16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

RevistaColombianadeEntomologa
PrintversionISSN01200488

Rev.Colomb.Entomol.vol.30no.1BogotJan./June2004

ServicesonDemand
Article
Articleinxmlformat

Articlereferences

Caracterizacindeprototiposdebioplaguicidas
granuladosabasedeMetarhiziumanisopliaepara
elcontroldeAncognathascarabaeoides
(Coleptera:Nelolonthidae)
Characterizationofgranularbiopesticideprototypes
basedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolof
Ancognathascarabaeoides(Coleptera:Melolonthidae)

PAULAMARINO1,LAURAVILLAMIZAR2,CARLOSESPINEL3,ALBA

Howtocitethisarticle
Automatictranslation
Sendthisarticlebyemail
Indicators
CitedbySciELO
Accessstatistics
Relatedlinks
Share

MARINACOTES4
1MicrobilogaIndustrial.PontificiaUniversidadJaveriana.
2Qumicafarmacutica.M.Se.InvestigadoraLaboratoriodeControlBiolgico.
CORPOICA.C.I.Tibaitat.Email:laurafernandav@yahoo.es

More
More
Permalink

3B.Sc.Investigador.LaboratoriodeControlBiolgico.Corpoica.C.I.Tibaitat.
Email:cespinel@yahoo.com
4Autorparacorrespondencia:Ph.D.Fitopatologa.InvestigadoraPrincipal.LaboratoriodeControlBiolgico.Corpoica.
C.I.Tibaitat.Km.14vaMosquera.Telfono3443156.Email:acotes@corpoica.org.co

Resumen.LaespecieAncognathascarabaeoidesesuncolepterocuyaslarvasrizfagaspuedencausar

daosencultivosdefrjol,maz,cebolla,arracachaypapa,entreotros.Ocasionaprdidasentreel10yel80%
deltotaldelcultivo.Parasucontrolseutilizanmtodosculturalesyprincipalmentemtodosqumicos,mediante
productosaltamentetxicos.Antelosaltoscostoseconmicosyambientalesqueocasionaelusodeestos
productos,setienecomoalternativapromisoriaelusodeinsecticidasbiolgicosabasedehongos
entomopatgenostalescomoMetarhiziumanisopliae.DadoquemedianteinvestigacionespreviasenCorpoicase
seleccionunacepadeestehongo(Mt020)conunaactividadbiocontroladoradel76,6%contraA.
scarabaeoides,constasedesarrollarontrespreformuladosdepresentacingranularparaaplicacinalsuelo.
Porestosetuvocomoobjetivodeterminarsuscaractersticasfsicas,microbiolgicasysuactividad
biocontroladora.Paratalfin,lacepaseprodujomasivamenteyseformularontresgranulados(GR1,GR2,y
GR3)diferentesentresenlosquesevariaronsuscomponentesysusconcentraciones.Acadagranuladosele
determineltamaodepartcula,voluminosidad,porosidad,fluidez,humedadypHascomolaconcentracin
enconidios.g1ylaviabilidadexpresadacomoUFC.g1.Losprototiposyelprincipioactivosealmacenarona
trestemperaturas(8,18y28C)ymensualmenteseevalulaviabilidaddelhongo.Laactividad
biocontroladorasedeterminmediantebioensayosrealizadosencasademalla.Deacuerdoconlosresultados
obtenidos,seseleccionelgranuladoGR1portenercaractersticasfsicasadecuadas,convaloresigualeso
inferioresaloslmitesptimosparacadaunadeellas.Present0,31%depolvosfinos,esdecirqueelgranulo
noesdeconsistenciafrgil3,44ml.g1devoluminosidad,loqueestablecequenopresentarproblemasde
manipulacin18%deporosidad,esteporcentajeindicaraqueelgranulopodraresistirlamanipulacinsin
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

1/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

manipulacin18%deporosidad,esteporcentajeindicaraqueelgranulopodraresistirlamanipulacinsin
fracturarsetambinsepudoestablecerqueelproductofluyefcilmente(ngulodereposo27,2),en
consecuencianopresentaraproblemaenelllenadoyempaquedecantidadesgrandes.Poseeunahumedadde
9,7%,loquegarantizalareduccindeprocesosmetablicos,ypHde5,5.Adems,laprdidamximade
viabilidadalastrestemperaturaspresentadadurantelosseismesesdealmacenamientofuede20,7%y
produjonivelesdemortalidaddelaplagapromisoriosyestablesllegandohastael43%.

Palabrasclave:Preformulacin.Granulado,Chiza.Controlbiolgico.
Summary.ThespeciesAncognathascarabaeoidesisacoleopteranwhoserhizophagouslarvaecancause

damageinbean,maize,onion,andpotatocrops,amongothers.Itcauseslossesbetween10and80%ofthe
totalcrop.Culturalmethodsandespeciallychemicalmethodswithhighlytoxicinsecticidesareusedforits
control.Consideringthehigheconomicandenvironmentalcostscausedbytheuseoftheseproducts,a
promisingaltemativeistheuseofbiologicalinsecticidesbasedonentomopathogenicfungilikeMetarhizium
anisopliae.QivingthatinpreviousresearchatCorpoica,astrainofthisfungus(Mt020)wasselected,duetoits
biocontrolactiviryof76,6%againstA.scarabaeoidesthreegranularbiopesticideprototypesweredevelopedfor
soilapplication.Thereforetheobjectiveofthisworkwastodeterminetheirphysicalandmicrobiological
characteristics,andbiocontrolactiviry.Forthispurpose,thestrainwasmassproducedandthreedifferent
granulars(GR1,GR2,andGR3)thatvariedincomponentsandconcentrationswereproduced.Foreachgranular
theparticlesize,voluminosity,porosiry,fluidity,humidityandpHweredeterminedaswellastheconcentration
inconidia.g1andtheviabilityexpressedasUFC.g1.Theprototypesandtheactivesourcewerestoredatthree
temperatures(8,18and28C)andtheviabilityofthefunguswasevaluatedmonthly.Thebiocontrolactivity
wasmeasuredinbioassayscarriedoutinthescreenhouse.Accordingtotheresultsobtained,thegranularGR1
wasselectedbecauseofitsappropriatephysicalcharacteristics,whichwereequalorinferiortotheoptimal
limitsestablishedforeachofthem.Ithad0,31%finepowder,whichmeansthatthegranuleisnotfrage3,44
ml.g1ofvoluminosityestablishingthatitwillnothavemanipulationproblems18%porosity,thissmall
percentageindicatesthatthegranulecanresistmanipulationwithoutfracturingitwasalsoestablishedthatthe
productflowseasily(angleofrepose27,2),andsoitwillnotpresentproblemsinthefillingandpackingof
largequantities.Ithad9,7%humidity,whichguranteosthereductionofmetabolicprocesses,andpHof5,5.In
addition,themximumlossofviabiliryatthethreetemperaturespresentedoverthesixmonthsofstoragewas
20,7%,anditproducedpromisingandstablelevelsofpestmortalityofupto43%.

