UNIVERSITATEADEMEDICINIFARMACIEIULIUHAIEGANUCLUJNAPOCA

REZUMATUL TEZEI DE DOCTORAT

Infecia cu virus Epstein-Barr la copil

Doctorand

Simona Sorana Cinap

Conductor de doctorat

Prof Dr. Nicolae Miu

Cluj-Napoca 2012

CUPRINS

ABREVIERI....................................................................................................................................................................... 11
INTRODUCERE................................................................................................................................................................ 13
STADIULACTUALALCUNOATERII................................................................................................................... 15
1.VirusulEpsteinBarr.............................................................................................................................................. 17
1.1.IstoriculvirusuluiEpsteinBarr ..................................................................................................................................... 17
1.2.EpidemiologiainfecieicuvirusulEpsteinBarr ........................................................................................................... 17
1.3.Taxonomie.Structur.Biologiemolecular .................................................................................................................. 18
1.4.IstorianaturalainfecieicuvirusulEpsteinBarr ...................................................................................................... 18
1.4.1.Ciclullitic(infeciaactiv) ........................................................................................................................................... 18
1.4.2.Infecialatent ............................................................................................................................................................. 19
1.5.Rspunsulimun .............................................................................................................................................................. 21
1.5.1Rspunsulimuncelular ................................................................................................................................................ 21
1.5.2Rspunsulimunumoral ............................................................................................................................................... 22
2.BolileasociateinfecieicuvirusulEpsteinBarr ................................................................................... 22
2.1.Mononucleozainfecioas ............................................................................................................................................ 23
2.2.InfeciacronicactivcuEBV(CAEBV) ........................................................................................................................ 24
2.3.EBVipatologiahepatic ............................................................................................................................................... 25
2.4.EBVibolileautoimuneasociate ................................................................................................................................... 26
2.5.LimfohistiocitozahemofagociticasociatEBV ........................................................................................................... 27
2.6.EBVimalignitileasociate .......................................................................................................................................... 29
3.DiagnosticulinfecieicuvirusulEpsteinBarr....................................................................................... 32
3.1.Markeriserologici ........................................................................................................................................................... 32
3.2.DetectareaADNuluiEBVnser ..................................................................................................................................... 34
3.3.DetectareaADNuluiEBVnesuturi ............................................................................................................................ 34
4.TratamentulinfecieicuvirusulEpsteinBarr ....................................................................................... 35
CONTRIBUIAPERSONAL ........................................................................................................................37
1.Ipotezadelucru/obiective................................................................................................................................. 39
2.Metodologiegeneral ......................................................................................................................................... 41
3.Studiul1.Caracteristicileclinice,biologiceievolutive
aleinfecieicuvirusulEpsteinBarrlacopii................................................................................................. 43
3.1.Introducere ..................................................................................................................................................................... 43
3.2.Ipotezadelucru.Obiective ............................................................................................................................................. 43
3.3.Materialimetod .......................................................................................................................................................... 44
3.4.Rezultate.......................................................................................................................................................................... 44

3.5.Discuii ............................................................................................................................................................................. 53
3.6.Concluzii ......................................................................................................................................................................... 56

