Вы находитесь на странице: 1из 9

AO DE LA DIVERSIFICACION PRODUCTIVA Y EL

FORTALECIMIENTO DE LA EDUCACION

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA


FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

INFORME N,04: Mtodos de medios de cultivo de


microorganismos tcnicas de siembra

CURSO:

MICROBIOLOGIA

INTEGRANTES:
Espinoza Portocarrero Favio Omar

DOCENTE:

JULIA TICONA MICHILOT

FECHA DE ENTREGA: 21/10/2015

PIURA PER
2015
INTRODUCCION

En la naturaleza, la mayora de los microorganismos no se encuentran aislados, sino


integrados en poblaciones mixtas. Para llevar a cabo el estudio de estos
microorganismos y de sus propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar
con especies aisladas, obteniendo cultivos puros. Un cultivo puro es aquel que
contiene un slo tipo de microorganismo y que procede generalmente de una sola
clula; el crecimiento de sta origina, en medio slido, una masa de clulas fcilmente
visible que recibe el nombre de colonia. Para obtener cultivos puros a partir de una
poblacin microbiana mixta, se utilizan las denominadas tcnicas de aislamiento, que
fueron desarrolladas durante el siglo XIX. En un principio, Lister utiliz diluciones
seriadas en medio lquido con esta finalidad, pero la presencia de contaminacin, es
decir, de microorganismos no deseados, dificult el aislamiento. La escuela de Robert
Koch introdujo los medios slidos, complementados con agar, y las placas de Petri en
Bacteriologa, permitiendo as la separacin fsica de las colonias sobre la superficie
del medio de cultivo o en el interior del mismo. El aspecto de las colonias sirve para
diferenciar distintas especies microbianas.
Las bacterias se cultivan en el laboratorio en materiales nutritivos denominados
medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La eleccin del medio se
basa en el propsito del estudio. El material que se inocula en el medio se denomina
inculo. Cuando se inocula un medio como el agar nutritivo u otros medios con agar en
cajas de Petri, por el mtodo de siembra por estra cruzada en placa. Las clulas
quedan separadas individualmente. Durante la incubacin, las clulas microbianas
individuales se reproducen tan rpidamente que en un tiempo de 18 a 24 horas
producen masas visibles a simples vista, denominadas colonias. Cada colonia que se
observe diferente, presumiblemente es un cultivo puro de una sola clase de bacterias.
Si dos clulas microbianas procedentes del inculo original quedan muy cerca una de
la otra sobre el medio de agar, las colonias que resultan pueden quedar mezcladas o
muy juntas. La siembra por estra permite aislar las bacterias que dan lugar a colonias
separadas y posteriormente, transfiriendo una sola colonia a un medio nuevo, se
permite el desarrollo de un cultivo puro bacteriano. (Luis Roberto Alarcn, 2004).
El proceso de colocar las bacterias u otros microorganismos cultivables en medios de
cultivo, recibe el nombre de siembra; esta operacin la podemos realizar a partir de
muestras biolgicas o de un cultivo microbiano a otro, esto se hace con el fin de
reconocer la morfologa microscpica y macroscpica de estos microorganismos
incluyendo su comportamiento. Existen tcnicas adecuadas para realizar estos
cultivos, mediante el uso de algunos elementos importantes para realizar siembras
como: el mechero, el asa bacteriolgica (asa redonda), o micolgica (asa en punta),

los espacios adecuados, las condiciones aspticas y los medios de cultivos ya


preparados y atemperados a 37C. (Luis Roberto Alarcn, 2004).

MARCO TEORICO:
Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes
necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el
crecimiento de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas
plantas. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras
condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular
antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado slido,
semislido o lquido. El objetivo ltimo del cultivo es variado: antibiograma,
identificacin, multiplicacin.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin
de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio
de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe
estar exento de todo microorganismo contaminante.
Los virus, por ejemplo, son obligados parsitos intracelulares, por lo que necesitan un
medio que contenga clulas vivas.
Siembra
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra (inculo) en un
medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y
multiplicacin. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura
adecuada para el crecimiento. Las reglas fundamentales para efectuar la siembra
exigen:

Que se efecten aspticamente


Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estn esterilizados
Que se realicen solo los manipuleos indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un
mechero o bien Flujo laminar.

Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los requerimientos


del microorganismo a estudiar.

Medios slidos:
Siembra por inmersin: se coloca el inculo en una placa o caja de Petri y
sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este mtodo
se utiliza para microorganismos aerobios.
Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersin.
Una vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria
para cubrir la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este mtodo se
utiliza para microorganismos anaerobios facultativos y microaeroflicos.
Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo
fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inculo. Con ayuda
de una esptula de Drigalsky se extiende el inculo hasta su absorcin total por
el medio de cultivo. Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos

aerobios estrictos.
Siembra en estra: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo
fundido y se deja solidificar.