Keywords:Preformulation.Granular.Whitegrub.Biologicalcontrol.
Introduccin
Dentrodelasplagasquecausaneldaomayorenextensaszonasdecultivosendiferentesdepartamentosdelpas
seencuentralachizaomojojoy.Esteesuninsectocuyoestadolarvalatacaelsistemaradiculardefrjol,maz,
pastos,zanahoria,cebolla,flores,papa,esprragos,entreotroscultivos(Londoo1998).
ElcomplejochizaenColombiaabarcaungrannmerodeespecies.Lasespeciesdechizapredominantesparecen
estarrelacionadasconlaalturasobreelniveldelmar,esascomoaaltitudessuperioresa2.500metrospredominael
gneroAncognatha,condominanciadelaespecieAncognathascarabaeoidesErichson(Coleptera:Scarabaeoidea
Melolonthidae).Estaespecieseencuentraampliamentedistribuidaenioscultivosdetierrafrayenlasregionesaltas
declimamedioenColombia(Alvarado1977).Desdehacealgunosaossevienenaumentandolosnivelesde
poblacindeesteinsecto,locualesatribuidoalusoindiscriminadodeplaguicidasyacambiosenelmedioambiente,
queafectanlosfactoresderegulacinnaturalbiticosyabiticos,favoreciendodeestemodoelaumentodela
poblacindelinsecto(Londoo1998).Lasprdidasocasionadasporestaespeciesonconsiderables,ylleganhastael
100%enalgunoscultivoscomofresa,hortalizasyflores(Rodrguez1997).Paraelcontroldeesteinsecto,sehan
venidoutilizandomtodosculturales,talescomolarotacindecultivosylasaradasprofundas,sinobtenerresultados
satisfactorios(Alvarado1977).
Sinembargo,anivelnacional,comnmentesehanutilizadoplaguicidasqumicos,variosdeloscualessonproductos
altamentetxicos,eselcasodeCarbofurn,DiazinonyHostation,entreotros(Orellana1983).Estosproductos,
ademsderepresentarcostoseconmicosaltospuedencausarproblemasdeequilibrioenlosecosistemasincidiendo
negativamenteenelcontrolejercidoporenemigosnaturales(Rodrguez1983).Elusodedichosinsecticidasen
Colombiatienenuncostoaproximadodemediobillndedlarescadaaorepresentandosolamenteun5%dela
inversinrealizadaenagentesmicrobianosdecontrol(GmezyVillamizar1996).
Unaalternativapromisoriaparaelcontroldeestaplagaeslautilizacindemtodosbiolgicos(Rodrguez1983),
debidoaquesuusohatenidonotableimpactoenlosltimosaosespecialmenteencultivosperennes.Estas
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

2/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

alternativasbiolgicasincluyenelusodedepredadores,parasitoidesymicroorganismosentomopatgenos(Londoo
1998).
Anivelmundialsehanutilizadoconxitomicroorganismosentomopatgenosparaelcontroldeestaplaga,tales
comoMetarhiziumanisopliae,BeauveriabassianaybacteriascomoBacilluspoplaequecausaunaenfermedad
denominadamuertelechosa(LondooyRos1997).Porsuparte,loshongosentomopatgenostalescomoM.
anisopliaepenetranenelhospederodirectamentedegradandosucutculaynonecesitanseringeridos,presentan
msespecificidadquelosqumicos,crecenfcilmenteensustratossimplesyeconmicoshaciendofactiblesu
produccinmasivaconcostosbajosy,hastaelmomento,noseleconocenefectosadversossobreelambiente,los
animalesyelhombre(GalnyTmez1993).
Existendiferentestiposdepresentacinparalosbioinsecticidasdeaplicacinalsueloysudiseodependedelos
hbitosydelcomportamientodelaplagaobjetodecontrol(Gmezetal.1997).Algunostiposdeformulaciones
existentesparadichosbioinsecticidasson:polvosparaespolvoreo,polvoshumectables,lquidosemulsionadlesy
granuladosestosltimospresentanmayorfacilidadensumanipulacinyaplicacinalsuelo,yaquepermitenqueel
productoentreencontactodirectoconplagasdehbitorastreroyfavorecenladiseminacinypersistenciadel
biocontroladorenelsuelo(Gmezetal.1997).Sinembargo,paralaformulacindeunbioplaguicidadeaplicacinal
suelodestinadoalcontroldeplagastalescomoA.scarabaeoides,sedebentenerencuentalascondiciones
ambientalesenlascualesseencuentraelcultivo.Porlotanto,sehacenecesarioquelaformulacingaranticela
absorcindelahumedaddelmedioambiente,parafacilitarlagerminacindelmicroorganismoyconferirleasteun
sustratoadecuadoparasuestablecimientoenelsuelo.Igualmenteesimportantetenerencuenta,quela
formulacin,especialmentesiesungranulado,poseacaractersticasfsicasadecuadas,talescomofluidez,
humectabilidad,tamaodepartcula,voluminosidad,humedadypH(ICONTEC1992,1998).Dichascaractersticas
puedengarantizarlaviabilidaddelmicroorganismoencondicionesdealmacenamientoypermitendetectarsilos
granuladospresentanproblemas,yaseaporsudifcilmanipulacinopordificultadesenlosprocesosdellenadodelos
recipientesenquesealmacena(VoightyBorns1979).
EnColombialaproduccindebioplaguicidasesrealizadaenmuchoscasosenformaartesanal,sinestudiosque
respaldenlautilizacindecepasconactividadbiocontroladoraalta.Algunosdeestosproductoscarecendeuna
caracterizacinadecuadaqueaseguresuefectividadycumplimientodelasespecificacionesdelaetiquetaporlo
tanto,elobjetivodelpresentetrabajofueeldedeterminarlascaractersticasfsicas,microbiolgicasylaactividad
biocontroladoradepreformuladosgranuladosabasedeM.anisopliaeparaelcontroldelachizaA.scarabaeoides.