4.Studiul2.InfluenavirusuluiEpsteinBarr
nevoluianeoplazieilacopiistudiupilot ................................................................................................. 57
4.1.Introducere ..................................................................................................................................................................... 57
4.2.Ipotezadelucru.Obiective ............................................................................................................................................. 57
4.3.Materialimetod .......................................................................................................................................................... 58
4.4.Rezultate.......................................................................................................................................................................... 59
4.5.Discuii ............................................................................................................................................................................. 63
4.6.Concluzii ......................................................................................................................................................................... 64
5.Studiul3.VirusulEpsteinBarrfactordeprognostic
independentnneoplaziilepediatrice ............................................................................................................. 65
5.1.Introducere ..................................................................................................................................................................... 65
5.2.Ipotezadelucru.Obiective ............................................................................................................................................. 65
5.3.Materialimetod .......................................................................................................................................................... 66
5.4.Rezultate.......................................................................................................................................................................... 67
5.5.Discuii ............................................................................................................................................................................. 91
5.6.Concluzii ......................................................................................................................................................................... 95
6.Studiul4.EBERfactordeprognosticnneoplaziilepediatrice.................................................. 97
6.1.Introducere ..................................................................................................................................................................... 97
6.2.Ipotezadelucru.Obiective ............................................................................................................................................. 97
6.3.Materialimetod .......................................................................................................................................................... 98
6.4.Rezultate.......................................................................................................................................................................... 99
6.5.Discuii ....................................................................................................................................................................... 103
6.6.Concluzii ...................................................................................................................................................................... 105
7.Concluziigenerale .............................................................................................................................................. 107
8.Originalitateaicontribuiileinovativealetezei .............................................................................. 109
REFERINE .................................................................................................................................................................... 111

Cuvintecheie:virusulEpsteinBarr,neoplazii,copil.

INTRODUCERE
EBVesteunuldinceimaivechi,maicunoscuiidesuccesvirui,evoluiasafiindstrnslegatde
cea a speciei umane. Dup aproape 50 ani de la descoperirea sa, EBV continu s fascineze lumea
cercettorilor,princomplexitateamecanismelorsalepatogeneticeispectrultotmailargdebolincare
este implicat. Datele privind implicarea sa n diverse entiti patologice variaz n funcie de zona
geografic,vrstaistatusulsocioeconomicalgazdei.
nabsenaunordateepidemiologiceprivindinfeciacuEBVla populaiadinRomnia,nprima
parte a sa cercetarea ia propus definirea principalelor caracteristici clinice, biologice i evolutive ale
acestei infecii, la populaia pediatric dintro zon geografic extins, nordvestul Transilvaniei, care se
adreseazunuicentruimportantdepediatriedinRomnia.
Principala caracteristic a virusului EBV este capacitatea lui de a stabili o infecie latent n
organismulgazdei,carepersisttoatviaa.Proteineleviraleexprimatenperioadadelatensuntcele
responsabiledestimulareamecanismelorantiapoptotice,cretereaproliferriicelularepentruamenine
rezervorulinfeciosievadareadesubsupraveghereaimun.IzolatiniialnliniilecelularelimfocitareB,
cercetrile ulterioare au identificat noi inte ale EBV: limfocitele T, NK, celulele epiteliale, celulele
musculare. Astfel, abilitatea EBV de a infecta diferite tipuri de celule, coroborat cu capacitatea lui de a
eluda sistemul imun i de a imortaliza limfocitele B, constituie explicaia, cea mai probabil, pentru
asocierea lui cu un spectru tot mai larg de boli: de la clasica mononucleoz, la boli autoimune i
maligniti.
Dac rolul su etiologic n mecanismul multifactorial al cancerului este bine dovedit, studiile
publicateprivindrolulEBVnoutcomeulneoplaziilorsuntpuineicurezultatecontroversate.nplus,
studiile efectuate la copii au rezultate extrem de diferite fa de cele publicate la populaiile adulte.

