MODELOS SIMPLIFICADOS PARA ANALIZAR LAS

RESPUESTAS DEPENDIENTES DEL TIEMPO - DOSIS

DE LAS POBLACIONES A LAS SUSTANCIAS TXICAS
ABSTRACT:
La base de la ecotoxicologa se encuentra actualmente en la dosis-respuesta de los
organismos a los agentes txicos, como tpicamente se ha descrito por modelos
probit y logsticos. Sin dejar de reconocer sus mritos, los criterios de valoracin
estndar ignoran el proceso de toxicidad con el tiempo, y por lo tanto nuestra
capacidad para predecir los efectos txicos directos en la evaluacin de riesgos
ambientales se ve seriamente restringida. Aunque la respuesta de los txicos con el
tiempo se ha estudiado antes, su aplicacin en la ecotoxicologa sigue siendo
infrautilizada. Una razn es que no hay un mecanismo convincente haya sido
propuesto para explicar las curvas hiperblicas de tales respuestas, mientras que
una variedad de modelos han sido utilizados para describirlos. La explicacin de
ambas respuestas de tiempo y dosis dependientes se encuentra en ltima
instancia, en la variabilidad natural de los sitios del receptor entre los individuos de
las poblaciones expuestas a un inhibidor txico con el tiempo. El proceso se puede
explicar por la cintica de inhibicin, y se describe adecuadamente mediante una
expresin matemtica como la ecuacin de Michaelis-Menten, aunque otros
modelos asintticos (por ejemplo el modelo logstico) tambin pueden ser
utilizados. La ventaja del modelo hiperblico es que los valores de la mediana del
efecto (por ejemplo, CL50 de la dosis y ET50 para las respuestas dependientes del
tiempo) permiten el clculo de efectos de toxicidad en cualquier nivel de
concentracin y / o el tiempo de exposicin, por lo que resulta especialmente
atractivo para la evaluacin de riesgos.
INTRODUCCIN:
En la ltima dcada, la investigacin ecotoxicolgica ha comenzado a centrarse en
la relacin entre el tiempo de exposicin y la toxicidad de los productos qumicos,
revirtiendo la tendencia anterior que puso demasiado nfasis slo en los aspectos
de dosis-respuesta. En efecto, mientras que factores determinantes como el tiempo
de exposicin y el tamao, tambin fueron estudiados, ellos permanecan
desatendidos en ecotoxicologa y en la evaluacin de riesgos. Como resultado,
nuestra capacidad para evaluar y predecir los efectos ambientales de los
contaminantes en las poblaciones naturales fue, y sigue siendo, seriamente
obstaculizado.
La idea de que tanto la intensidad (dosis o concentracin) como el tiempo de
exposicin determinan el efecto de los txicos sobre los organismos, es antiguo y
se basa en el adagio de Paracelsus es slo la dosis la que hace a una cosa un
veneno. Dado que la dosis interna de un producto qumico es lo que determina su
toxicidad, y puesto que se necesita tiempo para que el compuesto penetre en el
organismo, el tiempo de exposicin es un factor que est vinculado esencialmente a
dosis txicas eficaces. Aunque este principio se entiende bien, ecotoxiclogos lo
han interpretado de una manera curiosa con el fin de estandarizar los bioensayos
de toxicidad: el tiempo de exposicin es arbitrariamente fijo y adecuado a los
diversos tipos de organismos analizados. De este modo, mediante la eliminacin de
la variable tiempo, la toxicidad ha sido prcticamente redefinida por el mediana de
las concentraciones letales (LC50) o efectivos (EC50) y otros puntos finales (por

ejemplo, NOEC) estimados en tiempos fijos, sin darse cuenta de que este tipo de
datos de bioensayos reflejan slo una parte de la historia: son una instantnea en el
proceso continuo de intoxicacin. Aunque tales datos de dosis -respuesta son tiles
para comparar potencias entre los diferentes compuestos, particularmente en lo
que se refiere a la toxicidad aguda, los puntos finales de tiempos fijos por s solos
son de poco valor para la evaluacin de los efectos txicos en los organismos de las
poblaciones naturales, el tiempo es un factor que no puede ser ignorado en el
mundo real.

El ncleo de la cuestin radica en la necesidad de explicar en trminos biolgicos

los criterios de valoracin estndar derivadas ya sea de funciones matemticas
probit o logstica que ajustan los datos de bioensayos experimentales.
Tradicionalmente, tal explicacin se basa en la tolerancia individual o dosis eficaz
del individuo (IED): un individuo muere slo si recibe una dosis igual o mayor que su
IED. Debido a que la distribucin de los valores del IED entre los individuos en las
poblaciones se describe mejor con un modelo log-normal (la base para el anlisis
probit), tal explicacin esta reivindicada. Algunos primeros detractores, sin
embargo, invocan procesos estocsticos como la razn principal para el ajuste
matemtico, suponiendo que la probabilidad de muerte por envenenamiento es el
mismo para todos los organismos de una poblacin. El ltimo punto de vista ha sido
confirmado por experimentos recientes en los que la supervivencia fuera
comparada despus del pulso de exposicin.
La pregunta fundamental es que causa el proceso de intoxicacin. Se acepta
comnmente que la mayora de las sustancias txicas actan mediante la inhibicin
de un receptor de destino, y que esta inhibicin puede ser irreversible (por ejemplo,
narcticos tales como cloroformo) o reversibles (por ejemplo, insecticidas
organofosforados). Los modelos basados en la cintica que consideran la
acumulacin de la masa de la sustancia txica en el interior del organismo, tales
como los de Kooijman (1981) y Chew & Hamilton (1985), llevaron a la proposicin
de que se requiere un residuo crtico del cuerpo para causar una inhibicin que
podra resultar en la mortalidad u otro efecto txico, en un organismo individual. El
tiempo necesario para alcanzar tal masa crtica fue analizado por Legierse et al.
(1999) utilizando organofosforados (PO) y por Verhaar et al. (1999) utilizando
narcticos no polares: su modelo de ocupacin de un objetivo crtico supone que la
letalidad ocurre cada vez que un nmero crtico de receptores fuese ocupado de
forma irreversible. Una extensin de este modelo (modelo de evaluacin de los
daos) fue propuesto por Lee et al. (2002) para acomodar inhibidores reversibles.
Por ltimo, un modelo estocstico mecanicista basado en los presupuestos de
energa dinmicos (DEBtox) ha sido propuesto por Bedaux y Kooijman (1994), este
permite el clculo de concentraciones sin efecto (NEC No Effect Concentration) de
sustancias txicas y es capaz de modelar la concentracin letal media como una
funcin del tiempo para cumplir con los desafos de la evaluacin de riesgos.
Desde que la ecotoxicologa se ocupa de los efectos de los productos qumicos
txicos en los organismos de las poblaciones y ecosistemas, la capacidad de
realizar predicciones de los efectos en otros puntos de tiempo de inters se vuelve
crucial si las evaluaciones de riesgo ecolgico de los productos qumicos han de ser
significativa. En este contexto, la extrapolacin de los puntos finales de la mediana
del tiempo A al tiempo B, segn lo predicho por el modelo DEBtox, o la estimacin

