DILUCIONES Y MTODOS DE RECUENTO EN PLACA

CARLOS ANDRES MARTINEZ

JESS DANIEL ARIZA
JESS DANIEL MENDOZA
KATHERIN BARROS ESCALANTE
YESID NIETO CANTILLO

DOCENTE: SANDRA RODRIGUEZ

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

PROGRAMA DE MICROBIOLOGIA
VALLEDUPAR-CESAR
2016

imagen 1. Crecimiento microbiano que corresponde a cada dilucion de muestra de

agua residual

10-1
10-3

10-2

Imagen 2

Al tomar 0.1 ml de la dilucin de agua residual correspondiente al factor 10 -1 y se

sembrar en superfiecie por duplicado, se observ el crecimiento masivo de los
microorganismos en ambas cajas tal como se muestra en la imagen 2, por lo cual el
conteo de colonias se hace dificil; debido a esto se puede reportar >10 UFC/ml.
Imagen 3

Al tomar 0.1 ml de la dilucin de agua residual correspondiente al factor 10 -2 y sembrar

en superfiecie por duplicado, se observ el crecimiento masivo de los microorganismos
en ambas cajas tal como se muestra en la imagen 3, por lo cual el conteo de colonias
es complicado; debido a esto se puede reportar >100 UFC/ml.
imagen 4

Al tomar 0.1 ml de la dilucin de agua residual correspondiente al factor 10 -3 y sembrar

en placas por duplicado, se observ un menor crecimiento microbiano en 1 de las cajas
con relacin a las diluciones mas concentradas, tal como se muestra en la imagen 4,

por lo cual se logr el correcto conteo de 36 colonias para la caja 1, en cuanto a la caja
2, de la dilusion 10-3 fue descartada por presentar mayor crecimiento que las diluciones
mas concentradas, lo que permiti determinar el nmero de clulas viables por el
siguiente calculo:
N colonias X factor de dilucin

36 X 1000 = 36,000

se informa: 36X103 UFC/ml

Imagen 5

10-3

10-1

El reporte general del recuento en placa, se obtuvo teniendo en cuenta las cajas
pertinentes a los factores de dilucin 10 -1 y 10-3, debido a que la caja con factor de
dilucin 10-2 se descart por presentar un mayor crecimiento con respecto a la caja con
factor de dilucin 10-1. El nmero de clulas viables se obtuvo de la siguiente manera:
N colonias caja 10-3= 36
N colonias caja 10-1= >10

se informa: >18X104

36000X10= 360000/2=180000

DISCUSIN DE RESULTADOS

El recuento en placa es una tcnica susceptible a contaminaciones del entorno si no se

procesa con adecuada precaucin por lo que puede ser un factor determinante para
que en la prctica se obtuviera un crecimiento mayor en placas con un grado de
concentracin menor, lo que no concuerda con Madigan, Martinko y Parker (2003),
quienes indican que en diluciones con un grado menor de concentracin, se debe
obtener un nmero menor de colonia con respecto a diluciones con una mayor
concentracin; por lo que se estima que la incompatibilidad de crecimiento en el
duplicado de las placas de la dilucin 10 -2 con respecto a 10-1, pudo haberse dado por
un incorrecto proceso en la dilucin, siembra e incubacin.
Madigan et al. (2003) Afirman que, el grado de crecimiento microbiano en las placas
est determinado por la cantidad de microorganismos diluidos en el medio acuoso, las
caractersticas del medio de cultivo y de las condiciones y tiempo de incubacin,
adems este mismo autor indica que la tcnica de recuento en placa utilizada en
muestras naturales de agua o suelo suelen dar una menor cantidad de
microorganismos que en un recuento microscpico directo, esto debido a que en este
ltimo se cuentan tambin clulas muertas, caso que no sucede en la tcnica de
recuento en placa; adems del hecho de que en muestras naturales hay diferentes
microorganismos con diferentes requerimientos nutricionales (pp. 146,147).
Debido al tipo de crecimiento obtenido en las placas con factor de dilucin 10-1 y 10-2,
en las cuales no fue posible hacer un conteo de colonias, se report de acuerdo a su
factor de dilucin como >10 y >100, lo cual no concuerda con Madigan et al. (2003) que
sugiere que las placas con un nmero muy elevado de colonias deberan descartarse
por haber demasiadas colonias para contar.

RECOMENDACIONES

 El uso de la tcnica de recuento en placa debera utilizarse con cultivos puros.

La siembra en placa de las diluciones debera hacerse en extendido con una
instrumento (asas), con el fin de garantizar una diseminacin homognea de la
alcuota.
El estudio de cuantificacin de microorganismos en muestras naturales debera
soportarse con otro tipo de tcnicas, tales como el recuento microscpico
directo.
El proceso de dilucin de las muestras naturales se debe considerar un punto
crtico en la investigacin, ya que si no se efecta correctamente esta tcnica,
alterara el resto de la prctica, y por ende los resultados.

CONCLUSION

De acuerdo a los resultados obtenidos, se logr observar que las tcnicas de dilucin y
recuento en placa son tcnicas sencillas, rpidas, accesibles y de gran utilidad en la
microbiologa ambiental, ya que pueden arrojar datos cuantitativos como la cantidad de
clulas viables en un cultivo obtenido de ambientes naturales, lo que es de gran utilidad
al momento de visualizar u obtener en este caso un perfil general de ambientes
acuaticos. Sin embargo, es importante destacar que este tipo de tcnica cuenta con un
grado de confiabilidad medio, por lo que la Universidad Tcnica Federico Santamara
(USM, s.f) afirma, que la tcnica de recuento en placa, es una tcnica susceptibles a la
contaminacin, por lo que pueden arrojar resultados indeseados.
Por el contrario, Se resalta que la tcnica de dilucin seriada acta como objeto de
apoyo para otras tcnicas como recuento de colonias, nmero ms probable, medicin
por turbidez, etc. Que requieren el uso obligatorio de esta.

BIBLIOGRAFIA

Universidad Tcnica Federico Santa Mara. (s.f.). Recuento bacteriano y anlisis de

agua. Recuperado de http://www.ramos.utfsm.cl/doc/530/sc/LABORATORIO_3.pdf
Madigan, M., Martingo, J., y Parker, J. (2003). Biologa de los Microrganismos. 10 ed.
Prentice Hall. pp. 146, 147