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UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTA DE CIENCIAS BSICAS
PREGRADO EN QUMICA
CURSO DE BIOLOGA GENERAL
MONTERA-CRDOBA
2016
INTRODUCCIN: Qumicamente un carbohidrato es diferente de un lpido y de
una protena. Cada una de estas biomolculas tiene sus propiedades distintivas
que permiten diferenciar a una de otra. Por ejemplo, los carbohidratos tienen
muchos grupos hidroxilo y carbonilo, los lpidos son altamente hidrofbicos y
las protenas tienen en su constitucin enlaces peptdicos que estn ausentes
en las otras clases de biomolculas.(UNAM, 2014)
Todos los organismos vivos poseen carbohidratos, protenas y lpidos. Estas
molculas son frecuentemente llamadas macromolculas. Todas las
macromolculas son polmeros sintetizados a partir de la unin de bloques
estructurales (compuestos orgnicos) ms sencillos, denominados monmeros.
Los polmeros pueden ser degradados en sus monmeros constituyentes
mediante reacciones de hidrolisis.(lvarez, 2006)
Las macromolculas tienen diferentes estructuras y propiedades qumicas. Por
ejemplo, los lpidos(compuestos de cidos grasos) poseen muchos enlaces CH y relativamente poco oxgeno, mientras que las protenas(compuestas de
aminocidos) poseen amino (NH3+) y carboxilo (-COOH). Estas subunidades
caractersticas y grupos qumicos, le confieren diferentes propiedades qumicas
a las macromolculas. Por ejemplo, los monosacridos tales como la glucosa
son polares y solubles en agua, mientras que los lpidos son compuestos no
polares e insolubles en agua (Moreno, 2009) que son los que se estudiaremos
por medio de parmetros fsico como el color, producto de reacciones qumicas
que se llevan a cabo por medio de la dosificacin de reactivos especficos.
La anterior actividad de laboratorio busca la determinacin de forma cualitativa
de protena, carbohidratos y lpidos, basndonos en pruebas y reacciones
qumicas caractersticas que produzcan cambio visible de color y as comparar
con los parmetros estipulados bibliogrficamente, asimismo se pretende
identificar a nivel microscpico lo anteriormente mencionado.
OBJETIVOS:
General:
Especficos:
METODOLOGA
La actividad de laboratorio fue llevada a cabo por medio del empleo de
sustancias qumicas que reaccionaron con los analtos manifestando
coloracin. A manera general, en cuanto a ejecucin la experiencia fue
relativamente sencilla y a continuacin se describir detallada pero
sucintamente el proceso realizado para cada identificacin.
1. DETERMINACIN CUALITATIVA DE AZCARES.
Inicialmente su dispuso de 7 tubos de ensayos previamente lavados y
secados. Se procedi rotulando los mismos del nmero 1 al nmero 7 y
luego se agreg en estricto orden 2mL de: almidn, glucosa, jugo, leche,
orina, sacarosa y macerado de fruta. Siguiente a esto, a cada tubo se
adiciono 1mL de solucin de Benedict y se llevaron bao de mara por 3
minutos hasta ebullicin. Se observ y se tomaron las correspondientes
anotaciones.
2. DETERMINACIN CUALITATIVA DE PRESENCIA DE ALMIDN
PRUEBA DE BENEDICT
COLOR INICIAL COLOR FINAL RESULTADO
1. ALMIDON
Azul claro
Azul
Negativo
2. GLUCOSA
Azul claro
Naranja-rojizo
Mayor 2.0%
3. JUGO DE
Verde plido
Naranja-rojizo
Aprx. 1.5%
GUAYABA
cremoso
4. LECHE
Azul cremoso
Verde plido
Aprx 0.5 %
5. ORINA
Verde marino
Verde-Azul
Ligeros vestigios
claro
de glucosa
6. SACAROSA
Azul claro
Azul claro
Negativo
7. MACERADO DE
Azul claro ms
Mostaza1.5 %
GUAYABA
intenso
amarillo
Tabla 1: Resultados de identificacin de azcares.
Los azcares reductores son aquellos que, como la glucosa, fructosa, lactosa y
maltosa presentan un carbono libre en su estructura y pueden reducir, en
determinadas condiciones, a las sales cpricas. Como bien ocurre en la prueba
de Benedict en la que se emplea una solucin que contiene principalmente
CuSO4 que le atribuye un color azul claro inicialmente. Al enfrentarse este
reactivo con un azcar reductor que posee electrones disponibles para donar,
el cobre acepta estos electrones y se reduce, por lo que se torna marrn
anaranjado. Durante este proceso, el ion cobre azul (II) se reduce a ion cobre
rojo (I). Mientras que el cobre se reduce, el azcar reductor en cuestin dona
sus electrones oxidndose.