de los efectos sobre el crecimiento de la poblacin, representa un desarrollo muy

valioso para nuestra ciencia.
Es lamentable, sin embargo, que la evolucin temporal de los efectos txicos suela
ser diferente entre los compuestos, as como entre especies de organismos, por lo
que las variables especficas para el compuesto (por ejemplo, factores de
bioconcentracin) o para el organismo (por ejemplo, las tasas de absorcin y
eliminacin, tamao, etc.) a menudo son necesarios para simular y predecir
adecuadamente las respuestas observadas. En la prctica, los modelos ms simples
que implican un menor nmero de parmetros pueden ser ms interesantes, y
quizs ms tiles, que los modelos empricos y multi-compartimental que a menudo
requieren el uso de ordenadores para resolver sus ecuaciones complejas e
interdependientes.
En este trabajo, proponemos un modelo matemtico simple basado en el proceso
de inhibicin enzimtica para describir los efectos de los productos qumicos txicos
en los bioensayos experimentales ya sea de corta (aguda) o de larga (crnica)
duracin. El modelo matemtico elegido fue usado primero por Leonor Michaelis y
Maud Menten en el siglo 20 para un propsito diferente: calcular la velocidad de las
reacciones mediadas por enzimas. El modelo cintico de Michaelis-Menten
normalmente se invoca para explicar los procesos de absorcin y eliminacin en la
toxicologa, sin embargo Van Ryzin y Rai (1987) lo usaba para describir la relacin
dosis-respuesta resultante de efectos txicos en los organismos. Aparte de una
mencin aislada en la literatura, a nuestro entender este modelo matemtico no se
ha utilizado para describir el tiempo de respuesta de las sustancias txicas ni la
cintica de inhibicin. La razn subyacente de este enfoque se describe en este
documento, incluyendo el ajuste del modelo a los datos experimentales de los
ensayos de toxicidad aguda y crnica ya publicados.
Fundamento del modelo propuesto:
Los modelos cinticos tales como los mencionados anteriormente por lo general
implican varios parmetros, incluso si sus supuestos son simples. Por ejemplo,
DEBtox utiliza tres o cuatro parmetros para la supervivencia de los organismos en
los ensayos agudos, y las asignaciones de energa para las funciones biolgicas son
tan diversas como el crecimiento o la reproduccin bajo el efecto de los factores de
estrs. Este enfoque mecanicista, sin embargo, se basa en el concepto de un solo
compartimento de captacin qumica.
Bonnomet et al. ( 2002 ) dieron cuenta de que tales modelos cinticos no podan
expresar el LC50 analticamente como una funcin del tiempo. Para lograr esto,
propusieron un modelo simplificado utilizando una aproximacin lineal de dos
pasos, de captacin de primer orden / despeje de la ecuacin cintica.

C ( t )=BCF x C [1exp (k x t ) ]

(1)

Donde Cin y C son las concentraciones de las sustancias txicas en el interior del
organismo y en los medios de comunicacin externa, respectivamente, t es el
tiempo, BCF es un factor de bioconcentracin y k es una constante que se asemeja
la velocidad de eliminacin. Su enfoque supone que la concentracin interna (dosis
efectiva) sea proporcional al tiempo y a la concentracin externa para exposiciones
cortas, pero no cuando t1/k, ya que la curva se vuelve asinttica con la dosis
mxima (BCF C). Su modelo puede ser fijado a una variedad de puntos finales

LC50 disponibles de la literatura para varias especies acuticas y productos

qumicos, y puede ayudar a explicar los procesos que intervienen en la toxicidad.
En efecto, las curvas de toxicidad resultantes de bioensayos de toxicidad sobre
tiempos de exposicin consecutivos son de forma asinttica o hiperblica. Por otra
parte, las curvas hiperblicas tambin se obtienen en la inhibicin de los receptores
enzimticos resultantes de la unin a sustancias txicas, es decir, la AChE y PO, en
la inhibicin de anticuerpos en ensayos de inmunoabsorcin ligados a enzimas
(ELISA), y en la cintica de las reacciones enzimticas. Todos estos diferentes
procesos tienen en comn las siguientes caractersticas:
-

Los efectos resultan de la interaccin de un receptor de destino (por ejemplo,

enzima, anticuerpo) con una sustancia (es decir, la sustancia txica) en
reacciones estequiomtricas.
Una cantidad finita y limitada de receptores est disponible, al menos dentro
del marco de tiempo experimental.
Cantidades crecientes de agente txico se suministran, ya sea para separar
grupos de individuos (por ejemplo bioensayos de dosis-respuesta) o al mismo
grupo con un incremento del tiempo de exposicin.

Parece, por tanto, que la razn fundamental de la forma de las curvas observadas
se rige por una simple relacin numrica entre las molculas del objetivo y el
txico, y no por mecanismos biolgicos especficos como se propone en los modelos
anteriores txico- cintico. Por supuesto , la mayora de las molculas dentro de los
organismos se encuentran dentro de estructuras complejas y su capacidad de
reaccionar qumicamente depende de la aparicin tanto del receptor y como del
agente txico en un lugar y tiempo dado, por lo tanto, los modelos de
compartimentos mltiples de absorcin . Pero siempre que el txico est disponible
para el receptor de destino, el resultado final ser una relacin asinttica que tiene
lugar en el tiempo.
El modelo propuesto en este documento se basa en la observacin de que la
ecuacin de Michaelis - Menten describe uno de tales procesos (es decir, actividad
enzimtica) de manera adecuada y en trminos matemticos simples. Adaptado al
proceso inhibitorio, la ecuacin de Michaelis - Menten toma la forma:

I =IC 100 X C/( IC50 +C)

(2)

