VITEK

Dra. Andrea Sakurada Zamora

Hospital Dr. Stero del Ro
Hospital Clnico Universidad de Chile
Mayo 2010

Tpicos de la presentacin

Tecnologa y propsito.
Ventajas y desventajas.
Descripcin equipo
Cocaceas gram positivas
Bacilos gram negativos
Control de calidad
Experiencia local/Encuesta

Recomendaciones.

PROPSITO DE LA AUTOMATIZACION
Mejorar el tiempo de respuesta de los estudios
microbiolgicos manteniendo la calidad de los
mismos.
REAS DE IMPACTO DE LA AUTOMATIZACIN
EN MICROBIOLOGA
Tecnolgica.
Informtica.

SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA
VENTAJAS

Estandarizacin de los procesos.

Requieren de un proceso de inoculacin e
incubacin corto
Rapidez de respuesta 6-18 hrs.
Contienen una librera taxonmica amplia
Adecuacin a la diversidad de agentes de
importancia clnica.
Objetividad de las determinaciones.
Precisin y reproducibilidad de los resultados.
Bioseguridad.

SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA
VENTAJAS:

Optimizan el tiempo del personal del

laboratorio.
Aplicacin
de
programas
que
facilitan
interpretacin de las pruebas realizadas y
anlisis estadsticos.
Estndares CLSI.
Almacenar gran cantidad de informacin.
Control de las variables: disminuyen error
Preanalticas (Identificacin de muestra).
Analticas.
Post analticas (Informes) .

SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA
DESVENTAJA:

Alto costo.

No incluye caractersticas esenciales de ciertas
especies.

Grado de resolucin es menor en algunos grupos
bacterianos.

No esta disponible para todo el espectro de
bacterias.

Paneles ATB no definidos por el usuario

Necesidad de correlacionar con microbiologa
tradicional.

Necesidad de cultivo puro.

VITEK 1

VITEK 1: FLUJO DE TRABAJO

VITEK I

Originalmente diseado para la NASA.

Utiliza sistemas de tarjetas con micro pocillos
con sustratos y antimicrobianos deshidratados
(pruebas bioqumicas).
Capacidad de 15-120 tarjetas
Debe realizarse una suspensin estandarizada
de la colonia que se inocula en la tarjeta y sta
es sellada e incubada en el equipo.
El equipo mide desarrollo microbiano mediante
un lector ptico.
Lecturas cada 1 hora.
Mide Colorimetra.
Tiempo de incubacin: 4-18 horas.

VITEK 1

Identificacin de:
BGN, fermentadores, no fermentadores,
Familia Vibrionceae.
Cocaceas Y bacilos gram positivos.
Levaduras.
Haemophilus y Neisserias.
Anaerobios.
S. viridans
Susceptibilidad: Gram+, GramNecesidad de confirmar algunas CIM y ATB no
presentes en las tarjetas.
Las reacciones son analizadas automticamente
e interpretadas por el sistema informtico.
(Sistema experto)

VITEK 2

Seguridad
Unidades
Selladas

Trazabilidad
Unin electrnica
Por cdigo de
Barras

Rendimiento
64 pocillos

Simplicidad
Inculo nico

FLUJO TRABAJO VITEK 2

1. Colocar 3 ml de sol salina
en tubo plstico.

5. Para la sensibilidad tomar alicota desde tubo

primario y ponerla en un segundo tubo con 3 ml
de solucin salina, mezclar y este tubo usarlo
para la sensibilidad.

2. Tomar colonias aisladas desde un

cultivo puro y ponerlas en un tubo con
los 3 ml de sol salina . (McFarland 0.5
0.63 )
3. Medir Mc Farland de inoculo
en densichek

4. Colocar tubo ya medido en

soporte (casete) tubo y tarjetas
de identificacin
145 ul para Gram Negativo
280 ul para Gram Positivo

SISTEMA VITEK 2

Tarjetas miniaturizadas
Identificacin microbiana a travs
de colorimetra, cintica
disminucin sustrato
Variadas tarjetas de
susceptibilidad.
Procesos completamente
automatizados.
Dilucin del inculo.
Inoculacin de las tarjetas.
Sellado de las tarjetas.
Carga en incubador.
Trasmisin de los datos.
Eliminacin de las tarjetas.

