UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR

DE SAN MARCOS
Universidad del Per, Decana de Amrica.

FACULTAD DE QUIMICA, INGENIERIA QUIMICA E INGENIERIA

AGROINDUSTRIAL
E.A.P INGENIERIA QUIMICA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE QUIMICA ORGANICA
PRACTICA N4: DESTILACION SIMPLE Y FRACCIONADA
CURSO:
LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA
PROFESOR:
GIOVANNA DELIAS YENQUE
INTEGRANTES:
JOAQUIN RODRIGUEZ LUIS FERNANDO

15070028

SANTIBAEZ VELASQUEZ LUIS EDUARDO

15070050

ATAHUAMAN POZO JESSY LISBETH

15070021

HORARIO:
FECHA DE REALIZACION:
13 de mayo del 2016
2016

VIERNES 2pm -6pm

FECHA DE ENTREGA:
20 de mayo del

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

INDICE:

RESUMEN

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

La cromatografa comprende un conjunto de tcnicas que tienen como finalidad
la separacin de mezclas basndose en la diferente capacidad de interaccin de
cada componente en otra sustancia.
En esta prctica se utiliz la cromatografa de adsorcin para evaluar mezclas de
colorantes naturales determinando su composicin mediante la comparacin con
patrones (los colorantes sin mezclar). Como fase estacionaria se utiliz papel
filtro, los solventes usados (fase mvil) fueron agua y alcohol. Se realiz las
pruebas en tubos de ensayo, siendo la distancia recorrida por el analito mayor
cuando se utiliz agua como disolvente en lugar de alcohol, asimismo, se hall
que el color azul utilizado era producto de una mezcla de colorantes (no era
puro.)

INTRODUCCIN
La cromatografa es una tcnica que permite separar los componentes de una
mezcla.
Esta separacin se logra utilizando un sistema bifsico: fase estacionaria donde
se retienen los
compuestos a separar y fase mvil que desplaza de forma diferencial los
compuestos a travs de la fase estacionara.
Dependiendo de la naturaleza de las fases, se pueden distinguir distintos tipos de
cromatografa:
Cromatografa slido-lquido: la fase estacionaria es un slido y la mvil un
lquido
Cromatografa lquido-lquido: ambas fases son lquidos y en la estacionaria el
lquido se ancla a un soporte slido.
Cromatografa lquido-gas: la fase estacionaria es un lquido no voltil sobre
soporte slido y
la fase mvil un gas.
Cromatografa slido-gas: la fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.
Existen otras clasificaciones para los distintos tipos de cromatografa:
A) En funcin de la interaccin que se establece entre los componentes de la
mezcla y las fases mvil y estacionaria:
Cromatografa de adsorcin: se producen interacciones de tipo polar
siendo la fase
estacionaria un slido.
Cromatografa de particin: la separacin se basa en las diferencias de
solubilidad de los componentes de la mezcla entre las dos fases siendo
ambas lquidas. Cuando la estacionaria es menos polar que la mvil se
denomina cromatografa en fase inversa.
Cromatografa de intercambio inico: se producen intercambios entre
iones presentes en la fase estacionaria y los del compuesto orgnico
solubilizado e ionizado en la fase mvil
B) En funcin del tipo de soporte empleado para la fase estacionaria:
Cromatografa en columna: utiliza como soporte una columna de vidrio
Cromatografa en capa fina: el soporte es una placa de vidrio, aluminio o
plstico

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

Ciertos componentes del fluido en movimiento tienden a ser adsorbidas o

disuelto. Cada componente interacta con el entorno de manera diferente que
los otros, en las mismas condiciones. Los componentes se mueven a una
velocidad diferente, dependiendo de su interaccin con la fase estacionaria; su
adsorcin en diferentes grados depende de la naturaleza del componente, la
naturaleza del absorbente y la temperatura.

OBJETIVOS
-Separar los componentes de una mezcla.
-Observar los cambios en el cromatograma producidos por el cambio de
solvente.
PARTE TERICA
En qu consiste?
La cromatografa comprende un conjunto de tcnicas que tienen como
finalidad la separacin de mezclas basndose en la diferente capacidad de
interaccin de cada componente en otra sustancia. De forma general,
consiste en pasar una fase mvil (una muestra constituida por una mezcla
que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a travs de una fase
estacionaria fija slida. La fase estacionaria retrasa el paso de los
componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan
a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los
componentes de la mezcla presenta un tiempo caracterstico de paso por
el sistema, denominado tiempo de retencin. Cuando el tiempo de
retencin del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de
la mezcla, ste se puede separar mediante la separacin cromatogrfica.
FUNDAMENTO TERICO
La separacin de los diferentes componentes de una mezcla que se
encuentran en un lquido o gas es el resultado de las diferentes
interacciones de los solutos a medida que se desplazan alrededor o sobre
una sustancia lquida o slida (la fase estacionaria). Las diversas tcnicas
para la separacin de mezclas complejas se fundamentan en la diversidad
de afinidades de las substancias por un medio mvil gas o lquido y un
medio absorbente estacionario (papel, gelatina, almina o slice) a travs
del cual circulan.
Tipos de cromatografa
Cromatografa en papel