MaterialesyMtodos
EnelpresenteestudioseutilizlacepadelhongoentomopatgenoMetarhiziumanisopliaeMt020,provenientede
Envigado(Antioquia),aisladadirectamentedelarvasdeAncognathascarabaeoides.Estacepafuesuministradaporel
CentrodeInvestigacionesLaSelvadeCorpoica.
Conelpropsitodemantenerelmaterialbiolgico,lacepaseincorporalBancodeGermoplasmadelLaboratoriode
ControlBiolgicodeCorpoicaC.I.Tibaitat,envialesconAgarPapaDextrosa(PDA)aunatemperaturade4Cy
antesdeserutilizadaenlosensayosbiolgicosfuereactivadaenlarvasdetercerinstardeA.scarabaeoides.
Produccinmasivadelprincipioactivo.LaproduccinmasivadelprincipioactivoMetarhiziumanisopliae(cepa
M1020),paralaposteriorformulacindelosgranulados,serealizenbandejasdealuminiode20cmdelargopor14
cmdeanchoy3cmdeprofundidadquecontenan34gdesalvadoy150mideextractodearroz.Lasbandejasse
cubrieronconpapeldealuminioyseesterilizarondurante20minutos.Posteriormente,cadabandejaseinoculcon5
mideunasuspensindeM.anisopliaequecontena107conidios.ml1ysecubrieronconunalminaplstica
permeablealgasparaevitarposiblescontaminacionesyparapermitirintercambiodegases,facilitandoelcrecimiento
delhongo.Estasbandejasseincubaronenuncuartodecrecimientoconluzconstantey:conuntemperaturade25C
durante15das.Alcabodeestetiempoelplsticoquecubralasbandejassecambiportoallasdepapel,para
permitirunmejorintercambiogaseosoconelfindeiniciarelprocesodesecadodelprincipioactivo,elcualselleva
caboenunaestufaconcorrientedeaireaunatemperaturade28Cdurante2das.Unavezquelabiomasase
encontrseca,semoliyfuepasadaporunamallade100micrmetrosparaobteneruntamaodepartcula
adecuado.
Preparacindelosexcipientesyprocesodeformulacindelosgranulados.Losexcipientessemezclaronconel
principioactivodeacuerdoconlascomposicionesindicadasenlatabla1.Unavezseobtuvounamasauniforme,sta
segranulporextrusinatravsdeunamallaconuntamaodeporode1mmaproximadamente.Posteriormente,los
granuladossesecarondurantedosdasa28Cenunestufaconcorrientedeaireposteriormente,seregranularon
paraobteneruntamaodepartculauniforme.
Caracterizacinfsicadelosgranulados.Seevaluaronlaspropiedadesfsicasdevoluminosidad,fluidez,tamaode
partcula,porosidad,humedadypH.
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

3/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

Ladeterminacindeltamaodepartculasellevacabomediantelatcnicadegravimetra(VoightyBorns1979).La
determinacindelavoluminosidadserealizporelmtododepesoconstantevolumenvariable(VoightyBorns
1979).Paradeterminarlaporosidadsepesaron25gramosdecadaunodelosgranuladosysecolocaronenuna
probeta,seleyelvolumenocupadoporelmaterial(VI)yposteriormente,seapisonelmateriallevantandola
probetahastalaalturamximapermitidaydejndolacaerlibrementesobreunabasedemadera,estaoperacinse
repitihastaelmomentoenquenosepresentvariacinenelvolumendadoporlaprobeta(Vf).Laporosidadse
calculutilizandolafrmulamatemtica:Porosidad=1(a/v),endondeaesladensidadglobaldelamuestra(W
muestra/V1)yvesladensidadrealdelamuestra(Wmuestra/Vf)(VoightyBorns1979).

Lafluidezsedeterminporelmtododefluidezesttica(VoightyBorns1979Helman1982,ICONTEC1992).La
determinacindelporcentajedehumedadserealizporelmtododeprdidadepesoporsecado(USPXXIII1995).
ParaladeterminacindelpH,serealizunasuspensin1:10P/Vdecadagranuladoenaguadestiladaysemidiel
pHconunpotencimetroColParmer,previamentecalibrado(CENICAF1996).
Eldiseoexperimentaldetodaslaspruebasdecaracterizacinfsicafuecompletamentealazar,contresrepeticiones
paracadagranulado,utilizandounasolarplicaatravsdeltiempoporserslounlotedeproduccin.Conlos
resultadosobtenidosfueposibleestablecerloslmitesptimosdeaceptacinparacadaunadelascaractersticasde
losdiferentesgranulados.
Caracterizacinmicrobiolgicadelosgranulados
Concentracinyviabilidad.Enladeterminacindelaconcentracinexpresadacomoconidios.g1decadaunode
losgranuladossequisoasegurarladesintegracindelosgranulosyunamejorobtencindeconidios,porloquese
pesungramodecadaunodelosgranulados,elculfuehomogeneizadoen2.000mideaguadestiladaduranteun
minuto.Posteriormente,sellevacabolacuantificacindeconidiosencmaradeNeubauer.
Laviabilidadsedeterminrealizandodilucionessucesivasentubosquecontenan9mideTWeen80al0,1%,
posteriormente,seinocularon0,lmldelasdiluciones106,107y108encajasdePetriquecontenanAgar
SaboureaudRosadeBengala(SBR).Estascajasfueronincubadasdurante8das,tiempodespusdelcualserealiz
elconteodelasunidadesformadorasdecolonia(UFC),expresandofinalmentelosresultadoscomoUFC.g1de
granulado.
Estabilidadmicrobiolgicadelosgranulados.Paraevaluarelefectodediferentestemperaturasde
almacenamientosobreelhongo,serealizunensayodeestabilidaddelosgranuladosatrestemperaturas(8,18y
28C)duranteseismeses,paralocual,sealmacenaronmuestrasde0,1gdecadagranuladoy0,1gdeltratamiento
controlqueconsistienprincipioactivopuro(Metarhiziumanisopliae),envialesestrilesselladoscontapnyagrafe,
cadamesdealmacenamientosetomunamuestrayseevalulaviabilidaddecadaunodelosgranuladosmediante
latcnicadescritapreviamente.
Actividadbiocontroladoradelosgranulados.Laevaluacindelaestabilidadbiocontroladoradecadaunodelos
granuladossobreelinsectoblancoserealizpormediodeunbioensayorealizadobajocondicionesdecasademalla
aunatemperaturade25Cyunahumedadrelativadel80%enpromedio.
Eldiseoexperimentalfuecompletamentealazar,yseutilizaronseistratamientos,cadaunocontresrepeticionesy
11individuosporrepeticin.Lostratamientosconsistieronenlostrespreformuladosgranuladosporevaluar(TI,T2,
T3),elhongosinformular,esdecir,elprincipioactivo(T4),eltestigotratado(T5),elcualconsistienunaformulacin
delgranuladosinprincipioactivoutilizandotodoslosexcipientesconelfindeverificarquestosnoprodujeranla
muertealinsectoyeltestigoabsoluto(T6).Laslarvasserecolectaron15dasantesdeliniciodelbioensayose
trasladaronalacasademallayseubicaronencubetasconsueloysuministrodealimentoconelpropsitode
brindarlesuntiempoparasuadaptacinalascondicionesexperimentales.