SISTEMA VITEK 2
Lectura ptica cada 15 minutos (16 veces
cada pocillo promedio)

Mide turbidez o cambio de color.

Reporte por escrito.

Anlisis del estudio de sensibilidad mediante
programa (AES).

Resultados sensibilidad entre 5-14 horas
(> BNF) e identificacin entre 2,5-14 horas.
Levaduras sensibilidad e identificacin 18
horas

Tarjetas con 64 pocillos identificacin.

Sustratos individuales donde se mide la
actividad metablica: acidificacin,
alcalinizacin hidrlisis y capacidad de
crecimiento ante un determinado metabolito.

VITEK 2

Susceptibilidad microbiana por CIM. ATB

deducidos.
Sensibilidad 64 pocillos
Promedio ATB por tarjeta 20 (1-5 diluciones)
Estudios de susceptibilidad en:
 Staphylococcus spp.
 Enterococcus spp.
 Streptococcus grupo B y D.
 BGN, BNF
 Fastidiososos
 levaduras.
*Confirmar algunas CIMs
*Limitaciones de tarjetas (ver)

ANTIMICROBIANOS TARJETAS VITEK

Quinolonas: 12 clases
Aminoglicsidos: 7 clases
Rifamicina: 1
B Lact/Inh B lact: 6 clases
B Lactamicos Pen: 8 clases
Carbapenemes: 6 clases
Cephem: 25 clases
Peptido ciclico: 1
Sulfa: 1
Glicopeptidos 2 clases
Glicilciclina: 1
Ketolidos: 1
Lincosamida: 2 clases

Macrlido: 2 clases
Monobactam: 1
Phenicol: 1
Fusidane: 1
Nitrofurano: 1
Oxazolidinona: 1
Streptogramina: 2 clases
Tetraciclina: 3 clases
Otros: 4

LIMITACIONES DE LAS TAREJTAS AST

AST 577: G+
Realizar tcnicas alternativas:
Eritromicina en S. agalactiae.
 Screening cefoxitin en S saprophyticus,.
 Ampicilina con S agalactiae.
 Linezolid con Enterococcus , Staphylococcus, S agalactiae.


AST N087: G Realizar tcnicas alternativas:

 Amikacina: A baumannii.
 Ampicilina: Citrobacter spp, Enterobacter spp, Pantoea spp,
Serratia spp.
 Ampicilina/sulb: Citrobacter spp, Enterobacter spp, Pantoea
spp, Serratia spp.

LIMITACIONES DE LAS TAREJTAS AST

AST N087: G Realizar tcnicas alternativas:

 Imipenem: Morganella morganii, Proteus spp, Providencia spp.
 Meropenem: Acinetobacter spp
 Ertapenem: E coli, K pneumoniae, C freundii, C koseri, E
aerogenes, E cloacae, K oxytoca, M morganii, P mirabilis, P
vulgaris, S marcescens.
 Tigecilina: C freundii, E cloacae, E coli, K oxytoca, K
pneumoniae, C koseri, E aergenes, S marcescens.
 Aztreonam: Pseudomonas.

VITEK 2 ALARMAS MECANISMOS DE

RESISTENCIA

Alarmas: B-lactmicos:

Modif PBP (mecA).