Donde I es la inhibicin proporcional del receptor de destino, C es la concentracin

del inhibidor en el organismo, IC50 es la concentracin del inhibidor requerida para
producir 50% de inhibicin del receptor de destino, y IC100 es la inhibicin mxima,
es decir, 100%. Cuando se aplica a la toxicologa, la variable I tambin puede
indicar la "inhibicin de la vida 'o la muerte de un organismo, o los efectos
subletales derivados de la actividad directa de la sustancia txica.
Al igual que en otros modelos, el supuesto es que la inhibicin es directamente
proporcional a la concentracin interna del txico C en el organismo, el cual es un
parmetro oculto que depende de la concentracin externa; pero como la ecuacin
2 indica, tal proceso de inhibicin se ralentiza como la concentracin interna de los
incrementos del txico, y se convierte particularmente lento antes de alcanzar el
nivel asinttico. El parmetro IC100 representa este nivel, que en teora slo puede
lograrse cuando la cantidad del inhibidor presente es igual o mayor que el del
destino. Sin embargo, como se mencion anteriormente, los organismos tienen una
complejidad de las estructuras y mecanismos que introducen de manera efectiva

las barreras del inhibidor biolgico para llegar al receptor deseado, por ejemplo
mediante la eliminacin o la metabolizacin de la sustancia txica en diferentes
formas, por lo que en la prctica la inhibicin mxima slo se puede conseguir
cuando las cantidades reales de inhibidor son varias veces mayores que las del
receptor de destino. Por lo tanto, se obtiene la curva de hiprbola asinttica.
Debe tenerse en cuenta que, aunque la ecuacin 2 es matemticamente idntica al
modelo de Michaelis-Menten, las variables implicadas son esencialmente diferentes:
en cintica enzimtica la variable dependiente es la velocidad de la reaccin, con la
lnea asinttica siendo la velocidad mxima, y la mitad de esta velocidad siendo la
constante de Michaelis (KM ), mientras que en el modelo hiperblico que aqu se
propone la variable dependiente es la inhibicin de un proceso (por ejemplo
bloqueo enzimtico, supervivencia) y la mitad de esta inhibicin representa slo un
punto de inflexin (por ejemplo, IC50, CL50 o CE50), uno de especial importancia
para la estimacin de cualquier otro punto de la curva, como aparece a
continuacin. Tpicamente, en la cintica enzimtica de Michaelis-Menten la
asntota superior (velocidad mxima) es desconocida, por lo que tal constante se
calcula a partir de los datos experimentales utilizando las parcelas Lineweaver-Burk.
Sin embargo, para procesos inhibitorios la constante de IC50 se puede calcular por
una lnea de regresin logartmica normal fijada a los datos - desde que la inhibicin
mxima es siempre 100%, el uso de las parcelas Lineweaver-Burk es innecesario.
Para evitar la confusin con la ecuacin original de Michaelis-Menten, el modelo (2)
podra ser llamado modelo hiperblico. Antes de explicar su utilidad en el modelado
de la toxicidad con el tiempo, se muestra su aplicabilidad a otros procesos
asintticos ntimamente relacionados con los efectos de las sustancias txicas.
Inhibicin de los receptores enzimticos
La inhibicin enzimtica se diferencia de la actividad enzimtica en que cada
molcula de enzima es inhibida slo una vez, mientras que una nica enzima activa
puede realizar su funcin muchas veces, siempre y cuando el sustrato est
disponible.
Entre los modos mejor entendidos de la accin de sustancias txicas est la
inhibicin del neurotransmisor acetilcolina sinptica-esterasa (AChE) debido a la
unin con compuestos fosforilados tales como OP y los insecticidas de carbamato, y
algunos venenos naturales (Walker et al. 2001). Si bien la reaccin de AChE con
carbamatos es reversible, no es lo que produce al PO (Matsumura 1985). En
cualquier caso, el proceso de intoxicacin es el mismo, que implica la inhibicin del
sitio activo de la enzima AChE por una molcula del agente txico, y el grado de
intoxicacin se puede determinar experimentalmente mediante la estimacin de la
reduccin de la actividad AChE en un tejido tal como el cerebro, donde se
encuentran la mayora de las sinapsis.
Varios autores han buscado una relacin entre la inhibicin proporcional AChE y
efectos letales o subletales asociados en los organismos afectados (Johnson 1977).
En general, los valores de LC50 para compuestos OP se han asociado con la
reduccin de 70 a 90% en la actividad de AChE en el pescado (Coppage y Matthews
1974;. Zinkl et al 1991), pero tales cifras pueden ser muy diferentes para los
vertebrados terrestres, debido a sus ms sofisticados mecanismos de
desintoxicacin, diferentes vas de exposicin, etc. Los ejemplos que se muestran
aqu (Fig. 1) se han tomado de la literatura y se refieren a la inhibicin de la AChE
en el cerebro de los peces despus de exposiciones de 24 h, como la provocada por

el OPs malatin en los peces de agallas azules (Richmonds y Dutta 1992), diazinn
en la perca americana (Pan y Dutta 1998) y profenofos en los peces arco iris del
este (Kumar y Chapman 1998).
Estos tres conjuntos de datos pueden ser descritos adecuadamente por la ecuacin
(2) o modelo hiperblico (Fig. 1a), como la prueba de bondad de ajuste de Chicuadrado indica en cada caso (Tabla 1). Sus respectivos autores, sin embargo,
utilizan otros modelos paramtricos para describir el excelente ajuste de sus datos
(r20,98) para grficos lognormal, aunque otras expresiones matemticas seran
vlidos tambin (figura 1, b1.): Por ejemplo, aquellos indicados por ecuaciones loglogsticas en la Fig. 1, b2. Kumar y Chapman tambin encontraron una buena
correlacin entre la respuesta txica y el patrn de acumulacin de profenofos en el
pescado.

Fig.1 inhibicin tpica de la acetilcolina esterasa en los tejidos cerebrales de pescado

despus de 24 h de exposicin a concentraciones crecientes (C) de insecticidas
organofosforados. Los datos experimentales se indican con puntos, mientras que las
lneas representan las tendencias predichas dadas por tres modelos matemticos
diferentes: (a) hiperblico, I = IC100 C / (IC50 + C); (b1) lognormal, I = a e^(k ln C); y
(b2) log-logstica, ln(I) = a + k ln C. Para los parmetros del modelo ver Tabla 1.
FUENTES: malatin en el pez sol, de Richmonds y Dutta (1992); diazinn en el largemouth
bass, de Pan y Dutta (1998); profenofos en peces arcoris del este, de Kumar y Chapman