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

4/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

Cadaunidadexperimentalconsistienunacubetaplsticade38cmdelargo,28cmdeanchoy15cmde
profundidad,enlacualsecolocaron5kgdesuelotamizado,incorporandolacantidaddeterminadadecadaunodelos
granuladosparaajustarencadacubetaeldobledelaCL50(1,58x107conidios.g1desuelo)determinadaparaesta
cepaenestudiospreliminaresrealizadosenelLaboratoriodeControlBiolgicodeCorpoica.Posteriormente,se
ubicaronencadacubeta11larvasdetercerinstardeA.scarabaeoides,debidoqueenensayospreviosseestableci
estenmerodeinsectoscomoeladecuadoparaevitarunasobrepoblacinqueacarrearaunposibleataqueentre
ellas.EncadacubetaseubicuncespedndepastoKikuyo(Penisetumclandestinum)comosoporteparala
alimentacindelosinsectosduranteelbioensayo.
Serealizelregistrodemortalidaddelarvasaldaseisyalda12deliniciodelbioensayoyapartirdeesteltimo,
cada10das.Laslarvasmuertassesometieronacmarahmeda,queconsistieronencajasdePetriestriles,que
tenanensubaseunatoalladepapelhmeda,lacualsecambiabatodoslosdasconelfindeevitarcontaminacin.
Lascajassemantuvieronaunatemperaturapromediode18Cconelpropsitodeevidenciarlaesporulacintpicade
esteentomopatgeno.
LosresultadosnetosdemortalidadsecorregieronconeltestigomediantelafrmuladeSchneiderOrelli(Ciba
Geygi1973):
Porcentajedeeficacia=((bk)/(100k)x100
Dondebequivalealporcentajedeindividuosmuertoseneltratamientoykequivalealporcentajedeindividuos
muertoseneltestigo.
Adicionalmente,estosresultadossesometieronaunanlisisdevarianzayacomparacinmltipledemediasde
Tukey,conelfindeevidenciardiferenciassignificativasentrecadaunodelostratamientos.

ResultadosyDiscusin
Produccinmasivadelprincipioactivo.Enelmediodecultivoutilizado(salvadoextractodearroz),elhongoformun
miceliofirmeydecolorblancoqueseevidencialoscuatrodasdeincubacin,elcualsefuetornandoverdeoscuroa
medidaqueseproducalaesporulacin,lacualseempezaobservarapartirdeldcimodadeincubacin.
Posteriormente,fuetomandounaaparienciapolvosayaldcimoquintodadeincubacinsesuspendilamisma,ya
quetodoelmedioestuvocolonizadoyconunaabundanteproduccindeconidios.Lasbandejasfueronsecadasy
molidas.Unavezseobtuvoelprincipioactivopuro(medioconelhongo),despusdelosprocesosdesecadoy
molido,sedeterminlaconcentracinyviabilidaddelmismo,siendolaprimerade1,7x1010conidios.g1ylasegunda
de3,5x1011UFC.g1.Esimportanteresaltarquelaproduccinmasivaserealizensalvadodetrigo,yaqueeste
sustratotieneunefectoinductordelavirulenciadeM.anisopliae(Villamizar1998).
Caracterizacinfsicadelosgranulados.Seevaluaronlaspropiedadesfsicasdevoluminosidad,fluidez,tamaode
partcula,porosidad,humedadypH.
TamaodePartcula.Enelprocesodeproduccindelosgranulados,setuvieronencuentadosetapasindispensables
paralaobtencindeuntamaodepartculauniforme,losprocesosdegranulacinyregranulacin.
Losresultadosdetamaodepartculadelosgranuladosfueronobtenidosmediantelatcnicadegravimetra(Tabla
2),seanalizaronmedianteunadistribucindefrecuencias,encontrndosequeparalostresgranuladoselporcentaje
mayordepesoretenidoseobtuvoeneltamiz18contamaodeporode0,84mm,conporcentajesde88,3,86,5y
87,1%paralosgranuladosGR1,GR2yGR3,respectivamenteporotraparte,losporcentajesdepesoretenidoenel
tamizinmediatamenteanterior(10),elcualtieneuntamaodeporode1,42mmfuerondel0,22,0,13y0,77%para
losgranuladosGR1,GR2yGR3,respectivamenteporconsiguiente,estosdatospermitenafirmarquelamayGR1ade
laspartculasdelostresgranuladosseencuentranenunrangodetamaodepartculaentre0,84mmy1,42mm.

