PRACTICA N 8

1. OBJETIVO:
Determinar por espectrofotometra molecular la concentracin de los
iones nitrato, NO3- que contienen las aguas mediante reduccin con
cadmio.
2. FUNDAMENTO TEORICO:
Los iones nitrato, NO3- se reducen casi cuantitativamente a iones
nitrito, NO2- en presencia de metal cadmio (Cd). Este mtodo utiliza el
cadmio comercial en grnulos tratados con sulfato de cobre, CuSO 4 y
como relleno de una columna de vidrio.
El nitrito as producido se determina por diazotizacin con cido
sulfanlico y acoplamiento N-(1-naftil)-etilendiamina para formar un
colorante azo de color muy intenso, que se mide colorimtricamente.
El rango de aplicacin de este mtodo es de 0,01 a 1,0 mg de NNO3-/L. El mtodo est especialmente recomendado para niveles de
nitrato inferiores a 0,1 mg N/L, donde otros mtodos carecen de
sensibilidad adecuada.
Las concentraciones de hierro, cobre u otros metales, por encima de
varios miligramos por litro, reducen la eficacia de la reduccin, para lo
cual para eliminar estas interferencias hay que aadir EDTA. El aceite
y la grasa recubrirn la superficie de Cd. Elimnese por extraccin
previa con un disolvente orgnico. El cloro residual puede interferir
por la oxidacin de la columna reduciendo su eficacia. El cloro
residual se elimina por la adicin de tiosulfato de sodio.
3. REACTIVOS, MATERIALES Y EQUIPOS
Reactivos:
Acido 4-aminosulfnico (cido sulfanlico) (s) P.A.

cido actico glacial (l), P.A.; 1-naftilamina(s), P.A.

Acetato de sodio(s), CH3COONa(s), P.A.

Nitrito de sodio, NaNO2(s), P.A.

 Nitrato de potasio, KNO3(s), P.A.

Sulfato de cobre (ll), CuSO4(s), P.A.

Etilendiamino tetractico, Na2H2Y.2H20, P.A.

Cloruro de amonio, NH4Cl(s), P.A.
Cadmio, Cd(s), P.A.
Materiales:
Fiolas de 50 ml, 100 ml y 250 ml.
Pipetas de 10 ml.

Columna para reduccin de nitrato.

Equipo:
Espectrofotmetro de absorcin molecular.
Balanza analtica con sensibilidad de 0,1 ml.
4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparacin de soluciones de reactivos:
(a) 100,0 ml de cido sulfanlico: disolver 0.8 g de cido sulfanlico
con 28 ml de cido glacial y luego diluir con agua a 100 ml.
(b) 100,0 ml de 1-naftilamina: disolver 0.5 g e 1-naftil amina con
28 ml de cido actico glacial y diluir con agua a 100 ml en una
fiola.

(c) 50,0 ml de CH3COONa.3H2O 2M: pesar 13.6 g de la sal y

disolverlo con agua haciendo un volumende 50.0 ml
(d) 100,0 ml de solucin estndar de trabajo de 10.0 ppm de
N-NO2: Pesar con exactitud 0.1232 g de nitrito de sodio disolver
con agua y diluirla con el mismo disolvente en una fiola de 250 ml.
Se tiene una disolucin de NaNO 2 de 100.0 mg N/L. Pipetear 10.0
ml de esta solucin en una fiola de 100.0 ml donde se le afora con
agua y se tiene una disolucin de 10.0 mg N/L.
(e) Solucin de cloruro de amonio-EDTA: disuelvase 13 g de
NH4Cl y 1.7 g de etilendiamino tetracetato de sodio en 900 ml de
agua. Ajstese el Ph A 8.5 NH3 cc y dilyase a 1,0 litro.
(f) Solucin diluida de cloruro de amonio-EDTA: diluir 300 ml de
la solucin concentrada a 500 ml con agua.
(g) Acido clorhdrico: diluir 100 ml de HCl cc a 200 ml con agua.
(h) Solucin madre de nitrato de 100.0 mg N/L: squese nitrato
de potasio
(KNO3) en una estufa a 105 C por 24 horas.
Disulvanse 0.7218 g de agua y dilyase a 1 litro.; 1ml = 100 ug
N-NO3-/L. Consrvese con 2 ml de CHCl3/L. Esta solucin es
estable por un mnimo de 6 meses.
(i) Solucin intermedia de nitrato de 10.0 mg N/L: dilyase
100.0 ml de solucin madre de nitrato a 1 litro con agua; 1.0 ml =
10 ug N-NO3-/L. Consrvese con 2 ml de CHCl 3/L. Esta solucin es
estable hasta 6 meses.
Preparacin de los grnulos de cadmio
(j) Grnulos de cobre-cadmio: lvese 25 g de grnulos de Cd de
calibre 40 a 60 nuevos. Agtese por rotacin el Cd con 100 ml de
solucin de CuSO4 al 2% durante 5 minutos o hasta que el color
azul se desvanezca parcialmente. Decntese y reptase con CuSO 4
reciente hasta que empiece a formarse un precipitado coloidal
marrn. Lvese con agua cuidadosamente, para eliminar todo el
Cu precipitado. Se debe utilizar agua exenta de nitrito para
preparar los reactivos y diluciones.
(k) Preparacin de la columna de relleno: insrtese un tapn de
lana de vidrio en la base de la columna de reduccin y llnese con
agua. Adase suficientes grnulos de Cd-Cu para producir una
columna de 18.5 cm de largo. Mantngase la columna con un nivel
de agua por encima de loa grnulos para evitar que el aire quede
atrapado. Lavar la columna con 200 ml de solucin de EDTA-NH 4Cl.
Actvese la columna, pasando a travs de ella a la velocidad de
dos gotas por segundo como mnimo. Luego pasar a la misma
velocidad 50,0 ml de solucin que contiene 25% de estndar de
nitrato de 1.0 mg N-NO3-/L y 75% de solucin de EDTA-NH4Cl.
Curva de calibracin, medicin de estndares y de muestras
(a) Las soluciones de 50.0 ml para obtener los puntos de la curva de
calibracin sern en nmero de 7 incluyendo a la solucin blanco,
siendo sus concentraciones en ppm de N.
Solucin

