ESCUELA DE TECNOLOGA MDICA

FACULTAD DE MEDICINA
UNIVERSIDAD DE CHILE

T.M. MARA CRISTINA SOTO PREZ

Curso Post Ttulo

Estudio y Estandarizacin
dos Biolgi
cos en el
Estandarizacin de Lqui
Lquidos
Biolgicos
Laboratorio
Mara Cristina
de Qum
mica
ica
PrezCln
ica
QuSoto
Clnica

LQUIDOS SEROSOS

Derivan del plasma

Estn en las cavidades pleural, pericrdica y

peritoneal

Cavidades delimitadas por una membrana

serosa parietal y una visceral

Son un ultrafiltrado del plasma derivado de la

abundante red capilar de la serosa

Mara Cristina Soto Prez

Relacin
Relacin entre cavidades,
cavidades, membranas serosas y vsceras
Mara Cristina
Soto Prez
(CLSI)

FISIOLOGA DE LOS LQUIDOS SEROSOS

En su formacin intervienen la presin hidrosttica la

presin coloidosmtica y la permeabilidad capilar
Estn en pequea cantidad y permiten la movilidad de
las vsceras
Se acumulan cuando aumenta la presin hidrosttica o
la permeabilidad capilar, cuando disminuye la presin
coloidosmtica o se obstruye el drenaje linftico
Mara Cristina Soto Prez

Sistema de presiones (Equilibrio de Starling)

Starling)
Aporte arterial

Vaso

Linftico

Retorno venoso

Presin Hidrosttica Sangunea

Presin Onctica Sangunea

o Coloidosmtica Sangunea
Presin Hidrosttica Tisular

Presin Onctica Tisular

Extremo arterial:
arterial:
Presin Neta de
Filtracin (7 mm Hg).

Extremo venoso:
venoso:
Presin Neta de
Absorcin (6 mm Hg).

Mara Cristina Soto Prez

Prof. Dr. C Dufrechou. Uruguay

CLASIFICACI
CLASIFICACIN

Transudados son lquidos no inflamatorios que se

originan por falla en las presiones
Exudados son lquidos inflamatorios que se originan
por aumento de la permeabilidad capilar

Se utilizan parmetros
parmetros bioqumicos y celulares para
hacer la diferenciacin

Mara Cristina Soto Prez

OBTENCI
OBTENCIN DE MUESTRAS I

Se obtienen por puncin de la cavidad (centesis

(centesis))

Es un procedimiento de riesgo:
riesgo:

Infeccin

Ruptura

Hemorragia

Hipotensin

Neumotrax
Mara Cristina Soto Prez

OBTENCI
OBTENCIN DE MUESTRAS II

Las muestras se deben alicuotar

Deben agitarse con suavidad durante la extraccin

extraccin,,
antes de alicuotar y antes de hacer los anlisis

El anticoagulante recomendado es EDTA para el

examen citolgico

Se pueden refrigerar hasta 24 horas

Mara Cristina Soto Prez

REQUISITOS DE LAS MUESTRAS

(CLSI)
ANLISIS
ANLISIS
Recuento celular y
diferencial

ANTICOAGULANTE
EDTA

Protenas
Protenas totales,
totales,
Heparina, ninguno
glucosa, LDH, amilasa
Cultivo,
Cultivo, Gram

Ninguno,
Ninguno, o alguno sin
efecto bactericida o
bacteriosttico
bacteriosttico

Cultivo de BAAR

SPS, ninguno,
ninguno, o alguno
sin efecto bactericida o
bacteriosttico
bacteriosttico

PAP

Ninguno,
Ninguno, heparina, EDTA

mL
5-8
8-10
8-10

15-50

5-50

Mara Cristina Soto Prez

SPS: polianetosulfonato sdico

TRANSPORTE

Se recomienda transportar a temperatura ambiente

Trasladar inmediatamente despus de la recoleccin

Problemas con la demora: lisis, degradacin celular,

crecimiento bacteriano

Para citologa, transportar de inmediato, si es

necesario se pueden refrigerar a 4C por varios das

Mara Cristina Soto Prez

EXAMEN MORFOLGICO

Tipos celulares:
q

Leucocitos, todos los subtipos

Macrfagos

Clulas mesoteliales

Eritrocitos

Clulas malignas

Mara Cristina Soto Prez

CLULAS MESOTELIALES
v Recubren las cavidades serosas
v Tienen gran variedad morfolgica
v Se pueden ver en acmulos o individuales
v Los acmulos tienen ventanas
ventanas que permiten
distinguirlos de acmulos de clulas malignas
v Clulas mesoteliales reactivas son ms grandes con el
ncleo excntrico
v En derrames crnicos las clulas reactivas se
agrandan ms, el ncleo con cromatina menos densa
v Pueden tener ncleos mltiples
v Actan como fagos y se pueden confundir con
macrfagos
Mara Cristina Soto Prez

CLULAS MESOTELIALES
Miden 12 a 30 m, poseen un ncleo excntrico,
cromatina homognea, presencia de 1-3 nucl
nuclolos

Mara Cristina Soto Prez

RECUENTOS CELULARES

Se puede realizar con cmara de Neubauer o contador

hematolgico. La dilucin se efecta con solucin
salina

El volumen adecuado de muestra es de 5 a 8 mL

Se puede refrigerar, pero se debe estudiar antes de 24

horas de extrada

Mara Cristina Soto Prez

Utilidad del recuento de leucocitos: Diferenciar entre

exudado y transudado

Utilidad del recuento de eritrocitos: Identificar derrames

hemorrgicos, neoplasias y traumas

Mara Cristina Soto Prez

RECUENTO DIFERENCIAL
Predominio polimorfonuclear: Predominan en el 90%
de los derrames causadas por inflamacin aguda
Se puede presentar eosinofilia (>10%) cuando hay
procesos inflamatorios alrgicos

Predominio mononuclear: Linfocitos predominan en el

90% de los derrames causadas por tuberculosis,
neoplasias y enfermedades sistmicas

Mara Cristina Soto Prez

 Es difcil diferenciar macrfagos de clulas mesoteliales

Algunos laboratorios consideran los macrfagos como
leucocitos
CLSI recomienda :
Utilizar el trmino recuento de clulas nucleadas en vez
de recuento de leucocitos
El recuento diferencial debe incluir todos los tipos
celulares e informarlos en %
Si se encuentran clulas malignas, correlacionar con el
resultado de la citologa
Establecer cooperacin entre ambos laboratorios
Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

MEMBRANA PLEURAL
o

Los pulmones estn rodeados de una

delgada y continua membrana
serosa. La superficie interna de la
cavidad que aloja al rgano, tambin
est cubierta por esta membrana

La membrana serosa est compuesta

por una capa de tejido conectivo
cubierto por una capa nica de
clulas mesoteliales

Mara Cristina Soto Prez

La cavidad pleural corresponde a una cavidad llena

de lquido delimitada por la membrana visceral y la
membrana parietal

Dentro de la membrana pleural existe una red de

capilares y vasos linfticos

Mara Cristina Soto Prez

FORMACI
FORMACIN DEL L
LQUDO PLEURAL

Corresponde a un
ultrafiltrado del plasma
producido y mantenido por
la pleura parietal

La reabsorcin
reabsorcin se produce
por la pleura visceral

Pleura parietal
Mara Cristina Soto Prez

FORMACI
FORMACIN

La formacin del lquido pleural esta determinada por

cuatro factores:
1. Permeabilidad de los capilares en la membrana parietal
2. Presin hidrosttica en los capilares
3. Presin onctica intracapilar
4. Absorcin del fluido por el sistema linftico

Mara Cristina Soto Prez

FUNCI
FUNCIN

La funcin del lquido pleural es prevenir la friccin contra

la pared torcica cuando los pulmones se inflan y
desinflan con la respiracin

Cuando se produce una acumulacin de lquido, los

pulmones pueden tener dificultad para inflarse por
completo, debido a que el lquido ejerce presin sobre
los pulmones

Mara Cristina Soto Prez

CAUSAS DE ACUMULACI
ACUMULACIN DE L
LQUIDO PLEURAL

Aumento en la presin de los capilares pulmonares, ej.

Falla Card
Cardaca

Aumento en la permeabilidad de los capilares

pulmonares, ej. Neumona

Disminucin en la presin intrapleural,

intrapleural, ej. Atelectasia

Mara Cristina Soto Prez

Disminucin en la presin onctica,

onctica, ej. Sndrome
Nefrtico

Aumento en la permeabilidad de la membrana

pleural, ej. Infecciones,
Infecciones, Procesos Pleurales Malignos

Defectos diafragmticos

Ruptura del ducto torcico

Mara Cristina Soto Prez

DERRAMES PLEURALES

Derrames pleurales transudativos

Embolia pulmonar

Falla cardiaca congestiva

Cirrosis

Sndrome nefrtico

Derrames pleurales exudativos

Embolia pulmonar

Neumona

Cncer
Mara Cristina Soto Prez

Principales causas de Derrame Pleural

USA, pacientes sometidos a toracocentesis
Adaptado de Light
INCIDENCIA
ANUAL

TRANSUDADO

EXUDADO

Insuficiencia
cardaca
congestiva

500.000

No

Neumonia

300.000

No

Cncer

200.000

No

Embolo Pulmonar

150.000

A veces

A veces

Enfermedad viral

100.000

No

By-pass
coronario

60.000

No

Cirrosis con
Ascitis

50.000

No

CAUSA

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

LQUIDO PLEURAL

Volumen normal: 1 - 10 mL
Patolgico
Patolgico:: si se detecta por radiologa
Causa ms frecuente:
frecuente: insuficiencia cardaca congestiva
Para obtener la muestra se realiza una toracocentesis

Mara Cristina Soto Prez

EVALUACI
EVALUACIN DE LA PRESENCIA
DE DERRAME PLEURAL
Sntomas: disnea, tos, dolor en el pecho
Radiografa
Ultrasonido
Tomografa computarizada

Mara Cristina Soto Prez

INDICACIN DE TORACOCENTESIS

En el caso de derrame unilateral por falla cardiaca

congestiva
Acumulacin de lquido por ms de tres das en
pacientes con falla cardiaca congestiva
Derrame con >10 mm de espesor en la radiografa
Indicada con urgencia cuando se sospecha
hemotrax
hemotrax o pus en el espacio pleural
Con fines diagnsticos
Mara Cristina Soto Prez

MUESTRA DE L
LQUIDO PLEURAL

Toracocentesis:
Toracocentesis: puncin
puncin percutnea utilizada para retirar
lquido desde la cavidad pleural con fines diagnsticos o
teraputicos

Mara Cristina Soto Prez

TORACOCENTESIS
Se aspira con
jeringa
heparinizada y se
separa en tubos
para:
Morfologa
Qumica
Microbiologa
Citologa (A.P.)

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

MUESTRA DE LQUIDO PLEURAL

Lquido de color negro

obtenido
de Carcinoma de Pulmn

Quilotorax
Mara Cristina Soto Prez

ESTUDIO DE LABORATORIO
1er. objetivo es diferenciar entre transudado y exudado
CRITERIOS DE LIGHT
Un lquido pleural es un exudado si se cumplen 1 o ms de
los criterios siguientes:
1) El cuociente entre la protena del lquido pleural y la
protena plasmtica es >0,5
2) El cuociente entre LDH del lquido pleural y la LDH
plasmtica es >0,6
3) La LDH del lquido pleural es >2/3 de la LDH plasmtica
Mara Cristina Soto Prez

CRITERIOS DE LIGHT EXTENDIDOS

Transudado
Protenas: <3g/dL

Exudado
> 3g/dL

LDH <2/3 lmite superior de LDH srica >2/3 lmite superior de LDH srica
Colesterol: <45 mg/dL

> 45 mg/dL

Cuocientes:

