INFORME N3

Enumeracin de coliformes, coliformes fecales y E. coli por la tcnica de

Nmero Ms Probable (NMP)
En esta prctica se realizaron pruebas para determinar la presencia de
coliformes totales, coliformes fecales y E.coli, en salsa de tomate. Las
pruebas realizadas fueron: Prueba presuntiva para evidenciar la
fermentacin de lactosa que confirma la presencia de Enterobacteriaceae;
Prueba confirmativa en caldo LBVB para detectar coliformes totales, y en
caldo EV para coliformes fecales y, Confirmacin de E.coli por siembra en
agar EMB y prueba de indol.
Resultados:
Alimento analizado: Salsa de Tomate
Tubos confirmados
RESULTADOS
Prueba presuntiva
Coliformes
Prueba
totales
confirmati
Coliformes
va
fecales

d: 10-1

d: 10-2

d: 10-3

NMP
por
gramo
15

Limite NMP
Inferio Superi
r
or
2,8
44

15

2,8

44

Evidencia fotogrfica de resultados:

Prueba presuntiva:

Tubos con caldo LST y campana de Durham,

dilucin 10 pasada 24 horas
-1

Tubos con caldo LST y campana de Durham,

dilucin 10 pasada 24 horas
-2

Tubos con caldo LST y campana de Durham,

dilucin 10-3 pasada 24 horas.

Prueba confirmativa:

Tubos con caldo LBVB y campana de Durham.

Diluciones 10-1, 10-1 y 10-2 pasadas 24 horas

Tubos con caldo E.C. y campana de Durham.

Diluciones 10-1, 10-1 y 10-2 pasadas 24 horas

Anlisis de resultados:

Para el anlisis de recuento de microorganismos indicadores como lo son

Coliformes totales, fecales y E.coli [2], se puede emplear el mtodo de
nmero ms probable (NMP), un mtodo cuantitativo el cual se usa cuando
se espera un recuento menor a 100UFC/gr o ml [1].
Para este resultado se realizaron dos diluciones decimales seriadas de 10 -2
y 10 -3 a partir de la dilucin inicial de 10 -1, y se procedi a realizar las
siguientes pruebas:
Prueba presuntiva:
Esta prueba consiste en detectar la produccin de gas en caldo LST
(lauryl sulphate tryptose), el cual se produce de acuerdo a la
fermentacin de la lactosa y tambin es causante de la generacin de
turbidez en la dilucin [2]. Se realizaron siembras de diluciones seriadas
10-1, 10-2 y 10-3 por triplicado y como se evidencia en las imgenes
anteriores correspondientes a esta prueba, los tubos positivos fueron:
Resultados de la Prueba presuntiva
Dilucin
10 -1
10 -2
10 -3
N de tubos
confirmados
2
1
0
(coliformes)

Los resultados se interpretaron mediante una tabla estadstica

estndar del NMP establecida para tres diluciones utilizando el
nmero de cultivos que indican la presencia o ausencia de estos
microorganismos, obteniendo como resultado NMP por gramo de Salsa
de tomate de 15 grmenes.

[1]

Segn la NTC 921 de 2008, la salsa de tomate debe cumplir los

siguientes requisitos microbiolgicos establecidos [4]:

Con respecto a los resultados obtenidos en esta primer parte de la

prctica, el producto Salsa de tomate no se encuentra dentro de los
lmites permisibles para su comercializacin y consumo.
Prueba confirmativa:
Para el desarrollo de esta prueba se sembraron muestras obtenidas de
los tubos positivos del paso anterior, en tubos con caldo LBVB y EC con
campana de Durham.
La siembra en caldo LBVB se realiz con la finalidad confirmar la
presencia de coliformes totales en el alimento [2], dando esta positiva por
presencia de gas y turbidez para los tubos con diluciones 10 -1, 10-1 y 10-2 ,
y obteniendo de nuevo un resultado de NMP por gramo de Salsa de
tomate de 15 grmenes.
La confirmacin de coliformes fecales se hace en tubos con caldo EC en
donde se debera presentar turbidez, por crecimiento microbiano y
desprendimiento de gas en la campana Durham [2] pero, como se muestra
en la evidencia fotogrfica esto no sucedi, por ende la prueba
confirmativa para coliformes fecales en Salsa de tomate dio negativa y
por lo cual no se procedi a realizar la confirmacin de presencia de
E.Coli.

Conclusiones:
1. Se observ en el producto comercial SALSA DE TOMATE, la presencia
de coliformes totales, los cuales indican prcticas sanitarias
deficientes en el manejo y en la fabricacin del alimento o
contaminacin del producto ya preparado [3].
2. La Salsa de tomate analizada no es apta para comercializacin ni
para consumo humano. Durante la prueba presuntiva y confirmativa
dio positiva la presencia de coliformes totales, teniendo como
resultado 15 coliformes por gramo de alimento y respecto a la NTC

921 de 2008, este producto supera los lmites permisibles dentro de

los requisitos microbiolgicos que debe cumplir.
3. La prueba para confirmacin de coliformes fecales dio negativa en el
alimento SALSA DE TOMATE, por lo tanto este producto tiene menos
de 3 coliformes fecales por gramo [1].
4.
5.

Bibliografa:
[1]: Anlisis microbiolgico de alimentos. Mara Marcela Martnez Miranda.
[2]: Guas de laboratorio de microbiologa de alimentos. Mara Marcela
Martnez Miranda. 2016-2
[3]: Microorganismos marcadores en la industria alimentaria. Mara Marcela
Martnez Miranda.
[4]:
file:///C:/Users/oem-pc/Downloads/NTC921%20SALSA%20DE
%20TOMATE.pdf