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Introduccin
La Organizacin Mundial de la Salud define que la
diarrea es la segunda causa de morbilidad y mortalidad en menores de 5 aos, dentro de este grupo
de enfermedades se encuentran las producidas por
parsitos intestinales, principalmente protozoarios
intestinales, siendo los ms importantes Entamoeba
histolytica, Giardia lamblia y Cryptosporidium.
El diagnstico de infecciones parasitarias a menudo
es complicado, especialmente cuando el paciente
no proviene de zonas endmicas o no tiene muchos
factores de riesgo para adquirirlas. Dentro de la
gran variedad de parsitos que afectan a nios, los
protozoarios intestinales suelen ser de difcil identificacin debido a factores como variaciones en
la cantidad eliminada de sus formas de resistencia
(quistes) o la deteccin de los trofozoitos no es posible por que las muestras no llegan a laboratorio en
buenas condiciones.
La eosinofilia frecuentemente es considerada como
indicador de parasitosis, pero esta se presenta en infecciones por helmintos, pero son pocos los protozoarios que se relacionan con la misma; este es un
motivo ms por el que surge la necesidad de contar
con pruebas ms orientadoras.
Las tcnicas de diagnstico parasitolgico para protozoarios intestinales pueden dividirse en directas e
indirectas. Las directas permiten observan al par*
Criptosporidiosis
Es una infeccin producida por un protozoario coccidio, del gnero Cryptosporidium, que afecta al
aparato digestivo de varios vertebrados incluido el
hombre, ocasionalmente encontrado en el epitelio
respiratorio. (Ver figura #1).
Giardia Lamblia y Cryptosporidium son parsitos
protozoarios muy frecuentes en nios y pueden aparecer en brotes de infecciones intestinales, general-
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Ciclosporiosis
Es la infeccin por un coccidio, Cyclospora cayetanensis causante de un sndrome diarreico prolongado en pacientes inmunocompetentes e inmunocomprometidos. (Ver figura # 2).
Este sndrome diarreico ha sido descrito acompaado de anorexia y gran astenia en pacientes inmunocompetentes. Hasta el momento no se conoce completamente el ciclo evolutivo, tiene caractersticas
similares al Cryptosporidium, principalmente por
su apetencia la tincin de Ziehl Nieelsen, pero el
ooquiste (forma infectante) tiene 2 esporozoitos y
2 esporoquistes adems de ser de mayor tamao (8
a 10 m).
Afecta principalmente al duodeno distal, provoca
inflamacin y atrofia de las vellosidades de la zona
adems de hiperplasia de las criptas.
Caractersticamente el paciente presenta fiebre de
ms o menos dos das de duracin, seguido de evacuaciones lquidas explosivas (5 a 7 diarias), anorexia, nuseas, dolor abdominal intenso, vmitos
ocasionales y gran astenia. La diarrea suele durar
3 a 4 das, cede espontneamente durante algunos
das y se repite nuevamente toda la signo-sintomatologa.
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Blastocistosis
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Cultivo
El cultivo de protozoarios intestinales es poco frecuente por las elevadas exigencias del parsito, que
encarecen el estudio y no todos los laboratorios implementan el mismo como prueba habitual. En caso
de requerirse y de contar con todos los medios se logra
el desarrollo de Entamoeba histolytica, Trichomona
vaginalis, Acanthamoeba y Naegleria sp. Los medios
mas utilizados son el de Robinson y el polixnico.
En el cuadro # 1, se describen las distintas tcnicas
de recleccin de muestras para estudios parasitolgicos directos.
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Tcnica
Parsitos
Perianal
Cinta adhesiva
Enterovius vermicularis
y progltides de Tenia
Recto
sigmoides
Duodeno
Aspirado
duodenal
Giardia lamblia,
Isospora,
Cryptosporidium, larvas
de Strongyloides
Hgado
Aspirado
de absceso
heptico
Entamoeba hystolitica
Boca
Entamoeba histolytica,
Recoleccin de Cryptosporidium, larvas
esputo
de Strongyloides y
Ascaris
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tico ms preciso, permite establecer incluso diferencias de un nucletido entre genotipos del parsito,
determinando as si se trata de un caso aislado o de
un brote al comparar los agentes aislados en infecciones similares, situacin que antes era muy difcil
en el caso de protozoarios por la dificultad para obtener desarrollo en cultivos de alta exigencia.
Las posibilidades de establecer el diagnstico definitivo aumentan de manera exponencial al sumar
ms de una prueba directa e indirecta.
En el cuadro # 2, se describen los mtodos para el
diagnstico de las parasitosis intestinales ms frecuentes en pediatra.
