
Co- DIRECTOR
DR. PEDRO VILA PERZ

METEPEC, ESTADO DE MXICO ENERO DE 2016

NDICE
1.
2.
2.1
2.1.1
2.1.2
2.2
2.2.1
2.2.2
2.3
2.4
2.4.1
2.4.2
2.5
2.5.1
2.5.1.1
2.6
2.7
2.7.1

ANTECEDENTES
MARCO TERICO
Contaminacin atmosfrica..
Clasificacin de los contaminantes atmosfricos.....
Fuentes de contaminacin atmosfrica.........
Contaminacin por metales pesados.
Principales fuentes de emisin y generacin....
Efectos a la salud y al ambiente................
Estrs en las plantas..............................
Bioindicadores
Caracterizacin de bioindicadores......
Briofitas como bioindicador..........
Biomarcadores...
Musgos como biomarcadores.........
Intercambio Inico y quelacin de los metales en Musgos.
Fitoquelatinas.....
Zona Metropolitana del Valle de Toluca (ZMVT)..
Diagnstico general de la calidad del aire en la ZMVT

1
2
3
5
5
6
8
9
9
9
11
11
13
13
15
16

3.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA..

17

4.

OBJETIVO....................

18

5.

HIPOTESIS........

18

6.

JUSTIFICACIN

19

7.
8.

BOSQUEJO DEL MTODO...........

CRONOGRAMA....

21
23

9.

FACTIBILIDAD..

24

10.

RECURSOS E INFRAESTRUCTURA DISPONIBLE.........

24

11.

FUENTES CONSULTADAS...............

25

1. ANTECEDENTES
La mezcla de elementos qumicos que, en forma gaseosa, se mantiene adherida
por gravedad a la tierra, se conoce como atmsfera o aire (Holdridge, 1978).
Los principales gases que componen la atmsfera son:
Nitrgeno (N2): 78 % total del aire. Es un gas que no reacciona con casi ninguna
otra sustancia (inerte) y apenas se disuelve en agua.
Oxgeno (O2): 21 % del total. Es un gas muy reactivo, se combina con otras
sustancias oxidndolas. Permite que los combustibles ardan y se disuelve en
agua.
Dixido de carbono (CO2): 0,033 % del total. Producido por la combustin de los
combustibles fsiles y la respiracin de las plantas. Es soluble en agua.
Otros gases presentes son:
Gases nobles: Argn (Ar) 0,93 %; Kriptn (Kr) 0,000114 %; Nen (Ne) 0,00182 %;
Helio (He) 0,000524 %.
Hidrgeno y metano.
El vapor de agua (H2O) se encuentra hasta un 4 %. Su proporcin depende de la
zona de la superficie terrestre y de la temperatura de la atmsfera.

2. MARCO TERICO
2.1 Contaminacin atmosfrica
La contaminacin atmosfrica es la aparicin en el aire de una o varias sustancias
extraas en cantidades y durante periodos de tiempo suficientemente prolongados
como para producir efectos nocivos sobre el hombre, los animales, las plantas o
las tierras as como perturbar el bienestar o el uso de los bienes.
Acta a distintas escalas desde cambios locales en la calidad del aire que
provocan malestar a los habitantes de las grandes ciudades hasta procesos
globales, que afectan al medio ambiente de todo el planeta.
1

2.1.1 Clasificacin de los contaminantes atmosfricos

Hoy en da se encuentran identificadas unas 3000 sustancias gaseosas
consideradas como contaminantes atmosfricos, la mayora de ellos orgnicos (es
decir, compuestos por cadenas de carbono). Estos compuestos se clasifican de
acuerdo a los siguientes criterios:
Segn su origen podemos clasificar a las emisiones gaseosas como naturales y
antropognicas. Las emisiones naturales se generan por procesos que ocurren en
la naturaleza como emisiones volcnicas y marinas, incendios forestales o la
actividad de los seres vivos (bacterias desnitrificadoras, digestin de los
herbvoros, etc.) Las emisiones antropognicas, reciben este nombre por ser
generadas por las actividades humanas, principalmente la extraccin, distribucin
y uso de combustibles fsiles (carbn, petrleo y gas) para la generacin de
energa o el transporte, la actividad industrial, la gestin de los residuos, la
agricultura, etc.
Otra forma de clasificar los contaminantes atmosfricos se realiza atendiendo a la
forma en la que se emite a la atmsfera. As se puede distinguir entre
contaminantes primarios y secundarios. Los contaminantes primarios son aquellos
que se emiten directamente a la atmsfera, son de muy diversa naturaleza
qumica y provienen de fuentes de emisin. Los contaminantes secundarios, son
el resultado de transformaciones qumicas de los contaminantes primarios
despus de ser emitidos mediante reacciones con otras sustancias gaseosas, con
el agua de la atmsfera o con la radiacin solar.
Segn su composicin qumica se pueden clasificar en compuestos de nitrgeno,
de azufre, compuestos orgnicos, como hidrocarburos aromticos policclicos y
compuestos inorgnicos como metales pesados.

