Garca Cruz Francisco Yair

Padrn Flores Cristian Alan

Practica 6: Cromatografa en columna
Objetivos.

Comprender la tcnica de cromatografa en columna, sus caractersticas y los

factores que en ella intervienen.
Emplear la tcnica de cromatografa en columna para la separacin de un
compuesto orgnico.
A travs de cromatografa en capa fina controlar la cromatografa en columna.

Introduccin.
Las tcnicas cromatogrficas se emplean para separar los componentes individuales de
una mezcla y, en ciertos casos, para identificar un compuesto comparando su
comportamiento cromatogrfico con el desustancias conocidas empleadas como patrn.
Se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala
preparativa. Como fase estacionaria se usa, generalmente, gel de slice o almina dentro
de una columna. La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho
disolvente pasa a travs de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicacin de
presin (cromatografa flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente
y se rellena la columna poniendo en el fondo de sta un poco de algodn o lana de vidrio,
para evitar que la slica o la almina queden retenidas en la columna y que el disolvente
se engrasada hasta el nivel del soporte. A continuacin se introduce la muestra por la
parte superior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogindose por lo
general en tubos de ensayo.
Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una sustancia slida de
propiedades adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son
las ms usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografa como la fase
estacionaria. A travs de la columna se har pasar una corriente de un disolvente o me.
La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y
se coloca sobre el adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida
por el mismo. A continuacin se pasa un flujo de eluyente a travs de la columna. Los
compuestos constituyentes de la mezcla sonar rastrados por el eluyente a su paso,
hacindoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo, no todos los compuestos
avanzan a la misma velocidad, y esta es precisamente la clave de la cromatografa.
Algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente (fase
estacionaria) y por lo tanto avanzarn ms despacio. Por el contrario, otros apenas son
retenidos y avanzarn a mayor velocidad.

Resultados.

Cuestionario.
1. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin.
Aplicaciones de la Cromatografa Lquida de Adsorcin en Capa Fina
Monitorizacin de una reaccin, poniendo un punto en el
cromatograma cada cierto tiempo
Identificacin de un compuesto, comparando el Rf del
compuesto a investigar con el del compuesto conocido.
Comprobacin de la pureza del compuesto, comprando la muestra con
el producto puro.
Eleccin del disolvente adecuado para cromatografa preparativa.
Anlisis de fracciones recogidas en una cromatografa en columna.

Cromatografa Lquida de Adsorcin en Columna

La Cromatografa en Columna se usa slo con fines preparativos,
siendo el mtodo ms general para la separacin y purificacin de
compuestos orgnicos, tanto slidos como lquidos.

2. Diga cul es la diferencia entre una cromatografa en capa fina y la de

columna.
En la cromatografa en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa
delgada de un adsorbente depositada sobre un soporte plano como
una placa de vidrio, o una lmina de aluminio o de plstico mientras que la
cromatografa en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con
un soporte slido adsorbente (fase estacionaria), la muestra que se quiere separar
se deposita en la parte superior de este soporte y el resto de la columna se
llena con el eluyente (disolvente que constituye la fase mvil) que, por efecto de
la gravedad, hace mover la muestra a travs de la columna

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3. Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto

que se purificara en cromatografa en columna?
De acuerdo a la polaridad de la muestra se escoge el eluyente con la polaridad
adecuada y determinar las dems fases que rodean la columna para evitar que la
muestra no se desplace ms de lo necesario.
4. Por qu es necesario realizar una cromatografa en capa fina a los eulatos
obtenidos de la columna cromatografica?
Porque la cromatografa en columna va de la mano con la de capa fina, esto para
poder observar la separacin y purificacin de compuestos, sin ella no se tendra
completa la cromatografa en columna.

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5. Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografa en columna en

orden de polaridad creciente. Anote su bibliografa.

Anlisis de Resultados.

Conclusiones.
La cromatografa en columna es un mtodo eficaz y sencillo de purificacin de
sustancias. Esta debe ser complementada con la cromatografa de capa fina para
poder hacer una identificacin de la sustancia y poder hacer as la identificacin de
la misma con ayuda de un testigo.