Extracto resumen del documento Biologa celular y molecular del virus de

inmunodeficiencia humana (VIH).

El VIH es un retrovirus perteneciente a la subfamilia de los lentivirus. Los

lentivirus son retrovirus exgenos no oncognicos que causan infecciones
persistentes, dando lugar a enfermedades con largos periodos de incubacin,
tiene la capacidad para instalarse en el organismo infectado durante amplios
periodos de tiempo. Normalmente infectan clulas del sistema inmune
(macrfagos, clulas T) y causan en ellas efectos citopticos. Una caracterstica
importante, carente en otros retrovirus, es su habilidad para infectar a clulas
quiescentes. Los lentivirus tienen un genoma de cido Ribonucleico (ARN) ms
extenso, en torno a las 10 Kilobases (Kb). Su propiedad ms relevante estriba
en la capacidad de codificar genes esenciales que permiten la regulacin de su
propia expresin en la clula infectada. La replicacin de los lentivirus es txica
para la clula conduciendo a su disfuncin y posterior muerte.
Muchas de las propiedades estructurales y funcionales del VIH son comunes a
todos los retrovirus. Por ello, la intensa investigacin desarrollada en el campo
de los retrovirus ha permitido profundizar y conocer muchos aspectos inditos
de la biologa molecular del VIH.
La Estructura del VIH consta de una bicapa lipdica externa, como envoltura,
donde se han encontrado diferentes protenas membranales del husped,
adems de glicoprotenas virales asociadas en trmeros o tetrmeros. La
glicoprotena de superficie gp120 3 est unida de forma no covalente a la
tambin glicoprotena transmembranal gp41; estos oligmeros son
fundamentales para la actividad biolgica del virin ya que aportan el sitio de
interaccin y fusin con las clulas blanco, adems de aumentar el tamao del
virus hasta en 10 nanmetros (nm) siendo fcilmente identificables por
microscopa electrnica.
Como la mayora de los retrovirus, el VIH posee un promotor y un sitio de
poliadenilacin dentro de la regin larga terminal (LTR) y expresa un solo
transcrito primario.
Se ha propuesto que los lentivirus deben incluirse en un subgrupo de los
retrovirus denominado retrovirus complejos. La caracterstica distintiva de este
subgrupo es la habilidad para regular su propia expresin va factores proteicos
codificados por el virus. Es esta propiedad la que permite a los virus que la
poseen, como el VIH, permanecer durante largos periodos en la clula
infectada, generando con ello infecciones crnicas activas.
Ciclo vital del VIH.
El ciclo vital del VIH sigue las pautas del resto de retrovirus. Despus de que el
virus alcanza la clula diana y logra penetrar a travs de la membrana
plasmtica, la RT convierte el ARN viral en ADN. El ADN retrotranscrito es
transportado al ncleo e integrado al ADN celular, proceso mediado por la