AcesteaaufostpremizelecareaustatlabazainiieriiunuistudiuprivindrolulinfecieicuEBVnevoluia
neoplazieilacopii.Aufostselectaipacienicuneoplazieconfirmathistopatologic(limfoameHodgkinsi
nonHodgkin,carcinoamenazofaringiene),lacareafostdemonstratserologiciprezenaEBV.nanaliza
statisticsaidentificatovaloarecutoffpentrutitrulIgGantiVCA(markerulimunologicalinfecieivirale
cusensibilitateaceamaimare),fadecaresaupututidentificalegturisemnificativestatisticcufactorii
deprognosticclasicidinneoplaziileprezentatedectrepacieniiincluinstudii.
Dac prin anticorpii serologici anti EBV este cofirmat prezena infeciei n antecedente,
identificarea EBER n esutul tumoral certific rolul etiologic al virusului n neoplazia subjacent.
Determinarea EBER n celulele tumorale ale neoplaziilor studiate, prin hibridizare in situ, a fost pentru
prima dat utilizat n Romnia, tehnica fiind pusa la punct de doctorul Bogdan Fetic de la Institutul
Oncologic Cluj. Demonstrarea prezenei EBER n celulele tumorale certific rolul etiologic al EBV n
mecanismulcomplexalcancerogenezei.
EvideniereainflueneiprognosticeaEBVnevoluialimfoamelorlacopiideschidecaleasprenoi
cercetri privind rolul terapiei intite la aceast grup de neoplazii, terapie menit s mbunteasc
supravieuirea.
Prin urmare, rezultatele cercetrii noastre vin s susin, prin dovezi clinice, ideea lansat de
cercettoriconformcreialimfomulEBValcopiluluiesteoentitateclinicaparte,caretrebuieabordat
specialdinpunctdevedereterapeutic.Astfel,sedeschidperspectivelecercetriinvedereaidentificrii
uneiterapiiintite,asociatetratamentuluiclasic,nacesttipdeneoplaziilacopii.
EBVrmneunvirusclasic,cercetatextensivicarenedemonstreazncodatcnepoate
surprindecunoiinoiaspecte,careigaranteazmeninereanluminareflectoarelortiinifice.

Studiul1.Caracteristicileclinice,biologiceievolutivealeinfecieicuvirusul
EpsteinBarrlacopii
Introducere
Infecia cu EBVfacepartedin categoria infeciilorubiquitareaproximativ 90% din populaieavnd
anticorpimpotrivaacestuiviruspnlavrstadeadult.SeroprevalenainfecieicuEBVcunoatelargivariaii
geografice.nrilecustatuseconomicsczutseparecpeakulinfecieiestenregistratnmicacopilrie,ntimp
cenriledezvoltateinfeciaaparecupreponderenlaadolescentiaduliitineri.
Aprutncopilrie,infeciacuEBVestecelmaifrecventasimptomatic.Astzi,spectrulbolilorasociate
infecieiEBVestetotmailarg,delaboliautoimune,lamalignitihematologiceinonhematologice.Abilitatea
EBVdeainfectadiferitetipuridecelule,coroboratcustatusulimundiferitalindivizilor,constituieexplicaia
ceamaiprobabilpentrunumrulmaredeboliasociateinfecieicuEBV.
Ipotezadelucru.Obiective
AvndnvederelargaadresabilitateapacienilorpracticdintoatarapentruClinicaPediatrieII,
prin acest studiu sa dorit o radiografiere a incidenei infeciei cu EBV, a complicaiilor acesteia i a bolilor
asociatelapacieniiinternai.
Obiectivelestudiuluiaufost:
StabilireacaracteristicilordemograficealepacienilorcuEBV
Evaluareamoduluideprezentareclinic
CaracteristicileserologicealeinfecieicuEBV
EvaluareaparametrilorhematologiciibiochimicincursulinfecieicuEBV
Stabilirea unor corelaii ntre titrurile de anticorpi anti EBV i ali parametrii clinici sau de
laborator
CorelaiintreprezenainfecieiEBVibolileasociatesaucoinfeciilevirale
Materialimetod
A fost iniiat un studiu prospectiv, consecutiv, fiind inclui pacienii cu infecie certificat cu EBV (la
prima internare sau la o internare anterioar n Clinica Pediatrie II). Astfel, au fost inclui 418 pacieni EBV
pozitivi,internaintreanii20052010.
Criteriideincludere:
Vrstantre1luni18ani
InfeciaEBVcertificatserologic