Segn su estado fsico. La atmsfera consiste en una mezcla de compuestos en

distintos estados fsicos, gaseosos en su mayora, pero tambin slidos (polvo en
suspensin) y lquidos (gotas de agua que forman las nubes, las nieblas o la lluvia
y las sustancias disueltas en ella).
Segn su reactividad qumica, es decir, su capacidad para transformarse
qumicamente, los contaminantes se pueden clasificar como reactivos o inertes.
Los gases inertes pueden transformarse en reactivos mediante reacciones con la
luz solar o con otros compuestos (Gallego et al, 2012).

2.1.2 Fuentes de contaminacin atmosfrica

Una fuente de contaminacin es aquella que da origen a la misma. En general se
clasifican las fuentes de contaminantes en cuatro grupos:
1. Puntual (tambin conocidas como fuente estacionaria o fija): Se refiere a una
fuente en un punto fijo o estacionario, existen fuentes estacionarias de
contaminacin del aire, como las plantas de energa, industrias qumicas,
refineras de petrleo, fbricas, etc.
Una de las mayores preocupaciones en todo el mundo, es la emisin de
contaminantes como el bixido de azufre (SO 2) y partculas (PM) en la generacin
de energa elctrica, pues su proceso involucra la combustin de grandes
cantidades de combustibles fsiles. Las industrias qumicas, entre otras son
responsables de emitir muchos contaminantes peligrosos como los compuestos
orgnicos voltiles (COVs).Muchas de estas fuentes de contaminacin a su vez,
generan productos de consumo tiles, crean millones de empleos y prestan
servicios y comodidades. Por lo que, no resulta viable clausurarlas, pero es
urgente que implanten procesos para minimizar y manejar adecuadamente sus
emisiones.

2. Mvil: Incluyen a las diversas formas de transporte tales como automviles,

camiones y aviones, etc.
La principal fuente mvil de contaminacin del aire es el automvil, pues produce
grandes cantidades de monxido de carbono (CO) y cantidades menores de
xidos de nitrgeno (NOx) y compuestos orgnicos voltiles (COVs).
Los programas para el control de emisiones de automviles, como el programa de
verificacin vehicular y el uso de convertidores catalticos, han reducido
considerablemente la cantidad de contaminantes del aire. Adems, las normas
que especifican la calidad del combustible de los automviles y lmites de
emisiones de vehculos nuevos y en circulacin, tambin han contribuido a una
mayor eficiencia y menores emisiones.
3. De rea: Las fuentes de rea se refiere a una serie de fuentes pequeas,
numerosas y dispersas, que no pueden ser incluidas de manera eficiente en un
inventario de fuentes puntuales, pero que en conjunto pueden afectar la calidad
del aire en una regin, por ejemplo: el uso de madera para cocinar o calentar la
casa, las imprentas, las estaciones de servicio, y las tintoreras, etc.
4. Fuentes naturales: Adems de las actividades humanas, los fenmenos
naturales y la vida animal y vegetal pueden jugar un papel importante en el
problema de la contaminacin del aire. A continuacin se describen dos fuentes
naturales significativas, que son comnmente consideradas en los inventarios de
emisiones atmosfricas.
Emisiones Biognicas. Un gran nmero de investigadores han establecido que la
vegetacin (ejemplo: pastos, cultivos, arbustos, bosques, etc.), emiten cantidades
significativas de hidrocarburos a la atmsfera.
Emisiones de Suelos. El xido nitroso (N 2O) es producido naturalmente en los
suelos como parte de los procesos de desnitrificacin (es decir, la reduccin de
4

nitritos y nitratos a nitrgeno gaseoso como N2 o NOx). Por su parte, los

fertilizantes nitrogenados comerciales constituyen una fuente adicional de
nitrgeno, lo cual incrementa las emisiones del suelo de N 2O. Se estima que las
emisiones de NOx provenientes de los suelos constituyen un 16% de la cantidad
global de NOx en la tropsfera (SEMARNAT, 2014).