El hecho es que cualquier conjunto de datos numricos se puede equipar a las

ecuaciones descriptivas apropiadas, incluso si las constantes derivadas de esta
manera podran eludir una interpretacin (Moriarty, 1999). Para la inhibicin de
AChE, el modelo hiperblico indica que la interrupcin del proceso de la
neurotransmisin provocada por los tres PO insecticidas es bsicamente idntica,
depende solo de la concentracin del inhibidor: no se requieren otras variables ni
constantes en el modelo hiperblico para describir analticamente el proceso de
inhibicin. Por lo tanto, cada insecticida difiere de los otros en su sensibilidad,
presumiblemente debido a las propiedades fsico-qumicas conferidos por su
estructura molecular especfica, una sensibilidad que pueden ser medidos por el
valor IC50 para el perodo de 24 h utilizado (Tabla 1), en exactamente la misma

manera que LC50 podra ser usado para comparar la potencia de estos agentes
txicos en las respectivas especies de peces.
Es posible que otros procesos inhibitorios mediados por enzimas y que conducen a
los efectos toxicolgicos (por ejemplo, la inhibicin de narcticos) pueden diferir del
que se muestra aqu, pero en ausencia de evidencia de lo contrario podemos
aceptar el modelo hiperblico como suficientemente explicativo de este tipo de
accin txica.

Fig.2 Cintica de la inhibicin ejemplificados por los inmuno-ensayos

competitivos para el insecticida endosulfn y el herbicida diurn. (a) Las curvas
estndar equipados por un modelo logstico de 4 parmetros en el logaritmo
natural de la concentracin de inhibidor, con indicacin de sus respectivos IC50;
(b) los mismos datos en la escala de lo normal, armarios por la misma ecuacin
hiperblica como en la Fig. 1a, con indicacin de la bondad del ajuste por Chi
cuadrado: 0,75 endosulfn> P> 0,5; diurn P> 0,9. Fuente de datos: Lee y

Inhibicin competitiva de ELISA

La inhibicin enzimtica no debe diferir de otros tipos de inhibicin bioqumica, tales
como la de anticuerpos o cualquier otra protena. Una ilustracin clara es
proporcionada por tpico ELISA, en el que la inhibicin de anticuerpos es
directamente proporcional a la concentracin de analitos inhibidores. Hay muchas
pruebas de ELISA disponibles en el mercado para el anlisis de residuos de
pesticidas en matrices de produccin agrcola y ambientales (Lee y Kennedy, 2001),
y la mayora de ellos utilizan un enfoque competitivo: analitos objetivo (por
ejemplo, plaguicidas) deben competir con un inhibidor estndar por los mismos
sitios de anticuerpo diana.
Cuando los datos de inhibicin proporcional de ELISA se representan grficamente
frente al logaritmo natural de la concentracin de inhibidor, una curva sigmoidea se
obtiene (Fig. 2a), uno que por lo general se describe por una funcin logstica de 4
parmetros:

Donde es la asntota inferior (relacionada con una correccin del control), es el

punto medio de la curva (IC50), C es la concentracin del inhibidor y

es una

constante que determina la pendiente de la curva. Como en el caso de la inhibicin

de la AChE, la asntota superior es la inhibicin mxima posible y corresponde a
IC100, mientras que la mitad de este nivel de inhibicin corresponde a la constante
de IC50.
Observe que para = 0 (sin correccin de control) y

= 1, la ecuacin. 3 se

convierte en I = 1 / [1 + exp (ln C)], y luego se hace exactamente los mismos

valores que los obtenidos a partir del modelo hiperblico (2): esto se puede ver
claramente por el trazado de la concentracin de inhibidor en una escala lineal (Fig.
2b).
La expresin simplificada, sin embargo, requiere slo dos parmetros en lugar de
cuatro para el logro de los mismos resultados. Incluso para las variaciones de y

menor que 5%, las diferencias entre las funciones hiperblicas y logsticos no

son significativas.
El hecho interesante es que, aunque el proceso de inhibicin que se muestra en la
Fig. 2 no se puede explicar en trminos de cintica enzimtica, el mismo modelo
matemtico (Ec. 2) se puede utilizar para describirlo: las razones subyacentes a
este patrn de inhibicin son, sin duda no relacionado con la cintica de los
procesos enzimticos. En primer lugar, en las reacciones enzimticas con el
suministro sin restricciones de sustrato hay una ralentizacin considerable hacia
abajo de la actividad enzimtica debido a la saturacin de la cantidad lmite de
enzima, por ejm. la asntota de la curva, mientras que en los inmunoensayos las
concentraciones de inhibidor son inferiores a los de anticuerpos hasta cerca del

punto de saturacin. Lo que los datos experimentales en la figura. 2 sugieren, sin

embargo, es que a pesar de las grandes cantidades de inhibidor utilizados despus
de un cierto punto ms all de la IC50, la inhibicin total no se logra como era de
esperar, pero requiere cantidades adicionales de agente txico para bloquear por
completo todos los sitios receptores.
Por qu debera el bloqueo de anticuerpos ser ms lento despus que la mayora
de ellos han sido inhibidos? Una explicacin de este fenmeno es que el principio en
el proceso de todas las molculas de anticuerpo estn disponibles para el inhibidor,
por lo que la reaccin de bloqueo se produce en proporcin directa a la cantidad de
este ltimo producto qumico; como el proceso contina y la mayora de los
anticuerpos estn siendo bloqueados, tanto los anticuerpos disponibles y la
cantidad de inhibidor escasean y, correspondientemente, la reaccin de inhibicin
se ralentiza debido a que es ms difcil para los restantes inhibidores de molculas
encontrar sitios diana no ocupadas. Por otra parte, para lograr una inhibicin total
de los sitios del receptor una cantidad sustancial de inhibidor debe estar presente
para que la reaccin transcurra completamente hasta el final, de lo contrario un
equilibrio se puede fijar, en el cual algunos anticuerpos quedan libres mientras que
las molculas de inhibidor estn todava disponibles. Tales son la cintica de la
mayora de las reacciones qumicas no mediadas por enzimas que a menos que la
concentracin del inhibidor es varias veces mayor que la del receptor de la reaccin
no llegara a una inhibicin del 100% de los sitios diana. Y la evidencia experimental
indica que el proceso bioqumico de llegar a un techo, es decir, el patrn observado
asinttica, se describe adecuadamente por el modelo hiperblico (2).
Respuestas dependientes del tiempo de las sustancias txicas
El proceso de la toxicidad depende de la dosis, as como tambin del tiempo
(Moriarty, 1999). La interpretacin clsica, con el apoyo de la cintica de inhibicin,
es que un organismo muere tan pronto como se ha acumulado una concentracin
de agente txico superior a un valor umbral, pero esto no significa necesariamente
que dicho umbral est fijado (teora IED), individuos de una poblacin pueden
adquirir cualquier tolerancia inducida o recuperar la susceptibilidad despus de
algn tiempo (Zhao y Newman 2007). En los organismos acuticos, el umbral slo
se alcanza despus de un cierto tiempo de exposicin a una concentracin de
txico C en agua, tiempo durante el cual la dosis eficaz o concentracin interna
(Cin) requerida para inhibir los sitios diana aumenta a travs de la absorcin de los
medios. El proceso de absorcin relaciona ambas concentraciones se ha descrito
por la cintica de primer orden (Ec. 1), y la sustitucin de dosis interna por
concentraciones externas con el tiempo ha permitido el desarrollo de muchos
modelos en ecotoxicologa para describir la acumulacin de sustancias qumicas en
organismos (Newman y Jagoe 1996; Escher y Hermens 2002). Algunos autores
(Kooijman 1981; Chew y Hamilton 1985; Hendriks 1995) lo han utilizado para
estimar los valores de LC50 como una funcin del tiempo, y DEBtox se basa en este
tipo de cintica tambin (Bedaux y Kooijman 1994).
Dixon y Newman (1991) introdujeron un nuevo enfoque mediante la medicin del
tiempo de muerte adems de los mtodos de punto final tradicionales: un registro
detallado de los datos con el tiempo proporciona una riqueza de informacin que
mejora la comprensin de los procesos de toxicidad, potencia estadstica y nuestra
capacidad de prediccin. Los datos se analizaron usando las funciones log-logstica
empricas que se ajusten a los puntos de datos experimentales de la serie histrica,
que requieren varios parmetros y constantes (Newman y Aplin 1992).

