UNIVERSIDAD AUTNOMA DE QUERTARO

FACULTAD DE QUMICA

Laboratorio integral de bsicas

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Prctica

Caracterizacin de muestras por IR y

luminiscencia

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Fecha:23/09/16

Fecha: 0710/16

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I. INTRODUCCIN
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS
III. OBJETIVO
IV. METODOLOGA
IV. 1. Material y equipo.
IV. 2. Reactivos y soluciones.
IV. 3. Requerimientos de seguridad
IV.4. Disposicin de residuos
IV. 5. Procedimiento.
IV. 6. Diseo experimental (si lo hay)
V. RESULTADOS.
V.1 Clculos
VI. DISCUSIN.
VII. CONCLUSIONES.
VIII. BIBLIOGRAFA

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I.INTRODUCCIN.
La fluorescencia consiste en la absorcin molecular de un fotn. Un compuesto que
presenta fluorescencia nativa es el sulfato de quinina, que se encuentra presente en el
agua tnica envasada, de modo que su contenido puede ser determinado por
espectrofluorimetra.
Se obtuvieron las longitudes de onda ptimas de emisin y excitacin de la quinina en
luminiscencia, y algunas caractersticas del mtodo como lmite de deteccin y
cuantificacin.
El espectro en IR nos permiti analizar la estructura de la molcula de la quinina.

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS.

La emisin de luz no es una propiedad exclusiva de los tomos. Cualquier sistema, en
el cual se promuevan electrones a niveles de mayor energa que el correspondiente al
estado fundamental, puede producir luz cuando la desexcitacin va acompaado de la
emisin de fotones. En general, en todos los sistemas, la transicin de un electrn de
un estado excitado al fundamental con emisin de fotones se denomina luminiscencia.
(Aldabe,2004).
Existen tres tipos de mtodos pticos relacionados con la luminiscencia molecular,
llamados fluorescencia, fosforescencia y quimioluminiscencia.
La fluorescencia y fosforescencia se parecen en que la excitacin se consigue
mediante la absorcin de fotones. La fluorescencia se diferencia de la fosforescencia
en que las transiciones electrnicas responsables de la fluorescencia no conllevan un
cambio en el espn del electrn. Las emisiones de fosforescencia estn acompaadas
por un cambio en el espn del electrn. La quimioluminiscencia, se basa en el espectro
de emisin de una especie excitada que se forma en el curso de una reaccin qumica.
(Skoog,2008).
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La medida de la intensidad de fotoluminiscencia o de quimioluminiscencia permite la

determinacin cuantitativa de un conjunto de especies inorgnicas y orgnicas .
Normalmente, el tiempo de vida media de una especie excitada es breve porque hay
diversas formas en las cuales un tomo o una molcula excitada liberan su exceso de
energa y se relajan a su estado fundamental. Dos de las ms importantes de estos
mecanismos son la relajacin (desactivacin) no radiante y la relajacin fluorescente.
Tambin puede ocurrir el relajamiento no radiante entre el nivel vibracional inferior de
un estado electrnico excitado y el nivel vibracional superior de otro estado electrnico.
Este tipo de relajacin llamado algunas veces conversin interna. (Rubinson,2001).
El trmino conversin interna describe los procesos intermoleculares por los cuales la
molcula pasa a un estado electrnico de ms baja energa sin emisin de radiacin.
La conversin interna parece ser particularmente eficaz cuando dos niveles de energa
electrnicos estn los suficientemente prximos como para que haya un solapamiento
de los niveles de energa vibracional. (Skoog,2008).
El trmino de espectrometra infrarroja designa normalmente el estudio de la absorcin
de la radiacin de longitudes de onda comprendidas entre 1 y 1000 micras. Este
intervalo se acostumbra a dividir en tres regiones: infrarrojo prximo (12 500 a 4000
cm-1), infrarrojo medio (4000 a 200 cm-1) y el infrarrojo lejano (200 a 10 cm-1).
La radiacin en el infrarrojo no es lo suficientemente energtica en comparacin la
radiacin ultravioleta y visible, de acuerdo al espectro electromagntico, donde a
mayor longitud de onda, menor energa. Para absorber en el infrarrojo , la molcula
debe sufrir un cambio neto en el momento dipolar como consecuencia de la vibracin.
Si la frecuencia de la radiacin coincide exactamente con la frecuencia de vibracin
natural de la molcula, tiene lugar una transferencia neta de energa que origina un
cambio en la amplitud de la vibracin de la molecular; teniendo como consecuencia la
absorcin de radiacin. (Rubinson,2001).
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La espectrometra de absorcin y reflexin en el infrarrojo medio es la principal

herramienta para la determinacin estructural de especies orgnicas y bioqumicas.
(Skoog,2008).

III.OBJETIVO
Comparar y analizar especies qumicamente activas en IR y Luminiscencia.

IV. METODOLOGA
IV. 1. Material y equipo.
Matraz aforado de 100 mL
Celdas
Micropipetas
Espectrofotmetro de luminiscencia PE (LS-PE).
Espectrofotmetro de infrarrojo marca Perkin Elmer (FTIR-PE)

IV. 2. Reactivos y soluciones.

Sulfato de quinina
H2SO4 al 10%.
Diferentes marcas de agua tnica o agua quinina
IV. 3. Requerimientos de seguridad
Usar bata blanca de manga larga de algodn cerrada, zapato cerrado de piel o de
seguridad, lentes de seguridad, guantes de ltex y mascarilla.