Cefuroximasa de alto nivel.
Cefalosporinasas alto nivel (Amp C)
B-lactamasa espectro ampliado
Carbapenemasas (Metalo/oxa), impermeabilidad.
BLEE+

Glicopptido:
VanA/VanB

Aminoglucsidos:
Macrlidos: MLSB, erm

Taxa Vitek 2

Gram negativos: 148

Enterobacterias: 72
BGN no enterobacterias: 68
BGN muy patog: 8

Gram positivos: 122

Enterococcus 11
Staphylococcus 26
Streptococcus 40
Anaerobio/Coryne 63
Levaduras: 54
Neisseria/Haemophilus 27
Bacillus: 42

EVALUACIN RESULTADOS TEST

Error muy mayor: (VME) informar susceptible cuando

la cepa es resistente. No mayor a 1.5%

Tasa VME=

Total de VME x 100

Total resistentes

Error mayor: (ME) informar resistente cuando la cepa

es sensible. No mayor a 3%

Tasa ME=

Total de ME x 100
Total de susceptibles

Antimicrobial susceptibility testing protocols By Richard Schwalbe, Lynn Steele-Moore, Avery C. Goodwin 2007

Antimicrobial susceptibility testing protocols By Richard Schwalbe, Lynn Steele-Moore, Avery C. Goodwin 2007

TIEMPO FLUJOS DE TRABAJO

JCM Eigner
2005
Enterob/ bnf/
staphylo/entero

N cepas

307

Prep/inoculo/carga
equipo/post
proceso (min)

1.5 min

Mantencin/mes(m 63 Min (1 hr)

in/hrs)
TTR (ID/AST)
Enterobact.
BNF
Staphylo
Enterococ
total
Concordancia
categrica %

451 + 76 (7,5)
679 +178 (11.3)
514 +(8,5)
566+ (9,4)
506 +120 (8.4)
97

Larone,
Goessens
Habele-Horn
(antes 2005)

JCM Junkins
2010

280
1,3-1.7
0,9
0.8-1.0

1.8

Staphylococus identificacin
N cepas Tiempo
hr

Identificacion
correcta %

Micrococaceae

117

5.2

97.3

JCM Wallet
2005

Staphylococcus spp

152
38 ref

93
63

JCM Delmas*
2008

Staphylococcus coag
negativo

86
27 ref

93
70.7

JCM Layer
2006*

Staphylo
mrsa/mssa/scoagn

93

8,5

97

JCM Eigner
2005

Coc+
Staphylo/Entero/Stre
pto

107

4-10

99.1

Diag microbio,
Nakasone*
2007

Coc +

457

4-6

96,5

Proveedor

Staphylococcus susceptibilidad
N
cepas

VME

ME

Gen mecA
Saur

620

0,2

0.6

vitek2 oxa/
cefoxitin KB

2.107

0.1

0,2

Detec PNC/
Oxa S lug

60

Detec vanco
I Saur

129

Detec. MLSB
Staph

163

Staphylos
Tetrac
Cipro

93

Detec Staph
MLSB
Gen mecA

107

mE

0.2
0
1.8

Conc.
categ

94,7

99.7

JCM Junkins
2009*

96.7-99.5
rep

Eur JCM Bemer*

2010

96.8

E Inf Microb clin

Batista 2009*

90.7
64.8 (leg)

JCM Swenson*
2009

93
100 Esp

JCM Lavall
2010*

99.2

JCM Eigner* 2005

3.0-0.5

12 cep
45

1.1
9.1
0

Conc.
esenc

0.4
0
0

100
90.6

97.8
100

Autor

Diag microbio,
Nakasone* 2007

Streptococaceae identificacin
N cepas

Tiempo
hrs

Identificacio Autor
n correcta
%

Strept/Entero

132

5.2

90.9

JCM Wallet 2005

ERV

121

4-6.5

94-98 (test
adic)

JCM Abele Horn

2006

Entero

51

100 (test
adic)