De acuerdo con el trabajo original de Kooijman (1981), el tiempo que transcurre

hasta que el 50% de los organismos expuestos a una concentracin dada de
compuesto de ensayo haya muerto (ET50) se puede medir por dos concentraciones
diferentes, en cuyo caso t1 = ET50 (C1) y t2 = ET50 (C2) representan las tasas de
mortalidad iguales para las respectivas concentraciones. Parece lgico admitir que
si las tasas de mortalidad para diferentes concentraciones externas son idnticos se
debe a que la dosis interna adquirida por los organismos es exactamente las
mismas-la nica variable es el tiempo transcurrido en cada caso, lo que sera ms
largo para la baja concentracin que para la mayor concentracin.
Desde que los tiempos de respuesta a sustancias txicas producen curvas
asintticas al trazar los niveles de efecto contra el tiempo de exposicin, los
modelos hiperblicos se pueden tambin utilizar para describirlas, en cuyo caso se
aplica la siguiente ecuacin:

donde t es el tiempo de exposicin para una concentracin externa dada y ET50 es

el tiempo efectivo para causar el efecto en el 50% de los organismos probados, y
constituye el punto medio de la curva. Una vez ms, la ventaja de utilizar este
modelo es que no se requiere la estimacin de las constantes empricas,
simplificando as enormemente el enfoque entero. Adems, una aplicacin til del
modelo (4) es que mediante el registro de los efectos con el tiempo no slo el valor
de la mediana (TE50) se puede predecir para una concentracin dada, sino tambin
cualquier otro percentil de inters (Newman y McCloskey 1996). El modelo permite
el clculo del tiempo de exposicin requerido para provocar un nivel de efecto
particular P entre los organismos probados utilizando la aritmtica simple: como
P100 toma el valor (efecto de 100%) 1, la solucin viene dada por la expresin:

Obviamente, para cualquier momento de la exposicin siempre habra una

concentracin que produce un efecto de 50%. Como resultado, los puntos finales de
toxicidad estndar (es decir, CL50) son los valores medios en particular a tiempos
especficos fijados: 48, 96-h, etc. Es importante tener en cuenta que la precisin de
las predicciones del modelo depende del valor del punto medio de la curva ET50.
Dicho valor se puede calcular utilizando cualquiera de las transformaciones
estndar disponibles para tal fin (por ejemplo: probit, etc.) o por regresin lognormal directa en el conjunto de datos.
Para ilustrar que los efectos txicos dependientes del tiempo pueden ser descritos
adecuadamente por el modelo hiperblico (4), se muestran los siguientes ejemplos.
El primero considera un test de toxicidad e 96h aguda esttica estndar del
insecticida imidacloprid a la ostracoda Cypridopsis vidua, donde las concentraciones
iniciales aplicadas son indicativos de la dosis total de insecticida que afecta a estos
organismos (Tabla 2). El segundo es un test de toxicidad semiesttica de 3 semanas
de CdCl2 para Daphnia magna, y se toma de Kooijman (1981); en este caso, la
media fue actualizada a intervalos regulares para asegurar un valor constante C en
la media, como es habitual con las pruebas crnicas, pero es evidente que la dosis
interna Cin aumentar proporcionalmente con el tiempo de acuerdo con la Ec. 1
(Tabla 3; Figura 3).

En ambos casos se obtuvo el porcentaje de mortalidad con el tiempo mediante el

registro de la supervivencia de los organismos en fechas especificadas. De hecho, el
montaje experimental para el anlisis de respuesta en el tiempo no es diferente de
la de los bioensayos de toxicidad estndar, pero la supervivencia debe ser
registrado despus de varios intervalos de tiempo, no slo al final de un perodo fijo.
La informacin proporcionada en esta forma permite el clculo de los respectivos
ET50s mediante una regresin lineal de los datos, y estos valores medios entonces
se utilizan para predecir cualquier otro nivel P utilizando la Ec. 5. Como se puede
observar en las Tablas 2 y 3, todas las series de datos se ajustaron bien a las
predicciones del modelo, con la excepcin de 32 mg / L de CdCl 2 sobre Daphnia
magna (P <0,05), que se puede interpretar un conjunto anmalo de datos, ya que
sigue una distribucin lineal. Ntese tambin que para predecir los valores de P en
la Fig. 3 el origen de cada curva debe coincidir con la fecha ms cercana para la
cual no se registr mortalidad.

Tabla 3 Tiempo transcurrido para causar mortalidad en la mitad de una poblacin

(ET50) de Daphnia magna expuesto a concentraciones de CdCl 2 durante 3 semanas.