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

5/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

Valencia(2000)encontr,paracuatropreformulacionesgranularesabasedelhongoentomopatgenoBeauueria
bassianaparaelcontroldelgusanoblancodelapapaPremnotrypesvorax,untamaodepartculaentre1,5mmy2
mmyalserevaluadasuactividadbiocontroladora,losporcentajesdecontrolfueron100,100,96,5y89,6%,
indicandoquedichotamaofueadecuadoparaestetipodeproductos.LosgranuladosdeWetarMziumanisopliae
tienenuntamaodegranulomenoralobtenidoporValencia,locualpodramejorarelcubrimientoydistribucindel
productoenlaaplicacin,repercutiendodirectamentesobrelaactividadbiocontroladora.Adems,lospreformulados
granuladosdeM.anisopliaepresentaronunatamaodepartculasimilaraladelbioplaguicidacomercialBIO1020
(0,8mm)abasedeM.anisopliae,indicandoquelosgranuladosdesarrolladosposeencaractersticasadecuadaspara
estetipodeformulacionesdeaplicacinalsuelo.
Deacuerdoconlosresultadosobtenidosencuantoalaproporcindepolvosfinosdecadaunodelosgranulados,se
presentaronporcentajesmuybajosconvaloresde0,31,0,25y0,11%respectivamente,paralosgranuladosGR1,
GR2yGR3indicandoqueningunodelospreformuladosposeeunaconsistenciafrgilenelgranulo,posiblemente
debidoaqueenelprocesodemanufacturaseutilizlacantidadyconcentracinadecuadadeagenteaglutinante,
logrndoseunaadhesinaltadelaspartculas.Adems,losgranuladoselaboradosmediantelatcnicadeextrusin
manualtiendenapresentarunadurezaaltayporlotantofragilidadbaja,poresto,seesperaquelosgranuladosno
presentenproblemasenelproductoterminadocuandoseaalmacenadoporperodosdetiempoprolongados,
evitndosesucompactacinenlabase,loqueimpediraelflujolibredelproductoylautilizacintotaldelmismo
(Morales1993).
Adicionalmente,lapresenciabajadepolvosfinosenlosproductosaseguranqueunamayorcantidaddelosmismos
lleguenalsitioblanco,yaqueelgranuloporsupeso,caedirectamenteenelsitiodeaplicacin,mientrasquelos
polvosfinossonarrastradosporelvientoyademspodranocasionarobstruccindelasvasrespiratoriasdelas
personasquemanipulanelproductoensumanufacturayaplicacin(Valencia2000).
Voluminosidad.LosgranuladosGR1,GR2yGR3presentaronunavoluminosidadadecuada,convaloresde3,44,3,25
y3,6ml.g1respectivamente(Tabla3),yaquenofueronsignificativamentediferentesdellmitemximoparadicho
parmetro,elcualdebeserde3ml/gparaquelosmaterialesnopresentenproblemasdurantelamanipulacin
(Martn1967).Resultadoquepermitesugerirqueposiblementeningunodelostresgranuladospresentarproblemas
enlosprocesosdellenadodelosrecipientes,mezclaytransportedelproductoterminadoaescalaindustrial.

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

6/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

Valencia(2000)obtuvovoluminosidadesde1,68,1,65,1,86y1,65ml.g1paracuatrogranuladosabasedeB.
bassiana,debidoaqueutilizexcipientesyprincipioactivo(arrozesporuladoymolido)convoluminosidadbaja.Sin
embargo,apesardehaberusadoparalosgranuladosdeM.anisopliaeexcipientesdebajavoluminosidad,elprincipio
activoesunhomogeneizadodelmediodecultivoesporulado,elcualestconstituidoensumayGR1aporsalvadode
trigoqueporserunmaterialmuyvoluminosopudoserlacausadequeestacaractersticaestuvieraporencimadel
lmiteptimo.
Porosidad.Estacaractersticaesdegranimportanciaparalosgranulados,yaqueeslamedidadelosespacios
intraparticularesdeunslidoydeterminasufragilidad.
Losresultadosobtenidosenestapruebafueronde18,19y25%paralosgranuladosGR1,GR2yGR3estoindica
quehayunapequeaproporcindeespaciosentrepartculasqueformanlosgranulosyporlotanto,seesperaque
puedanresistirlamanipulacinsinfracturarse,conservandosutamaodepartculaysinproducirpolvosfinosque
generenprdidasdelproducto.Elvalorptimoparaestacaractersticaesinferiora30%ylostresgranuladosse
encuentranpordebajodeestevalor,loquepermitiradeducirquelostresformuladossonmscompactos,
caractersticadeseableparaqueelproductonoseaarrastradoporelvientoenelmomentodesuaplicacin.
Fluidez.LosvaloresdelosngulosdereposoobtenidosparalosgranuladosGR1yGR3,fueronlosmenores,siendo
stosde27,2y29,8respectivamente,yelGR2presentunmayorngulodereposoconunvalorde30,6(Tabla
3).
Deacuerdoconelvalorptimoparaestacaracterstica(<30),valorpordebajodelcualseconsideraqueun
productoposeealtafluidez(VoightyBorns1979),losresultadosobtenidosparalosgranuladosGR1yGR3se
encuentranpordebajodedicholmite,sugiriendoquelosgranuladosfluyenfcilmenteynopresentarnproblemas
cuandoseanmanipuladosengrandescantidadesenlosprocesosdellenadoyempaqueprincipalmenteduranteuna
produccinindustrial,adems,laaltafluidezdelosformuladosfavoreceralaaplicacindelproductoporpartedel
agricultorpuespermitiraunamanipulacinfcil.
Humedad.Lahumedadresidualdeunproductogranulado,desarrolladoabasedeunhongo,esdegranimportancia
yaqueinfluyedirectamenteenlaviabilidaddelmismo,Losresultadosdelapruebadehumedadobtenidosparalos
tresgranuladospresentaronvaloresaceptables,siendostosdel9,7,6y3,3%paralosgranuladosGR1,GR2yGR3,
respectivamente(Tabla3).AunqueelvalordeporcentajedehumedaddelGR1esmayorcomparadoconlosotrosdos
granulados,stenosobrepasaelvalorsugeridoparaestetipodeproductos,elcualesinferioral10%,paraasegurar
quesereduzcanalmnimolosprocesosmetablicosdelmicroorganismoyasnoseproduzcanprdidasconsiderables
delaviabilidadduranteelalmacenamiento(Valencia2000).
pH.LosvaloresdepHparalosgranuladosGR1,GR2yGR3fueronde5,5,5,4y5,5,respectivamente(Tabla3)
valoresadecuadosparaestosproductosyaqueseencuentranentre5y7,rangoptimoparaelbuendesarrollode
estetipodemicroorganismos(Cenicaf1996)loqueindicaqueesteparmetroposiblementenoafectarla
viabilidaddeMetarhiziumanisopliae.
Caracterizacinmicrobiolgicadelosgranulados
Determinacindelaconcentracin.Ladeterminacindelaconcentracindecadaunodelosgranuladosexpresada
comoconidios.g1,seevaludesintegrndolosenaguadestiladayllevandoacabolacuantificacindeconidiosen
cmaradeNeubauer.
LasconcentracionesparalosgranuladosGR1,GR2yGR3fueronde4,8x109conidios.g1,5,2x109conidios.g1y
6,8x109conidios.g1,respectivamente(Tabla3).Esteresultadoindicaqueapesardelasdiferenciasenla
composicindelospreformulados,todospresentanunaconcentracinsimilaryadecuadaparaestetipodeproducto,
considerandoquelosproductoscomercialesabasedehongosentomopatgenospresentanconcentracionesque
oscilanentre107conidios.g1y1010conidios.g1.

