INSTITUTO TECNOLGICO SUPERIOR

DE MISANTLA

INGENIERA BIOQUMICA

CINTICA QUMICA Y BIOLGICA

PARMETROS DE CINTICA
ENZIMTICA POR MTODOS DE
REGRESIN LINEAL Y NO LINEAL
EJERCICIO 2

CARBALLO REYES IRAN

DARIL
132T0090
M. C. OSWALDO C. ORTZ
ZAMORA
GRUPO 605
MISANTLA, VER., ABRIL DE 2016

Eadie(1942) measure the initial reaction rate of hydrolisis of acetylcholine(sustrate) by dog

serung (soorce of enzyme) and obtained the following date.
Sustrate
concentrati
on
Mol/l
0.0032
0.0049
0.0062
0.008
0.0095

Initial
reaction
Mol/l
min
0.111
0.448
0.443
0.466
0.206

Evaluate de michaelos-mendel kinetic parameter employing the

langmuir plot(b) the lineaweaver-burk plot(c) the eadie-Hogfstee. D)
non-linear regression procedure.
a) M

odo de Langmuir. Datos

requeridos:
C
0.0032
0.0049
0.0062
0.008
0.0095

C/V
0.0288
0.0331
0.0434
0.0482
0.0475

Aplicando regresin lineal de acuerdo la ecuacin de Langmuir:

Grfico de Langmuir
0.06

C/V

0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0

0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.007 0.008 0.009 0.01

C

CS
r

rmax

KM

1
rmax

C b0 KM 0.0191
rmax
S

b1 1
3.3133
rma
x

parmetros enzimticos

rma 0.3018 mol

x

Lmin

KM 0.006 1 Lm

b) Mtodo de LineweaverBurk.
1/s

1/V
9.009009
01
2.232142
86
2.257336
34
2.145922
75
4.854368
93

312.5
204.0816
33
161.2903
23
125
105.2631
58

Aplicando regresin lineal de acuerdo la ecuacin de LineweaverBurk:

1/r0

Grfico de LineweaverBurks
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
90

140

190

240
1/Cs

1
r
r

max

KM

max
S

1
1

b0
3.6342
C
r

max

b1

KM
rmax

0.0172

parmetros enzimticos:

rmax

0.2752 mol Lmin

290

340

KM

0.0
05
1
Lmi
n

c) Mtodo de EadieHofstee.
Datos requeridos:
V/S
V
34.687
0.111
5
30.204
0.448
1
23.064
0.443
5
20.75 0.466
21.684
0.206
21

Aplicando regresin lineal de acuerdo la ecuacin de EadieHofstee.

Grfico de Eadie
Hofstee

0.5
0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
20

22

rr

24

K
max

26

28

b r
CS

30

32

34

36

max

0.2645

b1 KM 0.0043
Los parmetros enzimticos se dan directamente, as que:

rma 0.2645 mol

x

KM 0.0043 1 Lmin

Lmin

d) Regresin no lineal.
Los datos requeridos son los originalmente dados:
Sustrate
concentratio Initial
n
reaction
Mol/l
Mol/l min
0.0032
0.111
0.0049
0.448
0.0062
0.443
0.008
0.466
0.0095
0.206 Se grafican directamente, y se ajusta una ecuacin polinmica
para obtener una curva que se ajuste a los puntos:

Grfico de MichaelisMenden
r0 (mol/L*min)

0.25

rmax

0.2
0.15
0.1

KM
0.05
0

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006
Cs (mol/L)

0.007

0.008

0.009

0.01

Se obtienen los parmetros enzimticos por medio del mtodo grafico (a ojo), teniendo
as los siguientes valores:

rmax 0.19 mol

Lmin

KM 0.00275 1 Lmin

Comparacion de los valores obtenidos para los parmetros de MichaelisMenten con

cada uno de los mtodos:
Mtodo

KM (1/L*min)

rmax (mol/L*min)

Langmuir

0.3018

0.006

LineweaverBurk

0.2752

0.005

EadieHofstee

0.2645

0.0043

Regresin no lineal

0.19

0.00275