ml de solucin de 10.0
ppm en N a adicionar

Ppm de N

Blanco
Estndar
Estndar
Estndar
Estndar
Estndar
Estndar

1
2
3
4
5
6

0
0.1
0.2
0.3
0.5
0.7
1.0

0.00
0.05
0.10
0.15
0.25
0.35
0.50

Antes de iniciar la adicin de reactivos las fiolas deben estar con un

volumen de agua destilada de aproximadamente 25 ml, luego
adicionar a todas 1.0 ml de cido sulfanlico y se dejarn en reposo
por un 1 minuto, enseguida aadir 1 ml de 1-naftilamina y 1 ml de
acetato de sodio, y se completa con agua las fiolas mezclndolas
bien. Las soluciones estn listas para su medicin y con los puntos de
(absorbancia, concentracin) obtener la curva de calibracin.
Las muestras de agua: filtrada la muestra de agua y proceder de la
siguiente manera:
1ero: 10.0 ml con una pipeta es depositada en la cabeza de la
columna y se inicia la elucin a una velocidad de una gota cada 3-4
segundos. Una vez que en la cabeza de la columna tiene un nivel de
4 mm de lquido se adiciona unos 10 ml de agua destilada a la misma
velocidad. La solucin eluida es recibida en una fiola de 25.0 ml
donde se afora con agua destilada y lista para su medicin.
2do: Depositar en otra fiola de 25.0 ml, 10.0 ml de la muestra e agua
con 10.0 ml de agua destilada. A las dos soluciones se le agregan los
reactivos y tiempos considera dos en (a). se mezcla bien y afora
luego la muestra est lista para leerla en el espectrofotmetro
molecular.
5. CALCULOS Y RESULTADOS:
(a) La concentracin de los iones nitrato en el agua residual,
mg NO2-/L = (Cm2 Cm1) x V2 x (62.0)
V1
(14.0)
mg NO3-/L = [Cm2 Cm1] (25.0 ml/10.0 ml)
(62.0/14.0)
Donde:
Cm1: concentracin de nitrgeno del agua residual sin pasar por la
columna de reduccin empleando la curva de calibracin.
Cm2: concentracin de nitrgeno del agua residual que ha pasado por
la columna de reduccin empleando la curva de calibracin.
V1: ml de la muestra residual para la medicin de nitrato (10.0 ml).
V2: ml de la muestra diluida como es el caso presente a 25.0 ml.
(b) Presentar el esquema grafico analtico de la experimentacin, los
clculos, valores resumidos en tablas, grficas y los resultados de

acuerdo a os objetivos de esta prctica. Aqu tambin hay que

presentar resuelto la aplicacin numrica.
6. APLICACIN:
Se consiguen muestras de agua del ro Moche (9), muestreadas en
das diferentes del mes de marzo del 2011 para determinar su
contenido de nitrato en 9 puntos desde Quiruvlca a la ciudad de
Trujillo. 10,0 ml de muestra por triplicado fueron reducidas en una
columna de intercambio (Cd-Cu) de iones nitrato a iones nitrito. As
mismo se prepararon soluciones estndares de iones nitrito por
triplicado. Los reactivos que se adicionaron son: cido sulfanlico, 1naftilamina y acetato de sodio tanto para los estndares como para
las muestras obtenindose en todos un volumen final de 50,0 ml con
agua destilada. La solucin blanco que se empleo fue agua destilada.
Las mediciones de absorbancia de los estndares y muestras se
resumen en la tabla siguiente:
Muestra
Estndar 1
Estndar 2
Estndar 3
Estndar 4
Estndar 5
Estndar 6
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 5
Muestra 6
Muestra 7
Muestra 8
Muestra 9

Ppm
NO20,03
0,06
0,12
0,24
0,48
0,96
-

de Absorbancia a 420 nm
0,024
0,050
0,102
0,201
0,398
0,800
0,156
0,045
0,035
0,123
0,178
0,346
0,548
0,763
0,479

0,025
0,048
0,098
0,197
0,402
0,804
0,152
0,046
0,034
0,125
0,182
0,341
0,546
0,756
0,476

0,026
0,053
0,104
0,205
0,407
0,808
0,157
0,049
0,037
0,127
0,181
0,348
0,552
0,762
0,481

(a) Presentar la grfica de la curva de calibracin juntamente con su

ecuacin ajustada, indicando en los valores de ordenada y
pendiente su desviacin estndar o incertidumbre.
(b) Los resultados de ppm de iones nitrato de las distintas muestras
indicando su incertidumbre o desviacin estndar.
7. BIBLIOGRAFIA:
1. Organizacin panamericana de la salud, oficina sanitaria
panamericana. Criterios de salud ambiental No 5. Nitratos,
nitritos y nitrosaminas. Publicacin cientfica nm. 394, Mxico
D.F. (Mxico), 1980.
2. THOMAS M. Ultraviolet and visible spectroscopy. 2 a ed. John Wiley
& Sons, Chichester (England), pp. 143-160, 1996.