CdCl
(mg/L)

ET

50

(h)

Chi-cuadrado
(df = 8)

3.2

256.1

2.729

5.6

71.8

1,654

10

38.3

0.843

18

6.1

3.455

32

1.7

20.281*

56

0,9

8.868

La bondad de ajuste (valores de Chi-cuadrado) se refiere a las lneas equipadas se

muestra en la figura 3, que se calcularon utilizando el modelo hiperblico P = P 100 t
/ (ET50 + t)
Despus de los datos originales de Kooijman (1981)
* P < 0.05
Bioensayos de toxicidad para la dosis-respuesta
Los bioensayos de toxicidad estndar apuntan a encontrar la relacin dosisrespuesta entre la concentracin del txico en el medio externo y los efectos
observados en el organismo, y son usualmente llevados a cabo para periodos fijos
de exposicin para evitar la influencia del factor tiempo (Rand y Petrocelli, 1985).
Esos datos de dosis-respuesta pueden ser descritos por una curva sigmoidea
idntica a la ecuacin 3

Donde en vez de inhibicin I la variable de inters ahora es el efecto proporcional P

para los puntos finales de la eleccin (por ejemplo, mortalidad, inmovilidad). Aqu el
parmetro es la mortalidad de fondo (Forbes et al. 2001), considerando que las
constantes y conservan el mismo significado que en la ecuacin 3. Como se
explic anteriormente, cuando = 0 (no hay mortalidad de control) y = 1, la
ecuacin logstica simplificada rinde exactamente los mismos valores que los
obtenidos del modelo hiperblico, que en el caso de los bioensayos de toxicidad
toma la forma

Donde P mximo es el ms alto nivel de P y M 50 es la concentracin txica media para

la poblacin probada (por ejemplo, LC 50 o EC50). Una caracterstica comn a los
modelos logsticos e hiperblicos es el nivel de techo o saturacin, definido por P max,
mientras que las distribuciones exponenciales y lineales de transformaciones probit
o logsticas son infinitas. Adems de contar con slo dos parmetros, la ventaja de
usar el modelo hiperblico (7) es que permite la estimacin de niveles de efecto P
para un C deseado y viceversa (ver ecuacin 5).
Este modelo hiperblico puede utilizarse tambin para describir los datos
experimentales de bioensayos de toxicidad incluso si el 0, conforme los
protocolos de pruebas estndar estipulan que las mortalidades de control no
deben exceder el 10% para evitar sesgos estadsticos en el procedimiento de
correccin (Abbott 1925), en cuyo caso las discrepancias entre los modelos son de
menor importancia. La pendiente () de la curva dosis respuesta, sin embargo,
suele ser mayor que 1, en cuyo caso se obtienen desviaciones significativas de los
puntos de datos en ambos extremos de la curva. Por lo tanto, el modelo hiperblico
para describir este tipo particular de datos experimentales no siempre es posible
(vase la seccin abajo).

Fig. 3: Mortalidad dependiente de la dosis y tiempo de Daphnia magna expuesta a

varias concentraciones de CdCl 2 (rango de mg/L en leyenda). Las lneas en el ploteo
secundario fueron hechas para cada concentracin (smbolos, mg/L en leyenda)
utilizando un modelo hiperblico, con su correspondiente ET 50 y su bondad de ajuste
como se indica en la tabla 3. Las lneas y smbolos en la subparcela de la dosisrespuesta representan los cada vez mayores tiempos de exposicin (das en
leyenda); en este caso, slo las exposiciones de ms de 7 das se ajustaban a las
curvas sigmoides tpicas. Despus de los datos originales de Kooijman (1981)
Tres ejemplos de toxicidad aguda, tomados de nuestros propios experimentos y de
la literatura, se muestran aqu para confirmar la validez de usar el modelo
hiperblico (7) en los bioensayos de dosis respuesta, siempre que se cumplan la
restricciones indicadas arriba. El primer caso muestra la reduccin de volumen (%)
de las algas de agua dulce Scenedesmus acutus despus de 72 h de exposicin a
un herbicida (Meister y Van den Brink 2000), la segunda la inmovilidad de D. magna
por el insecticida imidacloprid despus de 48 h y el tercero la mortalidad del
camarn Palaemonetes vulgaris despus de 96 horas de exposicin al insecticida
heptacloro (Schimmel et al. 1976). La figura 4 muestra que, independientemente de
la longitud de la exposicin y los puntos finales medidos de valoracin miden, si es
la reduccin del volumen, la inmovilizacin o la mortalidad, los conjuntos de datos
no se desvan significativamente (P > 0.05) del modelo. Debemos recordar que, en
estos como en muchos otros ejemplos, la bondad de ajuste depende tanto de la
exactitud de los datos experimentales y del modelo de s mismo.
Toxicidad individual y las respuestas a nivel de poblacin

Suponiendo que la mortalidad, o cualquier otro efecto txico directo, es causada por
la inhibicin qumica de un determinado proceso, posiblemente mediado por
enzimas especficas una explicacin sigue siendo necesaria para traducir un
proceso bioqumico a nivel de individuo en un efecto en la
poblacin.
Esencialmente, la variacin en el nmero de receptores de destino entre los
individuos de una poblacin se presume que siguen una distribucin log-normal, ya
que depende del tamao y otras variables individuales. En consecuencia, una
grfica de los efectos acumulativos contra las diferentes dosis aplicadas (o sobre el
tiempo para la misma dosis) produce una curva sigmoidea que se analiza
correctamente usando los modelos logsticos e hiperblicos (Fig. 5). De hecho, los
modelos cinticos mecanicistas que integran las respuestas txicas sobre el
crecimiento, reproduccin y tienen en cuenta el tamao de los organismos y otros
parmetros, producen el mismo tipo de curvas, como se aprecia en las obras de
Jager et al (2004) y lvarez et al (2006).
Figura 4: Datos de bioensayos de
dosis-respuesta aguda para la
inhibicin de la alga Scenedesmus
acutus por un herbicida (adaptado
de Meister y Van den Brink 2000),
inmovilizacin de Dafnia magna por
el insecticida imidacloprid (adaptado
de Snchez Bayo y Goka 2006) y la
mortalidad
del
camarn
Palaemonetes
vulgaris
por
el
insecticida heptacloro (adaptado de
Schimmel et al. 1976). Las lneas
fueron predichas fueron calculadas
utilizando el modelo hiperblico P =
P100 C / (M50 + C), con el indicado M
derivado de los respectivos
50
conjuntos de datos. La bondad de
ajuste de Chi-cuadrado: herbicida 0,9 > P > 0,75; ambos insecticidas 0.1 > P > 0.05
Para una respuesta dependiente del tiempo, este patrn es claro. Sin embargo, en
el caso de los ploteos dosis-respuesta el patrn sigmoideo es producido slo
despus de un tiempo especfico, ni antes ni despus y tal vez depende en primer
lugar del rango de las dosis de las sustancias txicas elegidas. De hecho, cuando el
tiempo de exposicin es muy corto, slo las dosis altas pueden causar mortalidad
significativa, as que la dosis respuesta sera descrita por una curva ascendente
(tringulos en Fig. 5d). A medida que avanza el tiempo, ms personas moriran en
proporcin directa a las dosis internas recibidas, con la curva enderezndose para
arriba hasta que, en algn momento, el patrn sigmoideo aparecera (lnea en Fig.
5d). Permitir ms tiempo resultara en que la mayora de los individuos estn
muertos, excepto tal vez los tratados con las dosis ms bajas, as que la forma
sigmoidea se convertira poco a poco en una curva asinttica (con forma de
diamantes en Fig. 5d). Esta observacin, hecha ya por algunos autores (Giesy y
Graney 1989), proporciona el fundamento terico para establecer perodos fijos de
exposicin y rangos apropiados de las concentraciones en la determinacin de los
valores LC50.
DISCUSIN