enzima IN. Debido a las caractersticas de replicacin de los retrovirus, el ADN

proviral est flanqueado por las regiones LTR (long terminal repeats), con
importantes funciones reguladoras.
Despus de la integracin, el ADN retroviral (provirus) usa la maquinaria celular
para expresar el ARN viral. El ARN genmico, junto a las protenas virales, son
ensamblados en la partcula viral, que sale de la clula e infecta nuevas clulas
mediante la unin a receptores celulares especficos.
Los ciclos en pasos del VIH seran los siguientes:
Penetracin del virus: donde la protena Env del VIH se une al receptor de
superficie CD4
Sntesis del Provirus: Despus de la penetracin del virus, la cpside se
desestructura y la RT viral es activada.
Transporte nuclear e Integracin: El ADN del VIH es integrado en el
genoma celular a travs de la accin de la IN viral en sitios localizados al azar.
Expresin gnica: El provirus integrado y flanqueado por los LTRs se
organiza como una unidad transcripcional eucaritica. La transcripcin del
provirus, va ARNpol II celular, da lugar a un transcrito primario que tiene dos
importantes funciones: puede servir como ARN genmico para ser incorporado
en el virin, o bien ser procesado para proveer todos los ARN mensajeros
(ARNm) que codifican las protenas virales.
Ensamblaje del virin: Las protenas estructurales traducidas se van
acumulando dentro de la membrana plasmtica. Una de las peculiaridades de
VIH es el requerimiento de ciclofilina A (CyPA) para la infectividad del virus
Promotor viral: El potente promotor del VIH contiene una caja TATA y sitios de
unin para factores de transcripcin celulares incluyendo sitios para NF-KB y
Sp1 . Estos factores de transcripcin son esenciales para la funcin del
promotor. El promotor de VIH es altamente inducible y responde al estado de
activacin de la clula infectada.
Seales regulatorias en el ARN viral: Se han identificado muchos sitios en
el ARN viral del VIH que son esenciales para su propagacin. Entre ellos estan
los elementos reguladores positivos TAR y el elemento sensible a Rev (RRE)
junto a los negativos, que inhiben la expresin (INS o CRS). Estos elementos
negativos regulan la expresin mediante la interferencia en la estabilidad,
transporte y traduccin de los ARNm. Junto a los descritos, el ARNm tambin
contiene varios sitios necesarios para otros pasos en el ciclo viral como la
dimerizacin del ARN genmico y la encapsidacin (sitio psi).
ARNm virales: El transcrito primario del VIH generado por la ARNpol II est
protegido con una estructura CAP en 5 y una cola de poliAdeninas en el
extremo 3. Una porcin de este transcrito es sometida a splicing alternativo,
generando ms de 30 especies diferentes de protenas virales. Para propsitos
de regulacin gnica estos ARNm pueden dividirse en dos clases; La primera

clase, incluyendo los ARNm inmaduros y los que han sufrido parcialmente el
proceso de splicing dependen de la protena Rev para una expresin eficaz.
Estos ARNm codifican para Gag, Pol, Vif, Vpr, Vpu, Env y Tat-1. Se sabe que la
produccin de ARNm maduros est gobernada por la interaccin de las
protenas
Protenas virales: Los genes del VIH codifican para diversas protenas que
pueden clasificarse, bsicamente, en tres clases:
Protenas estructurales.
* Gag: da lugar a una protena precursora de 55 KDa tambin llamada p55 que
se expresa a partir del ARNm viral sin procesar. La poliprotena Gag es la
encargada de reclutar dos copias del ARN genmico viral junto a otras
protenas celulares y virales que permite la expulsin de la partcula viral desde
la superficie de una clula infectada.
Las molculas MA facilitan el transporte nuclear del genoma viral mediante una
seal que reconoce la maquinaria nuclear celular. Este fenmeno es el que
permite al VIH infectar a clulas que no estn en mitosis
* Gag-Pol (precursor): las protenas PR, IN, ARNasa H y RT son tambin
expresadas dentro del contexto de una fusin proteica Gag-Pol . El precursor
Gag-Pol (p160) es generado por un evento de cambio de marco de lectura
ribosomal (frame shifting) desencadenado por un elemento cis-acting
especfico. Cuando los ribosomas encuentran este motivo cambian al marco de
lectura de pol (aprox 5% del tiempo) sin interrumpir la traduccin. Durante la
maduracin viral, las proteasas virales separan el polipptido Pol del Gag y a
continuacin digieren ste para separar la PR (p10), RT (p50), ARNasa H (p15)
y la IN (p31).
* Env: se trata de una protena de 160 KDa (gp160) que se expresa a partir de
un ARNm sometido a splicing simple. Sintetizada en el retculo endoplsmico,
Env emigra a travs del complejo de Golgi donde es glicosilada con 25-30
cadenas de carbohidratos en los residuos de asparagina. Esta glicosilacin es
importante para la infectividad del virus 96. Una proteasa celular escinde
gp160 para generar gp41 y gp120. Mientras que gp41 contiene el dominio
transmembrana del Env, la gp120 se localiza en la superficie de la clula
infectada y del virin a travs de interacciones no covalentes con gp41. Se
sabe que Env existe como un trmero en la superficie del virin.
Regulacion de la expresion gnica de VIH: es llevada a cabo por una
combinacin de factores celulares y virales. Se produce a niveles tanto pre
como post-transcripcionales. Los genes del VIH se dividen en genes tempranos
y genes tardos . Los genes tempranos (tat, rev, nef) se expresan a travs de
un proceso Rev-independiente. Los ARNm que codifican para genes tardos
(gag, pol, env, vpr, vpu, vpi) requieren de Rev para ser localizados
citoplasmticamente y poder ser expresados.

