INTRODUCCION

La palabra cromatografa significa grfica de colores y fue diseada por Michael Tswett en el
1903. Tswett llev a cabo una extraccin de una mezcla de pigmentos de hojas verdes y luego
pas este extracto a travs de un tubo de vidrio empacado con carbonato de calcio; de esta
forma logr separar los pigmentos presentes en las hojas.
Actualmente cromatografa es el nombre que se le da a un grupo de tcnicas utilizadas en la
determinacin de la identidad de sustancias, en la separacin de componentes de las mezclas
y en la purificacin de compuestos. Esta tcnica es muy efectiva y por lo tanto se utiliza tanto
a nivel de investigacin como a nivel industrial.
Este mtodo puede variar de tcnica en tcnica, pero siempre se basa en el mismo principio:
Todos los sistemas de cromatografa contienen una fase estacionaria y una fase mvil.
OBJETIVOS
-Conocer la cromatografa como tcnica de separacin de mezclas de sustancias, sus
caractersticas y los factores que en ella intervienen.
-Estudiar la incidencia del coeficiente de reparto entre la fase mvil y la fase estacionaria.
-Analizar la influencia del solvente en la separacin cromatogrfica.
-observar las diferentes caractersticas de la placa en la cromatografa.
MARCO TEORICO
En toda separacin cromatogrfica hay una fase estacionaria y una fase mvil.
La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido que se queda fijo en la misma posicin.
La fase mvil puede ser un lquido o un gas que corre a travs de una superficie y de la fase
estacionaria. Las sustancias que estn en un sistema de cromatografa interaccionan tanto
con la fase estacionaria como con la fase mvil. La naturaleza de estas interacciones depende
de las propiedades de las sustancias as como tambin de la composicin de la fase
estacionaria.
La rapidez con que viaja una sustancia a travs del sistema de cromatografa depende
directamente de la interaccin relativa entre las sustancias y las fases mvil y estacionaria. En
el caso de una mezcla, si cada componente interacciona diferente con la fase mvil y la fase
estacionaria, cada uno de ellos se mover diferente.
En la siguiente tabla se observan diferentes fases mviles y fases estacionarias en diferentes
tcnicas de cromatografa:

Tcnica

Fase mvil

Fase
estacionaria

Cromatografa de
gases

Gas

Slido o lquido

Cromatografa
lquida
en fase inversa

Lquido
(polar)

Slido o lquido
(menos polar)

Cromatografa
lquida
en fase normal

Lquido
(menos
polar)

Slido o lquido
(polar)

Cromatografa
lquida
de intercambio
inico

Lquido
(polar)

Slido

Cromatografa
lquida
de exclusin

Lquido

Slido

Cromatografa
lquida
de adsorcin

Lquido

Slido

Cromatografa de
fluidos supercrticos

Lquido

Slido

En la cromatografa se tiene en cuenta la velocidad del soluto y la del eluente para pode
determinar la siguiente relacin.
Rf = Velocidad de movimiento del soluto
Velocidad de movimiento del eluente
A continuacin se describirn las diferentes tcnicas de cromatografa:
Cromatografa de papel: es un proceso donde el absorbente lo constituye un papel de Filtro.
Una vez corrido el disolvente se retira el papel y se deja secar, se trata con un reactivo
qumico con el fin de poder revelar las manchas.
Cromatografa de capa fina: basa en el principio del reparto entre dos fases. En general,
una cromatografa se realiza permitiendo que la mezcla de molculas que se desea separar
(muestra) interaccione con un medio que se denomina fase estacionaria. Un segundo medio
la fase mvil que es inmiscible con la fase estacionaria se hace fluir a travs de sta para
elur a las molculas en la muestra. Debido a que las distintas molculas en la muestra
presentan diferente coeficiente, la fase mvil a los distintos componentes con diferente
eficiencia, de modo que aquellos que en la fase mvil sern eludos ms rpido que los que
sean preferencialmente solubles en la fase estacionaria.
Cromatografa de columna: Los elementos bsicos en la cromatografa de columna son una
son la fase estacionaria y la fase mvil. La fase estacionaria la forma un slido poroso, el cual
queda soportado en el interior de una columna generalmente fabricada en plstico o vidri.