El modelo hiperblico presentado en este trabajo es una simplificacin de los

modelos paramtricos ya en uso en la ecotoxicologa, en particular el modelo
logstico y es aplicable siempre que se cumplan las condiciones requeridas. Ninguna
deduccin terica fue empleada para llegar a esta conclusin, pero sta no se
deriva de datos empricos, por el contrario, constituye un descubrimiento que
puede tener implicaciones importantes en la evaluacin de riesgo y en la
ecotoxicologa.
El hecho de que el modelo matemtico de Michaelis-Menten describa el proceso
inhibitorio as como la dosis respuesta y los patrones de toxicidad dependientes
del tiempo pueden no ser previstos. Y sin embargo, la simplicidad del modelo, que
se basa nicamente en dos parmetros, las concentraciones externas de txicos y
los valores de los efectos medios (LC 50 o ET50), lo convierte en una herramienta til
para analizar y, por tanto, predecir los efectos txicos en los organismos.
Obviamente, las precauciones an solicitan la extrapolacin de lis datos de
toxicidad en el laboratorio a las poblaciones naturales (Forbes y Calow 2002),
debido a que la sensibilidad de los organismos probados no es la misma que la
sensibilidad de las comunidades y los ecosistemas en el mundo real (Kammenga y
Riksen 1996; Van Beelen et al. 2001).
Aunque no es raro encontrar en la naturaleza diferentes procesos que pueden
describirse por modelos matemticos idnticos, la caracterstica ms llamativa de la
ecuacin de Michaelis-Menten es que es capaz de explicar tanto el mecanismo
bioqumico de la toxicidad de una sustancia qumica, as como su expresin en la
poblacin afectada, ya sea en un corto (aguda) o un prolongado (crnico) periodo
de exposicin. Una explicacin de este hecho es que los compuestos qumicos
txicos actan por inhibicin de los sitios de receptores especficos a nivel
individual, as como entre todos los individuos en la poblacin expuesta a los
txicos, y ambos procesos tienen lugar en el tiempo y siguen un patrn asinttico,
hiperblico de saturacin, que se describe adecuadamente por modelos
matemticos hiperblicos o logsticos.

Figura 5: Respuesta terica de una poblacin de organismos a una sustancia

qumica txica. A) Distribucin Normal de las cantidades de enzimas o sitios
receptores, entre los individuos de una poblacin bajo prueba; b variacin de la
dosis interna de los txicos con el tiempo de exposicin; los smbolos representan
diferentes concentraciones iniciales; c: tiempo de respuesta expresado como el
efecto proporcional en la poblacin para los diferentes tiempos de exposicin
(mismos smbolos como en b), con las lneas predichas por las ecuaciones de
Michaelis-Menten; d: Dosis-respuesta estndar que muestra el efecto proporcional
en la poblacin contra el logaritmo de la concentracin o la dosis aplicada:
tringulos = tiempo de exposicin temprana; cuadrados = tiempo fijo (p. ej. 48 h) y
la curva sigmoidea conforme; los diamantes = lmite de tiempo de exposicin.
La universalidad de los ltimos modelos queda demostrada por los ejemplos
presentados en este trabajo, que en su mayora son tomados de la literatura
publicada. Experimentos de toxicidad aguda y crnica con algas, Daphnia,
ostrcodos y camarones parecen demostrar el caso (tablas 2, 3; Figuras 3, 4),
aunque en un caso la respuesta no estaba de acuerdo con el modelo debido a una
distribucin inusual de los datos.
Sin embargo, se seal anteriormente que no todos los conjuntos de datos dosisrespuesta se espera que sean adaptables a tales modelos (Fig. 5d). As, la
capacidad de nuestro modelo para analizar las curvas de dosis-respuesta es
limitada por el rango de concentraciones y tiempos fijados utilizados en cada caso
en particular, aunque esto se aplica a los actuales modelos paramtricos.
Mucho ms til es la aplicacin del modelo hiperblico para analizar las respuestas
txicas en el tiempo. En bioensayos agudos de corta duracin, se puede suponer
que la concentracin interna de la sustancia txica aumenta con el tiempo, y como
hay suficiente concentracin de la sustancia txica en el medio se obtendra el
patrn general en la figura 5c. Por lo tanto, las dosis ms altas superarn el NEC
desde el principio mientras que las dosis ms bajas tardan ms en llegar a ese
umbral a travs de un proceso de absorcin dependiente del tiempo. Entonces, las
concentraciones muy bajas de un producto qumico no pueden resultar en sntomas
txicos visibles en pocos das, pero los impactos pueden ser notorios despus de
tiempos ms largos de exposicin.
Tomando la respuesta de los ostrcodos Cypridopsis al imidacloprid como un
ejemplo de exposicin de corto plazo (tabla 2), es evidente que las tasas de
mortalidad de esta especie aumentaron de 33% en el primer da a 68% despus de
4 das para una concentracin de 0,25 mg/L y de 53 a 94% en los respectivos
tiempos para la dosis ms alta probada (4 mg/L). Incluso la concentracin ms baja
probada (4 lg/L) result en tasas de mortalidad que aumentaron de 15 a 40% en el
mismo perodo de tiempo, lo que indica que el compuesto txico era todava eficaz
despus de 4 das y su acumulacin a travs de la absorcin caus la muerte de un
mayor nmero de personas en ese perodo.
El estimado LC50 48-h de imidacloprid para Cyp-ridopsis en este experimento fue de
0,39 mg/L (Sa'Snchez-Bayo y Goka 2006), el cual es casi dos rdenes de magnitud
superior a la concentracin mnima utilizada y, sin embargo, casi una tasa de