2.2 Contaminacin por metales pesados

Los metales pesados estn constituidos por elementos de transicin y posttransicin incluyendo algunos metaloides como el arsnico y selenio. Estos
elementos tienen una gravedad especfica significativamente superior a la del
sodio, calcio, y otros metales ligeros. Por otro lado, estos elementos se presentan
en diferente estado de oxidacin en agua, aire y suelo y presentan diversos
grados de reactividad, carga inica y solubilidad en agua.
Una forma opcional de nombrar a este grupo es como elementos txicos, los
cuales, de acuerdo a la lista de contaminantes prioritarios de la Agencia de
Proteccin Ambiental de los Estados Unidos (USEPA), incluyen a los siguientes
elementos: Arsnico, cromo, cobalto, nquel, cobre, zinc, plata, cadmio, mercurio,
titanio, selenio y plomo.

2.2.1 Principales fuentes de emisin y generacin

Los metales pesados se encuentran en forma natural en la corteza terrestre. Estos
se pueden convertir en contaminantes si su distribucin en el ambiente se altera
mediante actividades humanas. En general esto puede ocurrir durante la
extraccin minera, el refinamiento de productos mineros o por la liberacin al
ambiente de efluentes industriales y emisiones vehiculares. Adems, la
inadecuada disposicin de residuos metlicos tambin ha ocasionado la
contaminacin del suelo, agua superficial y subterrnea y de ambientes acuticos.

Entre las principales fuentes de emisin de los metales de mayor preocupacin en

Mxico se tiene:
Mercurio
-

Actividades mineras de extraccin de oro, plata y cobre.

Fundicin primaria y secundaria de metales.
Combustin de combustleo y carbn en la generacin de electricidad.
Incineracin de residuo peligroso y biolgico infeccioso.

Plomo
-

Fundicin primaria y secundaria de metales.

Produccin de pinturas
Elaboracin de latas soldadas con plomo
Uso de gasolina con plomo

Cadmio
-

Fertilizantes
Pigmentos y Estabilizadores en Plstico y PV
Galvanizacin
Elaboracin de Pinturas
Aleaciones

2.2.2 Efectos a la salud y al ambiente

La contaminacin por metales puede derivar en diversos efectos a la salud y al
ambiente, dependiendo del elemento en particular. Los efectos a la salud y al
ambiente para los elementos metlicos de mayor preocupacin en Mxico se
enlistan a continuacin:
Mercurio
Los efectos txicos por inhalacin de vapor de mercurio, el cual daa
especialmente el sistema nervioso. Las exposiciones leves estn caracterizadas
por prdida de la memoria, temblores, inestabilidad emocional (angustia e
irritabilidad), insomnio e inapetencia. A exposiciones moderadas, se observan
desrdenes mentales ms importantes y perturbaciones motoras, as como

afecciones renales. Las exposiciones breves a altos niveles de vapor de mercurio

pueden producir daos pulmonares y la muerte.
Plomo
En las zonas urbanas con intenso trfico vehicular, la principal fuente de
exposicin al plomo resulta de la inhalacin de partculas extremadamente
pequeas que persisten en el aire durante algunas semanas antes de
sedimentarse y que son emitidas por los autotransportes que consumen gasolinas
que contienen tetraetilo de plomo. Se ha visto que el plomo es el principal
contaminante metlico en la atmsfera. La intoxicacin aguda se presenta
acompaada de alteraciones digestivas, dolores epigstricos y abdominales,
vmitos, alteraciones renales y hepticas, convulsin y coma. En tanto que la
intoxicacin crnica puede involucrar neuropatas, debilidad y dolor muscular,
fatiga, cefalea, alteraciones del comportamiento, parestesias, alteraciones renales,
aminoaciduria,

hiperfosfaturia,

glucosuria,

nefritis

crnica,

encefalopata,

irritabilidad, temblor, alucinaciones con prdida de memoria, clicos, alteraciones