JCM Eigner* 2005

Coc+
Enteroc

61

4-10

99.1

Diag microbio,
Nakasone* 2007

Coc +

457

4-6

96,5

Proveedor

Streptococaceae susceptibilidad
N
cepa
s
ERV
Vanco
Teico
Linezolid

121

Enteroc

51

VME

ME

mE

5
9
5
0

Conc.
Conc.
esencial categ

Autor
JCM Abele Horn
2006

94.2
95.9
97.5
100

JCM Eigner
2005*

St pneumoniae identificacin
N cepas

Tiempo

Identificacion
correcta %

Autor

Coc+

57

4-10 horas

99.1

Diagmicrobio,
Nakasone* 2007

Coc +

162

92.6

Eur J clin Microb

Infect dis
Abele Horn 2006

Coc +

457

4-6

96,5

Proveedor

Strepto pneumoniae susceptibilidad

Coc+

N
cepas

VME

292

2.4

0.3
1.7
0
0

0
0
0
0

PNC
eritro
stx
CTX
Coc+

ME

mE

Conc.
esencial

Conc.
categ

9.6

95

98.8

5.5
1
2.1
0

91.8
94.2
92.4
97.9

94.2
97.3
97.9
100

162
PNC
CTX
Amoxi

>95
4.3
0
4.9

95.7
98.1
95.1

Autor
JCM
Mittman
2009

Eur J clin
Microb
Infect dis
Abele
Horn
2006

BACILOS GRAM NEGATIVOS

FERMENTADORES IDENTIFICACION
N
cepas

Tiempo
(hr)

Identifi
correcta %

Enterobacterias, pasteurellas,
vibrios

243

5.2

98.7

JCM Wellet 2005

Enterobacterias

141

7.2

98

JCM Eigner 2005

Enterobacterias
Klpn/ecoli

181

4-10

96.7

Diag microbio,
Nakasone* 2007

Enterobacterias inhabituales

61

90

JCM Stone 2007

Bacilos gram negativos

623

96.8

Proveedor

4-6

BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES

SUSCEPTIBILIDAD

Enterobacte

N
VME
cepas

ME

141

1.7

3.7

16.7
5.0
4.3

0
0
0

1.4
2.8
6.4

0
0
25
0

suma
10 (10)
3 (3)
3 (28)
13 (13)

cefep
Pip
Cefaz
-E coli cefep
-Klpne caz
Imip
P/T
Cefep

79
31

E coli/klpne
cefep

174

14- 0
0
0
0
0
58 cep
Exp
corrig

mE

Conc.
esenci
al

Conc.
categ
95.9

Autor
JCM Eigner
2005*

Cong Chil infect

Roman 2009
98

Enf Inf Microb

Clin Trevio
2009

BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES

SUSCEPTIBILIDAD
N
VME
cepas
Enterobact
inhabituales
cfz
amp
sam
pip
cefep
ctx

ME

mE

61

Conc.
Conc.
esencial categ
80-9-100

1
0
0
0
0
0

1
1
4
0
0
0

3 cep
6
0
1
0
0

85.7
80.9
83.3
88
88
85.7

Autor

68.2-100 JCM Stone

2007*
77.3
68.2
81.8
95
100
100

VITEK 2 DETECCIN BLEE

BACILOS GRAM NEGATIVOS NO

FERMENTADORES IDENTIFICACION
N cepas

Tiempo

Concordancia Autor

Pseudomonas spp,
Acinetobacter spp
otros BNF

88

6.7

92.1

JCM Wellet
2005

Pseudomonas spp,
Acinetobacter spp
otros BNF

181

4-10

96.7

Diag microbio,
Nakasone*
2007

Psae/abau

22

11.3

100

JCM Eigner*
2005

Bacilos gram
negativos

623

4-6

96.8

Proveedor

BNF susceptibilidad

Psae/aba
u

N
cepas

VME

22

5,7

Merop
Cefta
Pip

33.3
25
14.3

Abau
Imip

112

Psae
Cefep
P/T
Imip
Caz
Cipro

16

ME

mE

11.6

0
0
0

(suma)
18.2 (18.2)
22.7(22.7)
0

7.2

20
27
19
17
0

suma
25 (45)
0 (27)
19 (38)
6 (23)
13 (13)

Conc.
esencial

Conc.
categ
86.9

Autor
JCM Eigner
2005*

BMC Infect dis

Kulah 2009
98

Cong Chil infect

Roman 2009

BNF susceptibilidad
N
cepas
BNF
Abau
P/T
Tige
Psae
P/T
Cipro
Tige
S malto
caz
Psae
aztr
Cefep
caz
Imip
P/T