 Comorbiditiprezente:hepatite,autoimuniti,vasculite
Criteriideexcludere:
Dateincompletendosarulclinic
AbsenaAcpozitivipentruEBV
Pacientnecompliant
Din dosarele clinice au fost recoltate numeroase date demografice, rezultatele examinrilor de
laborator,diagnosticelebolilorasociateetc.
AnalizastatisticafostefectuatcuajutoruluiprogramuluiExcelOffice2010.
Concluzii
1. Incidena maxim a infeciei EBV este la vrsta mic, sub 7 ani, caracteristic rilor cu status
socioeconomicsczut.
2. Dinpunctdevedereserologic,formalatentdeinfecieesteceamaifrecvent.
3. 1/3 din pacieni prezint hepatomegalie, dar 1/2 prezint creteri ale valorilor
transaminazelor.Darcreteriletransaminazelorsuntuoare,nmajoritateacazurilor.
4. Asocierea coinfeciilor virale, cu tropism hepatic, este fr semnificaie statistic raportat la
nivelultransaminazelor.
5. Asociereabolilorautoimuneestedeaproape9%,maimaredectnpopulaiageneral.
6. Leucocitoza,limfocitozaestesemnificativstatisticmaifrecventlaceicuIgMantiEBVpozitiv.

Studiul 2. Influena virusului EpsteinBarr n evoluia neoplaziei la copii

studiupilot
Introducere
De la prima descriere n 1958, n asociere cu limfomul Burkitt, spectrul neoplaziilor n care este
implicatEBVestencontinuextindere.Rezultatelestudiilorepidemiologiceimoleculareauadusdovezi
certe privindimplicarea lui n etiopatogeneza a tot mai multe neoplazii: limfomul Hodgkin, limfomul cu
celuleT,carcinomulnazofaringian,bolilelimfoproliferativepostransplant,cancerulgastrici,bineineles
limfomulBurkitt.
Ipotezadelucru.Obiective
Un prim studiu a fost iniiat avnd ca obiectiv investigarea rolului infeciei cu EBV n evoluia
neoplaziilor la copii, avnd n vedere c exist extrem de puine studii publicate pentru populaia
pediatricirezultateleacestorasuntcontradictorii.ncondiiiledeimunosupresieindusdetumorsau
de tratamentul oncologic poate apare o reactivare a EBV, caracterizat serologic prin titruri mari de
anticorpiantiVCA.
Exist studii care au pus n eviden faptul c titrurile mari de IgG anti VCA se coreleaz cu
reactivarea virusului, putnd fi considerate markeri serologici ai reactivrii, direct proporionali cu
ncrctura viral. Titrurile mari de anticorpi sunt considerate, n unele studii, factori de prognostic
independeni,maialespentrulimfomulHodgkinsaulimfomulBurkitt.
Avnd n vedere aceste informaii, neam propus, n condiiile nostre, evaluarea rolului pe care
titrul crescut al Ac anti VCA, ca marker al reactivrii sau ncrcturii virale crescute, l are n evoluia a
doudintrecelemaiimportantetipurideneoplaziilacopil.
Materialimetod
Au fost luai n studiu, de manier retrospectiv i consecutiv, pacieni tratai n Institutul
OncologicI.ChiricuClujNapoca,culimfomHodgkinsaunonHodgkiniinfeciecuvirusEpsteinBarr,
ntreanii2005i2010.
Criteriile de includere n lot au fost: confirmarea histologic de neoplazie, vrsta cuprins ntre 1
lun i 18 ani, efectuarea unui tratament oncologic chimioterapie cu un regim standard conform
ghidurilor n vigoare, terminarea chimioterapiei, certificarea infeciei cu EBV (serologic IgG anti VCA),
followupefectuat.
Criteriiledeexcludereaufost:pacieniicarenuaupututefectuantregtratamentulrecomandatdin
altemotivenafaraprogresieitumorale,ceicudocumentaieincompletsauceiEBVnegativi.
Dindosareleclinicealepacieniloraufostculesedatereferitoarelademografie,valoriletabloului
hematologic, viteza de sedimentare a hematiilor, albumina, nivelul de LDH, stadiul clinic tumoral,