hepticas, entre otros.
Para la biota, incluido el ser humano, el plomo es un elemento no esencial y
potencialmente nocivo. Cuando este metal alcanza niveles txicos provoca la
disminucin de la fotosntesis vegetal y el desarrollo de anemia en mamferos. En
las plantas adems del efecto ya mencionado, se le atribuye la reduccin en el
crecimiento, en la biomasa y la transpiracin; adems de lesiones cromosmicas,
inhibicin de la divisin celular e interferencia con enzimas ligadas al metabolismo
del nitrgeno.
Cadmio
La poblacin abierta se expone a l principalmente a travs de la cadena
alimenticia, aunque tambin por el consumo de tabaco contaminado con cadmio
presente en los fertilizantes fosfatados. El cadmio se acumula en el organismo
humano, fundamentalmente en los riones, causando hipertensin arterial. La
absorcin pulmonar es mayor que la intestinal, por lo cual, el riesgo es mayor
7

cuando el cadmio es aspirado. El cadmio ha sido asociado con la aparicin de

cncer en animales de experimentacin, as como con casos de cncer de
prstata en humanos (SEMARNAT, 2009).

2.3 Estrs en las plantas

La palabra estrs proviene del griego stringere significa restriccin o fuerza que
empuja deformando un cuerpo. Son las restricciones externas que limitan las
tasas de crecimiento o reproduccin de los organismos. El estrs se puede
distinguir como bitico (causado por otros organismos) y abitico (causado por
condiciones ambientales). Dentro del estrs abitico se encuentran factores fsicos
(luz solar, vientos y agua) y factores qumicos (metales pesados, salinidad, pH). El
estado del estrs oxidativo es la razn por la cual los metales son txicos en
plantas, causado por la exposicin a elevados concentraciones de metal (Pea et
al., 2005).
El conocimiento de los mecanismos de resistencia al estrs permiten comprender
los procesos evolutivos implicados en la adaptacin de las plantas a un ambiente
adverso y predecir hasta cierto punto la respuesta vegetal al incremento de la
adversidad asociada al cambio global (Valladares, 2004).
Tipos de estrs ambiental
-

Estrs hdrico.
Estrs por alta y baja temperatura.
Estrs por alta y baja irradiacin.
Estrs por alta y baja radiacin ultravioleta (UV).
Estrs por salinidad
Estrs nutrimental.
Estrs por toxicidad de metales pesados (Basurto et. al, 2008).

2.4 Bioindicadores
El termino bioindicador se deriva de su etimologa, es un ser vivo que indica las
condiciones del medio en que vive. Es aquel organismo o comunidad en los que
su existencia, sus caractersticas estructurales, su funcionamiento y sus
reacciones, depende del medio en el que se desarrolla y cambia al modificarse las
condiciones ambientales.
La capacidad de respuesta de los bioindicadores depende de:
- Composicin gentica del organismo, porque puede favorecer o no a la
adaptacin a los cambios, y por tanto, la manifestacin de respuestas, fcil y
rpidamente visibles.
- Su estado de desarrollo, pues hay etapas del ciclo vital que son ms influyentes.
- De las propias condiciones ambientales, porque los estmulos pueden ser
variados.

2.4.1 Caracterizacin de bioindicadores

Hay que tener en cuenta que los bioindicadores lo son en principio localmente,
pues sus requisitos pueden ser diferentes en distintos puntos geogrficos.
Hay muy pocas especies que sean cosmopolitas, es decir, que su rea de
distribucin cubra toda la superficie de la tierra, por esto puede ocurrir que los
datos acerca de bioindicadores que se conozcan de un lugar del mundo no sean
utilizables en otros.Hay que tener precaucin con los indicadores negativos, o sea,
por ausencias, pues los motivos por los que una especie no est en un lugar
pueden ser muy variados (Cap, 2007).

2.4.2 Briofitas como bioindicador

Los brifitos son un grupo de organismos que se separaron tempranamente del
resto de las plantas terrestres dando lugar a tres linajes diferenciados: musgos y
9

esfagnos (Div.

Bryophyta), hepticas (Div. Hepatophyta) y antoceros (Div.

Anthocerophyta). Aunque

parece que estos tres linajes no forman un grupo

monofiltico presentan caracteres reproductores y estructurales comunes, y

exclusivos de ellos, por lo que de manera informal se le denomina Brifitos
(Cubas, 2008).
Los lquenes y musgos fueron los primeros epfitas ser utilizadas como plantas de
monitoreo y todava ahora se utilizan como plantas de prueba (Brighigna, 2007).
Hay amplias evidencias que las briofitas son excelentes indicadores de la
contaminacin ambiental han sugerido usarlos como brimetros, instrumentos
para medir la fitotoxicidad de la polucin ambiental utilizando briofitas. An ms,
muchas especies de briofitas han perdido su fertilidad o se han extinguido en las
reas urbanas por su gran sensibilidad a la contaminacin ambiental.Tambin son
capaces de concentrar metales pesados en grandes cantidades, como Zinc (Zn),
Plomo (Pb), Hierro (Fe), Cobre (Cu), Nquel (Ni) y Cadmio (Cd) (Matteri, s.f.).
El uso de briofitas es un mtodo sumamente efectivo en el monitoreo de la
contaminacin del aire debido a las siguientes razones: (Mulgrew y Williams,
2000).
-

Las especies tienen una amplia distribucin geogrfica y crecen en un amplio

entorno.