Regulacin de la transcripcin: el LTR de VIH contiene sitios de unin a ADN

para mltiples factores de transcripcin. Los ms directamente implicados en
la regulacin de la transcripcin de VIH son aquellos pertenecientes a la familia
NF-kB. La protena NF-kB permite al virus ser el responsable del estado de
activacin de la clula T infectada. La estimulacin del TCR provoca que la
forma inactiva de NF-kB (localizada en el citoplasma) sea translocada al ncleo
donde induce la expresin de una serie de genes especficos relacionados con
la activacin de la clula T. La NF-kB y la consiguiente activacin de la
transcripcin del provirus puede tambin ser inducida por la citocinas TNF-a e
IL-1 128. Este fenmeno podra ser de inters en la patogenia del SIDA. Por una
parte, la activacin fisiolgica de una clula T latente infectada puede ser el
modo en el que la latencia finaliza y comienza la produccin del virus. Por otra,
las mltiples infecciones que sufren los pacientes con SIDA suponen una
elevada expresin de TNF pudiendo ste estimular la produccin de VIH y la
infeccin de ms clulas.
Los ARNm de VIH producidos pueden ser clasificados en tres clases:
1. ARN sin procesar: el transcrito primario no sometido a splicing de 9 Kb
puede ser expresado para generar los precursores de Gag y Gag-Pol o bien
empaquetado en los viriones sirviendo entonces como ARN genmico.
2. ARN sometido a splicing incompleto: estos ARNm usan el sitio donador de
splice cercano al extremo 5 de ARN genmico del VIH en combinacin con
cualquiera de los aceptores localizados en la regin central del virus. Estos ARN
pueden expresar en potencia Env, Vif, Vpu, Vpr y Tat (isoforma de un exn).
Todos ellos retienen el segundo intrn del VIH.
3. ARN sometido a splicing completo: en ellos se han eliminado los dos intrones
de VIH y pueden expresar Rev, Nef y Tat (isoforma de dos exones). Estos ARNm
no requieren la expresin de la protena Rev.
En ltimos estudios se han descritos dos tipos de VIH.
El VIH-1 es el agente etiolgico del SIDA epidmico de frica Central, Europa,
USA y la mayora de los restantes pases. Investigaciones posteriores llevaron
al aislamiento de un virus linftropo T humano emparentado con el SIV,
denominado actualmente como virus de la inmunodeficiencia humana-2 (VIH2) y que se encuentra con mayor frecuencia en frica Occidental.
Antignicamente, el virus VIH-2 slo presenta reacciones cruzadas con el VIH-1
en la protena p24/p25 y de forma ligera con Pol mientras que guarda ms
semejanzas con el SIV de macaco. Entre el SIV y VIH-2 existe una homologa en
la secuencia de nucletidos de alrededor del 75% mientras que entre VIH-2 y
VIH-1 slo es del 40%.
Como sucede con el VIH-1, el VIH-2 es un retrovirus, posee ARN como genoma,
est limitado por secuencias LTR terminales redundantes y contiene los genes
gag, pol y env. Existen 6 genes ms (tat, rev, nef, vif, vpr y vpx) estando todos
relacionados con los del VIH-1 salvo el vpx que sustituye al vpu. La mayor

similitud entre ambos subtipos es a nivel de las protenas del core (Gag, Pol) lo
que explicara la reactividad cruzada entre ambos virus. Tiene un ciclo
biolgico similar al VIH-1 infectando de la misma forma a clulas que presenten
CD4. Ambos tipos causan sndromes clnicos similares.
Referencia del documento:
Santana A, Domnguez C, Lemes A, Molero T, Salido E. (2003). Biologa celular y
molecular del virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Rev Diagn Biol
[revista en la Internet]. ; 52(1): 07-18. Disponible en:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003479732003000100001&lng=es.