DESARROLLODELA

ECUACINDEMICHAELISMENTEN
Dr.GerardoSaucedoCastaeda
saucedo@xanum.uam.mx
PlantaPilotodeFermentacinen
MedioSlido,PP4

 Paraconcentracinde
sustratoalta,latasade
reaccines
independientedela
concentracinde
sustrato;tasade
reaccindeOrdenCero.
Paraconcentracinde
sustratobaja,latasade
reaccinesdePrimer
Orden,conrespectoala
concentracinde
sustrato.
Elprocesoseveafectadoentodomomentoporlaconcentracin
totaldeenzima.Unaexpresinquedescribeesteprocesoes:

kCE 0CS
rs = rp =
K M + CS

 Los mecanismos elementales se pueden explicar tomando

enconsideracin:

S+E

P
+
E

k
CX
CP CE
CS CE
k1

k3

Dedonde:

CET = CE + CX
El avance de la reaccin se puede caracterizar
considerando la formacin y desaparicin del sustrato, el
complejoenzimasustratoyelproducto.Demaneraquese
pueden escribir, para la tasa de reaccin, las siguientes
ecuaciones.

Paraeldesarrollodelasexpresionesdetasadereaccinse
puedenhacervariasconsideraciones:
Suposicin 1: el complejo EnzimaSustrato (CX) es
despreciable.Enconsecuencia,laconcentracindeenzima
libreesprcticamenteigualalaenzimainicial.

CET = CE + CX

CE CET
CX 0

Suposicin 2: el complejo EnzimaSustrato (CX) no es

despreciable.Enconsecuencia,laconcentracindeenzima
totaleslasumadelaenzimalibreylaligadaalcomplejo
(ES).

CX 0 CET = CE + CX

Esposiblesuponerque:
La reaccin de formacin del complejo (ES) es muy
rpidaysealcanzaunequilibriorpido,o
Laconcentracindelcomplejo(ES)es constante

Suposicin 3: usando el concepto de

determinacindetasasdereaccinporpasos,el
pasomslentodeterminalavelocidadglobal,se
llegaalequilibrioenque:
k1

K=

k2

Suposicin 4: usando la aproximacin de estado

cuasiestacionarioparaelintermediario

dCX
=0
dt

si

CET
<< 1
S0

Metodologaparadesarrollartasasde
reaccin
Definirlatasadereaccindeinters
DividirporlaCET
Obtener expresiones para los complejos
incluidos(CES)
Sustituirlasexpresionesdeloscomplejos(CES)
Rearreglar la expresin para obtener una
funcinentrminosdeconstantesestimables
yvariablesmediblesCS,CET

Desarrollodelaecuacinde
MichaelisMenten
a)

Definir la tasa de reaccin de

inters

Sustituyendolostrminosy
rearreglando laexpresinsellegaa:

rS = v = k3CX
b)

DividirporlaCET:

v
k 3C X
rS
=
=
CET CET CE + CX

c) Obtener expresiones para los

complejosincluidos(Cx)

CES

CE CS
=
KS

CS
rs = v =
K S + CS
max

Donde:

= k 3CET = k cat CET

k
KS = 2
k1
max

BrigssHaldane(1925)llegaronaun
resultadosimilardonde:

max

KM

= k 3CET = k cat CET

(k + k )
= 2 3
k1

InterpretacindelaexpresindeMM
Conceptosimportantes:
vmax
Afinidad:KS oKM
SiCS =KM:sealcanzael50%devmax
v=0.5vmax

Simplificacionesdeceroy
primerorden
SiCS >>KM entonceslatasade
reaccinnodependedeCS,es s = v = dCS =
max
decir,lareaccinesdeorden
dt
cerorespectoaCS.
v
SiCS <<KM entonceslareaccinrs = dCS = vmax CS
k = max
esdeprimerordenrespectoa
dt
KM
KM
C M.
k = constan te de primer orden

Cmoseevalalavelocidadinicialde
unaReaccinEnzimtica?

Cmohagoparahacerunabuenaestimacindelavelocidadinicial?

Cmocalcular(rS)alt=0?