Son fcil de manejar ya que su tamao es pequeo.

La mayora de las especies son de hojas perenes y logran sobrevivir durante el

ao.

Las briofitas carecen de una cutcula y de un sistema de races y obtienen sus

nutrientes directamente de la deposicin atmosfrica. Tienen una buena
capacidad de bioacumulacin, particularmente para metales pesados, donde la
concentracin del metal refleja la deposicin sin la complicacin de la
captacin va el sistema radicular.
10

La capacidad de las briofitas para acumular elementos en muy altas

concentraciones ayuda al anlisis qumico de los tejidos y puede facilitar la
deteccin de elementos presentes en muy bajas concentraciones en el
ambiente.

Los lquenes pueden ser usados como bioindicadores o biomonitores en 2 formas

diferentes: la primera por mapeo de todas las especies presentes en un rea
especfica; la segunda, mediante el muestreo individual de la especies liqunicas y
la medicin de los contaminantes acumulados en los talos (Santoni 2006).

2.5 Biomarcadores
Son instrumentos de medicin de las caractersticas del husped que indican la
exposicin de una poblacin a un peligro o el alcance del efecto adverso causado
por dicho peligro. La Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos ha
clasificado los biomarcadores en 3 clases (Directrices, 2004):
Biomarcador de la exposicin
Biomarcador de los efectos
Biomarcador de la susceptibilidad
2.5.1 Musgos como biomarcadores

Los musgos se han utilizado en el norte de Europa desde finales de los aos
sesenta para el seguimiento de la contaminacin como medida indirecta de la
deposicin atmosfrica de metales pesados.
Los musgos debido a su simplicidad estructural, carecen de una cutcula, de un
sistema vascular y de un sistema radicular bien desarrollados, absorben la mayor
parte de los minerales necesarios para su desarrollo por va de la deposicin
atmosfrica (seca y/o hmeda) y no del sustrato, reducindose la posible
influencia de los metales pesados presentes en el sustrato en el que viven.
Adems presentan un contacto muy directo con la atmsfera que les rodea (hojas
11

con una sola capa de clulas y sin cutcula). Los iones son retenidos en su
superficie por un fenmeno de intercambio catinico, en el que los cationes
quedan retenidos en pumas de la pared celular cargados negativamente, la
ausencia de cutcula permite el acceso directo de los cationes a estos puntos de
intercambio inico. Por otra parte, poseen una elevada superficie especfica, que
les dota de una alta capacidad de retencin de partculas. De este modo, tanto los
nutrientes como los metales pesados son captados por el musgo. (Fernndez,
1999).
Los musgos no poseen las mismas barreras anatmicas que las plantas
vasculares, por lo que se ha sugerido que la acumulacin de ciertos compuestos,
como flavonoides, tiene un rol fundamental en su defensa y adaptacin a
condiciones causantes de estrs oxidativo (Aubad et al, 2007).
Se reconocen 87 especies y variedades de musgos del rea urbana de la ciudad
de Mxico, incluyendo 23 que slo se conocen por registros a principios de los
aos 1900 (Delgadillo, 2000).
La morfologa, la anatoma y la reproduccin de los musgos se han demostrado
experimentalmente para ser impactado por las altas concentraciones de
contaminantes.
El uso de musgos para el mapeo de la medida y la direccin de deposicin de
metales a partir de fuentes puntuales localizadas es uno de los usos ms
prominentes de musgos en vigilancia de la contaminacin. En la mayora de estos
estudios, la tasa de deposicin mayor a Musgo-bolsa, o la mayor concentracin de
los metales en el musgo natural se observa en las proximidades inmediatas de las
fuentes, y disminuye gradualmente con la distancia desde la fuente hasta que los
niveles de fondo son alcanzados(Onianwa, 2001).
En las zonas urbanas, donde los musgos que crecen de forma natural a menudo
son escasos o ausentes, el biomonitoreo se activa utilizando la '' tcnica de
12

bolsas'' el cual ha sido desarrollado con el fin de evaluar la contaminacin del aire
urbano.Esta tcnica tiene una serie de ventajas: tiempo bien-definido de
exposicin, las concentraciones de fondo conocidas de elementos en el musgo,
flexibilidad en la seleccin y el nmero de sitios de muestreo sitio para ser elegido,
la uniformidad de la superficie de atrapamiento, etc. La principal limitacin del
mtodo es que la eficiencia en la acumulacin de biomonitores para diferentes
contaminantes no se conoce. El tiempo de exposicin es tambin crucial en el
biomonitoreo al usar bolsas. Los musgos en las bolsas tienden a secarse y por
tanto su deficiencia en la retencin de metales puede variar dependiendo de las
condiciones ambientales. Especies de Sphagnum se han considerado por ser
especialmente adecuado para la vigilancia de la contaminacin de metales
pesados debido a la alta capacidad de intercambio catinico de sus paredes
celulares, gran rea de superficie en contacto con la atmsfera (Anicic, 2009).

2.5.1.1 Intercambio Inico y quelacin de los metales en Musgos

El intercambio de iones metlicos en solucin se ha demostrado en muchas
especies de musgos. La formacin de quelato es uno de los mecanismos de
captacin de los metales se infiere de la estabilidad de los metales unidos a
desplazamiento por otros metales.La quelacin de los metales en musgos es
posible gracias a los componentes qumicos de la estructura de musgo que
consiste en una variedad de grupos funcionales orgnicos capaces de formacin y
el intercambio de iones. Por ejemplo, los cidos urnicos formados durante la
sntesis de nuevos materiales de la pared en musgos Sphagnum es responsable
de intercambio inico en estas especies (Onianwa et al, 2001).

2.6 Fitoquelatinas
Las fitoquelatinas son ligados de alta afinidad que complejan metales pesados. Se
piensa que las fitoquelatinas pueden desempear en plantas el papel equivalente
al que las metalotionenas desempean en mamferos y bacterias. Las
13

fitoquelatinas se inducen rpidamente en plantas por tratamiento con metales

pesados. Su disminucin provoca una mayor sensibilidad a metales pesados, por
tanto su papel en la tolerancia y acumulacin de metales pesados en plantas es
crtico como se muestra en la tabla 1 (Navarro, 2007).
Tabla 1. Principales fitoquelatinas implicadas en la tolerancia y/o acumulacin de
metales pesados.

14

2.7 Zona Metropolitana del Valle de Toluca (ZMVT)

La ciudad de Toluca inicia su configuracin como Zona Metropolitana a partir de la
dcada de los aos 60, derivado de la industrializacin del corredor Toluca-Lerma
y que a su vez signific cambios importantes de actividades productivas y sociales
en estructura socioeconmica del Valle de Toluca, motivando la integracin de
municipios al conjunto metropolitano.
Los 22 municipios que componen la ZMVT concentran 2 millones 83 mil 66
habitantes en el 2009, representando el 14.03% de la poblacin estatal, en la tabla
2 se muestran el nmero de habitantes registrados en los ltimos 10 aos.
Tabla 2. Nmero de habitantes en la Zona Metropolitana del Valle de Toluca.
ZMVT
22 municipios

2000
1,732,984

2005
1,917,002

2009
2,083,066

Figura 1. Divisin porcentual de Poblacin Zona Metropolitana del Valle de Toluca 2009

15

El monitoreo de contaminantes atmosfricos en la ZMVT entr en operacin en

1994. La pgina http://sinaica.ine.gob.mx/rama_zmvt.htmlcontiene informacin
sobre la red de monitoreo actual. La red automtica de monitoreo atmosfrico de
la ZMVT (RAMA-ZMVT) se incorpor al sinaica en 2003, y desde entonces
transmite sus datos a dicho sistema en tiempo casi real.
Las estaciones de la RAMA-ZMVT tomadas en cuenta en el diagnstico de la
calidad del aire en el periodo de anlisis 2000-2009 son siete.
Durante el primer semestre de 2008 se reportaron solamente mediciones de los
contaminantes O3, CO, NO2 y SO2, lo que afect considerablemente el porcentaje
de datos validados en el periodo de anlisis.