mortalidad similar se obtuvo con la ltima dosis del da 4. Cunto tiempo tardara
la concentracin ms baja para lograr el 50% de mortalidad? La respuesta es dada
inmediatamente por el ET50 para 4 g/l, es decir 123,5 h o alrededor de 5 das
(Tabla 2). De hecho, para cada concentracin probada hay un valor LC 50 en el
tiempo de exposicin indicado por su correspondiente ET 50, por lo que el LC 50 a 48-h
es slo uno de los muchos valores medios entre todos los posibles perodos de
exposicin. Adems, eq. 5 puede utilizarse para encontrar cualquier nivel
de mortalidad. Por ejemplo, el 75% de mortalidad pueden obtenerse a 371 h (15
das) para la exposicin a 4 g/l, o 164 horas (7 das) de 0.25 mg/L, o incluso 64 h
(dentro de 3 das) para 4 mg/L.
Parece que la respuesta de Cypridopsis a imidacloprid es as porque la inhibicin de
este insecticida neonicotinoide (insecticida que acta en el sistema nervioso central
de los insectos) es irreversible, por lo que, para cualquier exposicin por encima
de 0, la mortalidad es slo una cuestin de tiempo. Para las sustancias txicas que
pueden ser metabolizadas o eliminadas por el organismo, es posible que las bajas
concentraciones externas nunca puedan resultar en dosis internas que superen el
NEC, tal como se observa a menudo.
El patrn de toxicidad crnica observado en los experimentos con CdCl2 y la prueba
estndar con especies D. magna (Fig. 3), revelan claramente la naturaleza
acumulativa del mecanismo txico segn se explica por el proceso inhibitorio. En
este ejemplo, la desaparicin de Cd desde el medio no fue obstculo para su
constante absorcin por Daphnia, porque el medio se refrescaba con regularidad.
Como consecuencia de ello, la concentracin interna de Cd se supone que haba
aumentado con el tiempo y caus la muerte de los organismos de acuerdo con el
patrn descrito por la Ec. hiperblica. 4. Las cantidades internas de metales
pesados como el Cd se acumulan a lo largo del tiempo en los animales (Newman y
McIntosh 1983; Roy y Campbell, 1995; Rowe, 2003), as como en las plantas (Smith
y Kwan, 1989). No importa cun baja las concentraciones iniciales pueden ser, los
efectos txicos se sentirn despus de un cierto tiempo, tan pronto como se
alcanza el nivel umbral del txico es alcanzado. En este caso, debido a las bajas
concentraciones de Cd en agua (3.2 y 5.6 mg/L) la mortalidad comenz a ser
observada despus de 11 das- antes de ese tiempo las concentraciones internas
estaban por debajo de la NEC, ya que no pudieron observarse efectos letales.
Entonces la pregunta es, cunto tiempo llevara para cada concentracin de CdCl 2
alcanzar un nivel significativo de mortalidad? Una vez ms, la solucin es
proporcionada por Eq. 5. A partir de los datos de la Tabla 3, un nivel de proteccin
mnimo al 5% de la mortalidad sera alcanzado en 13,5 das de la exposicin crnica
a 3,2 mg/L en el agua, o en un da, si la concentracin es tan alta como 18 mg/L.
Modelos ms complejos que incorporan el tamao como una co-variable (Newman
et al. 1994; Newman y McCloskey 1996) pueden ser ms precisos en la prediccin
de un resultado similar, pero hay ventajas en usar el modelo hiperblico en lugar de
expresiones ms complejas. Primero que todo, el modelo hiperblico no requiere
ms variables que la concentracin del txico (C) y la duracin de la exposicin (t).
Su expresin matemtica simple se basa enteramente en la variable independiente
y su correspondiente valor de efecto medio derivado de conjuntos de datos con el
tiempo. Por el contrario, los modelos logsticos y exponenciales usan varios
parmetros y constantes extrados desde equipamiento emprico a determinados
datos experimentales, y es dudoso que puedan indicar las caractersticas
significativas de los productos qumicos o microorganismos probados. Lo ms
probable es que los valores de estas constantes dependeran del diseo (es decir, el

rango de concentraciones utilizadas) y las condiciones externas que pueden influir

en la respuesta de determinados organismos (por ejemplo, temperatura, etapa de
crecimiento, etc.). En adicin, las ltimas condiciones influyen tanto en los
resultados de los experimentos que los LC 50s
estimados para un qumico
comnmente varan tanto como un orden de magnitud para una sola especie
acutica (Cantn y Adema 1978; Hoekstra et al. 1994), debido principalmente a la
variacin intraespecfica (Soares et al. 1992), cuestionando la bsqueda de
precisin, en primer lugar, y la relevancia de los valores de los parmetros exactos
obtenidos, en segundo lugar.
En segundo lugar, el modelo hiperblico destaca la importancia del valor de
respuesta medio, sea el LC50 en los tpicos anlisis dosis-respuesta o el ET 50 en
respuestas dependientes del tiempo. Ciertamente, este valor es la clave para
predecir cualquier otro nivel de respuesta de un grupo de organismos a cantidades
variables de una determinada sustancia txica y, en el caso de ET 50, a tiempos
variables de exposicin. En este sentido, estos valores medianos se vuelven
parmetros muy tiles en ecotoxicologa, no slo porque permiten la comparacin
de las potencias entre diferentes productos qumicos, proveen una medida de la
susceptibilidad de las diferentes especies hacia el mismo compuesto txico y
constituyen la vara de medicin actual en las pautas regulatorias para la
extrapolacin de los riesgos ambientales, sino tambin porque permiten
predicciones de cualquier otra respuesta txica con el tiempo.
Por ltimo, cuando el conjunto de datos experimentales obtenidos en los bioensayos
de toxicidad estndar recopilan informacin sobre las respuestas con las dosis y el
tiempo, segn lo recomendado por el Suter II et al. (1987), es posible predecir
cualquier respuesta para cualquier concentracin y tiempo de exposicin. Los
mtodos de evaluacin del riesgo ecolgico se beneficiaran enormemente de este
nuevo enfoque de modelado, ya que permiten una estimacin rpida de tales
respuestas, un paso necesario en los recientes marcos de riesgo de las poblaciones
silvestres (Nacci et al. 2005). Sin embargo, este nuevo enfoque no excluye el uso de
mtodos estndar para estimar los extremos de toxicidad fijos, que seguirn siendo
esenciales en ecotoxicologa (Maltby y Calow 1989),
Aunque no debemos olvidar que estos valores slo son vlidos para determinados
tiempos fijos entre toda la gama de LC 50 en el tiempo y, por consiguiente, son
insuficientes para predecir los niveles de otros efectos en las muchas exposiciones
posibles en el mundo real.