OPCIONES
PARA OBTENER
MUESTRAS
METODOS DE
RECOLECCION Y
CONSERVACION
PROCEDIMIENTO
DIAGNOSTICO
Heces frescas
Heces preservadas
Sigmoidoscopa
Suero
Giardia
Heces frescas
Heces preservadas
Aspirado duodenal
Biopsia
Suero
Cryptosporidium
Heces frescas
Heces preservadas
Biopsia
Microsporidium
Heces frescas
Heces preservadas
Aspirado duodenal
Biopsia
Suero
Aspirado
Biopsia
Suero
Conservacin
de muestras
en alcuotas
separadas
Frotis en fresco
Tincin tricrmica
Serologa por ELISA
Esputo
Aspirado bronquial
Biopsia
Recoleccin de
muestras en
alcuotas sin
conservantes
Frotis en fresco
Tincin tricrmica
Serologa por ELISA
HIGADO
Entamoeba histolytica
PULMONES
Entamoeba histolytica
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muestras con un intervalo de 2 a 3 das, con un mximo de 10 das entre las tres. Pueden ser recolectadas
sin conservante, pero el uso de formol o alcohol polivinlico puede aumentar la sensibilidad al preservar
la muestra enviada a laboratorio. En fase temprana de
la enfermedad puede resultar en falsos negativos.
String test o prueba de la cuerda o de la cpsula de gelatina: una vez que llega al duodeno donde
permanece 40 minutos, se recoge la misma y se examina su extremo en busca de trofozoitos.
Aspirado y biopsia duodenal mediante endoscopa: en busca de trofozoitos.
Deteccin del antgeno especfico GSA-65 por ELISA, este es un glucopptido producido por el parsito en duodeno, tiene una sensibilidad del 93% y
especificidad del 99% (16,20)
Inmunofluorescencia con anticuerpos policlonales
de inmunoenzimoensayo: usado para detectar antgenos en heces fecales. No es utilizado en nuestro medio
por los elevados costos por prueba.
En busca de anticuerpos especficos para Giardia,
se realizaron estudios mediante radioinmunoensayo (RIA), pero los hechos mediante la tcnica de
ELISA tienen mayores ventajas incluso para hacer
efectivo el estudio una vez que no utilizan radioistopos, por lo tanto son ms fciles de realizar y
ms econmicos.
La prueba ELISA en el caso de infecciones por
Giardia ha demostrado tener una sensibilidad del
99,2% y una especificidad de 98,2%.
Reaccin en cadena de la polimerasa sirve para
identificar (con el fin de encontrar) el ARN o el
ADN del parsito, con una sensibilidad del 91% y
una especificidad del 99%.
3. Cryptosporidium
Examen coproparasitolgico: No es de utilidad por
las caractersticas tintoriales del parsito, se debe
sospechar de su presencia cada vez que se encuentran quistes o trofozoitos de Giardia lamblia, por su
frecuente asociacin que puede llegar al 61%.
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Tcnica de la D-xilosa: es positiva debido al aumento del contenido de grasa en heces fecales, provocado por las lesiones producidas a nivel duodenal por
el parsito.
Biopsia intestinal: nos da el diagnstico de certeza,
ms cuando encontramos basfilos en el borde en
cepillo.
Tincin de Ziehl Nieelsen modificada: muy til para
encontrar ooquistes del parsito que generalmente
son eliminados en heces fecales, tiene como desventaja que requiere que el microscopista sea experimentado. Se realizaron estudios en los que se
compar a esta tincin con la de hematoxilina frrica, demostrndose que en manos expertas puede
tener una sensibilidad de hasta 90% y una especificidad del 92%.
La Reaccin en Cadena de la Polimerasa, demostr
tener una sensibilidad del 94% y una especificidad
del 100% (16), gracias a este estudio se pudieron
establecer los dos genotipos del parsito: Genotipo
1, recientemente denominado Cryptosporidium hominis y el genotipo 2, conocido como Cryptosporidium parvum.
microscopista experimentado.
Tincion de Kinyoun: de utilidad por las caractersticas tintoriales (cido alcohol resistente).
6. Blastocystis hominis
Examen coproparasitolgico: requiere experiencia
del microscopista, se aumenta la sensibilidad de la
prueba cuando las heces son enviadas con un conservante como alcohol polivinlico, no as con formol
debido a que altera la forma vacuolar del parsito,
por lo que tampoco se recomienda realizar pruebas
de concentracin que usen este reactivo.
Referencias
1. Guy R, Payment P, Krull U, Horgen P. Real-time PR
for quantification of Giardia and Cryptosporidium en
environmental water samples and sewage. Applied
and Enviromental Microbiology 2003;69:5178-85.
2. Khan U, Samantaray M, Sharma M. Detection of Entamoeba histolytica using polymerase chain reaction
in pus samples from amebic liver abscess. Indian Journal of Gastroenterology 2006;25:55-7.
3. Kucik C, Martin G. Common intestinal parasites.
American Family Physician 2004;69:1161-8.
Coproparasitolgico: si se realiza con lugol o solucin fisiolgica, no es de utilidad por las caractersticas tintoriales del parsito.
4. Isospora belli
5. Ciclospora cayetanensis
Coproparasitolgico: no es de utilidad por las caractersticas tintoriales del parsito.
Tincin de Ziehl Nieelsen modificada: de utilidad
una vez que permite ver al parsito, requiere de un
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