Estabilidadmicrobiolgicadelosgranulados
Unodelosaspectosbsicosaevaluarenunbioplaguicidaeslaestabilidaddelaviabilidaddelmicroorganismocuando
steesalmacenado,yaquelascondicionesdealmacenamiento,puedenafectardichacaractersticaeinfluir
directamenteenlaactividadbiocontroladoradelproducto.
LosresultadosobtenidosenlaspruebasdeestabilidaddelaviabilidaddeAi,anisopliaealastrestemperaturasde
almacenamiento(8,18y28C)paralostresgranuladosyparaelprincipioactivo(hongosinformular)mostraronuna
prdidadelamismaatravsdeltiempo(seismeses),lacualoscilentreel16yel36%(Fig.1).

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

7/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

A28C,losgranuladosGR2yGR3presentaronprdidasdelaviabilidaddel32,7y32,9%,respectivamenteen
comparacinconelgranuladoGR1yconelcontrol(principioactivo)quepresentaronprdidasdel20,7y22%,
respectivamente.LapruebadecomparacinmltipledemediasdeTukeyconun=0,05,nodetectdiferencias
significativasentrelasprdidasdeviabilidaddelosgranuladosydelprincipioactivo,indicandoqueposiblemente
ningunadelasformulacionesolosprocesosincluidosenlaformulacin,confirieronestabilidadalosconidioscuando
sealmacenaronbajoestascondiciones.
Porotraparte,losresultadosobtenidosconlosdiferentestratamientosalmacenadosa18C,mostraronun
comportamientosimilaraiqueseobtuvoa28C,enquelosgranuladosGR2yGR3presentaronprdidas
considerablesdelaviabilidaddel36,5ydel33,2%respectivamentemientrasqueelgranuladoGR1yelcontrol
(principioactivo)presentaronprdidasdeviabilidadinferiores,lascuales,fuerondel21,9ydel17%,respectivamente
(Fig.1).LapruebadecomparacinmltipledemediasdeTukeyconun=0,05determinquenohubodiferencias
significativasentrelaprdidadeviabilidaddelostresgranulados,perosentrelasdelgranuladoGR3yelcontrol
(principioactivo),loquesugierequeaestatemperatura,.algunosdelosexcipientesutilizadosenelgranuladoGR3
podranhaberafectadolaestabilidaddelmicroorganismobajoestascondicionesdealmacenamiento.Apesardeno
encontrarsediferenciasestadsticasentrelaviabilidaddelosgranuladosGR1,GR2yelprincipioactivo,seobserv
quelosgranuladospresentaronunamayorprdidadelaviabilidad,sugiriendoquedeigualformaqueconel
granuladoGR1,algunodelosexcipientesodelasoperacionesinvolucradasenelprocesodemanufactura,tuvieronun
efectonegativosobrelaviabilidaddelhongo.
Laviabilidadalatemperaturade8Cparalosdiferentesgranuladosfuelaquepresentmayorestabilidadduranteel
almacenamiento.ParalosgranuladosGR1,GR2yGR3huboprdidasdelaviabilidaddel16,2,23,1y21%,
respectivamente,mientrasqueparaelcontrol(principioactivo)stafuedel8,7%.Elanlisisestadsticoconun
=0,05nodetectdiferenciassignificativasentrelasprdidasdeviabilidaddelostrespreformuladosyelprincipio
activo,resultadoquesugierequeaestatemperaturalaviabilidaddelmicroorganismonoseveafectadaporlos
excipientesoporeiprocesodeformulacinenlostresgranuladosydichaprdidapodradeberseaunefectodel
tiempodealmacenamiento(seismeses).
LapruebadecomparacinmltipledemediasdeTukeynodetectdiferenciassignificativasparacadaunodelos
tratamientosalastrestemperaturasdealmacenamiento,esteresultadosugierequelatemperaturanotuvounefecto
determinanteenlaprdidadeviabilidaddelmicroorganismo.Sinembargo,entodosloscasoslasprdidasfueron
superiorescuandoelalmacenamientoserealiza28C,seguidasporlasprdidasencontradasa18Cyporltimo
lasproducidasduranteelalmacenamientoa8Cestosepuedeatribuiraqueatemperaturaambienteysuperioresa
sta,elmetabolismodelmicroorganismosepodraencontraranactivoylahumedadbajaylafaltadenutrientesy
oxgenopodranproducirlamuertecelular,siendorecomendableapartirdeestosresultados,elalmacenamientode
lospreformuladosodelprincipioactivoa8Cparadisminuirlasprdidasdeviabilidad.
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