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

En la cromatografa sobre papel, las interacciones del soluto con el papel
hacen que los compuestos se desplacen a velocidades diferentes.
Una pequea mancha de disolucin que contiene la muestra se aplica
sobre una tira de papel cromatogrfico a una distancia aproximada de un
centmetro de la base. La muestra es adsorbida en el papel. Esto significa
que la muestra entra en contacto con el papel y puede establecer
interacciones. El papel es sumergido en un disolvente adecuado (etanol o
agua) e introducido en un contenedor cerrado. A medida que el disolvente
asciende por el papel, encuentra la muestra que empieza a viajar por el
papel con el disolvente. Los diferentes compuestos de la muestra recorren
distancias diferentes dependiendo de la fuerza de sus interacciones
qumicas con el papel. La cromatografa en papel requiere algn tiempo,
habitualmente se necesitan varias horas para completarse.
El cromatograma final puede ser comparado con otros de mezclas
conocidas a fin de identificar los componentes de la muestra. La
cromatografa en papel de dos dimensiones consiste en desarrollar el
cromatograma en un disolvente, girar el papel 90 y desarrollar el
cromatograma en un disolvente diferente. Es til para separar mezclas
complejas de compuestos similares.
Actualmente, la cromatografa en papel se utiliza poco y ha sido
ampliamente reemplazada por la cromatografa en capa fina.
Cromatografa de intercambio inico
Se trata de una cromatografa en columna que utiliza una fase
estacionaria con sustancias con componentes con carga elctrica. Se
utiliza para separar compuestos cargados, incluyendo aminocidos,
pptidos y protenas. La fase estacionaria es normalmente una resina de
intercambio inico que contiene grupos funcionales cargados que
interaccionan con grupos cargados de signo opuesto del compuesto que
se quiere retener. Puede ser:
1. Intercambiador de iones cargado positivamente (intercambiador de
aniones), que interacciona con aniones
2. Intercambiador de iones cargado negativamente (intercambiador de
cationes), que interacciona con cationes
Los compuestos retenidos se pueden eluir de la columna por gradiente de
elucin o por elucin isocrtica con un cambio de la concentracin salina o
del pH. La cromatografa de intercambio inico es muy utilizada para
purificar protenas.
Cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC)

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

Se suele denominar HPLC, y es una forma de cromatografa en columna
que se utiliza a menudo en bioqumica y qumica analtica. La muestra
problema es forzada a pasar a travs de una columna (fase estacionaria)
por un lquido (fase mvil) a elevada presin, lo que disminuye el tiempo
que los componentes separados permanecen en la fase estacionaria, y por
lo tanto, el tiempo de difusin dentro la columna. En la salida de la
comuna existe un detector que indica la cantidad de soluto que est
saliendo. Este proceso de difusin dentro la columna comporta la aparicin
de picos anchos y prdida de resolucin. El hecho de estar menos tiempo
en la columna se traduce en picos ms estrechos en el cromatograma
resultante, as como una mayor resolucin y sensibilidad.
Otra manera de disminuir el tiempo que la muestra est dentro de la
columna es utilizar un gradiente de disolventes, que consiste en cambiar
la composicin de la fase mvil a fin de acelerar la salida de la muestra del
interior de la columna. Se pueden considerar dos tipos:

Fase normal
Se utiliza una fase estacionaria polar y una fase mvil apolar, y se
usa principalmente cuando la muestra a analizar es de naturaleza
apolar. Fue el primer tipo de HPLC, pero hoy en da ha sido muy
desplazado por la fase reversa.
Fase reversa
Se desarroll debido al elevado nmero de biomolculas polares. La
fase estacionaria es apolar y la fase mvil polar. Una de las fases
estacionarias ms empleadas es slice tratada con RMe2SiCl, donde
R es una cadena alqulica como CnH2n+1. En este caso, para una
determinada sustancia, el tiempo de retencin aumenta con la
polaridad de la fase mvil.
Cromatografa de permeacin en gel (GPC)
La cromatografa de permeacin en gel se conoce tambin como
cromatografa de exclusin por tamao, porque separa las molculas
segn su dimensin. Las molculas pequeas entran en un medio poroso y
por tanto les cuesta ms salir de la columna, dejando las partculas ms
grandes eluir primero. La GPC es una tcnica muy empleada para
determinar la distribucin del peso molecular en polmeros, aunque suele
proporcionar baja resolucin.
Cromatografa de afinidad

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

La cromatografa de afinidad se basa en interacciones no covalentes
selectivas entre la muestra y molculas especficas. Es muy especfica,
pero no muy consistente. Se utiliza mucho en bioqumica para la
purificacin de protenas.
Cromatografa gas-lquido
La cromatografa gas-lquido se fundamenta en el reparto del equilibrio de
la muestra a analizar entre una fase estacionaria lquida y una fase mvil
gaseosa. Es una tcnica til para una gran variedad de mezclas no
polares, pero es poco eficiente para molculas termolbiles.
Aplicaciones:
-La cromatografa analtica se utiliza para separar mezclas, y tiene como
principal objetivo determinar la identidad y concentracin de los
componentes de una mezcla.
-La cromatografa preparativa se emplea para purificar grandes cantidades
de una especie molecular.