IV.4. Disposicin de residuos

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Todas las soluciones generadas durante los procedimientos, tanto acuosos como
orgnicos, se mezclan en un recipiente reservado para ello.

IV. 5. Procedimiento.
1. Curva de calibracin de sulfato de quinina en espectrofluorometra
La curva de calibracin se prepar en el laboratorio con sulfato de quinina en
concentraciones de 0, 4, 8, 12, 16 y 20 mg L-1 con 3 gotas de solucin de H2SO4 al
10%.
Las muestras fueron sonificadas para quitar el exceso de gas que pudieron contener.
Se hizo un pre-scan del estndar de 20 mg L-1 que es el ms concentrado, en el
equipo de fluorescencia LS-PE determinando las longitudes de onda de trabajo usando
un intervalo de +/- 100 a partir de la emisin mxima.
Longitud de onda (nm)

Intensidad

Excitacin

250.5

317.019

Emisin

447.1

556.642

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Fig 1. Espectro de emisin obtenido en el espectrofotmetro de luminiscencia a partir del

pre-scan.

Se coloc cada solucin en celdas de cuarzo, las cuales fueron introducidas al

espectrofotmetro, se seleccion Concentration en la pestaa Aplication despus
Stup parameters,luego de esto se procedi a se medir la intensidad de cada una de
las muestras.
Se colocaron de nuevo cada uno de las soluciones, del blanco a la ms concentrada,
se seleccion Aplication, seguido por References y por ltimo Curva de
calibracin.
2. Caracterizacin en IR
Se prendi el instrumento de Infrarrojo con Transformada de Fourier marca Pelkin
Elmer dos horas antes de su uso. Se coloc el anillo de plstico sobre la plataforma y

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se coloc una porcin de solucin madre de quinina, se seleccion Sample en la

pestaa Setup seguido por Instrument, se nombr la muestra y se guard, Se inici
en Start y despus seleccionando Scan para obtener el espectro. Se limpi el anillo
y la plataforma con etanol.
Se coloc de nuevo el anillo y se verti un poco de agua acidulada, se seleccion
Setup, seguido por Instrument y por ltimo Sample y se cambi el nombre, se
obtuvo el espectro.

V. RESULTADOS
Los valores obtenidos para la curva de concentracin en el equipo de fluorescencia
fueron los siguientes:
Concentracin (mg/L)

Intensidad

0.179

217.477

402.150

12

497.922

16

539.365

20

555.354

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Fig 2. Curva de calibracin quinina.

Los resultados para las muestras fueron las siguientes:

Muestra

Descripcin

Intensidad

Concentracin (mg/L)

Canadian Dry

43.024

1.287

Schweppes sesin 1

517.758

10.197

Garci Crespo

45.297

1.338

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Fig 3. Espectro IR de la quinina.

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VI. DISCUSIN.
La intensidad de la fluorescencia es importante porque es proporcional a la
concentracin de la quinina en el agua tnica. La concentracin de la quinina, se
obtiene a partir de la muestra aplicando un estmulo en la forma de energa
electromagntica mediante un rayo lser. La radiacin interacta con las molculas
de quinina que estn en el agua tnica, con lo cual se produce una emisin de
fluorescencia en una regin de 450 nm, observndose en la celda de cuarzo al emitir
un color azul, tal y como est marcado en el rango visible del espectro
electromagntico.
La quinina posee dos bandas de excitacin analticamente tiles, una centrada en
250 nm y la otra en 350 nm. (Skoog, 2008).
Tal y como se reporta en la bibliografa, en el laboratorio pudimos determinar la
primera banda de excitacin de 250 nm.
En los procesos de desactivacin de algunas molculas interfieren ciertos
fenmenos, uno de ellos es la conversin interna la cual es un cruce entre dos
estados de la misma multiplicidad (sencillo-sencillo o triple-triple). Esto es porque dos
niveles de energa electrnicos estn lo suficientemente prximos como para que
haya traslape de los niveles de energa vibracional. (Skoog, 2008).
En este tipo de conversin, la excitacin producida por la banda de radiacin 2 o
sea la de 350 nm, produce casi siempre una banda de fluorescencia centrada en una
longitud de onda 3 .

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Sin importar qu longitud de onda se utilice para excitar la molcula, la longitud de

onda del mximo de emisin es 450 nm. (Skoog,2008).
En el laboratorio la longitud de onda en emisin fue de 447.1 nm un valor no muy
alejado del ya reportado.
VII. CONCLUSIONES.

VIII. BIBLIOGRAFA
Aldabe S. Qumica 2: qumica en accin. 1a ed. Editorial Colihue. Buenos Aires,
Argentina. 2004
Skoog, D.A., Holler, F.J., Nieman, T.A. Principios de Anlisis Instrumental. 6ta ed.
Editorial Cengage Learning. 2008
Rubinson K.A..Anlisis Instrumental. Editorial Prentice Hall. Madrid, Espaa. 2001

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