8/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

ResultadosimilarregistrValencia(2000)conlosgranuladosdeB.bassianaparaelcontroldelgusanoblancodela
papaPremnotrypesvorax,enquelasmenoresprdidasdeviabilidadsepresentarondespusdeseismesesde
almacenamientoaunatemperaturade8C,lascualesfuerondel8%,mientrasquea18y28Clasprdidasfueron
del10,6y10,1%,respectivamente.Esteresultadoconfirmaquelatemperaturatieneunefectonegativosobrela
viabilidaddelosmicroorganismosbajocondicionesdealmacenamiento.
LasprdidasmayoresdeviabilidaddeM.anisopliaealastrestemperaturasseregistraronenlosgranuladosGR2y
GR3,loscualestuvieronporcentajesdehumedadinferioresalpresentadoporelgranuladoGR1.Estefactortambin
podrasercausaldelaprdidadeviabilidad,yaqueunexcesivosecadopuedeocasionarunaprdidadeagua
intracelularyafectarnegativamentelaestabilidaddelaclula,talcomoloencontrValencia(2000),cuando
almacenungranuladoconunporcentajedehumedadmuybajo(2,21%),yencontrprdidadeviabilidadmxima
de17,3%.
Actividadbiocontroladoradelosgranulados
Cuandoserealizlaevaluacindelaactividadbiocontroladoradelosgranulados,losporcentajesdemortalidad
acumuladaobtenida32dasdespusdeiniciadoelbioensayoparalostratamientosGR1,GR2,GR3,principioactivoy
testigotratado(excipientes)fuerondel42,4,48,4,27,2,GR1GR2GR327,2y30,3%,respectivamente(Fig.2).Estos
porcentajesdemortalidadsonbajossisetieneencuentaqueelbioensayoserealizencondicionescontroladas,por
loqueseesperaranporcentajesdecontrolsuperiores,yaqueseleestnproporcionandoalmicroorganismo,todas
lascondicionesparaqueejerzasuactividadbiocontroladora.Sinembargo,engeneral,losresultadossealadosde
controldechizaconhongosentomopatgenossonbajos.LondooyRos(1997)cuandoevaluarondiferentescepas
deM.ansopliae,yB.bassianaparaelcontroldedosespeciesdechizaspredominantesenAntioquia,Phyllopnaga
obsoletayAnmalaunduiata,obtuvieronporcentajesdemortalidadacumuladadel40%despusde20dasde
iniciadoelbioensayo.

Elporcentajedemortalidadobtenidoeneltestigoabsolutoparaestebioensayofuedel12,1%unvalordemortalidad
aceptableparaensayosbiolgicos(CIBAQEIQY1973)yposiblementesepuedeatribuirafactorestalescomoel
estrscausadoporelconfinamientodelaschizasenlascubetasyalefectodelasnuevascondicionesambientales.
LapruebadecomparacinmltipledemediasdeTukey(=0,2)determinqueexistierondiferenciassignificativas
entrelosporcentajesdemortalidadocasionadosporlosgranuladosGR1,GR2ylosexcipientesconrespectoalos
resultadosobtenidosconelgranuladoGR3,elprincipioactivoyeltestigo,peronodetectdiferenciasentreestos
ltimos.LosporcentajesdemortalidadproducidosporlosgranuladosGR1yGR2fueronsuperioresy
significativamentediferentesdelosproducidosporelprincipioactivoporloquesesugeriraquelaformulacin
potencializalaactividadbiocontroladoradelmicroorganismo,posiblementeporqueelgranuladoposeeunsoporte
nutricionalquelebrindaalhongolaposibilidaddecrecimiento.Adems,losgranuladosincluyenensuformulacinun
acondicionadordehumedadquelesproporcionaunamayorposibilidaddecaptacindeaguaparaqueel
microorganismopuedaactivarsusprocesosmetablicosrpidamenteyporendedesarrollarsuactividad
biocontroladoraconmseficacia.
Seobservquelosexcipientestienenactividadsobreelinsecto,yaqueelporcentajedemortalidadproducidopor
estetratamientofuesuperiorysignificativamentediferentedelobtenidoconelprincipioactivopuroyconeltestigo
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

9/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

absoluto.Estosepodraatribuiraunefectonocivodeldiluente,elcualesunaarcillaquepodratenerefecto
ligeramentecorrosivosobreladelicadacutculadelinsecto,bsicamentecausandounaresequedadexcesivadela
misma.Esteefectodelosexcipientesnotendraimpactosobreelhombre,peroposiblementesisobreotrosestadios
larvalesdeinsectosquepuedansersusceptiblesalmencionadoefectofsico.
EneltratamientoquecorrespondealgranuladoGR3sepresentunamortalidadinferiorysignificativamentediferente
delaobtenidaconlosotrosgranulados.Sinembargo,elporcentajedemortalidadparaestepreformuladonofue
estadsticamentediferentedelobtenidoconelprincipioactivopuroloqueindicaraquelaformulacindeeste
prototiponomejoralaactividadbiocontroladoradelmicroorganismosobreelinsecto.Apesardequeestegranulado
tambincontienelosexcipientesqueposiblementetienenunefectosobrelachiza,esprobablequelaconcentracin
destosenelprototipo,olascaractersticasfsicasproducidasporsucombinacinnoafectenlaactividad
biocontroladoradelmicroorganismo.
Teniendoencuentalosresultadosobtenidosenestaetapadelainvestigacin,sesugiereintegrarvarios
microorganismosenelmanejodepoblacionesdechizaylautilizacindeotrasalternativasdecontroldentrodeun
programademanejointegradodeplagas.
Deacuerdoconlascaractersticasfsicasdecadaunodelosgranulados,suactividadbiocontroladoraysuestabilidad
encondicionesdealmacenamiento,elgranuladoGR1presentlosvaloresmsadecuadosparacadaunadelas
caractersticasfsicas,unporcentajedemortalidaddel42%yprdidasnoconsiderablesenlosporcentajesde
viabilidadduranteelalmacenamientoaunatemperaturade8C.Adems,esimportantetenerencuentaqueel
granuladoGR1tienelosmenorescostosdeproduccin,yaqueestaformulacinnocontieneunodelosexcipientes
quesestincluidoenlosgranuladosGR2yGR3,loquepermitiraconcluirqueelgranuladoGR1eselpreformulado
queexhibelaspropiedadesmsadecuadasparaseroptimizadoyevaluadoenestudiosposteriores.

