UNIVERSIDAD DE PANAM

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE TECNOLOGA MDICA

MICROBIOLOGA CLNICA II

PRESENTACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

PRESENTADO A:
LICDO. DANILO FRANCO

PRESENTADO POR:
GUARDADO, ASHLY 8-901-935
GONZLEZ, NAHOMI 2-739-956

21 DE SEPTIEMBRE DE 2016

INTRODUCCIN

Lo ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento

en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio
en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo. Se han preparado ms de
10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno
adecuado, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento
como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Tambin se aaden colorantes
que actan como indicadores ejemplo Rojo Fenol.

OBJETIVOS

Objetivo General:

Conocer la forma de preparacin de los medios de cultivos.

Objetivo especfico:

Preparar medios de cultivo y explicar la diferencia en el procedimiento de preparacin.

Comprobar la efectividad del proceso de esterilizacin del Autoclave por medio de la
incubacin de los medios de cultivos controles.

BIOSEGURIDAD
Como bioseguridad se utiliz guantes, bata de laboratorio y mascarilla.

PROCEDIMIENTOS
I.

Medios de cultivos utilizados

1. Agar Mycosel
Es un agar selectivo para el crecimiento de hongos.
Las propiedades nutritivas de agar mycosel las suministra la peptona preparada
a partir de harina de soja. La dextrosa es una fuente de energa para el
metabolismo de los hongos. La cicloheximida inhibe la mayora de los hongos
saprofticos. El cloranfenicol es un antibitico de amplio espectro que inhibe
una amplia variedad de bacterias Gram positivas y Gram negativas. (1)

2. Agar Sangre
Es una combinacin de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5 % de
sangre ovina, tambin puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa
de Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa
tambin para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos
(que es un factor de virulencia). (2)

Base Columbia Agar (CNA)

3. Caldo y Agar BHI

Es un medio de uso general adecuado para el cultivo de una amplia variedad de

tipos de organismos, incluidos las bacterias, levaduras y hongos filamentosos, a
partir de muestras clnicas.
Brain Heart Infusion (BHI) Agar sin suplemento se recomienda actualmente
como medio universal para bacteriologa aerobia y para la recuperacin primaria
de hongos y Actinomycetos a partir de muestras clnicas y no clnicas. (2)
Este medio se utiliza para el aislamiento y cultivo de una amplia variedad de
hongos, incluidos los causantes de micosis sistmicas, Actinomycetales aerobia
(por ejemplo, Rhodococcus y Tsukamurella), adems de determinadas bacterias
exigentes. (2)

4. Agar McConkey
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la
mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben
el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las
colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Los microorganismos no
fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. (3)

II.

CLCULOS

La determinacin de los clculos fueron hechos utilizando la regla de tres.

1 plato
52 platos
X
44g

25 mL
X
1300 mL
1000 mL

MEDIO
Agar Sangre
Agar Mycosel
Agar McConkey
Caldo BHI
Agar BHI

III.

= (25) (52)= 1300 mL de agua

= (44) (1300)/1000= 57.2g del medio.
PLATOS
52
13
12
12

TUBOS

12
24 (12
profundos
)

mL DE AGUA
1300
560
264
60
444

g DEl MEDIO
57.2
20.16
13.2
2.22
23.1

PESAR Y SERVIR (EN EL ELERMEYER) LOS MEDIOS

Primero se pesa el medio en la pesa digital, luego se vierte los gramos pesados en el
Elermeyer, se le agrega agua destilada con el cuidado de no formar grumos, luego
se le aade un imn el cual se encarga d homogenizar la mezcla del agar y el agua y
se procede a calentar hasta antes de la ebullicin. Se espera que enfri y se mide pH.
IV.

MEDICIN DE PH
La medicin del pH se realiza con el pHmetro. Se
mide el pH inicial luego se lleva al pH que indica el
medio, lo ms cercano posible al pH que dice el agar.
La solucin NaOH ayuda a aumentar el pH y el HCl
ayuda a disminuirlo.

MEDIO

PH DEL

PH INICIAL

PH FINAL

Agar Sangre
Agar Mycosel
Agar
McConkey
Caldo BHI
Agar BHI
V.

VI.

MEDIO
7.3 0.2
7.0 0.2
7.1 0.2

6.72
6.71
6.86

7.35
7.04
7.15

7.4 0.2
7.4 0.2

6.11
7.24

7.46
7.41

AUTOCLAVE
Proceso de esterilizacin, nos permite esterilizar los medios de microorganismos
que nos pueda contaminar el medio durante la preparacin, para proceder a servirlos
en su plato o tubo.
Es un recipiente de presin metlico de paredes gruesas con un cierre hermtico que
permite trabajar a alta presin para realizar una reaccin industrial, una coccin o
una esterilizacin con vapor de agua. Su construccin debe ser tal que resista la
presin y temperatura desarrollada en su interior.
Sigue los siguientes parmetros: 15 lb de presin
121C temperatura
45 min (dividido en 3 perodos)

SERVIR LO MEDIOS EN PLATOS O TUBOS

Se procedi a servir los medios despus que salieron del autoclave.

En el caso del Agar Sangre luego de ir al autoclave se esper que tuviera una
temperatura adecuada para aadirle la sangre.
VII.

CONTROL DE CALIDAD

Se procedi a incubar un plato o tubo de cada medio por 24 horas, al da siguiente

no hubo crecimiento de microorganismos en ningn medio.

Agar BHI y Caldo BHI

Agar Sangre

Agar McConkey

Agar Mycosel

CONCLUSIN

Los medios de cultivos son uno de los mtodos ms usados para el anlisis de
microorganismos con varios fines, como el de la multiplicacin, identificacin,
antibiograma, entre otros, y puede ofrecer informacin valiosa sobre los mismos si
se realiza de manera adecuada, para evitar la contaminacin del medio y la
alteracin de los resultados.

INFOGRAFA

1. http://www.labmedibac.com/agar-mycosel-mediabac/
2. https://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007479(08)
(0107)_ES.pdf
3. http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm