INFORME DE LABORATORIO

Guzmn-Guzmn, Santiago. Montaa-Arias, Alejandra.

Programa de Biologa, Facultad de ciencias exactas, Universidad de caldas, Ibagu, Manizales,
Caldas, Colombia

INTRODUCCIN
Con el presente se busca generar un reporte sobre lo realizado en la prctica de laboratorio de
Biologa General, donde con el uso de ciertos mtodos de tincin y reactivos se logr determinar
la presencia de las distintas biomolculas tales como: carbohidratos, protenas y lpidos en
distintas sustancias.
SNTESIS
Reactivo de Benedict.
Muchos monosacridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacridos, son azcares
reductores porque poseen un aldehdo libre (no enlazado a los otros grupos en la molcula). La
Prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de azcares reductores porque el reactivo de
Benedict contiene cobre que se reduce en presencia de azcares reductores. Durante esta reaccin
el azcar se oxida. La reaccin antes mencionada se conoce como una reaccin oxidacinreduccin porque la oxidacin del azcar sucede simultneamente con la reaccin de reduccin
del cobre (Quesada, 2007)

Reactivo de Biuret
El mtodo comprende un ensayo colorimtrico de un paso donde se cuantifica la formacin de un
complejo estable entre protenas y cobre (II). El complejo presenta un color violeta caracterstico,
que se puede observar a 310nm o 540-560nm, el cual se da por la coordinacin de un tomo de
cobre con cuatro tomos de nitrgeno. El complejo se basa en la desprotonacin de los grupos
amida para formar el enlace con el cobre (II) o por el establecimiento de un enlace coordinado
entre el metal y los pares de electrones libres de los tomos de oxgeno y de nitrgeno del
pptido. Despus de la adicin del reactivo de cobre se requiere de tiempo para desarrollar una
coloracin de Biuret estable; es necesario considerar la posible influencia de aminocidos libres
que forman buffer en configuracin tris y amoniaco (Kischinevzky et al., 2005).

Se basa en la formacin de un complejo coloreado entre el Cu 2+ y los grupos NH de los enlaces

peptdicos en medio bsico. 1Cu 2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad de coloracin es
directamente proporcional a la cantidad de protenas (enlaces peptdicos) y la reaccin es bastante

especfica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del mtodo es muy baja y
slo se recomienda para la cuantificacin de protenas en preparados muy concentrados.
(Kischinevzky et al., 2005).

REACCIN INTELECTUAL

Por medio de las tinciones para la determinacin de compuestos bioqumicos identificamos las
estructuras presentes en diferentes composiciones biolgicas como lo son aceites, almidones,
azucares y grasas.

Estas tinciones se logran gracias a procesos qumicos, donde las estructuras tanto de solucin de
tincin como de las estructuras a determinar, se relacionan y reaccionan entre s por medio de

ionizaciones, reacciones de xido-redox, formacin de hidrxidos, entre otros. Un ejemplo de

esto es la Reaccin de Benedict para la determinacin de carbohidratos donde la glucosa y otros
azucares reductores reducen el ion cprico a ion cuproso, formndose hidrxido cuproso que da
un color amarillo o tambin un oxido cuproso que da un color rojo.

Las tinciones utilizadas en la prctica tienen ciertas caractersticas fisicoqumicas propias, esto,
nos ayuda a identificar directamente y con mayor facilidad la biomolecula presente en las
composiciones biolgicas.

El laboratorio realizado nos permita reconocer cada tincin de los reactivos en muestras
madre; en el caso de los Carbohidratos, obtuvimos un color anaranjado al verter 3mL de
Reactivo de Benedict a la muestra de glucosa madre, siguiendo estos pasos se logr identificar
Fructosa en una muestra de 5ml de jugo de manzana y polisacridos en 5mL de agua de arroz la
cual se trat con dos pruebas (Benedict y Lugol), obteniendo una tincin negativa con Benedict y

una tincin positiva con Lugol determinando la presencia de este (Vase en la Tabla 1.)

En Protenas se us la clara de huevo y caldo de carne con dos reactivos: Reactivo de Biuret y
Acido ntrico concentrado. Ambas tinciones dieron un resultado ptico diferente, para el caso del
reactivo de Biuret la tincin fue de color violeta y para la reaccin xantoproteica usada con cido
ntrico concentrado se obtuvo un color amarillo y un estado semigelatinoso

Los lpidos dieron una determinacin rpida y bastante visible. Se us aceite de cocina y caldo de
carne, en ambos casos la tincin fue de color rojo cobre en pequeas burbujas, esto recuerda a la
reaccin que se produce al verter aceite en agua, pero en este caso las burbujas de aceite que se
obtienen en el agua estuvieron pigmentadas de rojo cobre en las muestras de tinciones.

Sustancia

Caldo

Biomol.
Protena

leche
+-

carne
+

Lpidos
Carbohidratos

+-

Aceite
Albumina
+

vegetal

Arroz

papa

glucosa

jugo

Almidn

+
Tabla 1

----------------------- Page 4----------------------CONCLUSIONES

-Las tinciones son un mtodo muy eficaz de determinacin de biomolculas de compuestos
orgnicos gracias a la exactitud de los resultados.

-Las estructuras qumicas del reactivo y del compuesto de la biomolecula son las encargadas de
dar el efecto ptico de la solucin.

-Determinar la presencia de las biomolculas en las distintas sustancias ayuda a conocer las
propiedades en cada una de ellas, de este modo se puede conocer si ciertas sustancias son
adecuadas para el consumo.

-La presencia o ausencia de biomolculas ayudan a identificar posibles enfermedades en

organismos.

- Se adquiri habilidad en la prctica de laboratorio en el mbito de las tinciones

BIBLIOGRAFIA

Quesada, S. (2007). Manual de laboratrio de bioquimica. San Jose: Editorial universidad estatal
a distacia.
Kischinevzky, C. A., Ortega, G. J., Rodarte, B., Castaeda, G., Valencia, L. G., & Gutierrez, R.
(2005). Manual de practicas de biologia molecular de la celula I. Cuidad de Mexico:
Facultad de ciencias de la UNAM.