Conclusiones
LostrespreformuladosgranuladosabasedeMetarhiziumansopliaepresentaroncaractersticasfsicasy
microbiolgicasadecuadasparaestetipodeproductos.
Losexcipientesutilizadosafectaronlaestabilidaddelaviabilidaddelhongobajocondicionesdealmacenamientoa8,
18y28C.
Laestabilidaddelaviabilidaddelhongoseafectenmenormedidaenlatemperaturadealmacenamientode8C.
LospreformuladosGR1yGR2mostraronactividadbiocontroladorapromisoriasobrelarvasdeA.scarabaeoides.
SeseleccionelgranuladoGR1porexhibirlosvaloresptimosparalascaractersticasfsicasymicrobiolgicasyuna
promisoriaactividadbiocontroladora.

Literaturacitada
ALVARADO,L.1977.Prcticasculturalesenpapa.InstitutoColombianoAgropecuarioICA.ProgramaTuberosas.
EstacinExperimentalObonuco.p.58,59.[Links]
CENICAF.1996.Metodologaparaelcontroldecalidaddeformulacionesdehongosentomopatgenos.Disciplinade
Entomologa.Chinchin,Caldas.[Links]
CIBAGEIGY.1973.Comorealizarunbioensayo.En:Manualdeensayosdecampo,p.210.[Links]
GALN,L.TMEZ,R.1993.Estadoactualyperspectivasdebioinsecticidasmicrobianos.Biotecnologaparala
produccindebioinsecticidasmicrobianoscentradaenBacillusthuringiensis.UniversidadNacionalAutnomade
Mxico.Mxico,p.97100.[Links]
GMEZ,M.VILLAMIZAR,L.1996.Estudiotecnolgicoparaproduccinmasivaypreformulacindelhongo
entomopatgenoMetarhizlumspp.paraelcontrolbiolgicodelalangostadelosLlanosOrientalesTrabajodeGrado.
QumicoFarmacutico,UniversidadNacionaldeColombia.FacultaddeCiencias.DepartamentodeFarmacia.Bogot,
p.4044.[Links]
GMEZ,M.VILLAMIZAR,L.COTES,A.1997.Optimizacindeunpreformuladoabasedelhongoentomopatgeno
MetarhziumarsopliaeparaelcontrolbiolgicodelalangostallaneraRhammatocerusschistocercoides.Resmenes
XXIVCongresoSociedadColombianadeEntomologa,p.107108.Pereira.[Links]
HELMAN,H.1982.Farmacotecniatericayprctica.DeContinental.Mxico,p.16871720.[Links]
INSTITUTOCOLOMBIANODENORMASTCNICASYCERTIFICACIN.1992.Productosqumicosindustrialesparauso
agropecuario.Plaguicidasgranulados.ICONTEC.NormaTcnica3350.Bogot,p.4.[Links]
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

10/11

16/10/2016 CharacterizationofgranularbiopesticideprototypesbasedonMetarhiziumanisopliaeforthecontrolofAncognathascarabaeoides(Coleptera:Melolon

INSTITUTOCOLOMBIANODENORMASTCNICASYCERTIFICACIN.1998.Agentesbiolgicosparaelcontrolde
plagas,agentesmicrobianosabasedehongosybacterias.Produccin.ICONTEC.NormaTcnica44221.Bogot.
[Links]
LONDOO,M.E.1998.Lachizaomojojoy,unmodelodeinvestigacinentomolgica.CuartoSeminarioTcnico
Regional,Medelln.p.4855.[Links]
LONDOO,M.E.ROS,A.M.1997.EfectodediferentesagentesdecontrolbiolgicosobrePhyllophagaobsoletay
Anmalaundulis.(Coleptera:Melonlonthidae).AconteceresEntomolgicos.GrupoGEUN.UniversidadNacional
sedeMedelln.p.3542.[Links]
MARTN,A.1967.PhysicalPharmacy.LeaandFebiger,Philadelphia,p.611635.[Links]
MORALES,L.1993.FormulacindeBioinsecticidas,Biotecnologaparalaproduccindebioinsecticidasmicrobianos
centradaenBacillusthuringiensis.UniversidadNacionalAutnomadeMxico.Mxico,p.8589.[Links]
ORELLANA,H.S.1983.Plaguicidas.Laprevencindelriesgoensuuso.OPS.Mxico,p.4151.[Links]
RODRGUEZ,S.D.A.1983.Programadeentomologa.C.I.TibaitatMosquera(Cundinamarca).ICA.Informede
labores1982B1983A.p.23.[Links]
RODRGUEZ,S.D.A.1997.Biologaymanejodechizas.ICA.BoletndeSanidadVegetal21.Bogot,p.524.
[Links]
USP23.1995.UnitedStatesPharmacopeia.ConvenctionRockville.[Links]
VALENCIA,C.2000.Controldecalidadfsico,biolgicoymicrobiolgicodepreformuladosabasedelhongo
entomopatgenoBeauueriabassiana(Blsamo)utilizadosanivelexperimentalparaelcontrolbiolgicodelgusano
blancodelapapaPremnotrypesvorax(Hustache).TrabajodeGrado.CarreradeMicrobiologaAgrcolayVeterinaria.
FacultaddeCienciasBsicas.PontificiaUniversidadJaveriana.Bogot,p.4277.[Links]
VILLAMIZAR,L.F.1998.EfectodelacomposicindelmediodecultivoenlavirulenciadeMetarhziumanisopae
sobrelalangostallaneraRhammatocerusschistocercoides.Tesis.M.Sc.enMicrobiologa.UniversidadNacionalde
Colombia.Bogot,p7078.[Links]
VOIGHT,R.BORNS,M.1979.Tratadodetecnologafarmacutica.Acribia,Zaragoza,Espaa,p.181194.
[Links]

Recibido:Abr.22/2003Aceptado:Jul.30/2003

Allthecontentsofthisjournal,exceptwhereotherwisenoted,islicensedunderaCreativeCommonsAttributionLicense

Transversal24No.5431of405,EdificioVolterra,Bogot,Colombia.ApartadoAreo11366,Bogot,Colombia.
Tel.:(571)3472320.Fax:(571)2126209.
publicaciones@socolen.org.co

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S012004882004000100007

11/11