Cuocientes:

Protenas LP/S: <0.5

>0.5

LDH LP/S: <0.6

>0.6

Colesterol LP/S: <0.3

> 0.3

Gradientes:

Gradientes:

Albmina S/LP: >1.2

< 1.2

Protenas S/LP: >3.1

< 3.1

Mara Cristina Soto Prez

Sensibilidad:
98% - Especificidad: 80%

SEQC

Mara Cristina Soto Prez

Parmetro

Transudado

Exudado

Causa

Aumento de la
presin
hidrosttica
Disminucin en la
presin onctica

Aumento en la
permeabilidad capilar
Disminucin en la absorcin
linftica

Examen
fsico

Transparente
Amarillo plido
No posee cogulos
espontneos

Turbio (clulas, lpidos)

Variable
Frecuentemente presenta
cogulos

Mara Cristina Soto Prez

Parmetro

Recuento
Leucocitos

Transudado

Exudado

<1000 clulas /L

>1000 clulas /L

Recuento
Diferencial

Predominio de
mononucleares

Examen
Qumico

Glucosa: similar al plasma

Protena: <50% del plasma
Relacin L/S: <0.5
LDH: <60% del suero
LDH L/S: <0.6
Mara Cristina Soto Prez

Predominio de
polimorfonucleares en
primera etapa,
posteriormente
predominio de
mononucleares
Glucosa: < al plasma
Protena: >50% del plasma
Relacin L/S: >0.5
LDH: >60% del suero
LDH L/S: >0.6

COMPARACI
COMPARACIN DE CRITERIOS UTILIZADOS PARA
CLASIFICAR L
LQUIDO PLEURAL COMO
TRANSUDADO O EXUDADO

Criterio

Eficacia
diagnstica
%

Criterios de
Light

94

98

Alb pL/Alb
LP (1,2)

90

Col LP/Col
pl (0,3)
Bili LP/Bili
pl (0,6)

Sensibilidad Especificidad
%
%

VPP %

VPN %

72

95

87

90

89

98

64

88

91

83

95

64

86

90

65

93

85

Mara Cristina Soto Prez

SEQC

OTRAS PRUEBAS
ADA:

Se indica en derrames con predominio linfocitario

Valores sobre 40 U/l tiene S=90-100 y E=85-90 para TBC

pH:

Medicin con el equipo de pH y gases arteriales.

Tiene utilidad cuando se sospecha neumona o afeccin

maligna: pH <7.2 es indicacin para realizar drenaje del
fluido
Amilasa:

til en derrames producidas por ruptura

esofgica y enfermedad pancretica

Mara Cristina Soto Prez

Triglicridos: Se justifica cuando hay quilotrax (ruptura de

conducto torcico, neoplasias y linfomas)

Bilirrubina: Una relacin de bilirrubina pleura/bilirrubina suero

mayor de 0,6 indicara que estamos ante un exudado y
cuando es menor seria un trasudado

Mara Cristina Soto Prez

PRUEBAS INDICADAS SEG

SEGN ASPECTO
DEL L
LQUIDO PLEURAL

Aspecto del lquido

Prueba indicada

Interpretacin

Hemorrgico

Hematocrito
(pleurocrito)

<1% g No significativo
1-20% g cncer, mbolo pulmonar o
trauma

Turbio o grumoso
-Sobrenadante turbio

Centrifugacin
Triglicridos

Sobrenadante turbio g lpidos h

>110 mg/dL g quilotrax
>50 y <110 mg/dL g analizar
lipoprotenas
Presencia de quilomicrones g quilotrax
<50 y colesterol >250 mg/dL g pseudo
quilotrax

