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Plantas transgnicas
Dr. Mauricio Gonzlez Agero
Departamento de Mejoramiento y Biotecnologa
Laboratorio de Postcosecha
Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA) La Platina
Puntos de comparacin
Hibridizacin Clsica
Transgnesis
Nmero de genes
transferidos
Eleccin de la caracterstica a
transmitir
10-20 aos o ms
3 - 4 aos
Bacteria
DNA
plasmidial
Clula donante
Gen de
inters
Clula vegetal
Plsmido portando
el gen de inters
Clula vegetal
transformada
Teosinte
Cob
Maz
Tomate silvestre
(Lycopersicon pimpinellifolium )
D = 1 cm.
Planta transgnica
Plsmido portando
el gen de inters
Clula vegetal
Clula vegetal
transformada
Mtodos de transformacin:
permite introducir el DNA
dentro de la clula
+
Partculas de oro
o tungsteno
Directos:
DNA
Microcarriers
cubiertos por DNA
Indirectos:
- Biobalstica
- Electroporacin
- Whiskers de carburo
de silicio
- Agrobacterium tumefaciens
Desventajas:
- Agrobacterium rhizogenes
- Microinyeccin.
Proyectiles
conteniendo DNA
Eyector
Agrobacterium tumefaciens
Cartucho de
plvora
Proyectil
Microcarriers
cubiertos con DNA
Respiradero
Placa de
detencin
Clulas
blanco
El T-DNA contiene genes que codifican para algunas fitohormonas (auxinas y citoquininas) y
para la sntesis de opinas. Estos genes se expresan nicamente al ser integrados al genoma.
Vectores basados
en plsmido Ti
Vectores co-integrados
poco utilizado
Sistema binario
Plsmido Ti desarmado
Plsmido Helper
1 Verificar la expresin
de un gen de inters (o
parte de l).
Promotor
Gen reportero
T-DNA
Vector Binario
~3 das
1mM luciferina
Agrobacterium
Infiltracin
pBI121
E. coli
A. tumefaciens
ba
cte
ria
luciferasa
luciferina + ATP + O2
ro
Ag
Plsmido portando
el gen de inters
Clula vegetal
Clula vegetal
transformada
Mtodos de
transformacin
transformacin
Cepa GV3101
GFP/pBI121
Mtodos de
regeneracin
LEXa-GFP/pBI121
A. tumefaciens
Infiltracin
Mtodos de
seleccin
PpCobra-GFP/pBI121
Visualizacin
ro
Ag
ba
ria
cte
tallos
races
Callo indiferenciado
- Organognesis
- Embriognesis
Plsmido portando
el gen de inters
Clula vegetal
Cultivos diferenciados:
- races
- tallos
Clula vegetal
transformada
Mtodos de
transformacin
- embriones
- races
- tallos.
Cultivos indiferenciados:
Mtodos de
regeneracin
- callos
- suspensiones de clulas vegetales
- protoplastos.
Mtodos de
seleccin
Aplicaciones
Maz Bt:
No es txico en humanos.
40% de Semilla de maz Bt
en EEUU.
Reduccin potencial de uso
de insecticidas.
La soya Roundup Ready (RRS) que es Soya GTS40-3-2, lleva el gen que codifica
para la enzima CP4 EPSPS (5-enolpyrovylshikimate-3-phospate sintetase de
Agrobacterium sp. Cepa CP4), la cual le confiere tolerancia a herbicidas con el
ingrediente activo glifosato.
Geranilgeranil di-fosfato
fitoeno sintasa
El arroz
normal no
tiene estas
enzimas
Genes insertados
al arroz dorado:
Gen de Daffodil
(Narcissus
pseudonarcissus)
Fitoeno
fitoeno desaturasa
caroteno desaturasa
Licopeno
Licopeno-beta-ciclasa
- caroteno
(precursor vitamina A )
Gen de Daffodil
(Narcissus
pseudonarcissus)
- Reactivos de diagnstico
- Vacunas animales
- Alimentos animales
- Enzimas industriales
- Productos farmacuticos para el hombre
Uso
Planta husped
Hemoglobina y
-interferon
Sustituto de la sangre
Anti-cncer, antiviral
tabaco
arroz
EPO
Sero albumina
humana
Factor de crecimiento
epidrmico
Glucocerebrosidasa
Hirudina
NPI Defensina
Integridad
estructural
si
si
Actividad biolgica
Clulas de tabaco
papa
si
Sin testear
Mitgeno
tabaco
Enfermedad de Gaucher
Anticoagulante
Antibitico
tabaco
canola
tabaco
Sin testear
si, (glicanos) si
si
si
si
Fin