VME

ME

mE

Conc.
esencial

Conc.
categ

228
85

50

0
0

0
0

11.8
11.8

98.2
88.2

8
0
0

0
0
0

2
14
24

90
86
74

8.8

2,5

83.8

Autor
Enf Infec Microb
clin Gmez *
Garcs 2009

50

30

1.7
0
3.3
6.7
21.7

0
0
0
0
0

28.3
13.3
23.3
25
-

JCM Juretschko
S. 2007 *

CONTROL DE CALIDAD VITEK 1

Organismos control de calidad GNS

Utilizar E. coli (ATCC 25922) y Ps. aeruginosa (ATCC 27853).
Utilizar E. coli (ATCC 35218) en tarjetas GNS que contengan
amoxicilina/ cido clavulnico, ampicilina/sulbactam, piperacilina/tazobactam
o ticarcilina/cido clavulnico.
Utilizar E. faecalis (ATCC 29212) en tarjetas GNS que contengan
trimetoprima o trimetoprima/sulfametoxazol.
Utilizar E. coli (ATCC 51446) en tarjetas GNS que contengan el test
ESBL.

CONTROL CALIDAD VITEK 1

Organismos control calidad GPS

Utilizar E. faecalis (ATCC 29212) y S. aureus (ATCC 29213).
Sembrar E. coli (ATCC 35218) en una tarjeta GPS con
amoxicilia/cido clavulnico, ampicilina/sulbactam o ticarcilina/cido
clavulnico.
Sembrar E. faecalis (ATCC 51299) en una tarjeta GPS con un
pocillo de 6g de vancomicina y/o resultados de sinergia de
Gentamicina 500 y de Estreptomicina 2000.
Sembrar S. aureus (ATCC-BAA-1026) en una tarjeta GPS con la
deteccin de cefoxitina.

CONTROL DE CALIDAD vitek 2

Gram Positivas Identificacin:

Enterococcus casseliflavus ATCC 700327

Kocuria kristinae ATCC BAA-752
Listeria monocytogenes ATCC BAA-751
S. aureus spp. aureus ATCC 29213
S. saprophyticus ATCC BAA-750
S. sciuri ATCC 29061
Streptococcus equi spp. zooepidemicus ATCC 43079 *
Streptococcus thermophilus ATCC19258

CONTROL DE CALIDAD VITEK 2

Gram Negativas Identificacion:

Acinetobacter baumannii ATCC BAA-747

Enterobacter cloacae ATCC 700323
Klebsiella oxytoca ATCC 700324 *
Ochrobactrum anthropi ATCC BAA-749
Proteus vulgaris ATCC 6380
Shigella sonnei ATCC 25931
Stenotrophomonas maltophilia ATCC 17666

CONTROL DE CALIDAD VITEK 2

Gram Negativas Sensibilidad ( AST-N087):

E. coli ATCC 25922 *

Ps. aeruginosa ATCC 27853 *

E. coli ATCC 35218 *

K. pneumoniae spp. pneumoniae ATCC 700603 *
Gram Positivas Sensibilidad (AST-P577):

E. faecalis ATCC 29212 *

S. aureus ATCC 29213 *

E. faecalis ATCC 51299 *

S. aureus ATCC BAA-1026 *

S. aureus ATCC BAA-976 *

S. aureus ATCC BAA-977*

Encuesta Vitek 1

Hospital Roberto del Rio (Dra Benadof)

Hospital Dipreca (Dra Benadof)
Hospital San Juan de Dios (Dr. Chanqueo)

Aos incorp: 2003-2007

1.- Dificultad id coc+
En SCN no identifica bien, No es costo efectivo en Saur, No sirve en
Strepto B hemolticos. No lo utilizan para Staphylos solo Enteros.
2.- Susc Coc+
CIM vanco muy sensible a preparacin inoculo. No lo utilizan para
Staphylos solo Enteros s/probls
3.-Tiempo demora en informar coc+
6-8 horas
4.-dificultad Id BGN
Shigella y Salmonella solo gnero, mal S. maltophilia y B cepacia.
5.- Susc BGN
BLEE en no E coli
6.- Tiempo demora en informar
6-8 horas