La fase mvil se encuentra formada por la solucin que lentamente va atravesando la fase
estacionaria. La solucin que sale al final de la columna se reemplaza constantemente por
nueva solucin que se suministra desde un contenedor por la parte superior de la columna.
La Cromatografa en columna se emplea para la separacin de sustancias en escala
preparativa.
Cromatografa gaseosa: La muestra es vaporizada e introducida en un flujo de un gas
apropiado denominado de fase mvil o gas de arrastre. Este flujo de gas con la muestra
vaporizada pasa por un tubo conteniendo la fase estacionaria, donde ocurre la
separacin de la mezcla. La fase estacionaria puede ser un slido adsorbente o, ms
comnmente, una pelcula de un lquido poco voltil, soportado sobre un slido inerte o
sobre la propia pared del tubo. Las sustancias separadas salen de la columna disueltas
en el gas de arrastre y pasan por un detector; dispositivo que genera una seal elctrica
proporcional a la cantidad del material eluido.
La Cromatografa Gaseosa es una tcnica utilizada para la separacin y anlisis de mezclas
de sustancias voltiles.
MARCO PRACTICO
En este experimento se utilizaron las siguientes muestras.
Muestra A higuexi.
Los aminocidos : cisteina y cstina.
Las muestra A junto con los aminocidos, se colocaron en la placa por medio de un capilar;
se dejaron secar, luego se introdujeron a una cmara cromatografica.
Al dejarla durante unos minutos el eluente subi hasta la mitad de la placa. Fue sacada de la
cmara, pero no registro la presencia de algn aminocido en la sustancia A.
Se volvi a dejar secar la placa, se relvelo por medio de luz ultravioleta la cual nos dio unos
datos poco claros, por lo cual no nos permita determinar con claridad la presencia de
aminocidos en la muestra.
Por ultimo la placa fu revelada en una cmara de yodo I la cual nos arrojo datos mas claros
como fueron la presencia de manchas en la misma columna de la muestra A y la de la
cisteina.
Tabla de resultados
Muestra A
Cmara de
cromatografa

No obtuvo nada

Cisteina

Cistina

No obtuvo nada

No obtuvo nada

Revelado en
Se vio un pea
luz ultravioleta mancha borrosa

Se vio una mancha

demasiado borrosa

No obtuvo nada

Revelado en

Se obtuvo una mancha

No obtuvo nada

Se vio una

yodo I

mancha grande.

pequea a la misma altura

de la mancha de la
muestra A

ANLISIS DE RESULTDOS
En esta practica no se pudieron obtener los resultados deseados debido a varios factores que
modificaron los resultados como lo fueron:
La falta de tiempo, ya que si la placa hubiera sido dejada hasta que el eluente subiera del todo
en la placa hubiese sido posible que en la parte superior de la placa arrojara algunos datos
que nos indicara la presencia de alguno de estos aminocidos en la muestra A.
La posible vejes de las placas, ya que muchas de estas se embobaron modificando
notablemente los resultados finales.
Pero con los resultados obtenidos nos mostraron la presencia de cisteina en la muestra A y
la no presencia de cistina.
CONCLUSIONES
Se observo en esta practica que por medio de la cromatografa es posible identificar de que
sustancias esta compuesta una mezcla.
Como la polaridad del solventes utilizados para la cromatografa determinan la el resultado
mostrndonos sus diferentes compuestos.
Se observo como las diferentes caractersticas de la mezcla A se vean en la placa promedio
de sus diferentes manchas.
Como ciertos factores pueden modificar el restado en esta practica.
BIBLIOGRAFA

Compendio de anlisis qumico cuantitativo

Autores:Fischer, Rebert B.- Peters, Dennis G.
Editorial interamericana S.A de C.V.
Mxico D.F. 1987

QUMICA ORGANICA, Tercera edicin.

Autor: Noller, Carl R.
Editorial interamericana S.A de C.V.
Mxico D.F. 1973