pozitivitateasemnelorB(scdereponderal>10%,subfebriliti,transpiraii),prezenasaunuabulky
disease (tumori >10 cm sau diametrul tumoral mediastinal >1/3 din diametrul toracic). Sa calculat
scorul IPI (International Prognostic Index), a fost notat tipul de tratament i rspunsul la tratament
complet sau nu (aici fiind incluse: remisiunea parial, boala stabilizat i boala n evoluie). Toate
rezultatelehistologiceaufostrevzutenvedereaasigurriiuneiconsisteneadatelorcudosareleclinice,
nplussaefectuatimunohistochimianecesarstudiului4carevafidetaliatulterior(evideniereaEBER
pelame).
Amutilizattehnicistatisticedescriptivesauinfereniale.Diferenelentreloturilecunivelemaride
IgG anti VCA i caracteristicile bolii au fost investigate cu testul Chisquare sau Fischer. Am utilizat
programulSPSS17.0,Medcalc8.3.1.1.saufacilitileprogramuluiExcelalMicrosoftOffice2007.
Concluzii
1. AceststudiupilotapermisidentificareauneivaloricutoffpentruIgGantiVCA,careacondusla
identificarea unor subgrupe de pacieni cu anse statistic semnificativ diferite de a obine remisiune
completlafinalulchimioterapiei.
2. PrezenainfecieicuEBV,cuantificatprintitrulIgGantiVCA,poateficonsideratcafactorde
prognosticpozitivnevoluialimfoamelorlacopii.
3. Bieiiparafimaiafectaidehemopatii,indiferentdeintensitateainfecieicuEBV.
4. Tipulhistologic,stadiulclinic,nivelulLDHnusaucorelatcuintensitateainfecieicuEBV.

Studiul 3. Virusul EpsteinBarr factor de prognostic independent n

neoplaziilepediatrice
Introducere
Rolul EBV ca i factor etiologic al limfoamelor a fost iniial sugerat de datele epidemiologice,
prezenaanticorpilorantiEBVfiindidentificatntrunprocentcrescutlacopiiicuneoplaziihematologice
comparativcupopulaiageneral,apoiafostconfirmatdeprezenagenomuluiEBVnceluleletumorale.
Dac rolul etiologic al EBV n limfoame este bine stabilit, rmne ns ntrebarea asupra
cuantumuluiinflueneipecareoareEBVnevoluiaacestora.
Ipotezadelucru.Obiective
ntrunprimstudiustudiulpilotamreuitspunemnevidenovaloarecutoffaIgGantiVCA
de 213,44 UI/ml, care reprezint un factor predictiv pentru obinerea remisiunii complete la finalul
chimioterapiei. Intensitatea infeciei cu EBV, reflectat de titrul de anticorpi IgG antiVCA, pare s
reprezinte un factor de prognostic favorabil cei cu infecie EBV activ/reactivat par a avea anse
crescutedeaobineunrspunscompletlafinalultratamentului.naceststudiu,peunlotmritcareainclus
pacieniidindouunitisanitarecaretrateaznmodcurentpacienicuneoplaziipediatrice,afostextins
cercetareaasuprainflueneipecareEBVopoateaveaasupraevoluieibolii.Sferadeinteresafostlrgit,
fiindluatencercetareattaspecteledemografice,deprezentareclinic,tabloulhematologicsaubiochimic,
cticelelegatedetoxicitatealatratamentisupravieuireaglobalsausupravieuirealiberdeboal.
Materialimetod
Am selectat, prospectiv i consecutiv, pacieni tratai n Institutul Oncologic I Chiricu Cluj
NapocaiseciadeOncopediatrieaSpitaluluiClinicdeUrgenpentruCopiiClujNapoca,ntreanii2005
i 2010. Lotul de pacieni a constat din 89 de copii internai i tratai n aceste uniti spitaliceti, cu
neoplaziidetiplimfomHodgkinsaunonHodgkinsaualtpatologieneoplaziccertificatafiEpsteinBarr
pozitiv, prin identificarea unui titru de anticorpi IgG anti VCA n serul pacienilor (carcinom
nazofaringian, sarcoame, nefroblastom, neuroblastom etc). Din dosarele clinice ale pacienilor au fost
culesedatenceeaceprivetedemografia,datedehematologieibiochimie,cumarfiVSH,LDH,albumina
seric,stadiulclinicaltumorii,prezenasaunuasemnelorBdeboal,tipulbulkydeboalsaunu,afost
calculatscorulIPI(detaliatnstudiulanterior),tipuldetratament,rspunsullatratament.
Toatehistologiilecazuriloraufostrevizuitepentruaofericonsistendatelorculesedindosarele
clinice.
Criteriiledeincluderenuaufostdiferitefadestudiulpilotianume:
Cazuricertificatehistologiccuneoplazie
Vrstantre1i18ani