Encuesta Vitek 1
7.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales id
Klebsiella indol, proteus indol, BNF oxidasas, enterococcus pigmento y
movilidad, coc+ catalasa y cefinasa.
8.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales susc
Blee en no coli, vanco por E test en invasivas, test hodge en
carbapenemasas
9.- Estudio de levaduras
lectura e incubacin diferida. En general bien
10.- Anaerobios.
No

Encuesta Vitek 2

-Hospital Militar Dra Porte

-Hospital Pto Montt Dra. Rioseco.
-Fusat TM Alejandra Farias/Patricia Silva
-HCUH: TM P Martnez, M Vidal, A
Canales; M Castillo; J Flores

Aos incorp: 2008-2009

1.- Dificultad id coc+
problemas de crecimiento o caractersticas atpicas no bien identificadas,
bajo porcentaje de discriminacin en Strepto viridans.
2.- Susc Coc+
Discordancia Nitrof en Enterococcus, Falsas R en SCOAN v/s E test,
discordancia nitrof y STX en Staphylo , Enterococcus Vanco I por R v/s E
test, si no entrega identificacin no entrega susc.
limitaciones de tarjeta
3.-Tiempo demora en informar coc+
4,5-11 hrs
4.-dificultad Id BGN
enterobacter como Klebsiella, Psae no identificaca, no discrimina Ps ptida
de fluorescens, no se usa en pac con FQ,

Encuesta Vitek 2
5.- Susc BGN
P/T enterobacter v/s dif en agar, Tigeciclina v/s E test, Klpne mucosas no
determina Blee, discordancia imip v/s E test en abau, carbapenmicos con
Abau y Proteus, corige los carbapenmicos cuando erta es R.
limitaciones de la tarjeta.
6.- Tiempo demora en informar
4,8 -10 horas
7.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales id
indol proteus, gelatina en pseudo putida y flouresc,
8.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales susc
cefinasa coc+, blee en proteus mirabilis, ATB no en tarjeta, E test para
strepto viridans y pneumo, levofloxacino en S maltophilia.
9.- Estudio de levaduras
necesidad de dos traspasos sucesivos para obtener buenos resultados
10.- Anaerobios.
No

CONCLUSIONES EQUIPOS AUTOMATIZADOS

IDENTIFICACIN Y SUSCEPTIBILIDAD

Identificacin:
Alto nivel de identificacin de bacterias mas
frecuentemente aisladas en clnica.

Susceptibilidad:
Errores mayores y muy mayores en general bajos.
Errores con ciertas drogas y bacterias.
Todos presentan limitaciones de ATB.
No se puede reemplazar totalmente la microbiologa
tradicional.
Resultados siempre analizar por profesionales competentes
en el rea de la microbiologa.
Grupos de usuarios de los sistemas deberan solicitar
incorporacin de paneles AST con ATB de acuerdo a
realidad nacional.

CONCLUSION II

La decisin de cual equipo utilizar depende de:

Tamao equipo.
Costo (reactivos/adecuaciones/hrs extraord).
Facilidad de uso.
Evaluacin de cuales tcnicas se realizarn en
forma manual de acuerdo a la microbiologa local
(ID/AST).
Conocer las limitaciones del equipo.
Control de Calidad.
Facilidad manejo software
Post venta.
Apoyo tcnico del proveedor.

RECORDAR
El grado de impacto que pueda tener la
automatizacin en
el laboratorio de
microbiologa depender de la capacidad del
staff mdico de modificar en forma
oportuna las conductas al lado del paciente.
No olvidar que la automatizacin no
reemplaza la experiencia del personal del
laboratorio de microbiologa
(OJO del
microbilogo.

Muchas gracias

Bibliografa cocaceas positivas

1.

Nakaone I., Kinjo Thoru, Nobuhisa Y., Laboratory based evaluation of teh colorimetric VITEK-2
Compact system for species identification and of the Advanced Expert System for detection of
antimicrobioal resistance : VITEK -2 compact system identification and antimicrobial susceptibility
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