FUNDAMENTO TEORICO

La fibra diettica total (TDF) se determina sobre muestras duplicadas de

secado y desgrasada (si el contenido de grasa es> 10%) de material. Las
muestras se cocinan a ~ 100 C con calor estable -amilasa para dar la
gelatinizacin, la hidrlisis y despolimerizacin de almidn; se incubaron a 60
C con proteasa (Para solubilizar protenas y despolimerizar) y amiloglucosidasa
(a fragmentos hidrolizan el almidn en glucosa); y se trata con cuatro
volmenes de etanol para precipitar la fibra soluble y eliminar despolimerizada
protenas y glucosa (de almidn). El residuo se filtra; lavado con 78% de etanol,
95% de etanol, y acetona; seco; y se pesaron. Un duplicado se analiz para la
protena y el otro se incub a 525 C para determinar la ceniza. La TDF es el
peso del filtrado y residuo seco, menos el peso de la protena y ceniza. La
principal ventaja del Kit de prueba Megazyme TDF es que enzimas contiene
alta pureza desprovista de interferir las actividades y las actividades de las
enzimas estn estandarizados. La importancia de actividad estandarizada amilasa en la medicin de resistente almidn es bien reconocido. Megazyme
amiloglucosidasa es esencialmente carente de celulosa, mientras que otras
preparaciones utilizadas comnmente contener contaminacin significativa con
esta actividad, lo que conduce a solubilizacin y la subestimacin de -glucano.
Todo Megazyme TDF enzimas se suministran en una forma lista para usar,
estabilizado, lquido.
Normalizacin de la pureza de la enzima:
La eficacia y la pureza de Megazyme -amilasa, la proteasa
y amiloglucosidasa han sido evaluadas utilizando los estndares
se recomienda en el mtodo AOAC 985.29 y 991.43, y la AACC
Mtodo 32-05,01. Megazyme termoestable -amilasa (E-BLAAM)
tiene una actividad de 3000 U / ml (mtodo Ceralpha); la proteasa es
suministrada a una concentracin de 50 mg / ml (~ 350 tirosina U / ml); y la
amiloglucosidasa se suministra a una concentracin de 200 U / mL
(Sustrato de p-nitrofenil -maltsido) (o 3300 U / ml soluble en
almidn). Esta actividad amiloglucosidasa es 150% la concentracin
tradicionalmente utilizado en los ensayos de TDF, de manera que 0,2 ml (en
lugar de 0,3 ml) se utiliza en el ensayo.
Megazyme amiloglucosidasa (E-AMGDF) es esencialmente desprovista
de celulosa, mientras que en otras preparaciones utilizadas para la TDF
determinacin, la contaminacin de celulosa puede ser tan alta como 1% de la
amiloglucosidasa (sobre una base de actividad). Este nivel de contaminacin
conduce a una subestimacin de -glucano en hasta un 10-15%.
Los mtodos utilizados para la medicin y la estandarizacin de Megazyme
enzimas estn disponibles bajo peticin.

DETERMINACION DE LA FIBRA DIETARIA TOTAL SOLUBLE E INSOLUBLE

Basado en el mtodo AOAC 991.43 "total, soluble e insoluble
La fibra diettica en los Alimentos "(Primera Accin 1991) y el mtodo AACC
32-07,01 "Determinacin de soluble, insoluble y total
La fibra diettica en alimentos y productos alimenticios "(Aprobacin Final
16/10/91).
DEFINICION:
Este mtodo es la modificacin simplificada de la diettica total AACC
fibra de mtodo (TDF), 32 a 05,01, y la AACC diettica soluble / insoluble
Mtodo de fibra (para los productos de avena), 32-21,01 (ver Nota 1, pgina 9)
1.-PRINCIPIO: 1 g sec muestras de alimentos (por duplicado) se sometieron a
digestin enzimtica secuencial por -amilasa estable al calor, y la proteasa
amiloglucosidasa.
2.- DETERMINACIN SOLUBLE / INSOLUBLE FIBRA DIETTICA: La fibra
diettica insoluble (IDF) se filtra, y despus el residuo se lava con
agua destilada. solucin combinada de filtrado y los lavados de agua
se precipita con 4 volmenes de etanol al 95% (EtOH) para diettica soluble
fibra (SDF) determinacin. El precipitado se filtra y se seca. Ambos
residuos FDS y FDI se corrigen para la protena, ceniza y blanco, para el
clculo final de los valores FDS y FDI.
3. DETERMINACIN FIBRA DIETTICA TOTAL:
SDF se precipita con EtOH, y residuo se filtra a continuacin, se seca y se
pesa. fibra diettica total (TDF) se corrige el valor de protenas y contenido de
cenizas.

ANEXOS
1.- Determinacin de fibra soluble e insoluble mtodo enzimtico

BIBLIOGRAFIA
1. Association of Official Analytical Chemists. (1985). Official Methods of
Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43, A20, p.399.
2. Association of Official Analytical Chemists (1986). Changes in
methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69, 370.
3. Association of Official Analytical Chemists (1987). Changes in
methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70, 393.
4. Prosky, L., Asp, N. G., Furda, I., DeVries, J. W., Schweizer, T. F. &
Harland, B. F. (1985). Determination of total dietary fibre in foods and
food products: Collaborative study. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 68, 677.
5. Prosky, L., Asp, N. G., Schweizer, T. F., DeVries, J. W. & Furda, I. (1988).
Determination of insoluble, soluble, and total dietary fibre in foods
and food products. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 71, 1017.