 Tratamentulcompletcuschemestandarddechimioterapie,conformghidurilorinternaionale
nvigoare
EBVIgGantiVCApozitiv
Criteriiledeexcludere:
NegativitateapentruEBV
Dosarecliniceincompletenceeaceprivetetratamentul,evalurilerspunsuluilatratament,
analizelendecursulchimioterapiei
Cazurineconfirmatehistologic
Comorbiditicareauimpusmodificareaschemeistandarddechimioterapie
Lotul de pacieni a fost mprit n dou categorii, n funcie de valoarea cutoff identificat la
studiulpilot<i,respectiv,>213,44UI/ml,analizastatisticfiindcentratpeintensitateainfecieicuEBV
reflectat de titrul IgG, la care sa adugat cercetarea privind corelarea cu diferii factori de prognostic
clasici pentru neoplaziile prezentate de aceti pacieni. Au fost n final selectai pacienii cu limfom
HodgkinsaunonHodgkin,precumiceicucarcinomnazofaringian,neoplaziincarerolulEBVcaiagent
etiologicestebinestabilit.
Analiza statistic a fost efectuat cu ajutorul tehnicilor descriptive i infereniale: Chi square sau
testul Fisher exact au fost utilizate pentru a evalua corelaiile ntre variabilele cantitative, urmnd
aplicaiilestandardpentrufiecaretest.DatelecontinueaufostanalizatecuajutorultestuluiShapiroWilk.
Diferenele dintre grupurile de date continue au fost interpretate cu testul Student sau testul Mann &
WhitneyU.AnalizaR.O.Cincluzndcurbesauariadesubcurb (AUC)cuintervaldeconfidende95%
(95%CI),sensibilitateispecificitateaufost,deasemenea,utilizate.Unpragdesemnificaiestatisticde
<0,05afostalespentrutoatetestele.SoftwareulutilizatafostSPSS13.0(ChicagoII)iMedCalc8.3.1.1.
Concluzii
1. EBVpoateficonsideratfactordeprognosticindependentnevoluialimfoamelorlapopulaia
pediatric.
2. ansaderspunscompletlatratamentuloncologicestemaimarelaceicutitrulmaredeAcanti
VCAtipIgG,attpentrulimfomulHodgkin,ctipentruLNH.
3. Supravieuirea liber de boal este dependent de obinerea unui rspuns complet la
chimioterapie.
4. Limfomul Hodgkin pare a fi asociat n proporie mai mare cu infecia cu EBV intens, spre
deosebiredeLNH.
5. IntensitateainfecieicuEBVsecoreleazcusubtipulhistologiccucelularitatemixtiscleroz
nodular.
6. Modulclinicdeprezentareapacienilorculimfoame(stadiulTNM,boalabulky,nivelulLDH,
diametrul tumoral maxim, prezena semnelor B, boala extraganglionar) nu este influenat de titrul IgG
antiVCA.
7. InfeciaintenscuEBVcretetoxicitateapelinieleucocitarieritrocitar.
8. CoinfeciileviralenusuntinfluenatedeprezenaEBV.