Dirigindonos a los casos trabajados en la experiencia, observamos que para
el almidn y la sacarosa arrojaron un resultado negativo, debido a que en su
estructura no tienen grupo aldehdo o un grupo cetnico libre lo que los clasifica
como glcidos de reservas; la sacarosa no es un azcar reductor y tampoco
posee un extremo reductor con electrones libres. Caso contrario para las
dems muestras estudiadas si manifestaron presencia de azucares reductores
lo cual se evidenci por los cambios y grados de coloracin, ejemplo de la
glucosa que mostr una grado mayor al 2% de presencia de azcares
reductores dando color rojo ladrillo. El jugo de guayaba evidenci
aproximadamente 1.5% en presencia de azucares reductores lo que se puede
explicar teniendo en cuenta que este no estaba endulzado previamente, por lo
que esta manifestacin es debida a la fructosa, levemente reductora, de igual
forma sucedi en el macerado de guayaba. Para el caso de la leche se obtuvo
un aproximado de 0.5% en presencia de azucares reductores ya que en la
leche se encuentra la lactosa (glucosa + galactosa). Por ultimo en la orina la
Tubo
1
Muestra
Yema de huevo
Coloracin
Violeta
oscuro
fuerte
2
Clara de huevo
Violeta intenso
3
Gelatina
sin Violeta brillante
sabor
intenso
4
Leche
Violeta
suave
cremoso
Tabla 2: resultados de las prueba de identificacin de protenas.
La presencia de protenas en una muestra se puede determinar mediante la
reaccin del Biuret. El reactivo de Biuret contiene sulfato de Cobre (II) y sosa.
El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptdicos
formando un complejo de color violeta cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protenas. En otras palabras, la reaccin se basa en la
formacin de un compuesto de color violeta, debido a la formacin de un
complejo de coordinacin entre los iones Cu 2+ y los pares de electrones no
compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. Da
positiva esta reaccin en todos los compuestos que tengan dos o ms enlaces
peptdicos consecutivos en sus molculas.
4 IDENTIFICACIN DE LPIDOS.
Se observ la formacin de dos fases luego de adicionar Sudan al agua. Esto
se debe a que el Sudan III pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que
son aquellos que no tienen afinidad por estructuras cidas o bsicas y son
insolubles en el agua.
Al agregar aceite vegetal se observ dos fases, una en la parte superior teida
de color rojo y otra en la parte inferior transparente, por lo observado se puede
decir que el sudan solo es soluble en grasas.
Esto se debe a la baja solubilidad de los lpidos por su estructura qumica
fundamentalmente hidrocarbonada, el cual contiene cantidades de enlaces C-H
y C-C de naturaleza covalente y su momento dipolar es mnimo. As, el agua al
ser una molcula muy polar, con gran facilidad para formar puentes de
hidrgeno, no es capaz de interaccionar con estas molculas y siendo est
ms densa, quedar en el fondo y el aceite arriba. Por otro lado, el color rojo en
la parte superior, se da porque los lpidos se colorean con este reactivo debido
a su baja polaridad y gracias a las interacciones intermoleculares de tipo
puente H y de London (cadena hidrocarbonada) entre los lpidos y dicho
reactivo.
Para la grasa animal se observ una coloracin naranja.
Los colorantes para grasas son ms solubles en las propias grasas que en el
medio en el que van disueltos. As, al baar la grasa con la solucin del
colorante, ste tiende a disolverse en la grasa que se va cargando del
colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solucin
alcohlica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua.
5 MICROSCOPA
Cmo se observa en la figura 5.1 bajo el objetivo seco dbil, hay una
abundancia de puntos cono de coloracin morado-oscuro debido al Lugol. Este
se adiciona con el propsito de tinturar los grnulos de almidn presentes en la
papa, logrando una mejor visibilidad de cada grnulo. Los puntos conos o
grnulos mencionados son conocidos como amiloplastos un tipo de
leocoplastos. Estn presentes en el tubrculo en estudio, debido a su funcin
especfica: almacenar el almidn como reserva.
La grasa animal observada es el resultado de la fusin del tejido adiposo, la
cual es muy rica en cidos grasos insaturados. Este tejido se encuentra
formado por clulas denominadas adipositos.
En la figura 5.2 se visualiza una poblacin de adipositos de un color oscuro en
consecuencia de la adiccin de sudan IV mediante el objetivo seco dbil (10X).
Mientras que con el objetivo seco fuerte (40X), se evidenci en el campo visual
los espacios intercelulares sin teir debido a la ausencia de grasas, que a su
Almidn ms Lugol
Muestras ms Biuret
Sudn en agua
Sudn+Agua+Aceite vegetal