Existen distintas tcnicas para la siembra en estras, el objeto es obtener colonias


aisladas.

Siembra en agar en tubo inclinado o bisel: en este caso se colocan 5 ml de


medio de cultivo fundido y estril, se inclina el tubo y se deja enfriar.

El inculo se siembra, con ayuda de ansa, de la siguiente manera:

En profundidad con asa de punta


En superficie con asa de aro

OBJETIVOS
Ejecutar las tcnicas bsicas para el aislamiento de microorganismos en cultivo.

PROCEDIMIENTO
AISLAMIENTO DE COLONIAS POR AGOTAMIENTO:

1)
2)
3)
4)
5)
6)

Limpiar el rea 4x3 con algodn y alcohol.


Prender el mechero.
Flamear el asa en el mechero.
Flamear el frasco del microorganismo.
Sacar con el asa una porcin pequea de microorganismo.
Coger la placa Petri que contiene agar y hacer las estras.

AISLAMIENTO POR DILUCIONES SUCESIVAS Y RECUENTRO DE COLONIAS:


7) Agregar en un matraz 10 ml de agar y 90ml de solucin salina.
8) Agitar para que se mezcle.
9) Flamear el matraz y la pipeta.
10) Sacar con una pipeta 1ml de la muestra.
11) Sacarle el algodn al tubo de ensayo.
12) Agregar la muestra con cuidado en el centro del tubo de ensayo de agar
lquido.
13) Mezclar con cuidado para que no se moje el algodn
14) De este sacar 1ml del tubo I.
15) Agregar al tubo II.
16) Sacar un ml del tubo II y agregarla al tubo III.

AISLAMIENTO POR TRANSPLANTE:


Agar inclinado:
17) Flamear el asa.
18) Flamear el microorganismo.
19) Sacar una parte de microorganismo.
20) Hacer las estras en el agar inclinado que est en el tubo de ensayo en
medio slido.

Agar en columna:
21) Flamear el asa.
22) Flamear el microorganismo.
23) Sacar una parte de microorganismo.
24) Introducir el asa en medio del agar para que no se disperse por las paredes
del tubo y no puedan quedarse all.

Agar en medio liquido


25) Flamear el asa.
26) Flamear el microorganismo.
27) Sacar una parte de microorganismo.
28) Y agregarlo al agar liquido

Colocar en la cocineta para esterilizarlo y ver los microorganismos presentes.

RESULTADOS

DISCUSION

1. CUANDO TRABAJAS CON CULTIVOS MICROBIANOS PUEDES HABLAR SI


Y NO PORQUE?
No, porque el cultivo se contaminara de acuerdo a los resultados obtenidos en
la anterior prctica de laboratorio podemos decir que los medio de cultivo
constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microorganismos. La composicin precisa depender de la especie que se
quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varan considerablemente.
Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de
laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan
determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

2. DEBES TOCAR LAS CAJAS DE PETRI CON AGAR CON TUS MANOS?
Para tocar las placas de agar con las manos ests deben estar debidamente
protegidas con guantes de ltex para evitar la contaminacin del agar, y as
obtener un buen resultado de la siembra de los microorganismo
3. PUEDE ENCONTRAR ORGANISMOS EN EL AIRE?
Si, de toda clase de microorganismo entre ellos estn las esporas asperigillus,
esporas clandosporium, esporas alternaras, microccocus. etc.

CONCLUSIONES
En este laboratorio aprendimos cmo se realizaban los distintos tipos de siembra en
los cuales se aislaron los cultivos de bacterias y el hongo aspergillus a los cuales se
introdujo varias veces el asa en el agar haciendo piquetes o enredamientos del hongo
en los agares. Se concluye que cada una de estas bacterias tiene particularidades
diferentes debido a la observacin que se hizo de sus caractersticas macroscpicas,
luego se realiz su respectiva interpretacin teniendo en cuenta sus conceptos. Al final
se pudo identificar los tipos de asas al momento que se realiz la siembra.

BIBLIOGRAFA:

Jawetz E., etal. Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnicky Adelberg. Editorial


Manual Moderno, 19 a Ed. Mxico 2008; 702-703.

Caldas A. L., Gua de Microbiologa y Parasitologa bsico clnica. Disponible


en:
http://www.facultadsalud.unicauca.edu.co/Documentos2010/DptoMedInt/Tencio
n_de_gram.pdf.

Camacho, A., M.Giles, A.Ortegn, M.Palao, B. Serrano y O.Velzquez. 2009.


Tcnicas para el Anlisis Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de
Qumica, UNAM. Mxico.