Studiul4.EBERfactordeprognosticnneoplaziilepediatrice

Introducere
O tumor este ncadrat ca fiind virus asociat atunci cnd genomul viral sau produii lui (micro
ARN,proteine)suntevideniainceluleletumorale.PrezenagenomuluiEBViexpresiaconstantaunor
proteineviralentrunspectrulargdemalignitireprezintdoveziputernicecaresusinimplicareaEBV
ncarcinogenez.
Expresiaproteinelorviraledifernfunciedetipuldemalignitateasociat,darEBER(EBVencoded
smallRNA) este singurul produs care este intens exprimat n toate cele 3 tipuri de stri de laten. Din
aceast cauz, EBER este inta ideal pentru metodele de diagnostic histologic. Punerea n eviden a
EBER, cu ajutorul metodei de hibridizare in situ, reprezint gold standardul diagnostic pentru
demonstrareaasocieriidintreEBVioseriedemaligniti:limfomulHodgkin,limfomulBurkitt,PTLPD,
anumitetipuridelimfoameT,carcinomulnazofaringian.
Recent sa demonstrat rolul pe care l are EBER n meninerea fenotipului malign: determin
rezisten la apoptoz, induce secreie de IL10 care acioneaz ca factor autocrin de cretere pentru

celulele tumorale din limfomul Burkitt, confer rezisten la aciunea apoptotic a IFN , prin blocarea
activitiiproteinkinazei.
Ipotezadelucru.Obiective
StudiuliapropusstabilireauneicorelaiintretitrulcrescutalIgGantiVCAcamarkerserological
prezeneivirusuluiEBV(infecieactiv/reactivare,boalasociatprocesuluitumoral)iprezenaEBERn
esutul tumoral (martor al rolului etiologic al EBV) i evaluarea EBER ca factor prognostic n evoluia
neoplaziilorlacopii.
Materialimetod
Din lotul stabilit pentru studiul precedent (89 de pacieni), au fost identificate 20 de cazuri cu
blocurilaparafin12bieii8fete,nhistotecaIOCNsauaSpitaluluideCopii.Acesteprobelaparafin
au fost secionate pentru prepararea lamelor necesare coloraiilor imunohistochimice. Sa verificat cu
acestprilejconcordanadiagnosticuluicucelmenionatnfoaiaclinicacazului.
Pelotulselectatdepacieniaufoststudiaiprincipaliifactorideprognosticailimfoamelorncorelaiecu
statusul EBER: rspunsul la tratament, stadiul bulky dimensiunea tumoral, toxicitatea hematologic i
biochimiclatratamentuloncologic.
TehnicadecolorareEBER
HibridizareainsitupentrudeteciavirusuluiEBV
Aufostidentificateiselectate(folosindseciunistandardcolorateHE)blocurilecuconinutmaximde
material tumoral (cele mai multe celule carcinomatoase pentru carcinoamele nazofaringiene sau cele mai
multe celule Hodgkin pentru limfomul Hodgkin). Pentru hibridizare a fost folosit o prob complementar
oligonucleotidei EBER conjugat cu fluoresceina (NovocastraTM Fluoresceinconjugated probes for in situ
hybridizationEpsteinBarrVirusProbeISHKit).
Concluzii
1. Prezentarea clinic a neoplaziilor (dimensiunea tumoral maxim) este independent de
statusulEBER.
2. RspunsullatratamentulchimioterapicnuesteinfluenatdestatusulEBER.
3. SupravieuirealiberdeboalnuesteinfluenatdestatusulEBER.
4. ToxicitateatratamentuluioncologicnuesteinfluenatdepozitivitateasaunegativitateaEBER.
5. TitrulAcantiVCAIgGnuestestatisticlegatdestatusulEBER.