2.7.1 Diagnstico general de la calidad del aire en la ZMVT

De acuerdo al anlisis de la informacin reportada por la red de monitoreo sobre el
periodo 2000-2009, los principales problemas con la calidad del aire en la ZMVT
se relacionan con altas concentraciones de PM 10 Y O3 (Toluca, 2009)
En la ciudad de Mxico, como en otras reas metropolitanas, musgos parecen
reducir su biomasa nmeros con el aumento de la contaminacin o la acumulacin
de calor. El dixido de azufre es un contaminante importante que descompone las
molculas de clorofila efectivamente destruye muchos musgos urbanas, pero la
desecacin tambin inhibe el crecimiento y la reproduccin (Delgadillo, 2000).

16

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La contaminacin atmosfrica es un problema caracterstico de las grandes
ciudades, causado principalmente por el desarrollo urbano, industrial y
demogrfico, que demanda el uso de bienes y servicios con la consecuente
generacin de emisiones contaminantes a la atmsfera.
La zona metropolitana del valle de Toluca, integrada por 22 municipios, no escapa
a esta situacin, observndose actualmente aspectos preocupantes en materia de
contaminacin del aire. A partir de 1993 el Gobierno del Estado de Mxico opera la
red automtica de monitoreo atmosfrico de la zona metropolitana del valle de
Toluca (RAMA de la ZMVT), con el propsito de medir de manera permanente los
principales contaminantes atmosfricos y parmetros meteorolgicos (ozono,
bixido de azufre, bixido de nitrgeno, monxido de carbono y partculas
suspendidas fraccin respirable PM10, velocidad y direccin del viento, humedad
relativa, precipitacin pluvial, presin atmosfrica, temperatura y radiacin solar)
en el rea con mayor densidad poblacional dentro del valle para conocer la calidad
del aire en la misma.
El monitoreo continuo de la calidad del aire forma parte del sustento tcnico para
la elaboracin de proyectos encaminados a la prevencin y control de la
contaminacin atmosfrica en beneficio de los habitantes del valle de Toluca.
Una manera de monitorear la calidad del aire es mediante el uso de briofitas
(tambin conocidos como musgos), los cuales son capaces de retener
concentraciones de metales pesados y su aplicacin tendr lugar en esta
investigacin para evaluar la cantidad de contaminacin ambiental en la Zona
Metropolitana del Valle de Toluca.

17

4. OBJETIVO

GENERAL
Evaluar la induccin de biomarcadores (fitoquelatinas) in vitro por exposicin a
metales pesados (Cd, Pb y Cu) en musgos de la ZMVT

Objetivos especficos
Establecer las condiciones ptimas de crecimiento del musgo en condiciones
de laboratorio.
Exponer al musgo en condiciones de laboratorio a diferentes concentraciones
de Cd, Pb y Cu.
Cuantificar la acumulacin de Cd, Pb y Cu en las muestras de musgo
expuestas.
Cuantificar las fitoquelatinas inducidas en los musgos y correlacionarlas con la
concentracin y tipo de metal expuesto.

5. HIPOTESIS
La concentracin y tipo de fitoquelatina inducida por la exposicin a metales
pesados en condiciones de laboratorio en musgos de la ZMVT, es funcin del tipo
de metal y de la concentracin a la cual el musgo es expuesto.

18

6. JUSTIFICACIN
La Zona Metropolitana del Valle de Toluca es la segunda conurbacin en
importancia del Estado de Mxico y la quinta a nivel nacional, integrada por 22
municipios, donde viven 2 millones 166 mil 024 habitantes, presenta un aumento
en la demanda de servicios pblicos, transporte y viviendas, que requieren del
suministro de agua y energa, propiciando diversos problemas ambientales.
En la mayora de los casos, la principal fuente de energa, despus de la elctrica
es la combustin de combustibles fsiles; existen otras actividades que generan
emisiones a la atmsfera, como por ejemplo, el uso de solventes, la aplicacin de
pintura, la pavimentacin y asfaltado de calles, el almacenamiento y distribucin
de combustibles, incluso, algunos fenmenos naturales como la erosin del suelo
y el metabolismo de las plantas tienen un papel importante en el problema de la
contaminacin del aire.
Ante este panorama, se hace necesario el monitoreo
de

control

las condiciones ambientales presentes, con el propsito de no llegar a

transgredir lmites que atenten contra la vida humana. Desde esta

se

constante

han

establecido

una

serie

de indicadores de carcter mecnico y otros

de tipo biolgico. El biomonitoreo permite

establecer

contaminacin

contextualizados

sobre

los

seres

perspectiva,

vivos

el

impacto
en

de

la

el ambiente,

adems, el monitoreo convencional del ambiente urbano e industrial requiere

de tcnicas cada vez ms costosas y complejas, por
necesario

el

uso

de

lo

cual

se

hace

mecanismos alternativos que permitan obtener

informacin relevante a precios ms accesibles. Este tipo de investigaciones son

novedosas a nivel internacional y se encuentran en la frontera de la ciencia en su
rea.
Especies vegetales experimentan un estado de estrs con la exposicin a metales
pesados que conduce a dao de la clula vegetal, adems de acumular iones
19