Olor ptrido

Tincin y cultivo

Olor ptrido g posible infeccin por

anaerobios

Mara Cristina Soto Prez

INTERVALOS DE REFERENCIA

Volumen (mL
/cavidad)
(mL/cavidad)
N clulas nucleadas

4.1 12.7 mL
1395 3734/
3734/L

Macrfagos

64 80%

Linfocitos

18 36%

Neutrfilos

0 1%

Clulas mesoteliales

0 2%

* Noppen M y col. Am J Respir Crit Med. 2000; 162:1023-1026

Mara Cristina Soto Prez

OTROS ELEMENTOS

Bacterias

Hongos

Clulas malignas

Fijar la preparacin en formalina (10% en PBS)

en proporcin 1:1

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

INTERPRETACIN SEGN PREDOMINIO CELULAR I (CLSI)

Tipo Celular

Condicin

Neutrofilia (>50%
PMN)

Inflamacin aguda (EJ. Derrame

paraneumnico)

Eosinofilia (>10%)

Neumotrax, mbolo pulmonar,

hemotrax traumtico, enfermedades
parasitarias, Sndrome de ChurgStrauss

Linfocitosis (>50%)

Transudados, TBC, carcinoma, ciruga

de by-pass coronario, enf.
Linfoproliferativas, derrames quilosos

Monocitos/Macrfagos

Significancia diagnstica limitada

Eritrfagos y siderfagos son tiles
para distinguir lquidos patolgicos de
trauma

Blastos

Mara
Cristina Soto
Prez
Neoplasia
hematopoytica

INTERPRETACIN SEGN PREDOMINIO CELULAR II (CLSI)

Tipo Celular

Condicin

Clulas plasmticas

Condiciones reactivas, mieloma de

clulas plasmticas (raro)

Clulas mesoteliales

Normal (>5%), descenso marcado

en derrames tuberculosos (<0,1%)
Nota: deben distinguirse de clulas
tumorales

Clulas neoplsicas de
tumores slidos

Carcinoma metastsico, etc

Miscelneos:
Clulas LE

Lupus eritematoso sistmico

Cls de Reed-Sternberg

Enfermedad de Hodgkin

Megacariocitos

MaraEnfermedades
Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

mieloproliferativas

Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez

PERICARDIO

Limita la dilatacin brusca de las cavidades cardacas

por hipervolemia o sobrecarga aguda

Transmite al corazn las variaciones de presin

intratorcica y facilita el llene auricular

Fija el corazn al mediastino y minimiza el roce del

corazn durante las contracciones

Mara Cristina Soto Prez

PERICARDITIS
Causas

Procesos inflamatorios

Neoplasias

Hemorragias

Muestra se obtiene por pericardiocentesis

Mara Cristina Soto Prez

PERICARDIOCENTESIS
Similar a la
toracocentesis
Separacin en los
mismos tubos de
acuerdo al volumen
obtenido

Mara Cristina Soto Prez

Para la diferenciacin en transudados y exudados se

utilizan los criterios de Light
Sensibilidad 98%
Especificidad 72%
La mayora de los derrames de importancia clnica son
exudados

Mara Cristina Soto Prez

COLOR:

Amarillo claro

ASPECTO:

Transparente

t Turbidez: indica presencia de leucocitos

t

Aspecto lechoso: caracterstico de derrames

quilosos
t

Aspecto hemorrgico: diferenciar hemorragia

de puncin traumtica

Mara Cristina Soto Prez

Lquido Pericrdico Hemorrgico

Pericarditis hemorrgica idioptica

Sndrome de Dressler (post infarto)

Pericarditis tuberculosa
Artritis reumatoide
Lupus eritematoso sistmico
Carcinoma metastsico
Pericarditis bacteriana
Pericarditis urmica
Rotura de aneurisma
Mara Cristina Soto Prez

ORIENTACIONES
Leucocitos > 10x109/L se asocia a pericarditis bacteriana,
tuberculosa o neoplsica
Predominio de PMN orienta a etiologa bacteriana
Concentracin de glucosa <2,2 mmol/L suele asociarse a
pericarditis bacteriana, tuberculosa , artritis reumatoide y
neoplasia
Gradiente de albmina LP/suero <12 g/L para
diagnstico de exudado tiene sensibilidad de 90% y
especificidad de 89%
Mara Cristina Soto Prez

Mara Cristina Soto Prez