1)Deltadiscretas CP
t
2)RegresinLineal,Ojmetro

3)RegresinPolinomial

CP = a0 + a1t + a2 t 2 + a3 t 3 +L + an t n
dCP
= a1t + a2 t 2 + a3 t 3 +L + an t n
dt
dCP
rS = rPt =0 =
= a1
dt t =0

CP

Grfica(CP oCS)vs t

tiempo

Comentarestrategiasexperimentales

Estimacindeparmetros:vmax y
KS
Paralaestimacindelosparmetrospodemosrecurrira:

Mtodosdiferenciales:
LineweaverBurk
HanesWoolf
EadieHoftee

dCS vmax CS
rs =
=
dt
K S + CS

Mtodosintegrales
CS

dCS
dt = r
S
CS 0

9Las simplificaciones de cero y

primer orden son de gran
utilidad!!!
9Ademstienerepercusionesenel
diseo de los reactores de flujo
continuo

Mtodosdiferencialesparala
estimacindeparmetros:vmax yKS
RepresentacingrficadeLineweaverBurk

SeobtieneelinversodelaecuacindeMichaelisMenten yserearregla la
expresin.

CS
v=
K S + CS
max

1 KS 1
1
=
+
v vmax CS vmax
LapendienteesKS /vmax
Laordenadaenelorigenes1/vmax
Laabscisaalorigenes 1/KS

Mtodosdiferencialesparala
estimacindeparmetros:vmax yKS
RepresentacingrficadeHanesWoolf

SeobtieneelinversodelaecuacindeMichaelisMenten ysemultiplica
porCS;serearregla laexpresin.

CS
v=
K S + CS
max

CS
KS
1
=
+
CS
v
vmax vmax
Lapendientees1/vmax
Reordenamiento con excelentes carctersticas LaordenadaenelorigenesKS/vmax
LaabscisaalorigenesKS
estadsticasparalaestimacindeKM yvmax

Mtodosdiferencialesparala
estimacindeparmetros:vmax yKS
RepresentacingrficadeEadieHofstee

LaecuacindeMMsedivideenelnumeradoryeldenominadorporCS y
sedespejav.

CS
v=
K S + CS
max

v
v = K S
+ vmax
CS
LapendienteesKS
Laordenadaenelorigenesvmax

Mtodosintegralesparalaestimacin
deparmetros:vmax yKS
v
C
dC

=
= rs = v
S

K S + CS

dt

max

CS

dCS
dt =
C S 0 rs

Integrandoycambiandoloslmitesdeintegracinllegamosa:
t

CS 0

dt =
0

CS

dCS
K
= S
rs v max

CS 0

CS

dCS
1
+
Cs v max

CS 0
1
KS
+
t=
Ln
CS 0 CS )
(

v max CS v max

CS 0

dC

CS

Mtodosintegralesparalaestimacin
deparmetros:vmax yKS

Rearreglando lasiguienteecuacin:

CS 0 (CS 0 CS )
KS
t=
Ln
+
v max CS
v max

Trminodeceroorden

Trminodeprimerorden

Sellegaa:

(CS 0 CS ) = K + v
t
S
max
Ln(CS 0 CS )
Ln (CS 0

CS )

Reordenamiento con excelentes carctersticas

estadsticasparalaestimacindeKM yvmax

Mtodosintegralesparalaestimacin
deparmetros:vmax yKS
Recordemoslassimplificacionesdeceroyprimerorden
SiCS >>KM entoncesrS esdeordencero respectoaCS.

dC
rs = v = S = vmax vmax
dt

CS 0

CS

dt = dC

CS 0 CS )
(
t =

max

SiCS <<KM entoncesrS esdeprimerordenrespectoaCS.

t
dCS vmax CS
K
rs =
=
dt = M
dt
KM
vmax
0

CS 0

CS

C
K
dCS
t = M Ln S 0
CS
vmax CS

Desarrollodelasecuacionesde
variacininternadeE,S,ESydeP
1
3
S+E

P + E

CS CE

CP CE

Consumodesustrato

dCS
= k1CS CE k 2CX
dt

CX

Condiciones iniciales CS = CS 0 @t = 0

Variacindelaenzimalibre

dCE
= (k 2 + k 3 )CX k1CE CS
dt

Condiciones iniciales CE = CET

@t = 0

VariacindelcomplejoES

dCX
= k1CE CS (k 2 + k3 )CX
dt

Condiciones iniciales CX = 0
@t = 0

Formacindelproducto

dCP
= k 3C X
dt

Condiciones iniciales CP = 0 @t = 0