DETALLES EXPERIMENTALES
Materiales:
-papel de filtro
-tijeras
-colorante de repostera
-vaso de precipitado
-tubos de ensayo
-agua
-Alcohol
-luna de reloj
-goteros de plstico

PROCEDIMIENTO

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

Solvente: AGUA
-Mediante el gotero, extraer unas gotas de colorante y depositarlo sobre la
luna de reloj. Repetir esto con cada colorante, usando un gotero por
colorante. Esto se usaron como patrones (colores usados: negro, rojo, azul,
amarillo).
-Cortar una tira de papel filtro con una longitud mayor a la del tubo de
ensayo que se usara (la parte inicial de la tira se corta con forma de
saeta), procurando que el ancho sea menor que el dimetro del tubo (para
evitar contacto con las paredes del mismo).

-Colocar una gota del colorante en la parte central del papel y a 1cm del
extremo con forma de saeta. Repetir con cada colorante y con las
muestras a analizar.

-Agregar unas gotas del solvente en el tubo. Colocar el papel dentro del
tubo (fijar el papel en la parte superior). Repetir con cada colorante y con
las muestras a analizar al mismo tiempo.

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

Solvente: ALCOHOL
-Cortar dos rectngulos de papel filtro con las dimensiones del vaso de
precipitado que se vaya a usar.
-Aplicar una gota de cada colorante sobre el papel filtro. En el primer papel
irn los patrones, en el segundo, las muestras a analizar.

-Agregar el solvente en el vaso de precipitado, con una altura menor de

1cm.
-Colocar el papel dentro del vaso de precipitado.

Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

DISCUSIN DE RESULTADOS
En la primera parte de la experiencia, se obtuvo este resultado:
En las muestras-patron se observa que el
color amarillo y el rojo no se descomponen
en otros colores, mientras que el azul deja
rastros de celeste y rosa; y el negro deja un
rastro bastante colorido.

Despus de un tiempo, los colorantes han

ascendido hasta la parte superior del papel
filtro.
En el caso del tubo que contena la muestra
N1, el exceso de solvente ocasiono que
gran parte del colorante terminara en la
fase mvil del sistema.
Estos son los resultados de las pruebas
realizadas: 4 tiras (correspondientes a los
patrones) y 3 a las muestras mezcladas.

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En la segunda parte de la experiencia, se obtuvo los siguientes resultados:
Al comienzo, el alcohol desciende
lentamente
pero
no
arrastra
significativamente a los colorantes.
El proceso fue lento, y la dispersin del
cromatograma fue ms compacta en
comparacin con el obtenido en el caso
del agua.
Una diferencia notoria fue que en el caso
del colorante azul utilizado como patrn.
En el agua
se observa cmo se separa en dos fases
notoriamente, mientras que en alcohol
esto no es muy notorio, el componente
rosado casi es imperceptible.
El color amarillo ascendi muy poco en el
alcohol.

CONCLUSIONES
-Las sustancias usadas en esta experiencia fueron colorantes alimentarios,
estos se separaron en mayor medida cuando el solvente fue agua, por lo
tanto, es muy probable que contengan agua o que sus componentes sean
solubles en agua.
-El proceso en alcohol, si bien fue ms lento, produjo cromatogramas de
tonalidades ms intensas, probablemente a que tuvo menor capacidad de
arrastre que el agua.

RECOMENDACIONES
-Los tubos de ensayos debes estar completamente secos y al agregar el
solvente con la piceta, tener mucho cuidado de no mojar las paredes.
-El rea de contacto entre el papel y el solvente debe ser pequea, porque
puede ocurrir que la muestra sea arrastrada hacia el solvente.
-La muestra debe aplicarse sobre la cara lisa del papel filtro.
-El papel filtro escogido para la prctica debe ser lo menos rugoso posible.

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APNDICE
Adsorbente:
Sustancia, generalmente slida y de estructura porosa,
con una gran capacidad de adsorcin.
Eluir:

Extraer, mediante un lquido apropiado, una sustancia del

medio slido que la ha absorbido.

Efluente:

Lquido que sale de un proceso.

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Laboratorio de Qumica Orgnica Cromatografa

BIBLIOGRAFA:
Libros:
-GERSHON J. SHUGAR; RONALD A. SHUGAR; LAWRENCE BAUMAN; ROSE SHUGAR
BAUMAN, CHEMICAL TECHNICIANS READY REFERENCE HANDBOOK, McGRAWHILL, SEGUNDA EDICION 1981, paginas 743 776.

Pginas web:
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia.html