metlicos que afectan la homeostasis inica celular. Para minimizar los efectos
perjudiciales de la exposicin a metales pesados, y su acumulacin, las clulas
vegetales producen tioles de bajo peso molecular como pptidos ricos en cistena
como fitoquelatinas (PC), con alta afinidad por los metales txicos.
Es por ello que el presente proyecto evaluar los niveles de fitoquelatinas en
briofitas a travs de la exposicin a metales pesados en la ZMVT, para poder
monitorear la cantidad de contaminacin que se encuentra en el aire.

20

7. BOSQUEJO DEL MTODO

Especie:
Fabronia ciliaris
Leskea angustata
B. argenteum
Syntrichia amphidiacea

Seleccin
9.de la
especie de
Musgo.

Cultivo en
laboratorio del
musgo.

Propagacin de
musgo.

Preparacin
Aislamiento
Condiciones Ambientales

Exposicin a
metales pesados.

Tratamiento de las
muestras.

Digestin.

Voltamperometra.

Extraccin.

Cuantificacin.

Anal. Electroqumico
HPLC

Determinar la contaminacin por metales pesados y la

concentracin de biomarcadores en la especie de musgo.

21

1. Cultivo en laboratorio y propagacin de Musgo.

- Preparacin del medio de cultivo.
- Aislamiento, esterilizacin y cultivo de explantes (esporas y segmentos de
-

gametofitos).
Condiciones optimas de crecimiento de los cultivos.
Seguimiento de las respuestas de los cultivos.

2. Exposicin de las muestras de musgos a diferentes concentraciones de los

metales Cd, Pb y Cu por periodos determinados.

3. Anlisis por absorcin atmica

A las muestras de musgos expuestas a los diferentes metales pesados se les
realizar una digestin cida en un horno de microondas (Marx 5X-CEM)
utilizando cido ntrico y clorhdrico (grado Ultrex). Las muestras digeridas se
mantendrn en refrigeracin hasta su anlisis.
Las concentraciones de los elementos metlicos se realizar mediante
Espectrometra de Absorcin Atmica con tcnica de flama, por horno de grafito o
de acuerdo a la Norma Mexicana NMX-AA-051-SCFI-2001.

4. Anlisis electroqumico
La extraccin de tioles no proteicos se realizar de acuerdo al procedimiento de
Leinenweber et al. (2009); Gil, 2015. Las PC (fitoquelatinas) se extraern
utilizando cido dietilen triamino penta actico (DTPA)

y cido trifluoractico

(TFA).
Posteriormente se realiz una molienda de musgos con la solucin fra en un
mortero de porcelana libre de metales La suspensin homogeneizada se

22

centrifugar a 10 000 rpm durante 15 min. En el sobrenadante se cuantificar la

PC.

8. CRONOGRAMA
Bimestres
6
7
8

10

11

12

resultados.
8. Presentacin

en Congreso
9. Escritura de

X
X

Actividad
1. Revisin
Bibliogrfica
2. Seleccin de

Musgo.
3. Cultivo en
laboratorio de
musgo.
4. Tratamiento de
las muestras
5. Anlisis de
metales.
6. Anlisis de
Bioindicadores
.
7. Tratamiento
Estadstico y
anlisis de

Tesis

23

9. FACTIBILIDAD
Es un estudio altamente factible debido a sus antecedentes, se llevar a cabo
tomando en cuenta investigaciones anteriores con la exposicin de metales
pesados en musgo.

10.

RECURSOS E INFRAESTRUCTURA DISPONIBLE

El presente proyecto est contemplado en la lnea de Investigacin Desarrollo de

materiales y tratamientos fisicoqumicos y de oxidacin para aplicacin ambiental.
Se realizar en el Instituto Tecnolgico de Toluca, en la UNAM-campus
Cuernavaca y Universidad de Barcelona, quienes brindarn las facilidades para
los procedimientos de sntesis, caracterizacin y fase de investigacin a travs de
sus departamentos de investigacin.

24

11. FUENTES CONSULTADAS

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